DMEM培养基配制方法
培养基配方
一、哺乳动物培养基1、DMEM培养基DMEM培养基低糖(干粉) D2902 10X1L 含L-谷氨酰胺和1000 mg/L的葡萄糖。
不含酚红和和碳酸氢钠。
50L每升培养基含10.0g干粉。
配制时每升加3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（干粉）D5523 10×1L 含L-谷氨酰胺和1000 mg/L葡萄糖，不含碳酸氢钠。
2×5L每升培养基含10.0g干粉。
配制时每升加3.7g碳酸氢钠。
5L50L DMEM培养基低糖（干粉）D5030 10×1L 不含L-谷氨酰胺，葡萄糖，酚红，丙酮酸钠和碳酸氢钠。
10L每升培养基含8.3g干粉。
配制时每升加1.0g葡萄糖，0.584g 50LL-谷氨酰胺和3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（干粉）D5280 10×1L 可以高压消毒。
10L含1000 mg/L的葡萄糖。
不含L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。
50L每升培养基含9.6g干粉。
配制时每升加0.584g L-谷氨酰胺和3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（液体）D5546 500ML 含有1000 mg/L葡萄糖和碳酸氢钠，不含L-谷氨酰胺。
用盐6×500ML 酸维生素B6代替盐酸吡哆醛。
使用前每升加入0.584g L-谷氨酰胺。
24×500ML1L6×1L DMEM培养基低糖（液体）D5921 100ML 含有1000 mg/L葡萄糖和碳酸氢钠，不含L-谷氨酰胺和酚红。
500ML用盐酸维生素B6代替盐酸吡哆醛。
使用前每升加入0.584g L-谷氨酰胺。
6×500MLDMEM培养基低糖（液体）D6046 100ML 含有1000 mg/L葡萄糖，L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。
用盐酸维500ML 生素B6代替盐酸吡哆醛。
6×500ML1LDMEM培养基低糖（液体）D2429 100ML 1×的培养基含有1000 mg/L的葡萄糖。
DMEM培养基配制方法
DMEM培养基配制方法DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种常用的细胞培养基，广泛应用于细胞培养、病毒繁殖和实验室研究中。
DMEM培养基含有多种必需和非必需氨基酸、糖类、维生素和盐类成分，提供了生长细胞所需的营养和环境。
以下是DMEM培养基的配制方法。
配制DMEM培养基的主要成分包括基础培养基、补充物和pH调节剂。
基础培养基：1.准备适量的无菌去离子水，用于稀释和配制DMEM培养基。
补充物：1.氨基酸：将提供的无菌氨基酸液中的每种氨基酸均匀混合，制得氨基酸混合液。
如有需要，可以根据实验需求添加特定的氨基酸。
2.糖类：将葡萄糖溶液与无菌去离子水混合，配制成葡萄糖溶液。
3.维生素：将提供的无菌维生素溶液与去离子水混合，制得维生素溶液。
4.盐类：将提供的无菌盐溶液与去离子水混合，制得盐溶液。
pH调节剂：1. 英文名Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane）：是一种常用的pH缓冲剂。
取适量的Tris溶液。
2. 英文名Sodium bicarbonate：是一种重要的pH调节剂，可提供细胞培养中所需的碱性环境。
取适量的Sodium bicarbonate溶液。
先准备好所需的试剂和仪器，并保证它们是无菌的。
配制过程如下：1.取适量的基础培养基（DMEM），移至无菌培养瓶中。
2.依次向DMEM基础培养基中加入补充物。
首先加入氨基酸混合液，根据提供的比例将其加入培养基中，充分混合。
然后加入葡萄糖溶液、维生素溶液和盐溶液，依次混合均匀。
3. 加入适量的Tris溶液，用于调节pH值。
根据实验需求和DMEM配方，逐渐加入Tris溶液，同时用pH计测量pH值，直到达到所需的pH范围（通常为7.2-7.4）。
4. 加入适量的无菌Sodium bicarbonate溶液，用于调节和维持培养基的碱性环境。
根据实验需求和DMEM配方，逐渐加入Sodium bicarbonate溶液，充分混合。
DMEM低糖培养基说明书
深圳市达科为生物工程有限公司地址：深圳市坪山区坑梓街道金辉路14号深圳市生物医药创新产业园区1号楼702、703邮编：518122Tel**************Web:E-mail:*************DMEM低糖培养基说明书Cat#：6016111产品描述：Dulbecco′s Modified Eagle′s Medium (DMEM)是一种改进的Eagle基础细胞培养基(BME)，含有四倍浓度的氨基酸和维生素。
本品为低糖型（1000mg/L），支持多种哺乳动物细胞的培养，包括原代成纤维细胞、神经元、胶质细胞、HUVECs和平滑肌细胞，以及HeLa、293、Cos-7和PC-12等细胞系。
本产品是GMP级别的培养基，不含动物成分，培养细胞时需额外添加胎牛血清等培养添加物。
包装规格：货号名称规格6016111DMEM低糖培养基含酚红，碳酸氢钠，L-谷氨酰胺和丙酮酸钠500mL产品信息：预期用途：采用无菌工艺生产该培养基，可用于进一步的制造用途。
本产品不适用于人体、诊断或治疗用途。
保存方法：2℃~8℃，避光保存，保质期12个月。
注意：本品避免反复冻融，使用时注意无菌操作。
