香烟毒性对蚕豆根尖细胞微核的影响
环境污染物的蚕豆根尖微核试验
环境污染物的蚕豆根尖微核试验实验内容随着工农业生产的迅速发展，新的化学物质和工业“三废”不断地进入人们的生活环境，它们中有许多可能对遗传物质产生损害并造成致癌、致畸、致突变等遗传毒理效应的环境致突变物，可对人类健康和生存构成严重危害。
微核试验(Themicro nucleu stest, MN T)是以动植物为材料，采用细胞生物学手段，观测其出现的微核率来表示材料受遗传损伤程度的一种检测遗传毒物的方法。
微核是无着丝点的染色体断片，在有丝分裂后期不能向两极移动，所以游离于细胞质中，在间期细胞核形成时，即可在它附近看到一到几个很小的圆形结构，直径大约是细胞直径的 1 ／20 － 1 ／ 5 ，这就是微核（micronucleus ）。
微核是常用的遗传毒理学指标之一，指示染色体或纺锤体的损伤。
由于这种损伤会因细胞受到的外界诱变因子的作用而加剧，而微核产生的数量又可与诱变因子剂量的强弱呈正比，因此可以用微核出现的频率来评价环境诱变因子对生物遗传物质的损伤程度。
蚕豆(Vicia faba)是一种理想的细胞遗传学研究材料。
蚕豆的染色体大，数量少(2n=12),根尖中含有较多的分裂相细胞，非常适合显微观察，而且蚕豆根尖细胞周期中的大部分时间对诱变剂敏感，便于遗传毒性检测实验，因此，早在1959年，放射生物学家已经用蚕豆的根尖细胞来进行X射线的遗传损伤研究。
到了上世纪70年代，蚕豆根尖染色体畸变技术已发展得相当成熟，作为一种检测化学品遗传学毒性的方法为人们所知并被广泛采用。
蚕豆根尖微核试验在1986 年已被中国环保局列为一种环境生物测试的规范方法，它作为一种环境变异的检测手段，在我国不少地区的环保部门和医疗卫生系统中都有广泛的应用。
蚕豆根尖微核试验在对水体污染物、空气污染物、农药、重金属、化妆品、工业化学品等的致突变性检测方面，都得到了较广泛的应用，在此仅以农药污染的蚕豆微核实验为例介绍其相应的实验方法与步骤，学生在具体开展相关环境污染物的蚕豆根尖微核试验时可参考使用。
香烟烟雾水溶液诱导大蒜根尖细胞产生微核
香烟烟雾水溶液诱导大蒜根尖细胞产生微核肖星辉;李予霞;徐亮;王小奎;李文超;李佳馨;刘红玲【摘要】为了探究香烟烟雾水溶液对大蒜根尖细胞遗传物质的影响,通过常规的微核技术观察了香烟烟雾水溶液不同浓度和不同时间处理下根尖细胞中微核的形态和数量.结果表明:在0.5~8支/mL的浓度范围内,大蒜根尖细胞的微核率随着浓度的增加而不断上升,差异极显著(P<0.01);在12~36 h处理时间范围内,微核率随着处理时间的增长呈现先升高后降低的趋势;当处理时间为12和24 h时,微核率随着浓度的增加而明显上升,而当处理时间为36 h时,微核率随着浓度的增加呈现先升后降的趋势;香烟烟雾水溶液的浓度和处理时间与微核的产生显著正相关,烟雾浓度对大蒜根尖细胞微核产生的贡献更大;试验组的细胞微核率均极显著高于空白对照组(P<0.01),微核指数均大于3.5,属于重度损伤.上述结果表明,香烟烟雾水溶液在较低的浓度(0.5支/mL)和较少的处理时间(12 h)就对植物遗传物质产生严重损伤.%In order to explore the influence of the water-soluble fraction of cigarette smoke on the micronucleus of plant cells, choosing the garlic rooy tip as the experimental material and extracting water-soluble fraction of different concentrations, this study analyses the influence of different concentration and treatment time on the genetic material of cells of root tip of Garlic. The results indicated that micronucleus rate increased with the concentration increases when the range of water-soluble fraction of cigarette smoke is 0.5 to 8. The rate of micronucleus increases first and then decreases at last when treatment