分光光度法检测血清百草枯质量浓度及意义
离子对色谱测定百草枯水剂中的有效成分
离子对色谱测定百草枯水剂中的有效成分吕 建 军（辽宁省农药检定站，辽宁 沈阳 110034）摘 要：采用离子对色谱、UV 检测器研究了百草枯水剂中有效成分的测定方法。
该法的回收率和变异系数分别为 99.7%～100.8%和 0.12%。
关 键 词：离子对色谱；百草枯；辛烷磺酸钠；二乙胺 中图分类号： O 657.7文献标识码： A文章编号： 1004-0935（2011）02-0188-03百草枯，又名克芜踪，用于清茬、牧场更新、蔬菜行间除草、用于干燥多种作物、用于植物园除 草等。
近年来，国内外文献对百草枯分析有大量报 导。
有用 HPLC 、TLC 、毛细管电泳、氰亚铁酸锌和 氰亚铁酸铜凝胶膜（隔膜）电极测定、荧光光谱测 定的有关报导[1]，也有用液-质联用测定的报导，本 文就离子对色谱测定百草枯有效成分的分析方法 进行了研究，建立了离子对色谱测定百草枯高效液 相色谱方法。
该法的分离度、准确度和精密度均满 足定量分析要求。
1 实验部分1.1 试剂和溶液辛烷磺酸钠，并用磷酸调 pH=2.5）＝10＋90（V /V ）；流量：1.2 mL /min ； 柱温：30 ℃； 检测波长：225 nm ； 进样体积：20 μL ； 保留时间：16.1 min 。
上述液相色谱操作条件，系典型操作参数，可 根据不同仪器特点，对给定的操作参数作适当调 整，以期获得最佳效果。
百草枯标样液相色谱图见 图 1，典型的百草枯水剂液相色谱图见图 2。
百草枯标样（使用前在 120 已知质量分数≥99.0%； 辛烷磺酸钠：优级纯； 二乙胺:分析纯; 乙腈：色谱纯； 磷酸:分析纯。
1.2 仪器℃干燥 4 h 以上）：图 1 百草枯标样液相色谱图高效液相色谱仪：Agilen 1100，具可变波长检 测器；Agilen 1100 色谱工作站； Millipore 超纯水制备系统；色谱柱：250 mm×4.6 mm(id)不锈钢柱，内装 C18、5 μm 填充物； 过滤器：滤膜孔径约 0.45μm 。
推扫富集胶束电动毛细管色谱法和紫外分光光度法测定血液灌流前后血清中百草枯浓度的比较
２５ ） ．０ 为缓 冲溶 液 ， 分离 电压 ２ Ｖ， ２ｋ 进样 压力 ５ｋ ａ在 ６０ ｓ Ｐ ， ０ 内富集倍数达到 ６ ０倍 ， ５ 检测 波长 ２ ０ａ 在 紫 ６ ｍ。
需 要多 次灌 流 。目前 ， 临床 缺 少 检 测 血 液 灌 流前 后
…
Ｐ ｒ ｑｕ ｔ 凭 经 验 决 定灌 流 次 数 。本 文 仅
建 立 了血 液 灌 流 前 后 血 液 中 百 草 枯 浓 度 的检 测 方 法 ． 临床监 测 及救 治百 草枯 中毒提供 标 准 和依据 。 为
外分光 光 度 法 中 ， 清 样 品经 体 积分 数 为 ２ ％ 三氯 乙酸 去 蛋 白处 理 ，０ 血 ０ ５
度 法 对 百 草枯 的 检 测 限 为 ００ ｇ Ｌ 相 对 标 准偏 差 Ｒ Ｄ 为 ２ ５ ％ 。 ． １ｍ ／ ． Ｓ ．０
微 量 比色 池 ， 外检 测 波 长 紫
２ ７ｎ ５ ｍ。胶束 电动 毛细管色谱 法对百草枯 的检测 限为 ０ ０ ２ｍ ／ ， ．０ ｇ Ｌ 相对标准偏差 Ｒ Ｄ为 ２ ９ ％ ； Ｓ ． ５ 紫外分光光
低 ． 适合 多次 灌流后 血 清 中痕量 百草 枯 的检 测 。 更
１ 实验部分
１ １ 仪器 和试 剂 ．
