希波氏-离子色谱用SPE-C18柱使用方法
C18色谱柱使用指南
C18色谱柱使用指南1.样品准备在进行C18色谱柱分析之前，样品通常需要进行预处理。
对于有机溶剂溶解的样品，可以通过过滤来去除杂质颗粒。
对于水溶性样品，可以使用有机溶剂混合溶解，以提高样品在有机相中的溶解度。
此外，还可以使用离心机除去悬浮物和沉淀物。
2.工作条件选择C18色谱柱可以在不同的工作条件下使用，包括流动相组成、流速、柱温等。
在选择工作条件时，需要考虑目标化合物的极性、分离程度和保留时间等因素。
常见的流动相组成包括水和有机溶剂的混合物，比如水/甲醇和水/乙腈。
流速的选择需要权衡分离效果和分析时间，一般流速在0.5-2 mL/min之间。
柱温的控制可以改变样品的保留行为，从而影响分离效果。
3.柱平衡在进行实际分析前，C18色谱柱需要进行柱平衡。
柱平衡的目的是使色谱柱内部的填料达到稳定的状态，从而提高分离效果和重复性。
柱平衡可以通过流动相运行一段时间来实现，一般需要10-20柱体积的流动相通过柱床。
4.样品注射在C18色谱柱中，样品通常是通过进样器注入。
选择适当的进样量是保证分析准确性和可重复性的关键。
进样量过大会导致色谱峰扩展和分离效果下降，进样量过小则可能导致分析信号过低。
通常情况下，进样量在1-10μL之间。
5.分析在进行C18色谱柱分析时，需要关注色谱峰的对称性、解析度和保留时间等指标。
色谱峰的对称性可以通过调整流速、压力、温度等因素来改善。
解析度是衡量两个相邻峰之间的分离程度，可以通过调整流动相组成和流速等来增加。
保留时间是指化合物在色谱柱中停留的时间，可以通过调整流动相组成和流速来改变。
总结：C18色谱柱是常用的反相色谱柱，在样品准备、工作条件选择、柱平衡、样品注射和分析等方面有一些注意事项。
正确的样品准备、选择合适的工作条件、进行柱平衡、控制进样量和关注分析指标可以提高C18色谱柱的分析效果和重复性。
在使用C18色谱柱进行实验时，需要严格按照相关的操作规范进行操作，以确保实验结果的准确性和可靠性。
c18反相柱色谱过柱
C18反相柱色谱过柱技术是一种常用的分离方法，广泛应用于化学、制药、环境等领域。
本文将详细介绍C18反相柱色谱过柱的原理、操作步骤以及应用案例。
一、C18反相柱色谱过柱原理C18反相柱是一种基于亲水性原理的柱层材料，其表面被涂覆上疏水性的C18链状碳链。
它能够通过样品中溶质与固定相之间的亲疏水作用力来进行分离。
当样品进入柱中时，极性较小的溶质会迅速与柱内的疏水相互作用，而极性较大的溶质则会较慢地与疏水相互作用。
通过控制移动相的性质和流速，可以实现对不同化合物的选择性分离。
二、C18反相柱色谱过柱操作步骤1. 准备工作：检查仪器设备是否正常运行，确保柱子处于良好状态。
准备好所需的溶剂和移动相。
2. 样品制备：将待测样品溶解于适当的溶剂中，并进行必要的预处理，如过滤、离心等。
3. 柱子装填：将C18反相柱装入色谱柱架中，连接好进样系统和检测器。
4. 初始条件设置：设置移动相组成和流速，一般采用梯度洗脱方法，即开始时使用较弱的极性溶剂，逐渐改变为较强的极性溶剂。
5. 进样：将样品通过进样系统注入柱中，注意保持稳定的进样流速。
6. 色谱分离：开始进行色谱分离，根据需求调整流速和梯度条件，使不同组分得到有效分离。
7. 数据采集和解析：利用检测器对柱出口的化合物进行检测和记录，获取相应的色谱图。
8. 结果分析：根据色谱图进行结果分析，确定目标化合物的峰位置、峰高、峰面积等参数。
三、C18反相柱色谱过柱应用案例1. 药物分析：C18反相柱色谱过柱广泛应用于药物分析领域，可以用于分离和鉴定药物中的杂质、代谢产物等。
通过优化移动相的组成和流速，可以实现对复杂药物样品的高效分离。
