蛹虫草中虫草素_虫草多糖综合提取工艺研究
蛹虫草虫草素研究进展
蛹虫草虫草素研究进展蛹虫草又称虫草，是一种常见的中草药材，具有较高的药用价值。
虫草素作为蛹虫草中的一种有效成分，近年来备受研究者的关注。
虫草素具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等多种药理活性，在医学和保健品领域有着广阔的应用前景。
本文将对蛹虫草虫草素的研究进展进行综述，介绍其药理活性及应用前景，为其开发利用提供参考。
一、蛹虫草虫草素的提取与分离蛹虫草虫草素主要存在于蛹虫草的子实体内，其提取与分离是相关研究的首要步骤。
目前常用的提取方法包括水提取、超声波提取、酶解法等。
酶解法相对高效，可以有效提高虫草素的提取率。
在分离方面，常采用柱层析、薄层层析、高效液相色谱等技术进行分离纯化。
通过高效液相色谱技术，可以得到高纯度的虫草素，为后续的研究奠定了基础。
二、蛹虫草虫草素的药理活性研究1. 抗菌活性虫草素具有较强的抗菌活性，可以抑制多种致病菌的生长繁殖。
研究表明，虫草素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等细菌均具有明显的抑制作用。
这为虫草素在医药、食品等领域的抗菌应用提供了理论基础。
2. 抗炎活性虫草素对炎症反应具有一定的抑制作用，可以减轻组织炎症反应，缓解炎症所致的痛苦和不适。
研究发现，虫草素可以调节白细胞、中性粒细胞的活性，减少炎症介质的释放，从而发挥抗炎作用。
3. 抗肿瘤活性虫草素具有明显的抗肿瘤活性，可以抑制肿瘤细胞的增殖和扩散。
研究表明，虫草素可以通过诱导肿瘤细胞凋亡和抑制血管生成等方式发挥抗肿瘤作用，对多种肿瘤具有一定的抑制效果。
4. 抗氧化活性虫草素具有较强的抗氧化活性，可以清除自由基，减少氧化应激对机体的损害。
研究表明，虫草素可以提高抗氧化酶的活性，降低氧化损伤的发生，对预防氧化性疾病具有一定的保护作用。
蛹虫草培养基残余体综合利用的研究进展
生态效益 。因此 ， 近 年来 虫草培养基残余 体的综合利用研 究
备 受 关 注 。笔 者 从 虫 草 培 养 基 残 余 体 的 虫 草 素 、 虫 草 多糖 的 提取纯化 ， 在 保 健 食 品 和 饲 料 中 的应 用 及 作 为 杀 虫 真 菌制 剂 或 用 于 培 养 其 它 微 生 物 等 方 面 综 述 了 虫 草 培 养 基 残 余 体 综 合利用的研究进展 。
间１ ２ ０ ｍｉ ｎ， 料液 比（ Ｗ／ Ｖ） １ ： ２ ０的 条 件 下 ， 测 得 多 糖 含 量
为１ ． １ ２ ｍｇ ／ ｍＬ 。 梁 晨 通 过 对 水 浴 法 、 超 声 波 法 和 微 波 三 种
提 取 方 法 的提 取 工 艺 进 行 研 究 ， 得 到 最 佳 的蛹 虫 草 培 养 基 多
比、 提 取 次 数 。在 最 佳 工 艺 提 取 温 度 ８ ０ ％， 提取 ２ 次， 提 取 时
蛹虫草 【 Ｃ ｏ ｒ ｄ ｙ ｃ ￣ｓ ｍ ｉ ｌ ｉ ｔ ａ ｒ ｉ ｓ （ Ｌ ． ） Ｌ ｉ ｎ ｋ］ 又名北冬虫夏 草 、 北 虫草 ， 与 冬 虫 夏 草 同属 异 种 。 由于 其 主 要 药 用 成 分 虫 草 素 含 量 比冬虫夏草高得 多 ， 大约为后 者 ３ ５ 倍甚至 ｌ ０ 倍 一 ， 且 蛹 虫 草更 容易人工栽 培 ， 因此 蛹 虫 草 目前 被 选 为 冬 虫 夏 草 的最 佳
摘
要 从虫 草 培 养基 残余 体 的 虫草 素 、 虫 草 多糖 的 提取 纯
一
般采用 水 、 ５ ０ ％ 乙醇 、 乙 醇 和 甲 醇 等 溶 剂 。 提 取 方 法 主 要
化， 在保 健食 品和饲料 中的应用 ， 作 为 杀 虫 真 菌 制 剂 和 用 于 培
正交设计优选蛹草拟青霉中虫草素和虫草多糖的提取工艺
正交设计优选蛹草拟青霉中虫草素和虫草多糖的提取工艺黄婷婷;马云淑;阳丹;王维丽;谭麒冉【摘要】目的：采用正交设计优化蛹草拟青霉菌丝体中虫草素和虫草多糖的提取工艺。
方法：建立高效液相色谱测定指标成分虫草素含量的方法，采用正交试验法考察醇浓度、加醇量、提取次数与时间的组合3个因素对虫草素乙醇提取率的影响。
醇提后残渣以水提取多糖，采用苯酚-浓硫酸比色法在490 nm 处测定虫草多糖的含量，以单因素法筛选多糖提取工艺。
结果：HPLC 色谱条件下精密度的RSD 为0.30％，稳定性的 RSD 为1.27％，重复性的RSD 为2.93％。
以乙醇浓度为90％，加醇量为10倍量，提取3次，每次1 h 虫草素的提取率最高；而以乙醇浓度为95％，加醇量为6倍量，提取3次，每次1 h 提取虫草素后的残渣再以水提取，虫草多糖得率最高。
结论：所优化的提取工艺虫草素和虫草多糖提取率均较高，采用的含量测定方法稳定可靠。