Ａ ｉｎ Ｅ型毛 细管 电泳仪 ， 极 管 阵 列 检 测 器 ； ｇｅｔ ｅｈｏ ｇｅ Ｃ ｅ ｔｉｎＦｍｉ ｇｅｔ ｌ Ｃ 二 Ａ ｉ ｎ Ｔｃｎｌ ｉ ｈｍＳａｏ ａ ｌ ｌ ｏ ｓ ｔ ｙ色谱 工 作 站 ；Ｈ ．Ｃ型酸度 计 （ Ｐ Ｓ３ 上海 雷 磁 仪 器 厂 ） Ａ ｋ Ｇ ．６ ； ｎｅＴ Ｌ１Ｇ型 台式 高 速 离 心 机 （ 海 安 亭 科 学 仪 器 厂 ） 上 ； Ｕ ２ ５ 紫外 分光 光度 计 （日本 岛津 ）５ Ｌ微 量 比色池 ， 测 波长 为 ２７ｎ Ｃ ６０型 电热恒 温水 Ｖ－５０型 ，０ 检 ５ ｍ； Ｕ ０ 箱 ：Ｋ １型快 速混 匀器 。 Ｓ．
百草枯检测
液相色谱_串联质谱法快速测定植物源性食品中的百草枯摘要:建立了水果、蔬菜、豆类和粮谷中百草枯残留的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS /MS)分析方法。
用水提取样品中的百草枯，弱阳离子交换(WCX) 固相萃取柱( SPE) 净化。
采用CAPCELL PAK ST 色谱柱(150 mm × 2. 0mm)，乙腈-10 mmol /L 乙酸铵水溶液( 用甲酸调至pH 4. 0) 为流动相，以电喷雾离子源正离子模式多反应监测(MRM)定性、定量测定百草枯。
百草枯在0. 01 ～ 0. 1 mg /L 范围内峰面积与质量浓度呈线性关系，相关系数为0. 993。
在空白样品中添加百草枯，测得方法的回收率为84. 0% ～ 106. 0%，相对标准偏差(RSD) 为7. 8% ～ 18. 8%。
果蔬和粮谷样品中百草枯的定量限分别为0. 01 mg /kg 和0. 05 mg /kg，满足各国残留限量要求。
百草枯，英文名paraquat，化学名1，1-二甲基-4，4'-联吡啶阳离子，是有机杂环类季铵盐除草剂，商品多为其硫酸盐或氯化物形式。
由于其具有优良的除草效果，在世界上120 多个国家广泛使用。
百草枯对人、畜有较强的毒性作用，且一旦中毒无药可解。
百草枯的结构稳定，半衰期长，容易在环境和食物中形成残留累积，对人类健康和自然环境构成潜在危害。
因此，国际农残法典委员会(CAC)、欧盟和美国等都规定了水果、蔬菜、粮食和肉类中百草枯残留物的限量标准。
“中国技术性贸易措施网”收录的CAC 和一些国家及地区的百草枯残留限量标准多达391 条，其中水果和蔬菜中百草枯残留限量多为0. 05 mg /kg;我国GB 16333 中规定菜籽油、成品粮、柑橘、苹果和梨中百草枯的最大允许残留量分别为0. 05、0． 5、0. 2、0. 05 和0. 05 mg /kg。
因此，研究食品中百草枯残留测定方法十分必要。
最新百草枯中毒诊治指南
百草枯中毒诊治指南百草枯中毒诊治指南背景资料百草枯（Paraquat Poisoning）又名对草快、杀草快、俗名“一扫光”，亚洲市场商品名为“克芜踪”（Gramoxone)。
百草枯最初合成于十九世纪，当时用作化学指示剂（氧化还原指示剂）。
二十世纪五十年代末，百草枯的除草作用被发现，1962年由英国卜内门化学公司出品在市场销售。
目前，百草枯是世界除草剂市场上第二大产品，已在100多个国家登记注册使用。
百草枯是一种非选择性、速效接触性除草剂。
喷洒后能够很快发挥作用，接触土壤后迅速失活。
在土壤中无残留。
正常情况下使用对野生动物和环境无危害。
正确的使用以喷洒作业人员的健康无不良影响。
使用这种除草剂可减少耕种作业，有助于防止土壤被侵蚀，保持土壤湿度，有得于促进无需消耗时间和能量的“免耕农业”或“直播农业”的推广。