2. 环境监测：C18反相柱色谱过柱也可用于环境样品中有机污染物的分析。
比如水样中的农药残留、土壤中的有机污染物等。
通过该技术，可以对这些污染物进行快速、准确的分离和定量。
3. 食品安全：C18反相柱色谱过柱可应用于食品中有害物质的检测，如农药残留、食品添加剂等。
C18色谱柱
在用的最多的就是反相C18色谱柱,在平时的工作中,个人积累了一些小经验,很管用的，在此与大家分享1、新柱的处理：我们每次新买的柱子虽然是经厂家测试过并密封好的，可是有的柱子到达手中时已经过很长的时间了，因此，我们每拿到一根新的色谱柱都必须要对柱子进行处理。
首先，是配制好65%的乙腈/水，再把色谱柱正确的连接在色谱仪上，出口放空（注意：出口端切不可连上检测器，以免污染了检测器），以低流速0.1ml/min~0.5ml/min（如果是LC/MC 柱子，则应以0.3ml/min进行）均可，不可以高流速进行，等看见柱子出口有液体流出后，过20分钟后再接上检测器，以循序渐进的方法将流速调至1.0ml/min（如果是LC/MC柱子则应以0.3ml/min进行），继续冲洗2~8小时。
2、新柱的使用：首先我们确认所分析样品流动相的PH是不是在色谱柱PH的耐受范围之内，以免损伤柱子!如果，确认在柱子的使用范围之内，就用做样品的流动相平衡柱子(如果流动相中含用缓冲盐溶液，在平衡柱子之前务必要先用5%甲醇或5%乙腈去过渡30分钟以上。
再用带盐的流动相去平衡色谱柱。
)当色谱柱平衡了足够时间，基线非常平稳的时候，方可进样分析。
不管是分析什么样的产品，由于各种各样的因素，样品中总有杂质。
因此，最好在色谱柱前端加上保护柱。
以增加色谱柱的使用寿命！3、色谱柱清洗：①如果样品分析中只用到一般的乙腈、甲醇和水的流动相，在做完样品之后可直接用55%~65%乙腈/水或者用55%~65%甲醇/水冲洗色谱柱40~80分钟，然后以纯甲醇或乙腈冲洗30分钟，即可保存；②如果样品分中流动相里含用缓冲液或酸或离子对试剂的流动相，在做完样品之后的清洗必须按照如下步骤进行清洗柱子:先用5%的甲醇/水或5%的乙腈/水，以1ml/min,冲洗1.5小时以上(如果色谱柱更长，则还需要增加适当时间);然后用55%甲醇/~水65%/水冲洗色谱柱30~60分钟.最后用甲醇或乙腈以1ml/min冲洗30分钟。
C18色谱柱通用使用方法
C18色谱柱通用使用方法1.柱的准备：a.检查柱的完整性和封闭性。
确保柱的端口和连接器没有损坏，没有杂质进入柱内。
b.检查柱的包装是否完好。
确保柱没有受到损坏或污染。
2.柱的预处理：a.将新的C18色谱柱进行预处理。
通常情况下，柱需要进行反相条件下的"洗涤"，以去除柱内的杂质和残留物。
b.使用适当的洗涤溶液，如乙腈/水或甲醇/水混合溶液，进行柱的洗涤。
通常需要使用高浓度有机溶剂，如100%乙腈或甲醇，进行洗涤。
c. 洗涤柱时，使用较高的流速，通常为1-2 mL/min，以加快杂质的去除。
3.样品的准备：a.样品前处理。
根据需要，对样品进行适当的前处理，如过滤、离心、稀释等。
b.样品溶剂的选择。
根据样品的性质选择合适的溶剂，通常为乙腈/水或甲醇/水混合溶剂。
c.样品的溶解。
将样品溶解于适当的溶剂中，并通过过滤器进行过滤，以去除悬浮物和固体杂质。
4.色谱条件的设置：a.流动相的选择。
根据需要选择合适的流动相组成，通常为乙腈/水或甲醇/水混合溶剂。
b.pH值的调节。
根据需要调节流动相的pH值，以适应目标化合物的分离。
c. 流速的设置。
根据样品的复杂性和分离的要求，设置合适的流速。
通常情况下，流速为0.5-2 mL/min。
d.分析温度的控制。
根据样品的性质和分析要求，设置合适的温度。
通常为室温或稍高温度。
5.色谱分离：a.样品注射。
将样品通过自动进样器或手动注射器注入到色谱柱中。
b.等待分离。
