中药化学显色试剂
中药化学各章显色反应
中药化学各章显色反应
一、生物碱
哌啶苦参氧化碱，吲哚单萜士的宁，有机胺类麻黄碱
二、糖和苷类
三、香豆素和木脂素
香豆素显色反应的鉴别特点和意义
2．Labat反应（没食子酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝绿色）3．Ecgrine反应（变色酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝紫色）
四、醌类
醌类化合物不同颜色反应鉴别特点及意义
五、黄酮类
的存在。
若有3-OH和（或）5-OH，加二氯氧锆显黄色。
若只有5-OH，加枸橼酸后黄色减
褪，若有3-OH ，则加枸橼酸后黄色不变，因此可用于区分黄酮和黄酮醇。
用于鉴别3-OH 的存在。
二酚羟基或兼有3-羟基、4-酮基或5-羟基、4-
酮基结构的化合物反应生成沉淀。
而碱式醋酸铅的沉淀能力要大得多，一般酚类化合物均可与其发生沉淀反应。
① 二氢黄酮易在碱液中开环，转变成相应的异构体查耳酮，显橙色至黄色。
②黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色。
③分子结构中有邻二酚羟基或3，4’-二羟基取代时，在碱液中不稳定，易被氧化，产生沉淀。
六、皂苷类
1）、甾体母核的显色反应
八、胆汁酸
胆汁酸的鉴别反应
九、其他成分
氨基酸的显色反应。
常用几种显色剂及其配制方法
10% 硫酸铈 (IV)+15% 硫酸的水溶液 1% FeCl 3 + 50% 乙醇水溶液 0.1% 桑色素 +甲醇
1.5g 茚三酮 + 100mL 正丁醇 + 3.0mL 醋 酸
12g 二硝基苯肼 + 60mL 浓硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇
15g 香草醛 + 250mL 乙醇 +2.5mL 浓硫 酸
高锰酸钾
含还原性基团化合物， 比如羟基，氨基，醛
1.5g KMnO 4 + 10g K 2CO 3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水 . 使用期 3 个月
溴甲酚绿
钼酸铈 茴香醛 (对甲氧基苯甲醛 )
茴香醛 (对甲氧基苯甲醛 )2
羧酸， pKa<=5.0 广谱 广谱
在 100ml 乙醇中， 加入 0.04g 溴甲酚绿， 缓 慢滴加 0.1M 的 NaOH 水溶液， 刚好出现蓝
茴香醛 :HClO 4: 丙酮 :水 (1:10:20:80)
磷钼酸 (PMA)
广谱
10 g 磷钼酸 +100 mL 乙醇
色即至。 235 mL 水 + 12 g 钼酸氨 + 0.5 g 钼酸铈
氨 + 15 mL 浓硫酸
135 乙醇 + 5 mL 浓硫酸 + 1.5 mL 冰醋 酸 + 3.7 mL 茴香醛，剧烈搅拌，使混合均
匀
萜烯，桉树脑 (cineoles), withanolides, 出油柑碱
(acronycine)
常用几种显色剂及其配制方法
显色剂
检测物质
不饱和或者芳香族化合 碘
中药化学实验指导(全套
实验一大黄中游离蒽醌的提取分离与检识（一）目的要求学习羟基蒽醌类化合物的提取分离和检识，通过实验要求：1.掌握从大黄中提取和分离游离蒽醌的方法。
2.掌握用pH梯度萃取法分离不同酸性的羟基蒽醌类化合物。
3.掌握蒽醌类化合物的主要检识方法。
