植物培养基基本成分
植物组织培养MS培养基配方
植物组织培养MS培养基配方（一）母液配制与保存配制培养基时，如果每次配制都要按着杨成分表依次称量，既费时，又增加了多次称量误差。
为了提高配制培养基的工作效率，一般将常用的基本培养基配制成10～200倍，甚至1000倍的浓缩贮备液，即母液。
母液贮存于冰箱中，使用时，将它们按一定的比例进行稀释混合，可多次使用，并在配制较多数量的培养基时，降低工作强度，也提高试验的精度。
基本培养基的母液有四种：大量元素（浓缩20倍），微量元素（浓缩100倍），铁盐（浓缩200倍），除蔗糖之外的有机物质（浓缩100倍）1大量元素配制大量元素母液时要分别称量，分别溶解，在定容时按表1中的序号依次加入容量瓶中，以防出现沉淀。
倒入磨口试剂瓶中，贴好标签和做好记录后，可常温保存或放入冰箱内保存。
2微量元素母液在配制微量元素母液时，也应分别称量和分别溶解，定溶时不分先后次序，可随意加入溶量瓶中定容（表2），一般不会出现沉淀现象。
倒入磨口试剂瓶中，贴好标签和做好记录后，可常温保存或放入冰箱内保有存。
3铁盐母液由于铁盐无机化合物不易被植物吸收利用，只有基螯合物才能被植物吸收利用，因此需要单独配成螯合物母液表3）。
配制方法：称取5.56g硫酸亚铁和7.46g乙二胺乙酸二钠，分别用450ml的去离子水溶解，分别适当加热不停搅拌，分别溶解后将硫酸亚铁溶液缓缓加入到乙二胺四乙酸二钠溶液中，将两种溶液混合在一起，最后用去离子水定溶于1000mL，倒入棕色贮液瓶中，贴好标签和做好记录后放入冰箱内保存。
先取一种置容量瓶（烧杯）中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。
4有机物母液按表4中的量分别称取各种有机物，分别溶解后，用蒸馏水或去离子水定容于1000mL，放入细口瓶配成1 mg/ml 。
各100 ml。
6-苄基腺嘌呤（6-BA）用0.5 N的HCl加热溶解。
萘乙酸（NAA）用少量无水乙醇溶解，再加蒸馏水。
植物组织培养的培养基
★植物组织培养培养基的主要成分1.无机营养物：无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成，大量元素主要包括氮、磷、钾、钙、镁和硫六种，氮源通常有硝态氮或铵态氮，但在培养基中用硝态氮的较多，也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。
磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。
钾是培养基中主要的阳离子，在近代的培养基中，其数量有逐渐提高的趋势。
而钙、钠、镁的需要则较少。
培养基所需的钠和氯化物，由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。
微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁,这些元素有的对生命活动的某个过程十分有用，有的对蛋白质或酶的生物活性十分重要，有的是参与某些生物过程的调节。
培养基中的铁离子，大多以螯合铁的形式存在，即FeSO4与Na2—EDTA（螯合剂）的混合。
2.碳源：培养的植物组织或细胞，它们的光合作用较弱。
因此，需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要。
培养基中的碳水化合物通常是蔗糖或D-葡萄糖，用量通常为2%-4%，高者可达5%，亦可用市售的白糖所代替，但一般应增加用量，而且最好用比较固定的厂家生产的产品，以保证实验的稳定性。
3.有机营养成分：包括人工合成或天然的有机附加物（包括维生素，氨基酸及其它有机物质等）。
最常用的有酪朊水解物(水解乳蛋白、水解酪蛋白CH)、酵母提取物、玉米胚乳、麦芽浸出物、西红柿汁、椰子汁(CM)及各种氨基酸如甘氨酸（氨基乙酸）等。
维生素：在培养基中加入维生素，常有利于外植体的发育。
培养基中的维生素属于B族维生素，其中效果最佳的有硫氨素（维生素B1）、盐酸吡哆醇（维生素B6）和维生素H（生物素）、泛酸钙等、肌醇（环己六醇）、烟酸。
在部分培养基中还添加维生素BX（氨酰苯甲酸）、维生素C（抗坏血酸）、维生素E（生育酚）、、维生素B12（氰钴胺酸）、维生素BC（叶酸）、维生素B2（核黄素）和氯化胆碱等维生素。
这些可能对某些植物或植物的某些代谢过程有重要作用，如肌醇主要以磷酸肌醇和磷脂酰肌醇的形式参与由Ca介导的信号转导。
培养基的组成、配制与灭菌
1、大量元素：
组织培养中，各种矿质营养主要从培养基中获得， N、P、K、Ca、Mg、S等6种大量元素依靠各种无机 盐提供。
不同植物种类和不同试验目的对元素的使用量要求 不同，需经试验确定。
目前已选择出多种培养基配方用于植物组织培养。 其中以MS应用最广泛。
通常激素母液浓度生长素类为0.1~0.5 mg/ml, 细 胞分裂素母液浓度为0.2~1.0 mg/ml.