在发达国家和发展中国家，百草枯均被广泛的应用于在多种作物上，促进了农业生产力的提高。
百草枯为联吡啶类除草剂，属中等毒类。
该除草剂对环境和人体健康有害，其对环境的影响，特别是对土壤和人类健康的影响常常被忽视。
在一些国家已经被禁用，但在中美洲仍在大量销售和使用。
至今尚无特效解毒剂清除百草枯，同时也没有特效螯合剂可以结合血液组织中的百草枯。
因此使用或接触百草枯的人必须配戴专门的面具和工作服，喷雾器必须没有任何泄漏。
然而，并不是所有的中小农场主都配备有专用设备，因为对他们来说，这好比是买一套宇航服，因此，即便完全按照使用说明操作，也难免不发生意外。
我国是个农业大国，由于基层医生对此中毒了解甚少，所以官方报道中毒病死病例数很少，这不能不引起我们的重视。
百草枯中毒病死率高，世界各地相继报道百草枯中毒总病死率为25%-75%，口服20%原液者则高达95%，已引起了全球性的关注。
医学界精英投入了大量的人力和物力研究！！研究领域已包括动物实验、基础、病理生理、临床等。
每月有数千篇研究论文发表！！！但是，目前为止，尚未见特效治疗.......百草枯中毒机理百草枯通过一个需能的传递系统，富积于肺泡的I型细胞和2型细胞（由于百草枯的结构和多胺相似而被且泡摄取），高浓度的百草枯富积于肺和肾的细胞，影响其氧化还原反应的进程，产生对组织产生有害作用的氧，可破坏细胞的防御机制，导致肺损伤（急性或亚急性）和肾小管坏死。
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测—酶抑制率法(分光光度法)
入射光 I0
透射光 It
测量某物质对不同波长单色光的吸收程度，以波长（）为横 坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘制吸光度随波长的变化可得 一曲线，此曲线即为吸收光谱。 不同浓度的同一物质，它的最大吸收波长是不变的，但吸光 度随浓度增大而增大。 在最大吸收波长处测量吸光度，其灵敏度最高。
有色溶液对某一波长光吸收的强度与有色物质的浓度c及吸 光溶液的液层厚度b成正比，称为光吸收定律或朗伯－比尔 定律，其数学表达式为 A=εbc 式中： b为液层厚度，单位为cm； c为浓度，单位为mol.L-1； ε为摩尔吸光系数，单位为 L.mol-1.cm-1。
酶抑制率法对部分农药的检出限
农药名称 敌敌畏 对硫磷 辛硫磷 甲胺磷 马拉硫磷 乐果
检出限 mg/kg
0.1 1 0.3 2 4 3
农药名称 氧化乐果 甲基异柳磷 灭多威 丁硫克百威 敌百虫 呋南丹
检出限 mg/kg
0.8 5 0.1 0.05 0.2 0.05
说明
葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液 中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处 理这类样品时，可采取整株（体）蔬菜浸提。对一些含叶绿 素较高的蔬菜，也可采取整株（体）蔬菜浸提的方法，减少 色素的干扰。 当温度条件低于37° C，酶反应的速度随之放慢，加入酶液 和显色剂后放置反应的时间应相对延长，延长时间的确定， 应以胆碱酯酶空白对照测试3min的吸光度变化D A0值在0.3 以上，即可往下操作。注意样品放置时间应与空白对照溶液 放置时间一致才有可比性。胆碱酯酶空白对照溶液3min的吸 光度变化D A0值＜0.3 的原因：一是酶的活性不够，二是温 度太低。