4.熟悉蒽醌类化合物的色谱检识方法。
5.了解用柱色谱法分离蒽醌类成分。
（二）主要化学成分的结构及性质大黄为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.、唐古特大黄Rheum tanguticum Maxim. ex Reg.和药用大黄Rheum officinale Baill.的干燥根及根茎。
大黄中含有大黄酸、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚及其苷，总含量约3％～5％。
1．大黄酸(rhein) 分子式C15H8O6，分子量284.21。
黄色针状结晶（升华法），mp.321～322℃，330℃分解。
能溶于碱水、吡啶，略溶于乙醇、苯、氯仿、乙醚和石油醚，几不溶于水。
2．大黄素(emodin) 分子式C15H10O5，分子量270.23。
橙色针状结晶(乙醇)，mp.256～257℃，能升华。
易溶于乙醇、碱水，微溶于乙醚、氯仿，几不溶于水。
3．芦荟大黄素(aloe-emodin) 分子式C16H10O5，分子量270.23。
橙色针状结晶（甲苯），mp.223～224℃。
易溶于热乙醇，可溶于乙醚和苯，并呈黄色；溶于碱液呈红色；氨水及硫酸中呈绯红色。
4．大黄酚(chrysophanol) 分子式C15H10O4，分子量254.23。
橙黄色六方形或单斜结晶（乙醇或苯），mp.196～197℃，能升华。
易溶于沸乙醇，可溶于丙酮、氯仿、苯、乙醚和冰醋酸，极微溶于石油醚、冷乙醇，几不溶于水。
5．大黄素甲醚(physcion) 分子式C 16H 12O 5，分子量284.26。
砖红色单斜针状结晶，mp.203～207℃，溶于苯、氯仿、吡啶及甲苯，微溶于醋酸及醋酸乙酯，不溶于甲醇、乙醇、乙醚和丙酮。
中药化学常用检出试剂的配制方法
常用检出试剂的配制方法（一）生物碱沉淀试剂1．碘化铋钾试剂取8g次硝酸铋溶于17ml 30％硝酸（相对密度1.18）中，在搅拌下缓慢滴加碘化铋钾水溶液（碘化钾27g溶于20ml水中），静置过夜滤过，加蒸馏水稀释至100ml。
附：改良碘化铋钾试剂甲液：取0.85g次硝酸铋溶于10ml冰醋酸中，加40ml水。
乙液：取8g碘化钾溶于20ml水中。
将溶液甲和乙等量混合，置棕色瓶中能保存较长时间，可作生物碱沉淀试剂用。
如作色谱显色剂用，需取上述混合液1ml与2ml醋酸、10ml水的比例混合即得。
2．碘化汞钾试剂取1.36g氯化汞和5g碘化钾各溶于20ml水中，将两液混合后再加水稀释至100ml。
3．碘-碘化钾试剂取1g碘和10g碘化钾，溶于50ml水中，加热溶解，加2ml醋酸，再加水稀释至100ml。
4．苦味酸试剂取1g苦味酸，溶于100ml水中即得。
5．硅钨酸试剂取5g硅钨酸，溶于100ml水中，用盐酸调pH2。
6．磷钨酸试剂取20g钨酸钠、10g磷酸（相对密度为1.13）与水混合后，加热煮沸20分钟，稍冷后加盐酸至酸性。
7．鞣酸试剂取1g鞣酸，加1ml乙醇，溶解后加水至10ml。
（二）苷类检出试剂1．糖的检出试剂（1）斐林试剂甲液：取6.93g结晶硫酸铜，加水至100ml。
乙液：取34.6g酒石酸钾钠及10g氢氧化钠，加水至100ml。
使用时甲、乙两液等量混合。
（2）α-萘酚-浓硫酸试剂甲液：取1gα-萘酚，加95％乙醇至10ml。
乙液：浓硫酸。
使用时分别加入两液。