四、培养基的配制：
1、量取母液：营养元素和激素。 2、称量蔗糖、琼脂，放入600ml左右蒸馏水的锅 内，电路上加热，使琼脂溶化。 3、加入母液，混合均匀，调整pH值。 4、分装入瓶，每瓶40－50ml。 5、封口：用4－6层称量纸封口，之后灭菌备用。
在植物组织培养中，主要通过植物激素 及生长调节物质对离体的组织、器官的形 态发生进行调控。包括诱导细胞分裂、愈 伤组织的生长、根芽的分化以及体细胞胚 胎发生等。
常用的植物激素及生长调节物涉及五大类植物 激素：
1、生长素类：IAA、IBA、NAA、2，4-D 2、细胞分裂类：6-BA、KT（Kin）、ZT、2ip 3、赤霉素类：GA3、GA4、GA7 4、脱落酸：ABA 5、乙烯：ETH
五、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）：
1、加热：
灭菌前检查灭菌锅内水量是否充足， 然后将培养基放于灭菌锅内，改好盖，关 闭放气阀，打开电源，加热升温。
2、排气：
当温度升至0.5kg/cm2时，打开放气阀 彻底排出锅内冷空气。然后关闭放气阀， 促使压力继续上升。
3、温度控制：
当锅内压力升至1.1kg/cm2时，计时15－20 分钟，计时结束后，关闭电源。
二、培养基的类型： 1、高盐浓度培养基：MS、B5、SH等。
培养基的一般常用成分
（一）水制备培养基必须使用纯净的，无微量金属，杀菌性和抑菌性化学物质的蒸馏水。
注意，以加氯的水进行蒸馏所得的蒸馏水，即使在使用前通过离子交换树脂，也偶含有显著量的游离氯．所以应进行测试，如正联甲苯胺试验显色。
测试后，以硫代硫酸钠中和后或进行重复蒸馏后才能使用。
（二）琼脂琼脂俗称洋菜，英文名agar ，为由海藻类（主要足石花菜）提取出来的一种胶体多糖，即半乳聚糖水解后，产生半乳糖及少量五烷糖和有机硫。
其化学性质系为一种不带侧链的半乳聚糖甙，含有90%右旋半乳糖和10％左旋半乳糖。
在约每10个吡喃半乳糖单位有一个首位或次位的羟基被硫酸脂化。
其阴离子脂组（-SO2 -OH ）主要是与钙结合，但也有少数是和镁、钠、或钾结合。
其制造方法，一般是在每年7-9 月收集海中石花菜，洗涤并经晒干后保存。
于冬季冰冻开始时，按1：30 比例将干藻放入水中煮沸，然后加入硫酸少许并煮沸5-6 小时。
过滤后待冷，用“漏子”推成粗条，再经日晒夜冻2-3 周后，即成条状琼脂。
除少数菌种外，绝大多数细菌都不能分解琼脂，因而琼脂在培养某中无营养价值，只是在液体培养基中凝结成半固体或固体培养基而已。
国外商售琼脂一般比较纯净，国内琼脂则含有杂质较多，故在使用前应先用冷水浸泡洗涤后才能使用。
供细菌培养使用的品质优良的琼脂应具有下列特性：( l ）凝固点不超过2 ℃，通常范围在34～38 ℃。
( 2 )1L 的1.5%琼脂，在蒸汽浴中重新完全溶化，不超过45 分钟。
( 3 ）在98 ℃能完全溶解子水。
( 4 ）在45 ℃仍保待足够的液态，以利于试验时的混合均匀。
( 5 ）与水的结合水平至少在50%以上，以保证完全的溶解性。
（6）含水量不超过原重17%。
( 7 ）燃烧残余物不超过3 %。
（8）金属最高允许含量，铅0.0005%，铁0.001%，镁0.1%，钙0.2%，钠0.4%，并不得含有抗菌物质。
( 9 ）透明度：在蒸馏水中加热溶解后，呈微乳白色透明凝块。
培养基的主要成分
培养基的主要成分
培养基是微生物繁殖和增殖的必要条件。
培养基由营养基、细胞因子和田间隔离菌等
组成，广泛应用于改良、繁殖和研究部门。
它还在临床、犯罪司法法律案件和环境检测中
得到广泛应用，具有重要的实用价值。
营养基是构成培养基的基础成分，具有提供必需的营养成分、调节pH值、维持温度
和改良培养基条件等特性。
营养基的主要原料是由碳源、氮源、矿物质、维生素、水合物
等杂质组成的多成分混合物，根据不同的培养要求，采用不同的配方生产存在多种类型的
营养基，如食品入口培养基、菌丝体培养基、细胞培养基、植物染色体营养基和细菌增殖