1.0
T
100
A
紫外分光光度法测定血液中的百草枯
紫外分光光度法测定血液中的百草枯
白云;范川鹏;李素燕;杜书明
【期刊名称】《国际检验医学杂志》
【年(卷),期】2013(034)011
【摘要】目的建立百草枯中毒患者血清百草枯定性定量的紫外分光光度法测定.方法血清经20％三氯醋酸沉淀蛋白,-20℃冰箱放置10 min,12000 r/min高速离心,取上清液,采用50μL微量比色池,紫外分光光度法测定.结果血清中百草枯浓度在0.05～40 μg/mL范围内呈线性,回归方程Y=0.084 2X+0.013 6,其相关系数为0.999 6,回收率为92.5％～103.0％,RSD为3.6％～4.7％.日内、日间相对标准差分别为2.8％～4.8％和2.2％～4.6％,最低检出限为0.02 μg/mL.结论该方法操作简便、分析快速,结果准确.为临床百草枯中毒的定性定量检测提供了一种简便准确的检测方法,适合对血液灌流前、后的百草枯浓度的测定.
【总页数】2页(P1421-1422)
【作者】白云;范川鹏;李素燕;杜书明
【作者单位】白求恩国际和平医院检验实验科,河北石家庄050082;白求恩国际和平医院检验实验科,河北石家庄050082;白求恩国际和平医院检验实验科,河北石家庄050082;白求恩国际和平医院检验实验科,河北石家庄050082
【正文语种】中文
【相关文献】
1.血液中舒乐安定的紫外分光光度法测定
2.紫外分光光度法测定血液保存液中DEHP的含量
3.紫外分光光度法测定尿中百草枯的含量
4.推扫富集胶束电动毛细管色谱法和紫外分光光度法测定血液灌流前后血清中百草枯浓度的比较
5.紫外分光光度法测定大鼠血浆百草枯浓度的应用研究
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分光光度法测定草甘膦生产废水中草甘膦和甘氨酸的含量_李国鹏
第2 期
李国鹏，等： 分光光度法测定草甘膦生产废水中草甘膦和甘氨酸的含量
作者针对我国某厂草甘膦生产过程中的废水，探究其有效成分草甘膦、甘氨酸含量的快速、简便的检测 方法，为治理草甘膦生产废水和回收废水中的有效成分奠定基础．
1 实验部分
1． 1 实验药品与仪器 硫酸、溴化钾、亚硝酸钠为市售分析纯； 水（ 实验室自制蒸馏水） ； 草甘膦（ 质量分数 95% ） ； 甘氨酸（ 质量
82
废水外观 淡黄色
郑州大学学报（ 理学版）
pH 值 约 10
表 1 草甘膦生产废水水质分析 Tab． 1 Components in wastewater of glyphosate produced
COD 值 / （ mg·L － 1 ）
40 000 ～ 50 000
草甘膦质量 分数 /%
约1
2． 2 甘氨酸含量的测定 2． 2． 1 甘氨酸标准溶液的配制及测定 精确称取 0． 009 00 g 质量分数 98% 的甘氨酸，配制成 500 mL 甘氨 酸水溶液； 配制 pH 为 5． 4，2 mol / L 醋酸缓冲液； 称取 0． 180 g 茚三酮和 0． 040 g 还原型茚三酮，用 20 mL 乙 二醇甲醚溶解，配制为显色液； 配制体积分数 60% 的乙醇溶液．
即可，如继续加热至 15 min，则溶液颜色不是变成蓝紫色，而
是变成紫红色，这 可 能 是 由 于 加 热 时 间 较 长 而 甘 氨 酸 质 量 浓 度较低，酚羟基被氧化显色所致［7 － 8］． 因此，要严格控制低质
百草枯检测方法研究进展