（3）氨性硝酸银试剂取1g硝酸银，加20ml水溶解，小心滴加适量氨水，随加随搅拌，至开始产生的沉淀将近全部溶解为止，滤过即得。
（4）苯胺-邻苯二甲酸试剂取0.93g苯胺及1.6g邻苯二甲酸，溶于100ml 水饱和的正丁醇中。
（5）α-去氧糖试剂1）三氯化铁-冰醋酸试剂甲液：取0.5ml 1％三氯化铁水溶液，加冰醋酸至100ml。
乙液：浓硫酸。
中药化学显色反应大汇总
中药化学显色反应大汇总试剂 颜色变化 鉴别类型1%钒酸铵的 浓硫酸溶液莨菪碱及阿托品 显红色， 士的宁显蓝紫 色， 奎宁显淡橙色莨菪碱、士的宁、奎宁 含少量甲醛的浓硫酸吗啡显紫红色 可待因显蓝色吗啡、可待因1%钼酸钠或 钼酸铵的浓硫 酸溶液吗啡显紫色渐转 棕色 小檗碱显棕绿色 利血平显黄色渐 转蓝色乌头碱显黄棕色 吗啡、小檗碱、利血平、乌头碱二硫化碳、硫 酸铜试剂、氢 氧化钠棕色沉淀 麻黄碱、伪麻黄碱铜络盐反应硫酸铜试剂、氢氧化钠溶液呈蓝紫色；加乙醚分层：乙醚层紫红色，水麻黄碱、伪麻黄碱层为蓝色碘化铋钾试剂反应碘化铋钾黄色至橘红色无定形沉淀生物碱碘化汞钾试剂反应碘化汞钾类白色沉淀生物碱碘-碘化钾试剂反应KI-I2红棕色无定形沉淀生物碱硅钨酸试剂反应硅钨酸淡黄色或灰白色无定形沉淀生物碱饱和苦味酸试剂2,4,6-三硝基苯酚黄色沉淀或结晶生物碱雷氏铵盐试剂反应雷氏铵盐红色沉淀或结晶生物碱（季铵碱）漂白粉显色反应漂白粉（或通入氯气）水溶液由黄色转变为樱红色小檗碱氯化汞沉淀反应氯化汞的乙醇溶液莨菪碱：黄色沉淀，加热后沉淀变为红色东莨菪碱：白色沉淀莨菪碱、东良菪碱Vitali反应发烟硝酸、苛性碱深紫色，渐转暗红色，最后颜色莨菪烷类结构中具有莨菪酸部分者消失过碘酸氧化乙酰内酮缩合反应（D DL反应）过碘酸、乙酰内酮显黄色樟柳碱分子的羟基莨菪酸（具有邻二羟基结构）总结二：章反应名称试剂颜色或沉淀变化鉴别类型节航Molish反浓硫酸和a-萘糖和苷和应酚Feigl反应醛类、邻二硝基生成紫色化合物醌类苯无色亚甲蓝无色亚甲蓝乙醇在白色背景下呈现苯醌及萘醌显色试验溶液出蓝色斑点Kesting-Cr乙酰乙酸酯、丙蓝绿色或蓝紫色苯醌及萘醌aven反应二酸酯Borntrager碱性溶液红至紫红色羟基蒽醌反应金属离子络Pb2+、Mg2+ Pb2+：生成沉淀析a-酚羟基或邻二酚合物反应出羟基颜色异羟肟酸铁盐酸羟胺 反应 显红色 内酯环三氯化铁反三氯化铁试剂 应蓝绿色酚羟基Gibb 反应 Gibb 试剂1」 蓝色酚羟基对位的活泼 氢Emerson 反应氨基安替比林和红色铁氰化钾酚羟基对位的活泼 氢盐酸-镁粉 反应 盐酸、镁粉 橙红色至紫红色黄酮、黄酮醇、二氢 黄酮、二氢黄酮醇 四氢硼钠反 应NaBH 4的甲醇 液红色至紫色二氢黄酮类化合物磷钼酸试剂磷钼酸试剂 反应 棕褐色二氢黄酮类化合物锆盐反应2%二氯化锆甲 醇溶液生产黄色3-羟基 锆络合物不褪色 5-羟基 显著褪 色3-羟基或5-羟基的存在镁盐 乙酸镁甲醇溶液天蓝色荧光二氢黄酮、二氢黄酮 醇香 豆 素黄 酮 类黄色至橙黄色乃至黄酮、黄酮醇及异黄褐色酮氯化锶（Sr氯化锶绿色至棕色乃至黑具有邻二酚羟基的C12）色沉淀黄酮类三氯化铁反三氯化铁试剂呈现明显的颜色含有氢键缔合的酚硼酸显色反硼酸亮黄色5-羟基黄酮及2’羟应基查尔酮萜环烯醚萜苷酸、碱、羰基化蓝色或深红色，有环烯醚萜苷类类反应合物、氨基酸些变黑地黄、玄参总结三章节反应试剂颜色变化鉴别类型皂苷Liebermann乙酐-浓硫黄一红—蓝—紫—绿皂苷反应酸一褪色Liebermann醋酐、浓硫最后呈红色或紫色三萜皂苷类-Burchard 