培养基。
细胞因子是有机物和无机物的混合物，具有活化、促进细胞分裂的作用。
常见的细胞
因子有甘露糖、氨基葡萄糖、枸橼酸、磷酸等。
细胞因子添加到培养基中，能够改善培养
效果，达到良好的培养条件，使微生物有良好的生长繁殖状况。
田间隔离菌是培养基中的重要成分，一般情况下，田间隔离菌是指从其他种类植物中
分离到实验室中新分离出来的细菌。
由于田间隔离菌具有良好的耐热性、耐久性和耐盐性，因此，它们可以用来控制微生物实验环境中污染物的数量和种类，使得培养基中的微生物
单种或少种株培养，以方便有效地繁殖和增殖。
除上述基本成分之外，培养基中还可加入抗生素和抗氧化剂，以防止污染物、藻类和
细菌的生长，保证培养条件良好，提高培养效果。
培养基的主要成分及其作用
培养基的主要成分及其作用培养基是用人工方法配制而成，适合微生物生长繁殖需要的混合营养基质。
适宜的培养基不仅用于细菌的分离、纯化、传代及菌种保存等，还可用于研究细菌的生理、生化特性。
因此，掌握培养基的制备技术及其原理，是进行细菌学检验的重要环节和必不可少的手段。
细菌的生长繁殖除需要一定的营养物质，如含氮化合物、糖类、盐类、类脂质及水外，有的还需加入特殊营养物质，如维生素的辅助生长因子或某些其他特殊因子；有的则需加入指示剂或抑制剂，以利于细菌的分离和鉴定。
1．营养物质营养物质提供细菌生长繁殖所需的能量、合成菌体的原料以及激活细菌酶的活性和调节渗透压等作用。
细菌需要的营养物质主要有氮源、碳源、无机盐及生长因子。
(1)蛋白胨：是由动物或植物蛋白质经酶或酸碱分解而产生的中间产物，是培养基中最常用的成分之一，主要供给细菌氮源，合成菌体蛋白质、酶类等，另外还具有缓冲作用。
由于蛋白质的来源和消化程度不同，因而制得的蛋白胨质量相差很大。
按照生产原料的性质，蛋白胨可分为植物胨和动物胨两类。
蛋白胨经喷雾干燥成粉末，吸水性较强，保存时应干燥密封，防止潮解结块。
(2)肉浸液：系用新鲜牛肉(去掉脂肪、肌膜及肌腱等)浸泡煮沸制成的肉汤。
肉浸液中包括含氮和非含氮两类浸出物，还有一些生长因子。
作为细菌生长所需要的氨源和碳源，由丁加热后大部分蛋白质凝固，仅留少部分氨基酸和其他含氮物质，不能满足细菌生长需要，故在制作培养基时，一般需加1％～2％蛋白胨和0.5％的NaCl。
(3)牛肉膏：又称牛肉浸膏，是肉浸液加热浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。
其中不耐热的物质如糖类已被破坏，故其营养价值不及肉浸液，但因无糖，可作为肠道细菌鉴别培养基的基础成分。
(4)糖(醇)类：含有细菌所需的碳源。
制备培养基所应用的糖(醇)类很多，常用的糖类有单糖(如葡萄糖、阿拉伯糖等)、双糖(如乳糖、蔗糖等)、多糖(如菊糖、淀粉等)：醇类有甘露醇、卫矛醇及侧金盏花醇等。
培养基的组成
培养基的组成1 前言培养基是人工配制的供微生物或动植物细胞生长、繁殖、代谢和合成人们所需产物的营养物质和原料，同时，培养基也为微生物等提供除营养外的其它生长所必须的环境条件。
常用的培养基都应符合一些基本要求：1 ) 都必须含有作为合成细胞组成的原料；2 ) 满足一般生化反应的基本条件，如碳源、氮源、无机盐、生长因素；3 ) 一定的pH等条件。
2 培养基的组成2.1 碳源碳源是组成培养基的主要成分之一。
常用的碳源有糖类、油脂、有机酸和低碳醇。
在特殊情况下( 如碳源贫乏时) ，蛋白质水解产物或氨基酸等也可被某些菌种作为碳源使用。
葡萄糖是碳源中最易利用的糖，几乎所有的微生物都能利用葡萄糖，所以葡萄糖常作为培养基的一种主要成分，并且作为加速微生物生长的一种有效的糖。
但是过多的葡萄糖会过分加速菌体的呼吸，以致培养基中的溶解氧不能满足需要，使一些中间代谢物不能完全氧化而积累在菌体或培养基中，如丙酮酸、乳酸、乙酸等导致pH下降，影响某些酶的活性，从而抑制微生物的生长和产物的合成。
