铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌感染的科普知识
演讲人：
目录
1. 什么是铜绿假单胞菌？ 2. 谁容易感染铜绿假单胞菌？ 3. 感染的症状有哪些？ 4. 如何预防铜绿假单胞菌感染？ 5. 感染后如何治疗？
什么是铜绿假单胞菌？
什么是铜绿假单胞菌？
定义
铜绿假单胞菌是一种广泛存在于环境中的革兰氏 阴性细菌，主要在水和土壤中发现。
感染的症状有哪些？ 严重情况下
若感染严重，可能引发败血症、肺炎等危及生命 的并发症。
这些情况下需要紧急治疗，以防止病情恶化。
感染的症状有哪些？ 症状变化
不同患者的症状可能会有所不同，需根据具体情 况判断。
早期识别和治疗非常关键。
如何预防铜绿假单胞菌感染？
如何预防铜绿假单胞菌感染？
保持环境卫生
它的学名为Pseudomonas aeruginosa，因其能够在 多种环境下生存而闻名。
什么是铜绿假单胞菌？
特性
这类细菌具有较强的抗药性，能够抵御多种抗生 素的作用。
它们可以形成生物膜，使其在医疗器械和人体器 官上更难被清除。
什么是铜绿假单胞ห้องสมุดไป่ตู้？
感染途径
铜绿假单胞菌通常通过接触感染，尤其是在医院 环境中更为常见。
定期清洁和消毒医疗设备及环境，减少细菌 滋生。
特别是在医院和护理机构中，环境卫生至关 重要。
如何预防铜绿假单胞菌感染？ 注意个人卫生
勤洗手，尤其在接触患者或医疗设备后。
使用含酒精的洗手液可以有效杀灭细菌。
如何预防铜绿假单胞菌感染？ 合理使用抗生素
避免不必要的抗生素使用，减少耐药性细菌 的产生。
医生应根据实际情况合理开处方。
医院环境中常见的铜绿假单胞菌更容易导致 院内感染。
铜绿假单胞菌
改变药物的作用靶点
抗生素作用靶点在微生物生长与存活中起 重要作用。很多抗生素就是通过作用于这 些作用靶点干扰细菌的生长来发挥抗菌活 性。如：拓扑异构酶Ⅱ 性。如：拓扑异构酶Ⅱ、Ⅳ是氟喹诺酮类 抗生素的主要作用靶点。氟喹诺酮类药物 通过形成DNA2拓扑异构酶2 通过形成DNA2拓扑异构酶2氟喹诺酮类药 物三元复合物,阻止DNA拓扑异构变化, 物三元复合物,阻止DNA拓扑异构变化,妨碍 细菌DNA复制、转录, 细菌DNA复制、转录,以达到杀菌的目的。
泛耐药铜绿假单胞菌肺炎危险因素
在探讨医院感染性肺炎泛耐药铜绿假单胞 菌 感染的危险因素 的研究中发现，感染前 住院时间、入住ICU 住院时间、入住ICU 、APACHE Ⅱ评分、 机械通气、体内留置导管( 机械通气、体内留置导管(包括尿管、胃管、 中心静脉导管和动脉导管) 中心静脉导管和动脉导管) 、纤维支气管镜 吸痰和使用抗菌药物数量与PA 吸痰和使用抗菌药物数量与PA 感染有关
青霉素结合蛋白( 青霉素结合蛋白( Penicillin2B inding2p roteins, PB2Ps)是位于细菌细胞内膜上的一些膜蛋白, PB2Ps)是位于细菌细胞内膜上的一些膜蛋白,是β内酰胺 类抗生素的专一性作用靶点, 类抗生素的专一性作用靶点,最初因为能与青霉素共价结 合而得名。PBPs是参与细菌细胞壁肽聚糖生物合成的酶, 合而得名。PBPs是参与细菌细胞壁肽聚糖生物合成的酶, 包括转肽酶、羧肽酶和内肽酶。它的正常存在是细菌保持 正常形态及功能的必需条件。