酸-醋酐最终呈蓝绿色甾体皂苷类反应三氯乙酸反三氯乙酸溶加热至60℃-红色甾体皂苷类应液渐变为紫色加热至100℃-红色三萜皂苷类渐变为紫色三氯甲烷-浓浓硫酸、三三氯甲烷层呈现红色皂苷硫酸反应氯甲烷或蓝色，硫酸层有绿色的荧光五氯化锑反五氯化锑的蓝色、灰蓝色或灰紫皂苷应三氯甲烷溶色斑点液芳香醛-硫酸香草醛显色灵敏甾体皂苷类或高氨酸反应甾体Liebermann醋酐、浓硫红一紫-蓝-绿-污甾体母核、胆母核-Burchard 酸-醋酐绿，最后褪色汁酸反应Salkowski 三氯甲烷、硫酸层显血红色或蓝甾体母核、胆反应浓硫酸色，三氯甲烷层显绿汁酸色荧光Tschugaev 冰醋酸、氯紫红一蓝一绿甾体母核、胆反应化锌、乙酸汁酸氯三氯化锑反三氯化锑的灰蓝色、蓝色、灰紫甾体母核、胆应三氯甲烷溶色汁酸液三氯乙酸-氯三氯乙酸-洋地黄毒苷元-黄色洋地黄类强胺T反应氯胺T试剂荧光心苷元羟基洋地黄毒苷元一 亮蓝色荧光 异羟基洋地黄毒苷元 一蓝色荧光Legal 反应 亚硝酰铁氰 呈深红色并渐渐退去C-17位上的化钠试剂不饱和内酯 环Raymond间二硝基苯 蓝紫色 C-17位上的反应试剂不饱和内酯 环Kedde 反应3,5-二硝基红色或紫红色C-17位上的苯甲酸试剂不饱和内酯 环Baljet 反应 碱性苦味酸 橙色或橙红色C-17位上的试剂不饱和内酯 强心 Keller-Klian 冰醋酸、三 乙酸层显蓝色 苷i （K-K ）反应氯化铁占吨氢醇（x 占吨氢醇试 红色anthydrol ）剂反应甲型 强心 苷环a-去氧糖a-去氧糖的定量分析a-去氧糖对-二甲氨基对-二甲氨灰红色斑点苯甲醛反应基苯甲醛试 剂过碘酸钠-对 过碘酸钠、深黄色斑点a-去氧糖硝基苯胺反对硝基苯胺 应 Pettenkofer 蔗糖、浓硫 紫色 胆汁酸 反应 酸 Gregory Pa 硫酸、糠醛 蓝色 胆酸的含量scoe 反应 测定Hammarste 铬酸溶液 胆酸显紫色，鹅去氧 胆酸与鹅去 n 反应胆酸不显色氧胆酸改良hamm乙酸、浓盐 胆酸显紫色，去氧胆 胆酸、去氧胆arsten 反应酸酸和鹅去氧胆酸不显 酸与鹅去氧 色胆酸胆汁 酸。
中药化学实验指导—实验十一 应用薄层色谱法检识中药制剂
实验十一应用薄层色谱法检识中药制剂（一）目的要求学习中药制剂的鉴别方法，通过实验要求：1．掌握薄层色谱法的操作技术及分离原理。
2．掌握中药制剂鉴别的一般程序及定性检识的原理。
3．熟悉检识其所含化学成分的方法与实验技术。
（二）实验原理本实验是根据中药制剂牛黄解毒片中的主要成分或特征成分的性质，选用适当的溶剂和方法对试样进行预处理，尽量排除干扰物质，达到提高待测成分或特征成分的相对浓度，以利在进行薄层色谱鉴别时提高色谱清晰度，实现应用薄层色谱检测技术鉴别和控制中药制剂质量。
（三）实验内容牛黄解毒片为包衣片。
处方为：牛黄50g，雄黄50g，石膏200g，大黄200g，黄芩150g，桔梗100g，冰片25g，甘草50g。
以上八味药，雄黄水飞或粉碎成极细粉；大黄粉碎成细粉；牛黄、冰片研细；其余黄芩等四味加水煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩成稠膏，加入大黄、雄黄粉末，制成颗粒，干燥，再加入牛黄、冰片粉末，混匀，压制成1000片，包衣即得。