continued12-36 h. however, when the treatment continued 12 or 24 hours, the rate of micronucleus increases quickly with the growth of concentration. While the treatment continued36 hour, the rate of micronucleus increases first and then decreases at last. the concentration and treatment time have an interaction on producing micronucleus, and the concentration of water-soluble fraction of cigarette smoke contributes more to producing micronucleus than the treatment time. All the rate of micronucleus of experimental group exceeds that of control group (P<0.05), and the index of micronucleus is bigger than 3.5, belonging to severe damage. In conclusions, under the quite low concentration (0.5/mL) and less treatment time , the water-soluble fraction of cigarette smoke has severe damage to the genetic material of plant.【期刊名称】《湖南农业科学》【年(卷),期】2017(000)006【总页数】4页(P7-10)【关键词】香烟烟雾水溶液;大蒜根尖;微核;浓度;处理时间【作者】肖星辉;李予霞;徐亮;王小奎;李文超;李佳馨;刘红玲【作者单位】石河子大学生命科学学院,新疆石河子 832000;石河子大学生命科学学院,新疆石河子 832000;石河子大学生命科学学院,新疆石河子 832000;石河子大学生命科学学院,新疆石河子 832000;石河子大学生命科学学院,新疆石河子832000;石河子大学生命科学学院,新疆石河子 832000;石河子大学生命科学学院,新疆石河子 832000;成都师范学院,四川成都 611130【正文语种】中文【中图分类】Q355;X171.5香烟燃烧产生的烟雾中含有5 000余种化学物质，这些化学物质既有植物烟草本身含有的，也有烟草燃烧后产生的[1]。
4种环境污染试剂诱导蚕豆微核现象的研究
4种环境污染试剂诱导蚕豆微核现象的研究杨蓓;许守明;赵丽芸;苏思【摘要】[目的]检测4种试剂处理后蚕豆的微核情况,以此评估一些污染物的危害性.[方法]通过蚕豆根尖微核试验,根据微核出现的频率来评价环境诱变因子对蚕豆微核的损害程度,镜捡计数后计算微核率.[结果]甲醛、丙烯酰胺、硝酸铅、O2衍生物可导致蚕豆根尖细胞间期细胞微核频率明显升高,但每种污染物在不同浓度会有不同程度的微核现象,且在一定浓度范围内微核率上升,浓度达到一定值时下降.[结论]丙烯酰胺、甲醛对蚕豆根尖细胞具有明显的遗传毒性效应;硝酸铅对蚕豆根尖细胞不具有明显的遗传毒性效应;SO2衍生物低浓度时对蚕豆根尖细胞有一定遗传毒性效应,高浓度效应明显.%[Objective] The aim was to study micronucleus phenomenon of Vicia faba induced by four invorment pollution reagent in order to assess some of the dangers of pollution. [ Method] By the mature root tip cells of Vicia faba micronucleus in substantial progress in water pollution monitoring, micronucleus phenomenon of Vicia faba induced by four invorment pollution reagent was studied. [Result] It was found that a