β 正常形态及功能的必需条件。β内酰胺类抗生素正是通过 与PBPs结合抑制细菌细胞壁的生物合成引起细菌细胞死 PBPs结合抑制细菌细胞壁的生物合成引起细菌细胞死 亡从而发挥杀菌作用[ 亡从而发挥杀菌作用[ 22 ] 。当细胞膜上的PBPs数量减 。当细胞膜上的PBPs数量减 少,或者PBPs的结构改变或产生一种新的PBPs,使其与β内 或者PBPs的结构改变或产生一种新的PBPs,使其与β 酰胺类抗生素的亲和力明显降低, 酰胺类抗生素的亲和力明显降低,就会产生耐药。这种机 制与β内酰胺酶能发生协同效应,引起细菌对β 制与β内酰胺酶能发生协同效应,引起细菌对β内酰胺类抗 生素的耐药。
铜绿假单胞菌的生物学特性及其对生态环境的影响
铜绿假单胞菌的生物学特性及其对生态环境的影响铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）是一种常见的革兰氏阴性杆菌，具有丰富的生物学特性和广泛的分布。
本文将从其生物学特性和对生态环境的影响两个方面进行探讨。
1. 铜绿假单胞菌的生物学特性铜绿假单胞菌具有以下生物学特性：1.1 革兰氏阴性杆菌铜绿假单胞菌属于革兰氏阴性杆菌，这意味着它在革兰氏染色中显现为粉红色，具有细胞外膜和细胞内膜。
1.2 高度耐药性铜绿假单胞菌是一种多重耐药菌株，常常对多种抗生素具有耐药性，使得治疗感染性疾病变得困难。
1.3 强致病性铜绿假单胞菌具有强大的致病性，特别在免疫功能低下的人群中，如免疫抑制剂治疗的癌症患者和器官移植患者，会引发严重的感染。
1.4 生长适应力强铜绿假单胞菌能够适应多种环境，包括不同的温度、pH、盐度和氧气含量，使其能在各种生态环境中存活和繁衍。
2. 铜绿假单胞菌对生态环境的影响作为一种常见的环境细菌，铜绿假单胞菌对生态环境有着重要的影响。
2.1 生物降解能力铜绿假单胞菌能够降解多种有机化合物，包括石油类化合物、芳香化合物和多环芳烃等。
这种生物降解能力使其在废弃物处理和环境修复中具有潜在的应用价值。
2.2 生活在水体中铜绿假单胞菌常常存在于水体中，包括河流、湖泊和海洋等。
它的存在可能对水体中的生物多样性和生态平衡产生影响。
2.3 影响环境中的其他生物铜绿假单胞菌可与其他生物竞争资源，并分泌抗生素和外毒素来保护其生存空间。
同时，它还可以通过共生或寄生方式对宿主产生影响。
2.4 形成生物膜铜绿假单胞菌能够形成粘附于生物和非生物表面上的生物膜。
这些生物膜能够保护细菌免受外界环境的影响，并在结构上提供附着和稳定性。
2.5 潜在致病性铜绿假单胞菌对人类和动物存在潜在的致病性。
其在医院环境中的存在可能导致医院感染，对患者造成威胁。
3. 应对铜绿假单胞菌的挑战铜绿假单胞菌的多重耐药性以及对人类和环境的潜在威胁，使得应对其成为一项紧迫的挑战。
铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌（也称绿脓杆菌）,为革兰阴性杆菌。
在自然界分布广泛，对外界环境的抵抗力较其他细菌强，在潮湿环境能长期生存，对干燥也有较强的抵抗力。
资料表明，水与铜绿假单胞菌的存在联系紧密。
医院内长期潮湿的地方及湿的物品是铜绿假单胞菌贮存的场所。
水源污染主要来自人或动物排泄物、人肠道铜绿假单胞菌两个途径。
