临床病原学检查 PPT课件
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临床病原学检查知识PPT课件
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13
那些有正常菌群寄居的腔道分泌物，涂片镜检虽不 能确定诊断，但对进一步检出的步骤、采用的方法 和分离鉴定病原体所需培养基有重要提示作用，如 在米泔水样便的悬滴片动力检查，发现有运动活泼 的鱼群样弧菌，常提示弧菌科细菌感(thiosulfatecitrate-bile saltssucrose，TCBS)选择培养基。组织标本和疱疹分泌 物涂片经瑞特染色后，查见多核巨细胞和核内嗜酸 性包涵体可早期诊断疱疹病毒感染。临床上不常规 应用电镜检查，但对某些病毒感染有确诊价值，如 婴幼儿急性胃肠炎腹泻粪便电镜下查见车轮状的双 层衣壳病毒颗粒即可诊断为轮状病毒感染。常用的 电镜技术有超薄切片标本电镜观察、负染标本电镜 观察和免疫电镜技术。
临床病原学检查
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1
不同病原体(细菌、螺旋体、支原体、放线菌、
衣原体、立克次体、病毒、真菌、原虫、蠕虫)
所致感染性疾病的实验诊断方法各有其特点，
但几乎都遵循以下基本原则：①正确、规范采
集和运送标本；②通过直接显微镜查见病原体
或检出病原体抗原成分；③借助分子生物学的
方法检测病原体核酸；④利用免疫学方法检测
机体对病原体抗原成分产生的免疫产物；⑤对
病原体进行分离与鉴定。在完成病原体的检出
和鉴定任务后，结合病人的病史、症状或体征，
快速作出诊断。并积极参与临床选择抗微生物
药物，指导和监控微生物的治疗方案，避免耐
药菌株的产生。
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2
标本采集和运送 ：
根据各种病原体所致感染性疾病的病程确定 标本采集的时间、部位和种类。所有采集的 标本均置于无菌或清洁容器中，不能接触消 毒剂和抗菌药物。 标本必须注明姓名、年 龄、性别、采集日期、临床诊断、检验项目 等。标本采集后应按要求处理，立即送往病 原学实验室，对于烈性传染病材料的运送需 专人护送。
临床免疫学与病原学检查课件
（一）血清抗链球菌溶血素“O”试 验
链球菌溶血素“O” 是一种A群溶血性链球菌的 毒素，属蛋白质，能溶解红细胞，杀伤白细胞和血 小板，它具有抗原性，可使人产生相应抗体，称抗 链球菌溶血素“O” （anti-streptolysin “O” ,ASO） ，也叫抗O或ASO。
一般当机体受到A群溶血性链球菌感染2-3周， 血清中出现抗O，这种抗体滴度直至病愈后数月到 半年才下降至正常水平。
一、肝炎标志物的检测： 1．甲型肝炎病毒标志物的检测
（1）甲型肝炎病毒抗原和RNA测定： ELISA和RT-PCR法
（2）甲型肝炎病毒抗体测定：ELISA （3）甲型肝炎病毒抗体IgM阳性表明机体
正在感染甲肝，它是早期诊断甲肝的 特异性指标。而IgG阳性提示既往感 染，可作为流行病学调查的指标。
HAV 病毒图谱
乙肝血清转换图
HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb
1+ -
--
2+ - + -
3+ - + -
4+ -
-+
5-
-
-+
6-
-
--
7- + - +
8- + - -
9- + - -
10 + + + -
- 携带者 - 急性感染早期,HBV复制活跃 + 急性或慢性感染,复制活跃 + 急性或慢性感染,复制减弱或停止 + 既往感染,未出现表抗,窗口期 + 既往感染,未出现表抗,窗口期 + 恢复期 + 恢复期 - 病后或接种疫苗后获得性免疫 + 不同亚型的感染
医院感染诊断标准ppt课件
泌尿道感染：如尿道炎、 膀胱炎、肾炎等
血液感染：如败血症、 脓毒血症等
06
神经系统感染：如脑 膜炎、脑炎等
医院感染的诊断 方法
病史和临床表现
病史：患者就诊时的症 状、体征、既往病史等
临床表现：发热、咳嗽、 呼吸困难、胸痛等
实验室检查：血常规、 生化检查、病原学检查
等
影像学检查：X线、CT、 MRI等
医院感染诊断标 准（WS/T 3122020）：由国家 卫生健康委员会 颁布，适用于各 级各类医疗机构
医院感染诊断标 准（WS/T 3122022）：由国家 卫生健康委员会 颁布，适用于各 级各类医疗机构