百草枯又名克无踪、对草快，化学名为１，卜二甲基４，４一联吡啶阳离子盐，其分子式为ＣｔｚＨ－小ｚ，纯 品为白色晶体。３００℃上分解，极易溶于水，微溶于低分子量的醇类，不溶于烃类溶剂。在酸性、中性溶 液中稳定，碱性溶液中易分解。其商品为深绿色有气味的液体。百草枯是速效接触型灭生性除草剂．对植 物绿色组织有很强的破坏作用。由英国上世纪５０年代开发，６０年代初期投入使用，至今已有４０多年历史。 是目前世界上使用量仅次于草甘膦的最受群众欢迎的除草剂之一。使用遍及全世界１３０多个国家和地区。 １９７８年黑龙江农垦首先从英国进口百草枯进行使用，１９８４年正式进入中国市场，随着它在中国的日益推 广使用，使用量逐步扩大。然而百草枯对人体健康和生态环境存在严重危害，在一定程度上已成为了社会
参考文献： １．杨世杰．．药理学［Ｍ］．第１版．北京；人民卫生出版社，２００７：４１６． ２． 胡秀春，吴正享，刘兰英．７一氨基头孢烷酸职业哮喘８例临床分析［Ｊ］．职业与健康，２００２，１８（１０）：３２－３３． ３． 白金，邹建芳，孙少秋等．７一氨基头孢烷酸致支气管哮喘二例［Ｊ］．中华劳动卫生职业病杂志，２００７，２５（１０）：６１６－６１７． ４．刘镜愉．哮喘的职业评价［Ｊ］．中国工业医学杂志，１９９５，８（２）：１２１． ５．ＧＢＺ５７－－２００８，职业性哮喘诊断标准，附录Ａ，正确使用本标准的说明．
．．３２９．
问题。百草枯对人、畜均有较强的毒性作用。目前尚无特效治疗方法，病死率较高。百草枯也是环境和农 产品残留物中需要检测的重要物质之一。其高毒性与广泛应用性，使得建立快速、高选择性、高灵敏度的 测定百草枯方法是非常必要的。现将百草枯检测方法综述如下。
百草枯中毒血、尿标本分析检测方法的研究进展
４
血液Ｓｙｍｍｅｔｒｙｓ ｈｉｅｌｄ ＴＭ 含２５ｍｍｏｌ／Ｌ Ｓｏｓ ０．００５
上清渡过柱后．用３０％甲醇水洗杂质．用Ｉ．０ｍｏｌ／ｌ氯化铵５０％甲
ＲＰｌ８柱
４５％的乙腈
醇液洗脱待测物．采用反相离子对高效液相色谱法，９６９ＰＤＡ检测
器，波长２５９ｎｍ，柠温２５℃．流速ｌｍｏｌ／ｍｉｎ。
５
血液 Ａｔｌａｎｔｉｓ ＨＵＣ Ｓｉｌｉｃａ 甲酸铵：乙腈（６０：４０ｖ１
第２７卷第６期 ２００９年１２月
实 验 与 检验 医学 ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬ ＡＮＤ ＩＡＢＯＲＡＴＯＲＹ ＭＥＤＩＣＩＮＥ
·６４９．
Ｖ０１．２７ Ｎｏ．６ Ｄｅｅ．２００９
·综述·
百草枯中毒血、尿标本分析检测方法的研究进展
陈辉凤，宋乃国综述，田喜凤审校
ｆ华北煤炭医学院生物科学系，河北唐山０６３０００）
１．２固相萃取法同相萃取法目前是百草枯净化提取最常 用的方法，它将百草枯从非常稀释的溶液中富集起来．从而 有利于分析。现将国内外对于血、尿标本中百草枯的固相萃 取法归结为表ｌ弘ｍ。
百革枯固相萃取法操作简便、快速。萃取回收率高．重现 性好，适合提取微量样品，能满足基层实际检验的需要。不足 之处是常采用酸液或碱液作为洗脱液．提取液难以浓缩且易 损害分析柱．
相等的不同而异。现将国内外研究应用于血、尿标本中百草
供气相色谱Ｎ、Ｐ检测分析。以乙基百草枯为内标物，进行血
枯分析检测的液相色谱法归结为表２【，，１１－１３，１９－２１］。
衰２不同色谱柱、不同流动相中不同百草枯液相色谱法
方法 标本
色谱柱
流动相试剂
篆躲
实验条件．
１
血液 Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ一２