representative of the environmental pollutants such as formaldehyde, acrylamide, lead nitrate, SO, derivatives could result in root tip cells of Vicia faba micronucleus frequency of interphase cells to increase significantly, but different pollutants at different concentrations varied degrees of micro-nuclear phenomenon, and in a certain range of concentration would increase the micronucleus rate, but would decline. [ Conclusion] Formaldehyde and acrylamide had evident genotoxic effects on root tip cells of Vicia faba, lead nitrate had not evident genotoxic effects, and S02derivatives had a certain genotoxic effect at low concentration, and had evident genotoxic effects at high concentration.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)021【总页数】2页(P12793-12794)【关键词】环境污染;微核;遗传毒性;蚕豆【作者】杨蓓;许守明;赵丽芸;苏思【作者单位】河南大学生命科学学院农业生物技术研究所,河南开封475004;河南大学生命科学学院农业生物技术研究所,河南开封475004;河南大学生命科学学院农业生物技术研究所,河南开封475004;河南大学生命科学学院农业生物技术研究所,河南开封475004【正文语种】中文【中图分类】S181蚕豆（Vicia faba）根尖细胞微核技术应用于水质污染监测具有良好的指示作用［1］。
TMV溶液诱导蚕豆根尖微核的研究
TMV溶液诱导蚕豆根尖微核的研究摘要：应用蚕豆根尖微核试验初步研究了一定浓度的烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus，tmv）溶液对环境污染的效应。
结果表明，tmv溶液浓度与各处理蚕豆根尖微核率的相关性较强（r=0.982），且差异极显著（p=0.0030.01），且蚕豆根尖微核率与处理时间相关性不强（r=0.312）。
研究表明蚕豆根尖细胞微核技术可应用于烟草花叶病毒遗传毒性监测。
关键词：烟草花叶病毒（tmv）；蚕豆根尖；微核率中图分类号：q943 文献标识码：a 文章编号：0439-8114（2013）03-0561-03存在于水体中的植物病毒可能导致植物病毒病流行，给农业生产带来不良影响。
目前很难估计水体中植物病毒对农业生产的潜在威胁程度，但烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus，tmv）通过植物根侵染植物已得到证实。
曾嵘等[1]研究发现在烤烟漂浮育苗中，tmv可以通过营养液侵染烟苗发病；刘勇等[2]研究表明水窖水体中的tmv具有侵染力。
已有从水体中分离到烟草花叶病毒的报道[3-9]，水体中存在的tmv有可能对环境造成一定的污染。
环境污染物（如物理、化学、生物污染源）能诱发植物细胞的染色体畸变，染色体断片游离在细胞质中于分裂末期形成微核。
蚕豆根尖细胞微核试验（micronucleus test，mcnt）是以蚕豆根尖细胞微核出现的频率为测试终点的监测方法[10]。
目前对水体植物病毒污染及其环境效应的研究极少，本研究以不同浓度的tmv溶液处理蚕豆根尖，分别统计各处理的蚕豆根尖微核率以及相应的污染指数，旨在初步探讨一定浓度的tmv溶液对环境污染的潜在威胁。
1 材料与方法1.1 材料供试蚕豆为青皮蚕豆（本地种），供试病毒为烟草花叶病毒的普通株系。
1.2 方法1.2.1 供试病毒液的制备将纯化的tmv接种于普通烟株k326（nicotiana tabacum cv. k326），3周后采病叶提纯tmv病毒[11]，经紫外扫描测得其浓度为109.9 μg/ml[12]，并将其稀释，配成浓度分别为2.7、5.4、8.1、10.8和13.5 μg/ml的病毒液各10 ml，4 ℃保存备用。