不同医疗机构根据自身特点制定的诊断标准
1 综合医院：根据患者症状、体征、实验室检查等综合判断 2 专科医院：根据专科特点，制定针对性的诊断标准 3 基层医疗机构：根据基层医疗资源，制定简便易行的诊断标准 4 传染病医院：根据传染病特点，制定严格的诊断标准 5 民营医院：根据市场需求，制定灵活的诊断标准
医院感染的防控 策略
预防措施
加强个人卫生：勤洗手、戴口罩、 01 保持社交距离Байду номын сангаас
加强环境消毒：定期对医院环境
02
进行消毒，保持清洁卫生 加强医疗设备管理：定期对医疗
03
设备进行消毒，确保设备安全 加强培训教育：提高医护人员的
04
感染防控意识和技能
早期发现和隔离病例
01
早期发现：对疑似病例 进行及时、准确的诊断
医院感染的现状和挑战
医院感染现状：全球范围内，医院 感染问题日益严重，对患者健康和
医疗资源造成严重影响。
医院感染原因：多种因素导致医院 感染，包括患者自身免疫力低下、 医疗设备污染、医护人员操作不当
病原学诊断PPT课件
第八章 病原学诊断
细菌学诊断 病毒学诊断 真菌学诊断
1
细菌学诊断
Diagnosis of bacteria
2019/8/27
2
细菌学诊断
病原菌检测
细菌学诊断：以检测病原菌及其抗原、产物 病原菌抗原检测
或核酸为目的。
其他检测法：PCR等
血清学诊断：以检测患者血清中特异抗体为目的。
3
病原菌检测
复染：碱性美兰
8
细菌分离和鉴定
分离培养是微生物学诊 断的金标准，是最可靠的传 统诊断技术。
细菌学诊断
9
致病菌的检验程序
细菌学诊断
普通琼脂平板
血平板
标本 选择培养基 观分培察菌离养涂落片性、状染、色溶、血镜性检、色素——初步鉴别
挑取可疑菌落
生化反应测定
纯培养
血清学鉴定
10
致病菌的检验程序
培养特征 形态特征 生化试验 血清学试验 动物试验 药物敏感试验
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2019/8/27
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细菌学诊断 病毒学诊断 真菌学诊断
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细菌学诊断
Diagnosis of bacteria
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2
细菌学诊断
病原菌检测
细菌学诊断：以检测病原菌及其抗原、产物 病原菌抗原检测
或核酸为目的。
其他检测法：PCR等
血清学诊断：以检测患者血清中特异抗体为目的。
3
病原菌检测
复染：碱性美兰
8
细菌分离和鉴定
分离培养是微生物学诊 断的金标准，是最可靠的传 统诊断技术。
细菌学诊断
9
致病菌的检验程序
细菌学诊断
普通琼脂平板
血平板
标本 选择培养基 观分培察菌离养涂落片性、状染、色溶、血镜性检、色素——初步鉴别
挑取可疑菌落
生化反应测定
纯培养
血清学鉴定
10
致病菌的检验程序
培养特征 形态特征 生化试验 血清学试验 动物试验 药物敏感试验
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临床病原学-HIV-PPT文档
2、非核苷类逆转录酶抑制物
3、蛋白酶的抑制剂
WHO的建议
开展广泛宣传教育，普及预防知识， 认识爱滋病的传染方式及其严重性， 杜绝吸毒和性滥交
建立HIV感染的监测系统，掌握流 行动态
加强国境检疫，严防传入 对供血者进行HIV抗体检查，确保
输血和血液制品的安全
预防
1、 已感染HIV的女性应避免怀孕、妊娠及哺 乳，以免将病毒传染给胎儿或婴儿 2、 输血或器官组织的移植应作好术前的检验 （无论供应者或受用者） 3、 使用彻底消毒的注射器 4、 皮肤或粘膜的破损伤口应避免接触感染者 体液 5、 采取安全的性生活方式
免疫损伤机制
病毒破坏淋巴细胞（ CD4+ T） 大量CD4+ T淋巴细胞死亡 CD4+细胞缺损和功能障碍
致病过程
HIV
人体（病毒血症）
病毒gP120与CD4细胞（CD4分子）结合
HIV-RNA进入细胞
1、HIV-DNA与宿主细胞DNA整合
2、随细胞DNA转录，缓慢释放病毒
3、大量病毒同时产生导致CD4细胞破裂
酒精浓度低于75%时,由于渗透性降低,也会影响消 毒能力.