铜绿假单胞菌在污染的水中可较长时间的存留，各种液体药剂，包括眼药水长期放置有可能被铜绿假单胞菌污染，消毒剂、手术器械浸泡液都可能成为铜绿假单胞菌的贮存场所。
呼吸机湿化装置及导管可作为传播的直接媒介。
铜绿假单胞菌因其生物学特点，营养要求低，潮湿处易生长。
大量资料表明医院内病人带菌率很高。
人体本身是一个主要的铜绿假单胞菌贮存所，细菌主要存在人体较为潮湿的部位如腋下、会阴部、呼吸道和肠道等。
本菌是医院内感染的主要病原菌之一，气管切开和插管、大面积烧伤、恶性肿瘤、免疫力低下、静脉插管及各种侵入性操作的患者易感染本菌，近年来住院患者感染的该细菌多为多重耐药菌，治疗上难度较大。
预防措施1、铜绿假单胞菌感染的患者应实行接触隔离，住隔离病室，隔离标志明确、醒目，在隔离病房或者区域的入口处应配备手套、手消毒凝胶、隔离衣及外科口罩；2、医务人员接触患者前，戴好口罩、帽子，穿隔离衣；3、加强医务人员手卫生，接触患者血液、体液、污物后均应洗手。
洗手提倡采用流动水洗手，如果手没有明显污染时，可以用消毒凝胶消毒双手；医务人员如手皮肤有破损，不宜护理此类感染性疾病的患者；4、护士对患者导管的各项操作，应先从清洁的部位开始再到污染的部位，避免交叉污染，如进行可能产生气溶胶的操作（吸痰或雾化治疗、纤维支气管镜等）时必须戴标准外科口罩，必要时带保护性眼罩；5、进行床旁检查（如便携式照片、心电图、B超）的仪器在检查完成后用消毒剂进行擦拭消毒；6、如患者需离开隔离病室到医技科室做检查，主管医生应先电话通知该诊疗科室或在检查单上标注患者感染情况，检查完毕患者接触过的物体表面要及时进行消毒处理；7、隔离病室患者接触过的一切物品，如被单、衣物、各类医疗器械、导管等应先行消毒处理，然后再清洁（洗）、消毒、灭菌；8、严格医疗废物管理，患者用过的所有敷料、导管等废物须置入专用黄色医疗废物袋内、封口，锐利器具用后及时放入专用利器盒内,集中焚毁。
铜绿假单胞菌的分类与特征分析
铜绿假单胞菌的分类与特征分析铜绿假单胞菌是一种革兰氏阴性杆菌，被广泛分布于自然环境中，是一种常见的水生细菌。
本文将为您介绍铜绿假单胞菌的分类和特征分析。
一、分类：铜绿假单胞菌属于铜绿单胞菌属（Pseudomonas aeruginosa），是铜绿单胞菌科（Pseudomonadaceae）的成员。
在分类学上，铜绿假单胞菌属被分为以下几个层次：1. 界：细菌界（Bacteria）2. 门：变形菌门（Proteobacteria）3. 纲：伯克霍尔德菌纲（Burkholderiales）4. 目：假单胞菌目（Pseudomonadales）5. 科：假单胞菌科（Pseudomonadaceae）6. 属：铜绿单胞菌属（Pseudomonas）7. 种：铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）二、特征分析：1. 形态特征：铜绿假单胞菌是革兰氏阴性的杆状细菌，通常为直杆状，具有一定的运动能力。
其细胞长度约为1.5-3微米，直径为0.5-0.8微米。
2. 纯培养特征：铜绿假单胞菌可以在一般的培养基上生长，例如血琼脂培养基、营养琼脂培养基等。
培养出的菌落呈糊状，表面带有绿色或蓝绿色。
3. 生理特征：铜绿假单胞菌具有很强的适应性，可以在广泛的环境中生存。