1．牛黄的鉴别（1）供试液制备；取本品10片，刮去包衣，研碎，加10ml氯仿研磨，滤过，再用10ml氯仿浸洗滤渣，合并滤液，浓缩至1ml为供试液。
（2）对照液制备：①取胆酸0.001g溶于1ml氯仿中，作为对照品溶液。
②取缺牛黄的模拟牛黄解毒片（相当于10片），按供试液制备法处理，得阴性对照液。
（3）薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na样品：牛黄解毒片供试液对照品：胆酸对照液模拟牛黄解毒片对照液展开剂：正己烷-醋酸乙酯-醋酸-甲醇（6∶32∶1∶1）显色剂：喷雾5％磷钼酸乙酸溶液，110℃加热10分钟2．冰片的鉴别（1）供试液制备：取本品2片，刮去包衣，研碎，加4ml甲醇-氯仿（1∶1），室温下浸渍30min，时加振摇，滤过，滤液使成5ml，作为供试液。
（2）对照液制备：①取冰片适量，加甲醇-氯仿（1∶1）溶解，制成1ml含4mg的溶液。
②取缺冰片的模拟牛黄解毒片（相当于2片），按供试液制备法处理，得阴性对照液。
显色剂与展开剂
中药各类物质常用显色剂和展开剂1、 生物碱（1）沉淀反应——碘化汞钾试剂 →白色或浅黄色沉淀碘化铋钾试剂 →橘红色沉淀碘—碘化钾试剂 →浅棕或暗棕色沉淀硅钨酸试剂 →浅黄或黄棕色沉淀磷钨酸试剂 →浅黄色沉淀磷钼酸试剂 →白色或淡黄色沉淀苦味酸试剂 →黄色结晶或非结晶形沉淀鞣酸试剂 →棕黄色沉淀氯化金试剂 →黄色结晶氯化铂试剂 →白色结晶雷氏铵盐 →红色无定形沉淀（2）薄层层析检查：吸附剂——碱性氧化铝（Ⅲ级，干法铺板）硅胶G（稀碱湿法铺板）展开剂——氯仿：甲醇显色——UV；碘化铋钾2、 氨基酸、多肽、蛋白质（1）加热沉淀试验：加热煮沸 →混浊或沉淀 （蛋白质）+5%H2SO4（不加热）→混浊或沉淀（2）双缩脲反应：+40%NaOH，1%CuSO4 →紫色、红色或紫红色（多肽、蛋白质）（3）茚三酮反应：+0.2%茚三酮试液 →蓝或蓝紫色（氨基酸、多肽、蛋白质）（4）吲哚醌反应：+吲哚醌试液 →各种颜色（氨基酸）（5）Millon反应：+Hg，H2NO2 →红色（蛋白质分子中有酪氨酸组成）（6）Hopkins-Cole反应：+乙醛酸，浓硫酸 →各色（蛋白质分子中有色氨酸组成）（7）氨基酸的薄层层析检查：吸附剂——硅胶G展开剂—— n-BuOH，n-BuOH：HAc：H2O显色剂——0.25%茚三酮试液 →紫红色斑点3、 有机酸（1）PH试纸检查（2）溴酚兰试液：喷洒→蓝色背景黄色斑点（3）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G或酸性氧化铝展开剂—— C6H6：EtOH显色剂——0.1%溴酚兰试液→黄色4、 酚类和鞣质（1）FeCl3试剂：+1%FeCl3试液 →蓝、暗绿或蓝紫色（2）三氯化铁-铁氰化钾试剂：喷洒→蓝色斑点（3）香草醛-盐酸试剂：喷洒 →红色（间苯二酚、间苯三酚）（4）重氮盐试剂：+对硝基苯胺、亚硝酸钠 →红色（5）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G或纤维素展开剂—— n-BuOH：HAc：H2O；15%HAc显色剂——1% FeCl3试液1%三氯化铁-1%铁氰化钾试液 →蓝、绿或黑色鞣质与酚类的区别：+明胶 —— 沉淀上清液 +1%FeCl3试液 →蓝、暗绿或蓝紫色5、 糖和苷（1）斐林试剂：+硫酸铜、酒石酸钾钠 —— 砖红色沉淀（还原糖）（—）+1%HCl +NaOH 沉淀（苷元）△30min 上清液（+）（多糖、苷）（2）Molish反应：+α-萘酚-浓硫酸 →紫红色环（3）银镜反应：+0.1N硝酸银、5N氨水 →银褐色（还原糖）（4）薄层层析检查：：吸附剂——硅胶G或纤维素展开剂—— n-BuOH：Pd：H2O；15%HAc显色剂—— 苯胺-邻苯二甲酸6、 皂苷（1）泡末试验：振摇 →大量持续性泡末+0.1M HCl 二管泡末高度相同（三萜皂苷）+0.1M NaOH 碱管高于酸管（甾体皂苷）（2）溶血试验：+2%红血球悬浮液 →溶血（3）Lieberman—Burchard反应：+醋酐-浓硫酸—— 紫红色（三萜皂苷）黄-红-紫-污绿（甾体皂苷）7、甾体（1）Lieberman—Burchard反应：+醋酐-浓硫酸 →黄-红-紫-污绿（2）氯仿-浓硫酸反应：+氯仿-浓硫酸 氯仿层→红或青色硫酸层→绿色荧光（3）五氯化锑或三氯化锑反应：+SbCl3或SbCl5 →红色（4）薄层层析检查：吸附剂——中性氧化铝或硅胶G展开剂—— C6H6-MeOH；CHCl3-MeOH显色剂—— 10%磷钼酸 →蓝-蓝紫色5%三氯化锑试液 →红、棕红或绿色8、黄酮（1）盐酸-镁粉反应：+HCl-Mg →红色（2）三氯化铝反应：+AlCl3 →黄色（3）浓氨水反应：+NH3 →亮黄或橙色（4）薄层层析检查：吸附剂——聚酰胺或硅胶G展开剂—— MeOH-H2O；EtOH-H2O显色剂—— UV→亮黄或黄绿色荧光1%三氯化铝试液→亮黄色9、香豆素、内酯（1）开闭环反应：+1%NaOH→澄清 +2%HCl→混浊（2）异羟污酸铁反应：+7%盐酸羟胺、10%KOH △ +稀HCl、1%FeCl3 →红色（3）重氮盐试剂：+对硝基苯胺、亚硝酸钠 →红色（4）薄层层析检查：吸附剂——酸性硅胶G或硅胶G 或酸性氧化铝展开剂—— 甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5：4：1）显色剂—— UV→蓝色荧光异羟污酸铁试液 →红色10、强心苷（1）Kedde试剂：+3，5-二硝基苯甲酸试液 →紫红色（2）Baljet试剂：+碱性苦味酸试液 →橙或橙红色（3）Legal试剂：+亚硝酰铁氰化钠试液 →紫红色（4）K-K反应：+FeCl3/冰HAc、浓H2SO4→ 上层绿~蓝色（2-去氧糖）界面红棕色（5）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G 或中性氧化铝展开剂—— n-BuOH：HAc：H2O（4：1：5）显色剂—— 碱性3，5-二硝基苯甲酸试液→紫红色碱性苦味酸试液 →橙红色11、蒽醌（1）碱液反应：+10%NaOH →红色 +H2O2 →红色不褪 +H+ →红色褪去（2）醋酸镁反应：+1%MgAc2 →红色（3）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G展开剂——Pet：EtOAc显色剂—— UV→黄色荧光5%NaOH →红色12、挥发油、油脂（1）油斑检查：油斑挥发 →挥发油； 油斑不消失→油脂或类脂（2）磷钼酸反应：喷洒5%磷钼酸试液 →蓝色（油脂、三萜、甾醇）。
中药化学各章显色反应
中药化学各章显色反应
一、生物碱
哌啶苦参氧化碱，吲哚单萜士的宁，有机胺类麻黄碱
二、糖和苷类
三、香豆素和木脂素
香豆素显色反应的鉴别特点和意义