致病机制
1.传染源：AIDS病患者、HIV感染者
（血液、分泌物、乳汁和脑脊液中）
2.传播途径 1）性传播：同性或异性 2）血源性：输血、意外受伤、静脉吸毒 3）母婴传播：HIV抗体（+）母亲 胎儿感 染率30—60％
不会引起感染的行为
引起疾病：获得性免疫缺陷综合征 (AIDS)(艾滋病)。有三个特性：
获得性---艾滋病并非先天具有，而是后天获 得。
免疫缺陷---AIDS的发病机理在于，HIV通过 造成人体免疫系统的损伤，进而导致免疫系 统防护功能的减低甚至丧失。对感染的易感 性明显增加；易发生恶性肿瘤；
3、蛋白酶的抑制剂
WHO的建议
开展广泛宣传教育，普及预防知识， 认识爱滋病的传染方式及其严重性， 杜绝吸毒和性滥交
建立HIV感染的监测系统，掌握流 行动态
加强国境检疫，严防传入 对供血者进行HIV抗体检查，确保
输血和血液制品的安全
预防
1、 已感染HIV的女性应避免怀孕、妊娠及哺 乳，以免将病毒传染给胎儿或婴儿 2、 输血或器官组织的移植应作好术前的检验 （无论供应者或受用者） 3、 使用彻底消毒的注射器 4、 皮肤或粘膜的破损伤口应避免接触感染者 体液 5、 采取安全的性生活方式
免疫损伤机制
病毒破坏淋巴细胞（ CD4+ T） 大量CD4+ T淋巴细胞死亡 CD4+细胞缺损和功能障碍
致病过程
HIV
人体（病毒血症）
病毒gP120与CD4细胞（CD4分子）结合
HIV-RNA进入细胞
1、HIV-DNA与宿主细胞DNA整合
2、随细胞DNA转录，缓慢释放病毒
3、大量病毒同时产生导致CD4细胞破裂
酒精浓度低于75%时,由于渗透性降低,也会影响消 毒能力.
致病机制
1.传染源：AIDS病患者、HIV感染者
（血液、分泌物、乳汁和脑脊液中）
2.传播途径 1）性传播：同性或异性 2）血源性：输血、意外受伤、静脉吸毒 3）母婴传播：HIV抗体（+）母亲 胎儿感 染率30—60％
不会引起感染的行为
引起疾病：获得性免疫缺陷综合征 (AIDS)(艾滋病)。有三个特性：
获得性---艾滋病并非先天具有，而是后天获 得。
免疫缺陷---AIDS的发病机理在于，HIV通过 造成人体免疫系统的损伤，进而导致免疫系 统防护功能的减低甚至丧失。对感染的易感 性明显增加；易发生恶性肿瘤；
医院感染检查 PPT课件
• 一旦医院感染暴发，感染控制委员会必须立 即确定暴发的涉及范围，病原的传播模式， 提出适当的控制措施；临床微生物实验室则 必须按应急预案立即开展下述工作：①会同 临床提出本次医院感染的病例诊断标准；② 尽快进行病例的实验室确诊；③如果感染菌 系耐药株，告知ICP感染菌的异常耐药模式； ④准确描叙分离株的特征，保存无菌部位的 分离株以及流行病学上重要的菌株，研究新 病例的实验室资料；
• 4、常见的临床类型： 下呼吸道感染 尿路感染 手术切口感染 胃肠道感染 血液感染 皮肤和软组织感染
二、医院感染病原学监测
• 1、标本采集和送检原则： • 1）发现医院感染应及时采集标本做病原学检 查。 • 2）严格执行无菌操作，避免正常菌群污染 • 3）应立即送检，床边接种可提高检出率。 • 4）对混有正常菌群的污染标本应做定量（或 半定量）培养，以判断是感染或定植菌。 • 5）对分离到的病原菌应做药敏试验，提倡 “分级报告”（即分阶段报告图片镜检、初步 培养、直接药敏、初步鉴定、最终鉴定与药敏 结果）和“限时报告”（图片报告2h，普通 培养3h）
• (五）水
• 水的培养多用于军团菌引起的医院感染的调查。 通常不需要进行常规的用水培养，只有在发生 经证实的军团菌医院感染时，才需采样培养。 有资料显示外周各采样点军团菌阳性率与感染 风险有关。水标本的采样可用滤膜，亦可用棉 拭自水龙头和莲蓬头采样。
• （六）医务人员的手