它是一种嗜热菌，生长适温范围一般为25-42摄氏度。
此外，铜绿假单胞菌是嗜氧菌，对氧气的需求较高。
4. 代谢特征：铜绿假单胞菌可以利用多种碳源进行代谢，包括葡萄糖、果糖、麦芽糖等。
此外，它还可以分解多种有机物质，具有较强的生物降解能力。
5. 病原性：铜绿假单胞菌是一种重要的致病菌，它可以引起多种感染，尤其是对免疫功能低下的人群更为具有威胁。
铜绿假单胞菌常导致医院获得性感染，如呼吸道感染、尿路感染等。
6. 耐药性：铜绿假单胞菌对多种常规抗生素具有较强的耐药性，包括β-内酰胺类、氨基糖苷类等。
这使得治疗相关感染变得困难，加大了临床治疗的难度。
总结：铜绿假单胞菌属于铜绿单胞菌科，是一种革兰氏阴性杆菌。
铜绿假单胞菌革兰染色结果描述
铜绿假单胞菌革兰染色结果描述铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）是一种常见的细菌，它通常存在于水和土壤中，并且也是一种可以感染人类的病原菌。
本文将对铜绿假单胞菌的特征和革兰染色结果进行详细介绍。
铜绿假单胞菌的特征铜绿假单胞菌是一种革兰氏阴性细菌，它的特征包括：1.形态特征：铜绿假单胞菌是一种杆状细菌，其形态多样，有的呈细长的弯曲杆状，有的则呈短而厚实的形态。
在培养基上生长时，铜绿假单胞菌形成的菌落呈灰绿色，因此得名“铜绿”。
2.生理特征：铜绿假单胞菌是一种革兰氏阴性细菌，其细胞壁主要由脂多糖组成。
它是一种兼性厌氧菌，可以在有氧和缺氧条件下生长，对温度适应范围较广，适合在25~42摄氏度生长。
3.异质性：铜绿假单胞菌在不同的环境中表现出不同的生长特征，有的菌株能够产生黏多糖，形成黏稠的胞外多糖层，有的则能够产生青霉素酶等耐药物酶。
革兰染色结果描述革兰染色是一种常用的细菌鉴定方法，通过使用靛紫染色剂和碘液、解靛液、洋红染色剂等对细菌进行染色，根据细菌细胞壁的性质来区分细菌的革兰氏染色阳性与阴性。
下面是对铜绿假单胞菌革兰染色结果进行的描述：1.染色结果：在进行革兰染色时，铜绿假单胞菌的细胞壁会呈现红色或粉红色，这表明它是一种革兰氏阴性菌。
在显微镜下观察，可以看到细胞呈杆状或弯曲杆状，表面呈现灰绿色，这是由于它的细胞壁主要由脂多糖组成的原因。
2.细胞结构：铜绿假单胞菌的细胞壁主要由脂多糖和蛋白质构成，细胞内含有DNA、RNA和其他细胞器，呈质地较为均匀的球形或椭圆形，细胞内含有许多颗粒状结构。
3.染色效果：在染色过程中，铜绿假单胞菌的细胞壁会吸收靛紫染色剂，但由于后续的解靛液和洋红染色剂的作用，使得细胞壁呈现红色或粉红色，显微镜下呈现杆状或弯曲杆状的棕色线条，这是铜绿假单胞菌革兰染色结果的特征。
在临床应用中，铜绿假单胞菌的革兰染色结果能够帮助医务人员对细菌进行初步的鉴定和分类，在感染性疾病的诊断和治疗中具有重要的意义。
铜绿假单胞菌检验方法标准
铜绿假单胞菌检验方法标准【原创版2篇】篇1 目录1.铜绿假单胞菌的概述2.铜绿假单胞菌的检验方法3.铜绿假单胞菌在化妆品中的卫生标准4.铜绿假单胞菌的致病性和治疗药物5.铜绿假单胞菌的防控措施篇1正文一、铜绿假单胞菌的概述铜绿假单胞菌，又称绿脓杆菌，是一种广泛存在于土壤中的细菌。
其菌体细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。