产品配方：完整成分清单mg/L氨基酸Glycine30L-Arginine•HCl 84L-Cystine•2HCl 63L-Glutamine584L-Histidine•HCl•H 2O 42L-Isoleucine 105L-Leucine 105L-Lysine•HCl 146L-Methionine 30L-Phenylalanine 66L-Serine 42L-Threonine 95L-Tryptophan16L-Tyrosine•2Na•2H 2O 104L-Valine 94维生素Choline chloride 4Folic Acid 4myo-Inositol 7.2Niacinamide4D-Pantothenic Acid•1/2Ca 4Pyridoxal•HCl 4Riboflavin 0.4Thiamine•HCl 4无机盐CaCl2200Fe(NO 3)3•9H 2O 0.1MgSO 497.67KCl400NaHCO 33700NaCl6400NaH 2PO 4109其它D-Glucose1000Phenol Red•Na 15Sodium Pyruvate110相关产品：货号名称规格6016011RPMI-1640培养基500mL 6016211α-MEM培养基500mL 6016311IMDM培养基500mL 6021021胎牛血清（南美）500mL 6021031胎牛血清（新西兰）500mLREV:C/2。
常用细胞培养基配方及缓冲液
常用细胞培养基配方及缓冲液细胞培养基是为了在体外维持细胞生长和增殖所设计的一种营养液。
细胞培养基的配方要求提供细胞所需的基本营养物质，如氨基酸、糖类、维生素和激素，并提供适当的pH和离子平衡。
同时，缓冲液也是细胞培养过程中不可或缺的一部分，用于稳定细胞培养基的pH，维持细胞正常的生长环境。
下面列举几种常用的细胞培养基配方及缓冲液：1. DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)-细胞培养基配方：-DMEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：无2. RPMI 1640 Medium (Roswell Park Memorial Institute Medium) -细胞培养基配方：-RPMI1640培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸)溶液，浓度为25mM，用于稳定pH。
3. MEM (Minimum Essential Medium)-细胞培养基配方：-MEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)- 缓冲液：盐酸/NaOH缓冲体系，通常用NaHCO3/N-2-羟乙基piperazine-N'-2-乙磺酸(HEPES)缓冲。
4. Hank's Balanced Salt Solution (HBSS)-细胞培养基配方：-HBSS培养基粉末-对应体积的无菌水-缓冲液：无5. L-15 Medium (Leibovitz's L-15 Medium)-细胞培养基配方：-L-15培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-缓冲液：HEPES溶液，浓度为25mM。
6. DMEM/F12 Medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium and Ham's F-12 Medium)-细胞培养基配方：-DMEM/F12培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：HEPES溶液，浓度为25mM。
DMEM培养基配方
DMEM培养基配方DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种常用的细胞培养基，广泛用于体外细胞培养和研究。
下面是一种常见DMEM培养基的配方，以及其组成成分和原理解析。
1.DMEM基础培养基：-DMEM混合物：420mL-热灭菌的双蒸馏水：500mL2.补充物：-胎牛血清（FBS）：100mL-青霉素和链霉素：1mL-10%海马酸溶液：5mL配方的组成成分和原理解析：1.DMEM基础培养基：DMEM是Eagle培养基的一种改良版，其中包含了额外的氨基酸、维生素和无机盐。
DMEM是无血清培养基，不含胎牛血清，可减少实验结果受到外界因素的影响。
2.热灭菌的双蒸馏水：双蒸馏水是通过蒸馏过程去除水中的杂质和微生物，保证细胞培养过程中的无菌状态。
3.胎牛血清（FBS）：胎牛血清是培养细胞所必需的重要补充物，其中含有许多生长因子、激素和蛋白质，可以提供细胞所需的养分。
4.青霉素和链霉素：青霉素和链霉素是两种广谱抗生素，用于预防和控制细胞培养中的细菌污染。
5.10%海马酸溶液：海马酸（L-glutamine）是一种重要的氨基酸，对细胞的生长和分裂非常关键。
10%的海马酸溶液用于提供细胞所需的L-谷氨酰胺。
补充物中的FBS用于提供细胞所需的生长因子、激素和蛋白质。
青霉素和链霉素的加入可以预防细菌感染，确保细胞培养的纯度和健康度。
海马酸溶液则提供细胞所需的L-谷氨酰胺，促进细胞的生长和分裂。
总结：DMEM培养基是一种常用的细胞培养基，配方中包含基础培养基、水和补充物。
基础培养基提供细胞所需的基本成分，而补充物则提供细胞所需的生长因子、抗生素和氨基酸。
这种培养基的配方可以为细胞提供稳定的生存环境，促进细胞的生长和分裂。
DMEM培养基
DMEM培养基DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。
分为高糖型（低于4500mg/L）和低糖型(低于1000mg/L)。
高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长，适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。
基本简介DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。
与MEM比较增加了各种成分用量，同时又分为高糖型（低于4500mg/L）和低糖型(低于1000mg/L)。