• 手部细菌的半定量检测和分离培养有利于证实交叉 感染的存在，有利于强调洗手的重要性。手部标本 的采集可将受检者的手置入含有10～20ml营养肉 汤的无菌塑料袋中，以肉汤洗手后送检肉汤，然后 进行平板接种同时进行半定量分析。 • （七）前鼻腔 • 引起医院感染暴发流行的菌株可能存在于携带者 的前鼻腔，如金黄色葡萄球菌（包括MRSA）就常 常寄居在携带者的前鼻腔，故鼻腔棉拭子采样培养 可能有利于医院感染传染源和传播途径的研究，特 别当感染株是金黄色葡萄球菌时。
《病原学诊断与防治》PPT课件
寄生虫的诊断
通过粪便检查、血液检查、组织活检等方法进行诊断。
防治方法
使用驱虫药、改善饮食卫生、加强环境卫生等措施。
其他病原体的诊断与防治
其他病原体的诊断
根据不同病原体特点，采用相应的检测方法进行诊断。
防治方法
针对不同病原体采取相应的防治措施，如使用抗真菌药物、抗病毒药物等。
04
病原学防治策略与措施
病原体防治新技术研究进展
基因编辑技术
基因编辑技术如CRISPR-Cas9等在病原体防 治中具有广泛应用前景，可用于编辑病原体 基因、抑制病原体复制或增强宿主免疫应答 等。
新型疫苗技术
新型疫苗技术如mRNA疫苗等在病原体防治 中具有重要价值，可快速开发针对新型病原 体的疫苗，提高疫苗接种覆盖率和保护率。
寄生虫
依赖宿主生存，可引起 消化道、神经系统等疾
病。
病原体的传播方式与途径
01
02
03
04
空气传播
通过飞沫、尘埃等传播，如流 感病毒。
接触传播
通过直接或间接接触传播，如 皮肤感染。
食物传播
通过污染的食物或水源传播， 如霍乱弧菌。
生物媒介传播
通过昆虫、动物等媒介传播， 如疟原虫。
02
病原学诊断方法
03
常见病原体的诊断与防治
细菌的诊断与防治
细菌的诊断
通过细菌培养、显微镜检查、免疫学 检测等方法进行诊断。
防治方法
使用抗生素、提高免疫力、改善环境 卫生等措施。
病毒的诊断与防治
病毒的诊断
通过病毒分离、抗原检测、核酸检测 等方法进行诊断。
防治方法
使用抗病毒药物、疫苗接种、提高免 疫力等措施。
寄生虫的诊断与防治
通过粪便检查、血液检查、组织活检等方法进行诊断。
防治方法
使用驱虫药、改善饮食卫生、加强环境卫生等措施。
其他病原体的诊断与防治
其他病原体的诊断
根据不同病原体特点，采用相应的检测方法进行诊断。
防治方法
针对不同病原体采取相应的防治措施，如使用抗真菌药物、抗病毒药物等。
04
病原学防治策略与措施
病原体防治新技术研究进展
基因编辑技术
基因编辑技术如CRISPR-Cas9等在病原体防 治中具有广泛应用前景，可用于编辑病原体 基因、抑制病原体复制或增强宿主免疫应答 等。
新型疫苗技术
新型疫苗技术如mRNA疫苗等在病原体防治 中具有重要价值，可快速开发针对新型病原 体的疫苗，提高疫苗接种覆盖率和保护率。
寄生虫
依赖宿主生存，可引起 消化道、神经系统等疾
病。
病原体的传播方式与途径
01
02
03
04
空气传播
通过飞沫、尘埃等传播，如流 感病毒。
接触传播
通过直接或间接接触传播，如 皮肤感染。
食物传播
通过污染的食物或水源传播， 如霍乱弧菌。
生物媒介传播
通过昆虫、动物等媒介传播， 如疟原虫。
02
病原学诊断方法
03
常见病原体的诊断与防治
细菌的诊断与防治
细菌的诊断
通过细菌培养、显微镜检查、免疫学 检测等方法进行诊断。
防治方法
使用抗生素、提高免疫力、改善环境 卫生等措施。
病毒的诊断与防治
病毒的诊断
通过病毒分离、抗原检测、核酸检测 等方法进行诊断。
防治方法
使用抗病毒药物、疫苗接种、提高免 疫力等措施。
寄生虫的诊断与防治
微生物感染的病原学检查 PPT精品课件
急性、恢复期 增高≥4倍有诊断意义 ☛ IgM:病毒感染早期
1.ELISA(间接法)
Ag+Ab?+抗球蛋白*+酶底物→显色
2. 蛋白印迹法（Western Blot）
病毒Ag→电泳(SDS-PAGE)→转移至硝酸纤 维素膜→加Ab?→加抗Ab*→加底物→显色
3.血凝抑制试验
原理:
[病毒(HA)+Ab?]+RBC→血凝抑制
第二节 病毒感染的微生物学检查法
☛ 病毒及其抗原检测 显微镜观察 分离培养与鉴定 Ab→Ag?