铜绿假单胞菌编码三种 VI 型分泌系统，即 h1-t6ss、h2-t6ss 和 h3-t6ss。
其中 h1-t6ss 被认为是一种严格的细菌靶向途径，而 h2-t6ss 和h3-t6ss 通过作为靶向宿主细胞并促进铜绿假单胞菌感染的毒力。
二、铜绿假单胞菌的检验方法铜绿假单胞菌的检验方法主要包括以下几种：1.形态学观察：通过暗视野显微镜或相差显微镜观察菌体的形态和结构。
2.培养法：将采集的样本在特定的培养基上进行培养，观察菌落的形态和特征。
3.免疫学检测：通过抗原 - 抗体反应检测样本中铜绿假单胞菌的抗原或抗体。
4.分子生物学检测：如 PCR、DNA 测序等方法，通过对特定基因进行扩增和测序，判断样本中是否存在铜绿假单胞菌。
三、铜绿假单胞菌在化妆品中的卫生标准在化妆品中，铜绿假单胞菌的检测是非常重要的，因为铜绿假单胞菌对人有致病力，常引起人皮肤化脓感染，特别是烧伤、烫伤、眼部疾病患者被感染后，常使病情恶化，并可引起败血症。
因此，在化妆品卫生标准中规定不得检出铜绿假单胞菌。
四、铜绿假单胞菌的致病性和治疗药物铜绿假单胞菌具有较强的致病性，可引起各种感染，如皮肤感染、败血症等。
针对铜绿假单胞菌感染的治疗，可选用以下药物：1.半合成青霉素：如阿洛西林和哌拉西林，其中以哌拉西林为最常用。
2.第三代头孢菌素：如头孢他啶、头孢哌酮。
3.其他内酰胺类药物：如亚胺配能及氨曲南。
4.氨基糖苷类：如庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星和异帕米星。
5.氟喹酮类：如氧氟沙星、环丙沙星及氟罗沙星等。
铜绿假单胞菌感染的科普知识PPT
如何预防铜绿假单胞菌感染?
如何预防铜绿假单胞菌感染? 个人卫生
保持良好的个人卫生习惯，如勤洗手、使用消毒 剂等。
尤其是在接触公共设施后，更需注意卫生。
如何预防铜绿假单胞菌感染? 医疗环境
医院及医疗机构需加强环境消毒，确保医疗器械 的清洁。
使用一次性器械可减少传播风险。
如何预防铜绿假单胞菌感染? 避免接触
及时的支持性治疗能帮助患者恢复健康。
铜绿假单胞菌感染的治疗 定期监测
感染患者需定期进行身体检查和实验室监测 。
监测病情变化，有助于及时调整治疗方案。
铜绿假单胞菌感染的前景
铜绿假单胞菌感染的前景
研究进展
目前针对铜绿假单胞菌的研究正在进行，力求找 到新的治疗方法。
科学家们在寻找新的抗生素和疫苗方面取得了一 定进展。
感染症状包括发热、咳嗽、呼吸急促及皮肤 感染等。
症状可能因感染部位不同而异。
铜绿假单胞菌感染的症状 严重症状
在重症病例中，可能出现败血症、肺炎等严 重并发症。
重症患者需尽快就医，避免病情加重。
铜绿假单胞菌感染的症状 高危人群
免疫系统较弱的人群，如老年人、糖尿病患 者及癌症患者，感染风险更高。
这些人群需要特别关注预防感染。
什么是铜绿假单胞菌? 特性
铜绿假单胞菌具有抗药性强、繁殖迅速等特点。
其抗药性使得治疗变得复杂，常见于医院感染。
什么是铜绿假单胞菌? 传播途径
铜绿假单胞菌主要通过直接接触、空气传播以及 水源传播。
在医院环境中，通常通过医疗器械或接触感染传 播。
铜绿假单胞菌感染的症状
铜绿假单胞菌感染的症状 常见症状
铜绿假单胞菌感染科普知识
演讲人：
目录