2.2 氮源氮源主要用于构成菌体细胞物质( 氨基酸、蛋白质、核酸等) 和含氮代谢物。
常用的氮源可分为两大类：有机氮源和无机氮源。
2.2.1 有机氮源常用的有机氮源有玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉和酒糟等。
它们在微生物分泌的蛋白酶作用下，水解成氨基酸，被菌体吸收后再进一步分解代谢。
有机氮源除含有丰富的蛋白质、多肽和游离氨基酸外，往往还含有少量的糖类、脂肪、无机盐、维生素及某些生长因子，因而微生物在含有机氮源的培养基中常表现出生长旺盛，菌丝浓度增长迅速的特点。
大多数发酵工业都借助于有机氮源，来获得所需氨基酸。
玉米浆是一种很容易被微生物利用的良好氮源。
因为它含有丰富的氨基酸( 丙氨酸、赖氨酸、谷氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸等) 、还原糖、磷、微量元素和生长素。
玉米浆是玉米淀粉生产中的副产物，其中固体物含量在50％左右，还含有较多的有机酸，如乳酸，所以玉米浆的 pH在4左右。
植物组织培养基的配制—培养基种类及成分
有时应用水解乳蛋白或水解酪蛋白，它们是含有约20种氨基酸的混合物， 用量在10～1000mg／L之间。由于它们营养丰富，极易引起污染。
• 天然有机添加物
其成分比较复杂，大多含氨基酸、激素、酶等一些复杂化合物。它对细胞和 组织的增殖与分化有明显的促进作用，但对器官的分化作用不明显。
（四）、生长调节物质
• 是植物新陈代谢中产生的天然化合物，它能以极微小的量影响到植物的细胞 分化、分裂、发育，影响到植物的形态建成、开花、结实、成熟、脱落、衰 老和休眠以及萌发等许许多多的生理生化活动。
• 在培养基的各成分中，植物激素是培养基的关键物质，对植物组织培养起着 决定性作用
• 常用的有生长素类和细胞分裂素类。
锰：参与植物的光合、呼吸代谢过程，影响根系生长。 锌：是各种酶的构成要素，能增强光合作用效率，参与生长
素的代谢，促进生殖器官发育和提高抗逆性。 铜：有促进离体根生长的作用。 硼 ：能促进生长器官的正常发育，参与蛋白质合成或糖类运输。 钼：参与 氮素代谢
（三）、有机营养成分
• 主要包括： 各种维生素、肌醇、氨基酸和天然有机添加物。
维生素具有热易变性，易在高温下降解，可进行过滤灭菌
• 肌醇
使用浓度一般为l00mg／L，适当使用肌醇，能促进愈伤 组织的生长以及胚状体和芽的形成。对组织和细胞的繁殖、 分化有促进作用，对细胞壁的形成也有作用。
• 氨基酸
是很好的有机氮源，是蛋白质的组成成分，可直接被细胞吸收利用，对外 植体的芽、根、胚状体的生长、分化均有良好的促进作用。
• 维生素
主要有盐酸硫胺素（VB1）、盐酸吡哆醇(VB6)、烟酸（VB3）、抗坏血酸 （VC）、泛酸钙、生物素（VB7）、叶酸（VB11）、钴胺素、VB2等。一般 用量为0.1～1.0mg／L。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
植物培养基基本成分
植物培养基是一种人工配制的液体或固体培养基，用于在无菌条件下培养和繁殖植物组织、细胞和种子。
植物培养基的基本成分包括以下几个方面：
1. 碳源：植物细胞的主要碳源是蔗糖、葡萄糖、果糖等单糖或双糖，部分植物还需要添加有机酸或淀粉等。
2. 氮源：植物细胞的主要氮源是硝酸盐、铵盐、天然氨等，还可以添加氨基酸、尿素等。
3. 磷源：植物细胞需要的主要磷源是磷酸盐，如二氢磷酸盐、三氢磷酸盐等。
4. 钾源：植物细胞需要的主要钾源是硝酸钾、磷酸钾等。
5. 微量元素：植物细胞需要的微量元素包括铁、锰、锌、铜、钼等。
6. 维生素：通常添加维生素B族，如硫胺素、核黄素、泛酸等。
7. 激素：激素对植物的组织培养有着重要的影响，通常添加生长素、赤霉素等。
以上是植物培养基的基本成分，不同类型的植物需要的成分略有差异，根据不同的培养目的和要求，还可以添加抗生素、植物提取物等其他成分。
- 1 -。