烟草中有害物质对人牙龈成纤维细胞的影响
烟草中有害物质对人牙龈成纤维细胞的影响烟草中有害物质对人体的危害已被广泛认可。
其中，烟草中的尼古丁、一氧化碳、致癌物质等很容易导致患上呼吸系统疾病、心血管疾病、口腔疾病等。
牙周病是口腔疾病中的一种常见病，而这种疾病和烟草有很大的关系。
成纤维细胞是牙龈组织中的主要细胞类型，这些细胞在维护牙龈的完整性和稳定性方面起着非常重要的作用。
然而，烟草中的有害物质对这些细胞的影响还需要进一步的研究。
尼古丁对成纤维细胞的影响尼古丁是烟草中含量最高的成分之一，是导致成瘤的主要物质之一。
此外，尼古丁还是一种强烈的刺激性物质，能够直接激活成纤维细胞。
大量研究表明，尼古丁可以导致成纤维细胞的功能受损、凋亡和分泌作用受到抑制，从而影响牙龈的稳定性。
尼古丁还可以促进牙龈组织中的细胞粘附分子的表达，从而增加细胞间的粘附力，使牙龈组织更容易受到病原菌的感染和侵袭。
此外，尼古丁还可以影响宿主的免疫功能，使成纤维细胞对病原菌的识别和清除能力降低。
一氧化碳对成纤维细胞的影响一氧化碳是烟草烟气中最危险的物质之一，也是煤气中毒的主要元凶。
在吸入一氧化碳后，其会结合血红蛋白，从而降低红细胞对氧气的亲和力，致使组织器官缺氧。
在口腔内，一氧化碳可以抑制成纤维细胞活力和细胞的凋亡，进一步影响牙龈的修复和稳定。
致癌物质对成纤维细胞的影响除了尼古丁和一氧化碳之外，烟草中的致癌物质也会影响成纤维细胞的生命活力和功能。
现有研究表明，致癌物质可以抑制成纤维细胞的迁移和分裂，减少其对组织修复的贡献。
此外，致癌物质还可以促进肿瘤的形成和发展，进一步加剧口腔疾病的严重性。
结论总之，烟草中的有害物质对成纤维细胞的影响是非常明显的。
这些物质可以影响成纤维细胞的生命活力、分泌功能、粘附作用和抵抗力等方面，从而加剧口腔疾病的严重性和持久性。
因此，减少烟草的使用，不仅一定程度上能够改善口腔健康状况，也能够提高全身的健康水平。
植物染色体毒理实验 蚕豆根尖微核实验
蚕豆根尖微核实验摘要：本实验用洗发水诱导蚕豆根尖发生畸变，通过固定、酸解、，染色、压片、镜检等一系列过程观察蚕豆根尖细胞核及微核，通过微核的数量判断洗发水对人体毒害作用的大小。
由于产生的微核数量与外界诱变因子的强弱成正比，因此可用微核实验来评价各种诱变因子对生物遗传物质的影响程度。
关键词：蚕豆根尖微核卡诺固定液吉姆萨染液前言：随着相关研究人员的一系列实验表明：日常用品中的一些物质会对植物细胞尤其是分生组织细胞产生明显影响，它们会破坏细胞中的遗传物质——染色体，导致微核的产生，破坏细胞正常的生命活动。
微核（micronucleus,简称MCN），也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。
在细胞间期，微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核1/3以下，着色与主核一致或稍浅，呈圆形或椭圆形。
蚕豆根尖细胞的微核是由于根尖细胞在分裂时受到外界诱变因子作用，形成的不随细胞分裂进入细胞核的染色体片段。
以观察细胞中微核的形成来检测遗传毒物，称为微核实验。
利用蚕豆根尖作为实验材料进行微核测试，可准确的显示各种处理诱发畸变的效果，并可用于污染程度的监测。
目前微核测试已经广泛应用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、染色体遗传疾病及癌症前期诊断等各方面。
1．材料1.1实验材料：蚕豆（根尖细胞的染色体大，DNA含量高，对诱变因子反应敏感）1.2实验药品：1mol/L盐酸、固定液（乙醇、冰醋酸3：1配制）、吉姆萨染液1.3实验用具：显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、盆、纱布、烧杯、水浴锅等2．步骤2.1 浸种催芽将试验所用适量蚕豆放入盛水烧杯盆中，在室温下浸泡1d。
种子吸胀后，用温润纱布松散包裹蚕豆置盆中，保持温度催芽2d，此时根长出将近约1.5cm。
2.2 毒性处理选取根生长良好，根长一致的种子，分成两组，一组放入盛有被测洗发水的盆中，被测液浸没根尖即可。
另一组放入盛有自来水的盆中培养，做对照组。
利用植物微核检测有毒物质
利用植物微核检测有毒物质摘要随着现代社会的发展，越来越多的化学物质应用到工业生产和人们的日常生活中，而其中有些物质具有较强的危害性如致畸、致癌、致突变性，称为三致性，而三致性的根本又在于致突变性，致畸、致癌常常是致突变的结果。