1. 什么是铜绿假单胞菌? 2. 铜绿假单胞菌感染的症状 3. 如何预防铜绿假单胞菌感染? 4. 铜绿假单胞菌感染的治疗 5. 铜绿假单胞菌感染的前景
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假单胞菌属Pseudomonas
种类：
• • • • • • • 铜绿假单胞菌(P.aeruginosa) 荧光假单胞菌(P.fluorescence ) 恶臭假单胞菌(P.putica ) 斯氏假单胞菌(P.stutizeri) 曼多辛假单胞菌(P.mendocina) 产碱假单胞菌(P.alcaligenes) 假产碱假单胞菌 (P.pseudoalcaligenes)
绿或灰绿 有溶血环 • MACc平：微小无光泽半透明 48h后菌落 呈棕色
鉴定
• 初步鉴定 菌体形态 菌落特征 产色素 气味 氧化酶 • 最终鉴定 非发酵菌生化鉴定系统 API-NE试条
• 细菌耐药机制
–外膜通透性降低 –产生灭活酶或钝化酶 –主动外排系统将抗生素泵出胞外 –抗菌药物作用靶位改变 –膜孔蛋白突变 –生物膜屏障作用
典型型（普通平板上）
菌落中央凸起 边缘扁平 表面粗糙
粗糙型（麦康凯平板）
菌落圆形凸起 似大肠埃希菌菌落
大肠型（麦康凯平板）
常见非发酵菌初步分群鉴定
试验 假单胞 不动杆 产碱杆 黄杆 莫拉 菌属 菌 属 菌 属 菌属 菌属 氧化酶 + + + + 葡萄糖O/F O/O/O/F 动力 + + MAC平板生长 + + + +/-
铜绿假单胞菌
致病性
• 广泛存在环境中的条件致病菌，是院内感染 主要病原菌 • 可引起皮肤感染、呼吸道感染、泌尿道感染、 烧伤感染、囊性纤维变性等 • 有多种毒力因子：包括菌毛、荚膜多糖、内 毒素、外毒素、绿脓菌素、蛋白酶、磷脂酶 等
• 粘附素：菌毛的神经氨酸酶分解上皮细胞表面的 神经氨酸促进细菌侵入 • 荚膜：多糖类物质抗吞噬细胞的吞噬作用；使细 菌锚泊在细胞表面，与呼吸道感染有关 • 内毒素、外毒素 • 绿脓菌素：绿色色素，由铜绿假单胞菌的RpoS基 因编码产生的代谢产物，具有氧化还原活性的化 合物，能催化超氧化物和过氧化氢产生有毒氧基 团，引起组织损伤。在致病中起重要作用 • 弹性蛋白酶：降解弹性蛋白，引起肺实质损伤和 出血；降解补体和白细胞蛋白酶抑制物；可与相 应抗体形成复合物，沉积于感染组织中 • 磷脂酶C
菌名 铜绿假单胞菌 荧光假单胞菌 恶臭假单胞菌 斯氏假单胞菌 洋葱伯克霍尔德菌 腐败希瓦讷拉菌 色素 绿脓素、红脓素、青脓素、荧光素 荧光素 荧光素 未定名黄色素 未定名黄色素、紫色素 未定名色素 颜色 蓝、红、黑、黄色 黄绿色 黄绿色 黄色 黄色、紫色 淡红褐色
各种标本
血平板和Mac平板 可疑菌落 涂片革兰染色 革兰阴性杆菌
• 溴化十六烷基三甲铵——具 有优良的渗透、柔化、乳化、 抗静电、生物降解性及杀菌 等性能。本产品化学稳定性 好， 耐热、耐光、耐压、 耐强酸强碱。
培养基成分： 营养琼脂培养基
• • • • • 胨 10g 牛肉浸出粉 3g 氯化钠 5g 琼脂15~20g 水 1000ml
书本P159 5.2
• （以营养肉汤培养基的处方及 制法）取上述成分，混合，煮 沸溶解后，调节pH值使灭菌后 为7.2±0.2，分装，灭菌。
十六烷基三甲基溴化铵平板