%Objective:To optimize the extraction processes of cordycepin and cordycepic polysaccharides from mycelia of Paecilomyces militaris by using Orthogonal design.Methods:A HPLC method was established to determine the content of cordycepin which was taken as indexes,and orthogonal test method was used to investigate three factors of alcohol concentration,alcohol volume ratio,and the combination of extraction times with time to influence on the extraction efficiency of cordycepin.Detection was performed at wavelength of 260 nm.The column temperature was 30 ℃ and the injection volume was 1 0 μL.After extracted by alcohol,the residue of mycelia was dealt with water to extracted cordycepic polysaccharides, and colorimetric method by using phenol—concentrated sulfuric acid as chromogenic agent was usedto determine the content of cordycepic polysaccharides in the extract under 490 nm.Results:Under the condition of HPLC,the precision of RSD was 0.30%,the stability of RSD was 1 .27% and the RSD of reproducibility was 2.93%.The results showed the extract ratio of cordycepin was the highest with the process parameters of 90% alcohol,1 0 times of alcohol volume ratio,3 times with 1 h for every time.And the water extract ratio of Cordyceps polysaccharide in the mycelia residue was the highest after cordycepin was extracted from mycelia with 95% alcohol,6 times of alcohol volume ratio,3 times,with 1 h each time.Conclusion:The extraction efficiency of cordycepin and Cordyceps Polysaccharide was high under the optimum process,and the methods of the content determination were stabile and reliable.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2016(018)002【总页数】5页(P203-207)【关键词】蛹草拟青霉菌丝体;正交试验;虫草素;虫草多糖;高效液相色谱法【作者】黄婷婷;马云淑;阳丹;王维丽;谭麒冉【作者单位】云南中医学院药学院，云南昆明 650500;云南中医学院药学院，云南昆明 650500;云南中医学院药学院，云南昆明 650500;云南中医学院药学院，云南昆明 650500;云南中医学院药学院，云南昆明 650500【正文语种】中文蛹草拟青霉(Paecilomyces mil itaris Liang sp.nov.)是从蛹虫草Cordyceps milltaris(ex Fr)Link中分离而得的一种真菌，现多用作蛹虫草的代用品。
蛹虫草培养基中虫草素分离提取的工艺综述
蛹虫草培养基中虫草素分离提取的工艺综述摘要：查阅了相关文献，对蛹虫草的化学成分及其药理作用、蛹虫草培养基的配制及蛹虫草的栽培作了简介。