百草枯
成人估计致死剂量20%水溶液约5~15ml或40mg/kg
口服3g即可导致系统性中毒，引起肝、肾多器官衰竭，尤其以肺损伤较严重，肺 充血，出血，水肿，透明膜形成和变性，增生和呼吸衰竭 对眼睛、皮肤有刺激和腐蚀作用 引起指甲、皮肤溃烂 目前，制毒机制不明确。
生物监测指标和样品处理
生物监测指标：血、尿中的百草枯含量
原因：接触百草枯者，血中含量增加，15~20小时以原行从肾脏排出
样品采集及保存 血样：采取肘静脉3ml,置于盛有0.1mol/L的盐酸溶液7ml的试管中，混匀后冰冻储存或 立即进行样品处理 尿样：收集班后尿100ml，置于聚乙烯材料管中，—4摄氏度运输保存。百草枯在中性、
高效液相色谱-质谱法
仪器参考条件：链霉素分析专用色谱柱（150mmX2.0mm，2.6um）；柱温30摄氏度；
流动相：0.4%TFA-水：乙腈=40:60；流速0.3ml/min；检测波长350nm
注意事项 标准储备液、标准应用液及萃取后用于上机测定的样品溶液，用PP材料的容器存
放，玻璃材料对百草枯有吸附作用，低浓度更加明显
酸性介质中稳定，而尿液为酸性或接近中性，可保存3个月，若服用某些药物如碳酸
氢钠等，会碱化尿液，需要加入盐酸调节到中性。
血和尿中百草枯的测定
分光光度法——用于快速检测
气相色谱法
高效液相色谱法——最常用的方法 毛细管电泳法 质谱联用法
分光光度法
原理：尿中百草枯在ph>10的条件下，与连二亚硫酸钠反应，生成蓝色离子化合物， 与395nm 处测定吸光度，用标准曲线发定量。 样品处理和测定：
①条件环境取适量尿样，视百草枯含量用水稀释5~10倍，取稀释尿液一定量于比 色 管内，然后加入适量无水碳酸钠和碳酸氢钠，摇匀，使其pH>10，
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分光光度法检测血清百草枯质量浓度及意义
作者：李昌斌， 李新华， 王贞， 姜成华， 彭艾， LI Chang-bin， LI Xin-hua， WANG Zhen， JIANG
Cheng-hua， PENG Ai
作者单位：李昌斌,李新华,王贞,彭艾,LI Chang-bin,LI Xin-hua,WANG Zhen,PENG Ai(同济大学附属第十人民医院肾病免疫科, 上海,200072)， 姜成华,JIANG Cheng-hua(同济大学医学院)
刊名：
中华急诊医学杂志
英文刊名：Chinese Journal of Emergency Medicine
年，卷(期)：2011,20(8)
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2.Agarwal R;Srinivas R;Aggarwal AN Immunosuppressive therapy in lung injury due to paraquat poisoning:a mtta-analysis 2007(11)
3.Dinis-Oliveira RJ;Sannento A;Reis P Acute paraquat poisoning:report of a survival case following intake of a potential lethal dose[外文期刊] 2006(07)
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