2．Labat反应（没食子酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝绿色）3．Ecgrine反应（变色酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝紫色）
四、醌类
醌类化合物不同颜色反应鉴别特点及意义
五、黄酮类
的存在。
若有3-OH和（或）5-OH，加二氯氧锆显黄色。
若只有5-OH，加枸橼酸后黄色减
褪，若有3-OH ，则加枸橼酸后黄色不变，因此可用于区分黄酮和黄酮醇。
用于鉴别3-OH 的存在。
二酚羟基或兼有3-羟基、4-酮基或5-羟基、4-
酮基结构的化合物反应生成沉淀。
而碱式醋酸铅的沉淀能力要大得多，一般酚类化合物均可与其发生沉淀反应。
① 二氢黄酮易在碱液中开环，转变成相应的异构体查耳酮，显橙色至黄色。
②黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色。
③分子结构中有邻二酚羟基或3，4’-二羟基取代时，在碱液中不稳定，易被氧化，产生沉淀。
六、皂苷类
1）、甾体母核的显色反应
八、胆汁酸
胆汁酸的鉴别反应
九、其他成分
氨基酸的显色反应。
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1、生物碱
（1）沉淀反应——碘化汞钾试剂→白色或浅黄色沉淀
碘化铋钾试剂→橘红色沉淀
碘—碘化钾试剂→浅棕或暗棕色沉淀
硅钨酸试剂→浅黄或黄棕色沉淀
磷钨酸试剂→浅黄色沉淀
磷钼酸试剂→白色或淡黄色沉淀
苦味酸试剂→黄色结晶或非结晶形沉淀
鞣酸试剂→棕黄色沉淀
氯化金试剂→黄色结晶
氯化铂试剂→白色结晶
雷氏铵盐→红色无定形沉淀
（2）薄层层析检查：吸附剂——碱性氧化铝（Ⅲ级，干法铺板）
硅胶G（稀碱湿法铺板）
展开剂——氯仿：甲醇
显色——UV；碘化铋钾
2、氨基酸、多肽、蛋白质
（1）加热沉淀试验：加热煮沸→混浊或沉淀（蛋白质）
+5%H2SO4（不加热）→混浊或沉淀
（2）双缩脲反应：+40%NaOH，1%CuSO4 →紫色、红色或紫红色（多肽、蛋白质）（3）茚三酮反应：+0.2%茚三酮试液→蓝或蓝紫色（氨基酸、多肽、蛋白质）（4）吲哚醌反应：+吲哚醌试液→各种颜色（氨基酸）
（5）Millon反应：+Hg，H2NO2 →红色（蛋白质分子中有酪氨酸组成）
（6）Hopkins-Cole反应：+乙醛酸，浓硫酸→各色（蛋白质分子中有色氨酸组成）（7）氨基酸的薄层层析检查：吸附剂——硅胶G
展开剂——n-BuOH，n-BuOH：HAc：H2O
显色剂——0.25%茚三酮试液→紫红色斑点
3、有机酸
（1）PH试纸检查
（2）溴酚兰试液：喷洒→蓝色背景黄色斑点
（3）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G或酸性氧化铝
展开剂——C6H6：EtOH
显色剂——0.1%溴酚兰试液→黄色
4、酚类和鞣质
（1）FeCl3试剂：+1%FeCl3试液→蓝、暗绿或蓝紫色
（2）三氯化铁-铁氰化钾试剂：喷洒→蓝色斑点
（3）香草醛-盐酸试剂：喷洒→红色（间苯二酚、间苯三酚）
（4）重氮盐试剂：+对硝基苯胺、亚硝酸钠→红色
（5）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G或纤维素
展开剂——n-BuOH：HAc：H2O；15%HAc