在流动相的作用下，样品组分将按照其亲水性和疏水性被分离。
根据需要，调节流动相的组成和温度，以实现最佳的分离效果。
c.收集分离的组分。
根据需要，收集分离出的目标组分，可以通过分级洗脱或梯度洗脱的方式进行。
6.柱的保养：a.柱的再生。
根据需要，可以使用适当的再生溶液（如有机溶剂）对柱进行再生，以去除残留的样品和杂质。
b.柱的保存。
在不使用柱时，将其存放在干燥、避光和低温的环境中，以保持柱的稳定性和使用寿命。
c18液相色谱柱的活化步骤
c18液相色谱柱的活化步骤
C18液相色谱柱的活化步骤如下：
1.在开始使用柱子之前，要用适当比例的有机溶剂（如甲醇或乙腈）洗涤
柱子。
例如，用3～5倍柱子体积的甲醇洗涤柱子。
2.将纯水通过柱子流通20～30min。
这一步可以去除残留的有机化合物和
杂质。
注意保持柱子湿润。
3.通过柱子流通一定比例的有机溶剂与水混合物。
例如，用70%乙腈+30%
水的混合物通过柱子。
这样可以逐渐增加有机相的浓度，有助于保护柱
子不被溶剂冲击。
4.接着，可以使用一定比例的有机溶剂溶解样品，并以柱洗涤液的方式通
过柱子。
可以考虑用一些柱洗涤液去除样品残留。
5.最后，洗涤柱子以消除任何残留的溶液，或将柱子存放在一定的缓冲液/
有机溶剂中，直到再次使用。
以上步骤仅供参考，建议咨询专业人士获取更准确的信息。
C18色谱柱通用使用方法
C18/C8色谱柱使用方法
一、新柱活化：新的色谱柱活化：采用100%甲醇1ml/min冲洗60min，
再换成流动相进行平衡；如果流动相中含有缓冲盐，在换成流动相前，请使用过渡流动相过渡后再换流动相平衡；
二、色谱柱保存溶液与评价报告一致。
三、在使用过程中如果流动相没有磷酸缓冲盐的存在，新柱子在使用
之前需用100%的甲醇（色谱纯）以0.5~1.0的流速平衡30min 左右，进流动相，待系统基线平稳直接进样即可。
做完实验再用100%的纯甲醇（色谱纯）以0.5~1.0的流速冲洗30min左右，最后用100%的纯甲醇（色谱纯）保存。
四、在使用过程中如果流动相有磷酸缓冲盐的存在，新柱在使用之前
需用10%的甲醇（色谱纯）水溶液以0.5~1.0的流速冲洗60min 左右，将新柱高浓度甲醇溶液完全置换掉，进流动相，待系统基线平稳直接进样即可。
做完实验再用10%的甲醇（色谱纯）水溶液以0.5~1.0的流速冲洗60min左右，将色谱柱中缓冲盐溶液完全置换掉，最后用100%的纯甲醇清洗色谱柱30min，最后用纯甲醇保存色谱柱。
C18柱使用指南(1)
C18柱使用指南
1、新柱在使用前需用纯有机试剂（如甲醇、乙腈）低流速冲洗，冲洗体积以20倍柱体积
为宜，以便固定相能充分润湿、碳链舒展彻底，使色谱柱的性能达到巅峰状态；
2、使用时需在每日实验结束后冲洗色谱柱，尤其是流动相中含有酸或盐时，需将色谱柱中
的酸或盐冲洗干净，通常建议用10%甲醇水冲洗20倍柱体积；
3、长期保存前要将色谱柱彻底冲洗，建议冲洗3-4小时以上，最后保存在纯有机试剂或高
比例的有机试剂溶液（如90%甲醇水）中；
4、日常保存溶剂（即第二天需继续使用）尽量与3中相同；
5、由于C18柱（极性改性处理的除外）的固定相疏水性较强，在使用过程中尽量不要使用
高水相条件，若水相比例过高易引起固定相疏水塌陷，引起柱效迅速下降，甚至造成不可逆的负面影响，Diamonsil（2）由于碳载量高，表现尤为明显，建议使用过程中水相比例不超过90%；
6、色谱柱压力升高、柱性能下降：通常为色谱柱被污染，对色谱柱进行再生处理可恢复部
分柱效；
7、色谱柱压力骤升：通常由盐析出或筛板堵塞引起，若是盐析出，用10%甲醇水低流速冲
洗至压力恢复即可；若判断并非盐析出，以纯甲醇或10%甲醇水为流动相反冲色谱柱（将色谱柱反接，不接检测器），若反冲半小时仍无效果则说明反冲无效，需寻找其他原因。