☛ 核酸检测 ☛ 特异性Ab检测
一、显微镜检查
1.电镜 /免疫电镜 2.光镜：
包涵体/ 多核巨细胞等
二、病毒的分离培养与鉴定
(一)动物接种
☛ 选敏感动物 ☛ 适宜途径
乙脑病毒→小白鼠脑内 牛痘苗病毒→家兔角膜
☛ 观察发病情况 ☛ 标本检测
(二)鸡胚培养
☛ 选择胚龄/接种途径 ☛ 标本检测
绒毛尿囊膜10~13d
羊膜腔10~12d 卵黄囊5~8d 尿囊腔 9~11d
（三）组织培养(器官/组织/细胞)
1.细胞培养类型
(1) 原代细胞培养
动物/鸡胚/人胚组织 ↓剪碎/胰酶
单个细胞 ↓培养液
单层细胞(原代细胞) ↓胰酶
☛干扰现象:病毒1(风疹病毒 ) ？
↓先感染 细胞（猴肾细胞） → CPE(-) ↑后感染 病毒2 (ECHO病毒)
☛意义：可检查不引起CPE/血凝/血吸的病毒
（5）空斑形成试验（test of plaque formation）
稀释病毒→单层细胞 →覆盖一层营养琼脂 ↓37℃，3~5d 空斑
测定病毒数量：
微生物感染的病原学检查
1.ELISA(间接法)
Ag+Ab?+抗球蛋白*+酶底物→显色
2. 蛋白印迹法（Western Blot）
病毒Ag→电泳(SDS-PAGE)→转移至硝酸纤 维素膜→加Ab?→加抗Ab*→加底物→显色
3.血凝抑制试验
原理:
[病毒(HA)+Ab?]+RBC→血凝抑制
第二节 病毒感染的微生物学检查法
☛ 病毒及其抗原检测 显微镜观察 分离培养与鉴定 Ab→Ag?
☛ 核酸检测 ☛ 特异性Ab检测
一、显微镜检查
1.电镜 /免疫电镜 2.光镜：
包涵体/ 多核巨细胞等
二、病毒的分离培养与鉴定
(一)动物接种
☛ 选敏感动物 ☛ 适宜途径
乙脑病毒→小白鼠脑内 牛痘苗病毒→家兔角膜
☛ 观察发病情况 ☛ 标本检测
(二)鸡胚培养
☛ 选择胚龄/接种途径 ☛ 标本检测
绒毛尿囊膜10~13d
羊膜腔10~12d 卵黄囊5~8d 尿囊腔 9~11d
（三）组织培养(器官/组织/细胞)
1.细胞培养类型
(1) 原代细胞培养
动物/鸡胚/人胚组织 ↓剪碎/胰酶
单个细胞 ↓培养液
单层细胞(原代细胞) ↓胰酶
☛干扰现象:病毒1(风疹病毒 ) ？
↓先感染 细胞（猴肾细胞） → CPE(-) ↑后感染 病毒2 (ECHO病毒)
☛意义：可检查不引起CPE/血凝/血吸的病毒
（5）空斑形成试验（test of plaque formation）
稀释病毒→单层细胞 →覆盖一层营养琼脂 ↓37℃，3~5d 空斑
测定病毒数量：
微生物感染的病原学检查