细菌的培养方法课件

⑵ 碘酒、75%酒精、棉学签习交等流PPT （1套/6人）
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培养基的制备
一、培养基（culture medium）
由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使 用的混合营养物制品。
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（一）培养基的类型及应用 1、按用途划分
1）基础培养基 能满足一般细菌生长繁殖的营养需要，如肉
汤（包括牛肉膏、蛋白胨、氯化钠等）。
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方法： （1块／3人） 打开血平板，将平板置于口腔前约15cm处，
对准培养基表面用力咳嗽3～4次，然后盖好平 板盖，放置于37℃孵箱内培养24小时观察 结果。
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正常人体皮肤及随身物品的细菌检查
在人体的皮肤表面有多种细菌存在，用水洗手或 用肥皂洗手，可以除去皮肤上的污垢和灰尘，从而减少 手上细菌的数量，但并不能有效的杀死细菌。而日常医 疗、试验工作中常用的化学消毒剂如碘酒、酒精等有很 好的杀菌作用，它们不仅对细菌的繁殖体，对芽孢也有 一定的杀灭效果，所以在临床医疗中广泛应用。
2 液体培养
沉
混
淀
浊
生
生
长
长
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表 面 生 长
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3 半固体培养
常用于检查细菌动力
无动力 学习交流PPT 有动力
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本次试验的操作：
1. 空气中细菌的检查（沉降法，血平板） 2. 呼吸道细菌的检查（咽拭子或咳碟培养，血
平板） 3. 随身物品细菌检查（普通平板） 4. 细菌的接种法：液体、半固体、固体培养基
实验三、 细菌接种及分离培养； 自然界及正常人体的细菌检查
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教学目标
1. 熟悉常用的纯种细菌的接种方法。 2. 掌握标本中细菌的分离培养技术。 3. 了解细菌广泛分布于自然界及正常人 体，树立“有菌观念”。 4. 深刻认识“无菌操作”对于微生物实 验及医药学实践的重要性。 5．进一步理解“正常菌群”的概念。
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空气中细菌的检查
检查空气中细菌的方法很多，沉降法 是其中的一种。它是利用含有细菌的尘粒 或气溶胶粒因重力作用而自然下降于培养 基表面，通过细菌培养，计数其菌落数， 而粗略地进行评估。
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操作：将血平板打开盖，放到教 室的四个角上，静止15分钟后，合上 盖后送37℃孵箱培养。
某些细菌如奈瑟菌在培养时需要提供5-10%二氧化碳；
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二、细菌在培养基中的生长现象
1．固体培养 • 单个微生物在适宜的固体培养基表面生长、繁殖
到一定程度，可以形成肉眼可见的有一定形态结 构的细菌集团，称为菌落（colony）。 • 菌落特征是鉴别细菌的重要依据之一。
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固学体习交培流养PPT基
半固体培养基
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（二）细菌生长繁殖的条件
1．充足的营养物质； 2．适宜的温度； 3．合适的酸碱度（ph）； 4．必要的气体环境；
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温度
嗜冷菌 (10-15℃) 嗜温菌（30-40℃）：绝大多数病原菌 嗜热菌（50-85℃）
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pH
嗜中性菌（ 5 to 8） 嗜酸性菌（below 5.5） 嗜碱性菌（above 8.5）
2）营养培养基
在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、 酵母浸膏等。
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3）鉴别培养基
用于鉴别不同类型细菌的培养基。特定的化学 反应，产生明显的特征性变化，根据这种特征性变化， 可将该种细菌与其他细菌区分开来。
4）选择培养基
将某种细菌从混杂的细菌群体中分离出来的培养 基。根据不同种类细菌的特殊营养需求，在培养基中 加入相应的特殊营养物质；或者加入某些化学物质， 抑制不需要的细菌生长，有利于所需细菌的生长。
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实验主要内容
1．录相：细菌的培养方法
2．操作：
⑴空气中细菌的检查 （沉降法 血平板 1块/6人）
⑵呼吸道细菌的检查 （咽拭子法培养 血平板 1块/3人
）
⑶随身物品的细菌检查（手指消毒前后 普通平板1块/3
人）
⑷细菌的接种法（液体、半固体、固体 1套/3人）
材料：
⑴ 大肠埃希菌培养物 （1支/6人）
5）厌氧培养基
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大肠埃希菌
沙门菌
志贺菌
SS琼脂培养基 （Salmonella-Shigella agar）
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2、根据物理状态划分
液体培养基：增菌 固体培养基（琼脂浓度为2－3％）：
增菌，分离培养 半固体培养基（琼脂浓度为0.2-0.5%）：动
力检查，保种
液体培养基
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操作与注意事项（1块／3人） 1、将平板底部用mark笔划线分成均匀的8个区，分别标
记为①②③④⑤⑥⑦⑧。
2、用右手的食指在①区上轻轻按一下，然后用肥皂在流
水下将手洗干净，用无菌棉签拭干右手食指皮肤上的水，
再轻轻在②区培养基上按一下。
3、用左手食指轻轻在③区按一下，然后用棉签蘸碘酒消
沉降法简单易行，缺点是不够准 确。但它客观地反映了空气污染的程 度和卫生通风状况，对手术室、食品 业等有重要的参考意义，是判断空气 污染的指标之一。
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据推算，每100cm²培养基在空气中暴露5 分钟，其表面接受自然沉降的细菌数约相当 于10升空气中所含的细菌量。
所以： 每m³空气中活菌数=（100cm²培养基上菌 落平均数/30）x1000。
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鼻咽喉及口腔中细菌的检查
— 咳碟试验 鼻咽喉及口腔是人体与外界相通的腔道，常
常有不同种类的细菌存在。这些细菌常是条件
致病菌，在一般情况下并不致病，但是当机体
的抵抗下降时，可引起疾病而对机体造成危害。
由于寄居人体的关系，这些细菌对营养的
要求较高，所以常用含血的培养基进行分离。
学习Baidu Nhomakorabea流PPT
多数病原菌最适酸碱度为PH7.2-7.6 霍乱弧菌耐碱 PH8.4-9.2 结核分支杆菌耐酸 PH6.5-6.8
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气体环境
• 氧和二氧化碳 按细菌对氧的需求可分为四种类型：
（1）专性需氧菌（obligate aerobe, O2 >20%）
（2）兼性厌氧菌（facultative anaerobe, O2 : Yes or no ） （3）微需氧菌（microaerophilic bacterium , O2 :2~10% ） （4）专性厌氧菌（obligate anaerobe, O2 : No ）