为了检测出已存在或潜在的危害，各种检测技术应运而生。
植物微核技术是根据遗传学上染色体畸变的原理而建立的一种环境污染的生物监测方法。
利用这种技术可以检测出有害气体、重金属、有机物等对生物体遗传物质的影响程度，目前该方法已经被广泛地应用于致突变物检测中。
本文采用蚕豆根尖植物微核技术，对生活用品指甲油进行检测。
结果表明在一定浓度范围内，蚕豆根尖细胞微核率增加。
这一结果表明指甲油有一定的危害，建议大家尽量少使用。
关键词：微核；蚕豆；指甲油目录第一章前言 (1)1．1植物微核技术的建立 (1)1．2植物微核技术的原理及方法 (1)······第二章材料与方法 (1)2．1实验材料 (1)2．2实验方法 (2)2．2．1选材并培养 (2)2．2．2处理与恢复 (2)2．2．3 根尖细胞的固定 (2)2．2．4根尖解离 (2)2. 2. 5 染色及压片 (2)2. 2. 6镜检 (2)······第三章结果与讨论 (2)3．1结果计算 (2)3. 2 结果统计 (2)3．3结果分析 (2)······结束语 (3)主要参考文献 (3)附录 (4)附录 A 指甲油成分 (4)致谢 (6)利用植物微核检测有毒物质第一章前言植物微核技术是根据环境中污染物能引起植物DNA损伤，诱发染色体畸变而形成微核的原理来检测诱变物质对染色体损伤的一种简便易行的方法。
利用这种技术可以检测出有害气体、重金属、有机物等对生物体遗传物质的影响程度，目前该方法已经被广泛地应用于致突变物检测中。
香菇对于蚕豆根尖微核率的影响
不同浓度的香菇提取液对香烟烟雾水溶液引起的蚕豆根尖细胞微核率的影响彭泽(华南师范大学生命科学学院，广东广州510630)摘要:本实验先用一定浓度的香烟烟雾水溶液处理蚕豆根尖18小时，再用不同浓度的香菇提取液来处理蚕豆根尖，最后在显微镜下观察并计数微核率。
实验表明，香烟烟雾水溶液物能够引起蚕豆根尖细胞微核率发生敏感性变化，而香菇可以起到有效的抑制作用，并且有一定的剂量效应。
关键词：蚕豆根尖；微核率；香菇；香烟烟雾水溶液Different concentrations of mushroom extract influence vicia faba cells micro kernel rate caused by Cigarette smoke solutionPeng zehua(South China Normal University，College of Life Science，Guangzhou Guangdong 510630)Abstract:This experiment first used certain concentration of cigarette smoke aqueous processing the vicia faba for 18 hours, garnish with different concentrations of mushroom extract to handle vicia faba cell. The experiments show that, cigarette smoke aqueous cause vicia faba cells micro nuclear rates sensitivity change, on the other hand, mushrooms can be an effective inhibition which have certain dose effect.Key words: Vicia faba micronucleus rate Xianggu mushroom Cigarette smoke solution微核（micronucleus, 简称MCN），也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。
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香烟毒性对蚕豆根尖细胞微核的影响
11生本 11112314147
前言：中国是世界上最大的烟草生产和消费国，据统计，目前中国约有3.5亿烟民，并且仍然以每年300万人的速度激增，初始吸烟年龄趋于低龄化，每年将近有百万人死于由吸烟引起的疾病。
[1]香烟中含有害物质有3000多种，致癌物质30余种，比如我们所熟知的尼古丁和焦油，香烟毒性能很大程度上促成细胞癌变，诱发癌症的产生，尤其是肺癌产生与吸烟的关系十分密切[2],吸烟时间越长，次数越多，开始吸烟的年龄越小，其毒性对人体的危害越大,有研究表明吸烟者比不吸烟者的患肺癌的几率高7-20倍[3-4]。