高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长，适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。
主要特点（1）氨基酸含量为依格尔培养基的2倍，且含有非必需氨基酸，如甘氨酸等；（2）维生素含量为依格尔培养基的4倍；（3）含有糖酵解途径中的重要物质——丙酮酸；（4）含有微量的铁离子。
主要成分DMEM(A)细胞培养基（粉末型）成分序号1234567891011121314化合物名称无水氯化钙.2H2O硝酸铁.9H2O氯化钾无水硫酸镁氯化钠无水磷酸二氢钠丁二酸丁二酸钠L-盐酸精氨酸L-盐酸胱氨酸甘氨酸L-盐酸组氨酸L-异亮氨酸L-亮氨酸含量(mg/L)265.000.10400.0097.676400.00109.0075.00100.0084.0063.0030. 0042.00105.00105.00序号1819202122232425262728293031化合物名称L-丝氨酸L-苏氨酸L-色氨酸L-酪氨酸L-缬氨酸D-泛酸钙酒石酸胆碱叶酸肌醇烟酰胺核黄素盐酸硫胺盐酸吡哆辛葡萄糖含量(mg/L)42.0095.0016.0072.0094.004.007.204.007.204.000.404.004.001 000.00151617L-盐酸赖氨酸L-甲硫氨酸L-苯丙氨酸146.0030.0066.003233丙酮酸钠酚红110.009.30.00相关应用该类培养基广泛应用于疫苗生产和各种初代病毒宿主细胞的细胞培养及单一细胞培养;如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等细胞系的培养。
DMEM培养基配制方法
自行配制DMEM的方法及说明书这里是一份GIBCO的低糖DMEM粉剂配制说明（普通高糖的DMEM培养基配法是一样的）：TO PREPARE 1*LIQUID1. Measrue out 5% less distilled water than desired total volume of medium using a mixing container that is as close to the final volume as possible.2. Add powdered medium to 15 to 30℃(room temperature)water with gentle stirring. (Do not heat water)3. Rinse out inside of package to remove all traces of powder.4. Add 3.7g of NaHCO3 per liter of medium.5. Dilute to a desired volume with water. Stir until dissolved. (Do not over-mix)6. Adjust pH of medium to 0.2-0.3 below desired final working pH* use of IN NaOH or IN HCl is recommended. (Add slowly with stirring) After pH has been adjusted keep container closed until medium is filtered.7. Sterilize immediately by membrane filtration. (Positive pressure recommended) *pH unite will usually rise 0.1-0.3upon filtration.另外，在李玲、李雪峰编著的《细胞生物学实验》中配制方法如下：1 制备新鲜三蒸水或Millipore超纯水。
DMEM培养基配制方法
DMEM培养基配制方法DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）是一种被广泛应用于细胞培养的营养培养基，适用于多种细胞类型的培养。
在使用DMEM培养基前，需要配制和调整培养基的组成，下面将详细介绍DMEM培养基的配制方法。
配制DMEM培养基的材料有：1.DMEM粉末：可从实验室供应商处购买。
2.无菌蒸馏水：用于稀释粉末和混合培养基。
3.黄体酮或胰岛素：这些添加剂用于特殊培养条件下的细胞培养。
4.无菌过滤器：用于过滤培养基以去除微生物污染。
下面是DMEM培养基的配制步骤：1.消毒实验台和培养物。
在开始培养基的配制之前，确保实验台和培养器具已经进行了有效的消毒。
这可以通过使用70%乙醇或其他消毒剂来实现。
此外，需要对培养物进行表面消毒处理。
2.配置培养基。
将适量的DMEM粉末称量到一个无菌容器中，并加入一定量的蒸馏水。
粉末的添加量根据细胞类型和细胞密度的不同而异，一般建议将DMEM粉末加入到预定体积的80-90％。
例如，如果需要100mL的培养基，可以将80-90g的DMEM粉末加入到约90mL的蒸馏水中。
3.调整pH值。
使用酸或碱类物质（如NaOH或HCl）逐滴调整培养基的pH值，直到达到理想的值。
一般来说，DMEM培养基的pH值在7.2-7.4之间是理想的。
4.筛选和过滤培养基。
将配制好的培养基通过无菌纤维过滤器过滤，以去除可能存在的微生物污染物。
这可以保证培养基的无菌性。
5.存储和标记培养基。
将过滤的培养基分装到无菌的培养基瓶中，并在瓶子上标记培养基的配方、配制日期和其他必要的信息。
将培养基存放在4℃下，避免光照。
请注意，在一些特殊情况下，可能需要向DMEM培养基中添加额外的添加剂，如黄体酮（对于一些动物细胞的培养）或胰岛素（对于一些特殊的细胞系的培养）。
在添加这些添加剂时，应遵循相应的实验室标准操作程序。
总结：DMEM培养基是一种广泛使用的细胞培养基，适用于多种细胞类型的培养。