色谱柱再生程序：
按照下列次序冲洗色谱柱，冲洗体积均为20倍柱体积：
10%甲醇水→甲醇→异丙醇（或氯仿）→甲醇→10%甲醇水
（步骤3选用异丙醇时，由于异丙醇粘度较大，需适当降低流速，建议流速设为0.2-0.3ml/min）
体积计算表：
迪马应用实验室。
C18色谱柱的使用
C18色谱柱的使用C18色谱柱是一种常用的反相色谱柱，广泛应用于化学分析、生物分析、药物研发等领域。
它具有良好的选择性和分离效果，对于疏水性化合物的分析具有很高的灵敏度和分辨率。
本文将详细介绍C18色谱柱的使用方法及其在不同领域的应用。
一、C18色谱柱的使用方法1.样品制备：将待分析的样品溶解在适当的有机溶剂中，通常是甲醇、乙腈等。
确保样品的浓度适当，以避免过高的浓度造成柱阻塞或过低的浓度造成分离不彻底。
2.色谱柱的准备：将C18色谱柱安装在色谱仪上，并根据柱子的要求进行预处理。
通常情况下，使用乙腈/水混合溶液进行洗脱，以去除柱子中的杂质和残留的有机溶剂。
3.流动相的选择：根据待分析化合物的性质选择合适的流动相。
C18色谱柱通常使用有机溶剂和水的混合物作为流动相，其中有机溶剂的比例越高，柱子的亲水性越低，适用于疏水性化合物的分离。
常用的有机溶剂包括甲醇、乙腈、异丙醇等。
4.色谱条件的优化：根据待分析化合物的性质和目标分离效果，优化色谱条件。
可以尝试不同的流速、温度、洗脱梯度等参数，以获得最佳的分离效果。
5.注射样品：将样品注射进色谱柱中，注意控制注射量，以避免样品过多造成柱阻塞或过少造成分离不完全。
通常情况下，使用自动进样器进行样品注射，以提高分析的准确性和重复性。
6.数据分析：通过检测器检测柱出口的化合物，得到色谱图。
根据峰的形状、相对保留时间等参数，对化合物进行定性和定量分析。
二、C18色谱柱的应用领域1.化学分析：C18色谱柱广泛应用于有机化学、环境分析、食品安全等领域的化学分析中。
通过C18色谱柱的分离效果，可以对复杂的混合物进行分离和鉴定，提高分析的准确性和灵敏度。
2.生物分析：C18色谱柱在生物分析中的应用也非常广泛。
例如，可以用于蛋白质和肽段的分离和纯化，用于核酸的分离和测序，用于药物代谢产物的分离和鉴定等。
C18色谱柱的选择性和分离效果能够满足对于生物分子的高分辨率分析需求。
3.药物研发：在药物研发中，C18色谱柱常用于药物的分离和纯化。
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离子色谱用C18柱
C18型前处理柱
C18型前处理柱是以平均粒度为40um C18为填料的样品前处理柱。
由于柱填料中不含阴、阳离子交换位点，其不会保留离子性物质，但可以保留疏水性物质，所以在进行离子交换分析以前，常常使用C18柱从样品基体中除去疏水性污染物。
技术指标
规格型号SPE-C18
官能团C18
填料克重250mg
使用范例有机物的去除
使用说明
1．为了能够给前处理柱必要的压力及适合的流速推荐使用10ml一次性针筒。
2．为了达到较好的前处理效果，每次处理前应使用5ml甲醇进行活化15ml高纯水（ > 17MΩ ）进行清洗。
当进行低浓度样品分析时，首先按照下表进行冲洗，然后再用2ml高纯水进行空白测定，如果空白值过高，表明冲洗不够充分。
应重新冲洗并进行空白测定。
规格型号冲洗试剂冲洗试剂体积流速
SPE-C
18
甲醇
高纯水5ml
15ml
< 3ml/min
3. 由于前处理柱是基于吸附原理进行，当样品流速< 2ml/min 时填料才能有效利用，
当所处理的样品浓度远小于柱容量时，流速可适当加快。
4. 在处理样品或标准液时，起初的流出液都应废弃不用。
例如：5ml 样品，弃去前3ml，收
集最后2ml进行离子色谱测定。
5．前处理柱在垂直使用时才会有理想的效果。