目前国内对香烟毒性的研究较少，主要研究方向为快速检测方法[5-6]和体外细胞毒试验（中性红法）[7]来检测香烟毒性。
而尚未发现从毒性使细胞产生微核的角度对香烟对其研究。
所以笔者试图从不同浓度的香烟浸出液对微核产生数目的影响这一角度进行实验，进一步阐发香烟对人健康带来的严重危害，给世人起到警示作用。
进行该实验需要注意以下几个问题：1、香烟中主要有害物质及其毒性的查明；2、香烟浸出的时间的掌控；3、香烟浸出液浓度梯度的设定；
4、学习培养蚕豆的方法；
5、掌握观察微核的方法。
实验材料：
1、受体材料：蚕豆。
2、诱导材料：市售红金龙牌香烟（市场价3元）。
3、试剂：固定液，解离液，95%酒精，85%酒精，75%酒精，70%酒精，醋酸洋红染液，蒸馏水。
4、器具：烧杯，培养皿，纱布，显微镜，恒温培养箱，计数器。
方案设计：
对照组：用蒸馏水培养4小时的蚕豆根尖。
实验组：用低毒组，中毒组，高毒组的香烟浸出液培养的4小时的蚕豆根尖。
具体实验步骤如下：
1、制得香烟浸出液。
取3只锥形瓶，分别标记“低毒组”“中毒组”“高度组”，在里面依次放入1根，2根，3根香烟，再向其中倒入100ml蒸馏水，使有毒物质溶出，浸制时间大约为2小时，收集这三中不同浓度的香烟浸出液。
2、蚕豆根尖的制备和处理。
首先将蚕豆用蒸馏水浸泡24小时，使种皮松软后放入垫有白纱布的培养皿中，在上方也盖上2层湿纱布，置于25℃的恒温培养箱中培养，每天换蒸馏水1次，待根尖长至2-3cm时，即可用于实验。
将准备好的蚕豆用蒸馏水冲洗干净后，均分为4组。
第一组为对照组，
用20ml蒸馏水培养，其余三组分别为低毒组，中毒组，高毒组，用前面得到的等量的香烟浸出液进行培养。
培养时间均为4h，培养温度为25℃。
然后用自来水清洗，再在25℃蒸馏水中浸根恢复培养24h，切1cm左右的蚕豆根尖于固定液中固定24h，之后分别用95%、85%、75%乙醇处理10min，最后置于70%乙醇中保存待测[8]。
3、微核观察。
在每个培养皿中随机选取3个蚕豆根尖，将其放在1mol/L的HCl解离液中解离5min。
用蒸馏水清洗3次，将解离液洗去，用刀片或解剖针截取根尖部分，滴上少许染液，染色15min，再盖上盖玻片，轻轻捣碎组织，在显微镜下观察细胞的分生组织区计数1000个细胞，然后测定其微核千分率（MCN,‰）和抑制率（%）。
具体计算公式为
MCN(‰)＝(含微核的细胞数)/(观察的细胞数)*1000
抑制率（%）＝（对照组含微核细胞数-实验组含微核细胞数）/（对照组含微核细胞数）*100[8-10]
数据处理表格设计
表-1 微核试验原始数据记录表
对照组低毒组中毒组高毒组
观测细胞数（个）
含微核细胞数（个）
MNC(‰)
抑制率（%）
参考文献：
[1]李竹，姜垣.烟盒上健康警语及其在控烟中的作用[J].中国慢性病预防与控制，2006,14（5）:380.
[2]Shiekls PG.Molecular epidem iology of smoking and lung canser [J]. Oncogene, 2002, 21: 6870-6876.
[3]廖美琳.嗜烟与致癌并非危言耸听[J].肿瘤预防诊疗与康复指南，2002,15(2):4.
[4]Pet R. Darby S, Deo H,et al.Smoking ,smoking cessation,and lung cancer in the UK since 1950:combination of national statistics with two case-control studies [J]. BMJ, 2000, 3:321-329.
[5]孙波，张桂荣等.100种香烟快速检测及毒性分析[J].中国初级卫生保健，2007,21（10）：69-70.
[6]王世平，孙波等.香烟毒性快速检测及毒性分级的方法研究[R].中国毒理学会第五次全国学术大会论文集,2010.
[7]张桂荣，王世平等.细胞毒试验对香烟毒性检测的研究[J].中国卫生工程学，2010,9（6）：406-410.
[8]朱蕴兰，邵颖等.蛹虫草多糖对紫外线诱发蚕豆根尖细胞微核的影响[J]. 商品科学，2009,30（1）：177-180.
[9]李宏.土壤农药残留物对蚕豆根尖细胞微核及染色体畸变的影响[J].贵州农业科学，2009，37（4）：182-183.
[10]朱睦元王君辉.现代遗传学实验[M]浙江；浙江大学出版社，2009:95-96.。