36±1℃ 24h
营养琼脂斜面
36±1℃ 24h
革兰氏染色镜检
阴性 报告
氧化酶试验
氧化酶试验 阴性
阳性
绿脓菌素试验 阴性 阳性
42℃生长试验
特性
• • • • 非发酵革兰氏阴性杆菌 常见的条件致病菌 菌体的一端有单鞭毛 在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运 动活泼。
• • • • • • •
绿脓菌素
• 绿脓菌素(pyocyanin)测定用培养基 (PDP琼脂)
胨 20g 甘油 10ml 氯化镁(无水) 1.4g 琼脂 18~20g 硫酸钾 10g 水 1000ml 取胨、氯化镁和硫酸钾加入水中，微温 使溶解，调节pH值使灭菌后为7.3±0.1， 加入甘油及琼脂，加热溶化，混匀，分 装于试管，灭菌，置成斜面。
假单胞菌属
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 革兰氏阴性 细胞单个 直的或弯的杆菌 0.5—1 × 1.5—4微米 单鞭毛或多鞭毛 有机化能异养菌 呼吸代谢，永不发酵 严格好氧菌
模式种：铜绿假单胞菌
铜绿假单胞菌
• 1.0.5-0.8*1.5-3.0微米的杆菌 • 2.细胞单个 • 3.成对或成短链。以极生的单鞭毛运动（有 二个或二个以上的极生鞭毛的细胞，但不 常见） • 4.在中性或碱性培养基种呈蓝色：在酸性培 养基种呈红色 • 5.专性好氧，在硝酸盐培养基中除外。
培养基成分：
PDP斜面，是否有色素，有， 用氯仿3-5ml萃取，用无菌 玻璃棒搅碎培养基、混匀， 色素完全在氯仿层。吸管 把氯仿层移到另一试管， 加入盐酸1M1ml，静置后， 盐酸出现粉红为阳性，无 粉红为阴性，阴性斜面培 养1-2天再重新做一遍。如 果仍是阴性。做下一步试 验。 绿脓菌素从有机相转到酸性 水相中会由蓝绿色变为粉 红色。
氧化酶(+)、OF：O 非发酵菌鉴定系统鉴定到种
微生物检验程序
• 生化反应： 氧化酶+ OF：O 硝还+ N 2+ 液化明胶+ 枸橼酸盐+ 精双 水解+ 乙酰胺酶+ 吲哚-
铜绿假单胞菌
电镜图
铜绿假单胞菌
• 抗原： O抗原(外膜蛋白-保护性抗原 脂多糖-型特异性) H抗原 血清学分型 • 抵抗力： 抵抗力强 耐干燥 不耐热 多重耐药 在室温水中长期生存 4℃不生长
• 本菌为专性需氧菌，生长温度范围25~42℃， 最适生长温度为25~30℃，特别是该菌在 4℃不生长而在42℃可以生长的特点可用以 鉴别。在普通培养基上可以生存并能产生水 溶性的色素，如绿脓素（pyocynin）与带荧 光的水溶性荧光素（pyoverdin）等。在血 平板上会有透明溶血环。 • 该菌含有O抗原（菌体抗原）以及H抗原 （鞭毛抗原）。O抗原包含两种成分：一种 是其外膜蛋白，为保护性抗原；另一种是脂 多糖，有特异性。O抗原可用以分型。
嗜麦芽 15%
其他 13%
不动杆菌 16%
铜绿假单胞 菌 56%
非发酵菌分离率
假单胞菌属Pseudomonas
• 共同特点： G-b 菌体细长 单端鞭毛 无芽胞 专性需O2 营养要求不高 35℃生长，少数4℃、42 ℃生长 葡萄糖O/－ 动力+ 氧化酶+ 可产多种色素：绿脓素 荧光素 脓玉红素
各种菌产生的色素
牛胆盐为抑菌剂，用于抑制一些杂菌的生长 。