显色剂——1% FeCl3试液
1%三氯化铁-1%铁氰化钾试液→蓝、绿或黑色
鞣质与酚类的区别：+明胶——沉淀
上清液+1%FeCl3试液→蓝、暗绿或蓝紫色
5、糖和苷
（1）斐林试剂：+硫酸铜、酒石酸钾钠——砖红色沉淀（还原糖）
（—）+1%HCl +NaOH 沉淀（苷元）
△30min 上清液（+）（多糖、苷）
（2）Molish反应：+α-萘酚-浓硫酸→紫红色环
（3）银镜反应：+0.1N硝酸银、5N氨水→银褐色（还原糖）
（4）薄层层析检查：：吸附剂——硅胶G或纤维素
展开剂——n-BuOH：Pd：H2O；15%HAc
显色剂——苯胺-邻苯二甲酸
6、皂苷
（1）泡末试验：振摇→大量持续性泡末
+0.1M HCl 二管泡末高度相同（三萜皂苷）
+0.1M NaOH 碱管高于酸管（甾体皂苷）
（2）溶血试验：+2%红血球悬浮液→溶血
（3）Lieberman—Burchard反应：+醋酐-浓硫酸——紫红色（三萜皂苷）
黄-红-紫-污绿（甾体皂苷）
7、甾体
（1）Lieberman—Burchard反应：+醋酐-浓硫酸→黄-红-紫-污绿
（2）氯仿-浓硫酸反应：+氯仿-浓硫酸氯仿层→红或青色
硫酸层→绿色荧光
（3）五氯化锑或三氯化锑反应：+SbCl3或SbCl5 →红色
（4）薄层层析检查：吸附剂——中性氧化铝或硅胶G
展开剂——C6H6-MeOH；CHCl3-MeOH
显色剂——10%磷钼酸→蓝-蓝紫色
5%三氯化锑试液→红、棕红或绿色
8、黄酮
（1）盐酸-镁粉反应：+HCl-Mg →红色
（2）三氯化铝反应：+AlCl3 →黄色
（3）浓氨水反应：+NH3 →亮黄或橙色
（4）薄层层析检查：吸附剂——聚酰胺或硅胶G
展开剂——MeOH-H2O；EtOH-H2O
显色剂——UV→亮黄或黄绿色荧光
1%三氯化铝试液→亮黄色
9、香豆素、内酯
（1）开闭环反应：+1%NaOH→澄清+2%HCl→混浊
（2）异羟污酸铁反应：+7%盐酸羟胺、10%KOH △+稀HCl、1%FeCl3 →红色（3）重氮盐试剂：+对硝基苯胺、亚硝酸钠→红色
（4）薄层层析检查：吸附剂——酸性硅胶G或硅胶G 或酸性氧化铝
展开剂——甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5：4：1）
显色剂——UV→蓝色荧光
异羟污酸铁试液→红色
10、强心苷
（1）Kedde试剂：+3，5-二硝基苯甲酸试液→紫红色
（2）Baljet试剂：+碱性苦味酸试液→橙或橙红色
（3）Legal试剂：+亚硝酰铁氰化钠试液→紫红色
（4）K-K反应：+FeCl3/冰HAc、浓H2SO4→上层绿~蓝色（2-去氧糖）界面红棕色
（5）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G 或中性氧化铝
展开剂——n-BuOH：HAc：H2O（4：1：5）
显色剂——碱性3，5-二硝基苯甲酸试液→紫红色
碱性苦味酸试液→橙红色
11、蒽醌
（1）碱液反应：+10%NaOH →红色+H2O2 →红色不褪+H+ →红色褪去（2）醋酸镁反应：+1%MgAc2 →红色
（3）薄层层析检查：吸附剂——硅胶G
展开剂——Pet：EtOAc
显色剂——UV→黄色荧光
5%NaOH →红色
12、挥发油、油脂
（1）油斑检查：油斑挥发→挥发油；油斑不消失→油脂或类脂
（2）磷钼酸反应：喷洒5%磷钼酸试液→蓝色（油脂、三萜、甾醇）。