出处：《中国人民共和国药典》2010版二部 附录 XI J 微生物限 度检查法 P114
培养基成分：
• • • • • • • •
溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基 胨 10g 溴化十六烷基三甲铵 0.3g 牛肉浸出粉 3g 琼脂 15~20g • 溴化十六烷基三甲铵琼脂培 养基是铜绿假单胞菌的选择 氯化钠 5g 性培养基，也是美国药典和 水 1000ml 中国药典等国推荐使用于食 除琼脂外，取上述成分，混合， 品、药品中铜绿假单胞菌检 微温使溶解，调节pH值使灭菌后 测的培养基。 为7.5±0.1，加入琼脂，加热溶化 后，分装，灭菌，冷至60℃，倾 注平皿。 书本P161 5.14
铜绿的菌落分型
典型型 大肠菌样型 粘液型 侏儒型 粗糙型
菌落光滑凸起 成粘液状
粘液型（麦康凯平板）
粘液型（血平板）
细小，无光泽 半透明菌落
侏儒型（麦康凯平板）
菌落呈灰绿色 大小不一 扁平湿润 边缘不规则 呈伞状伸展 表面常可见 金属光泽
典型型（麦康凯平板）
产绿脓素 琼脂染成黄绿色
• 各种抗生素治疗铜绿假单胞菌所致感染过程中都可 能发生耐药。初代敏感菌株在治疗3－4天后可能发 生耐药，有必要重复分离菌株 • 本菌对多种抗生素天然耐药，常用三代头孢和氨基 糖苷类联合治疗
鉴定结果分析
• 从临床标本中分离出来的铜绿假单 胞菌，需要排除污染因素 • 铜绿假单胞菌下呼吸道感染需连续 三次痰培养阳性才能确立。
菌落特征
感染途径：
当机体免疫功能受损或缺损时，可引起严重的甚至致死性的感染。
1.正常人皮肤，尤其潮湿部位如腋下、会阴部及耳道 内，呼吸道和肠道均有该菌存在，但分离率较低。 2. 医源性感染
3.术后操作感染（气管切开、保留导尿管等）
4.人、病人与病人的接触也为传播途径之一
检查意义：
• 人及动物的皮肤、肠道、上呼吸道等处都有该菌存在。绿脓杆菌抵 抗力较强，湿热55℃1小时才被杀死。 • 对紫外线不敏感。对多种抗生素易产生耐药性。本菌仅于人体防御 功能改变或直接进入机体（如通过泌尿道插管及静脉导管、呼吸道 的通气设备和其他治疗检查方法）以及混合感染时才具有致病性。 • 长期使用抗生素、肾上腺皮质激素、免疫抑制剂或大面积烧伤、肾 功能不全、心脏病、慢性支气管肺疾患的患者易继发绿脓杆菌的感 染。
• 绿脓杆菌是医院内感染的重要病原菌之一。
培养基成分：
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胆盐乳糖培养基（BL）
胨 20. 0g 磷酸二氢钾 1.3g 乳糖 5. 0g 牛胆盐 2.0g 氯化钠 5.0g (或去氧胆酸钠） （0.5g) 磷酸氢二钾 4. 0g 水 1000ml 除乳糖、牛胆盐或去氧胆酸钠外，取上述成分，混合，微温溶 解，调节P H值使灭菌后为7 . 4 ± 0 . 2，煮沸，滤清，加入 乳糖、牛胆盐或去氧胆酸钠，分装，灭菌。
• 书本P163 5.26
样 品 10g
10 ml
BL
100 ml
缓冲液
供试 液
10ml
BL 阳性
BL 阴 性 十六烷基三甲基溴化铵平板
培养温度： 36℃
营养琼脂斜面
培养时间： 十六烷基三甲基溴化铵平板 18~24h （必要时可 延长至48h）