对虫草素的物化性质及生理活性作了详细综述，并对虫草素分离提纯在国内外研究动态进行了介绍，从而为从蛹虫草培养基中分离虫草素的新工艺提供了分析资料。
关键词：蛹虫草培养基；虫草素；分离提取一、蛹虫草（一）蛹虫草的化学成分蛹虫草又名北冬虫夏草，与我国名贵中药材冬虫夏草为同属异种，属于真菌界子囊菌门麦角菌科虫草属。
在我国主要分布于吉林、河北、四川、湖南、湖北及山西等省。
北方民间曾把它当作冬虫夏草应用，《新华本草纲要》记载其“性平，味甘，有益肺肾，补精髓，止血化痰”。
用于肺结核、老人虚弱和贫血等症状，为珍贵的中药材。
国内外学者对其化学成分、生理活性进行了较系统的研究，也从中分得了大量单体化合物。
姜泓等从其子实体中分离出7个化合物，分别鉴定为3ˊ-脱氧腺苷，腺苷、N6-甲基腺苷、O5-乙酰基虫草素、N6-[β-（乙酰胺甲酰）氧乙基]腺苷、虫草环肽A和麦角甾醇过氧化物。
实体中还包括虫草酸（D-甘露醇）、虫草多糖等多种有效成分，其中Zn/Cu=4.3，为人参的1.4倍，为黄芪等补益药的2.8倍。
核苷类衍生物是蛹虫草重要的活性成分，虫草素是虫草最重要的活性成分之一，是虫草中的一种腺苷类结构类似物，具有显著的药理作用。
（二）蛹虫草的药理作用蛹虫草由虫草属真菌寄生在鳞翅目、鞘翅目及双翅目的一些昆虫的蛹或幼虫体上，使虫体僵死，抽生出子座而形成的。
对它的药理作用方面，2006年文庭池进行了比较详细的概述，认为蛹虫草具有抗肿瘤、抗氧化、抗衰老等作用。
中医认为，虫草入肺肾二经，既能补肺阴，又能补肾阳，主治肾虚，阳痿遗精，腰膝酸痛，病后虚弱，久咳虚弱，劳咳痰血，自汗盗汗等，是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的中药。
蛹虫草含有8种维生素，具有调节神经系统的作用，对植物神经系统具有外周抗胆碱作用，能降低副交感神经兴奋性。
蛹虫草中虫草素、虫草多糖综合提取工艺研究
蛹虫草中虫草素、虫草多糖综合提取工艺研究
王英娟;李多伟;王义潮;郑婷婷
【期刊名称】《西北植物学报》
【年(卷),期】2005(25)9
【摘要】以蛹虫草为材料,采用超声波水提法、超声波醇提法、水热回流法和醇热回流法4种提取方法选择虫草素和虫草多糖的最优提取方法,并用正交试验方法考察水热回流法中提取温度、提取次数、提取时间、料液比4个因素对虫草素、虫草多糖综合提取效率的影响,以确定从蛹虫草中综合提取虫草素、虫草多糖最佳工艺.结果表明,水热回流法是提取虫草多糖和虫草素的最优提取方法,其最佳工艺条件为:用10倍量的水于80℃热回流提取3次,每次90 min.
【总页数】5页(P1863-1867)
【作者】王英娟;李多伟;王义潮;郑婷婷
【作者单位】西北大学,生命科学学院,西安,710069;西北大学,生命科学学院,西安,710069;西北大学,生命科学学院,西安,710069;西北大学,生命科学学院,西
安,710069
【正文语种】中文
【中图分类】Q949.325
【相关文献】
1.蛹虫草虫草素和虫草多糖综合提取工艺的研究 [J], 祁波
2.正交设计优选蛹草拟青霉中虫草素和虫草多糖的提取工艺 [J], 黄婷婷;马云淑;阳
丹;王维丽;谭麒冉
3.蛹虫草中虫草素、腺苷综合提取工艺研究 [J], 韩建华;杨淑芳;孙继红;任连富;吕贵仁
4.蛹虫草多糖及虫草素的综合提取工艺优化 [J], 吐尔尼散·吐地;张忠;严培兰;周帅;张勉;唐庆九
5.蛹虫草菌渣中虫草素、多糖、多肽综合提取分离的工艺研究 [J], 雷燕妮;张小斌;陈书存;刘长霞;李多伟
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蛹虫草虫草素研究进展
蛹虫草虫草素研究进展蛹虫草（Cordyceps sinensis）是一种珍贵的药用真菌，世界自然保护联盟将其列为濒危物种。
蛹虫草寄生在高原冬虫夏草的干体上，由于其生长条件十分苛刻和寄生范围狭窄，导致其自然产量及采收十分有限，因此价格昂贵。
蛹虫草虫草素是蛹虫草的有效成分之一，具有多种生物活性，对生物的免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、降血糖等方面均有一定的作用。
近年来，蛹虫草虫草素的研究备受关注，本文将对其研究进展进行综述。
1. 蛹虫草虫草素的结构与生物学活性蛹虫草虫草素是一种高分子多糖，具有广谱的生物学活性。
其结构主要分为两大类，分别是α-D-葡萄糖和β-D-葡萄糖类多糖。
此外，蛹虫草虫草素中还含有丰富的氨基酸、三萜类化合物、生物碱等化学成分。
蛹虫草虫草素具有多种生物学活性，包括抗氧化、抗炎、抗肿瘤、免疫调节等方面。
蛹虫草虫草素对肿瘤细胞具有明显的抗增殖作用，可诱导肿瘤细胞凋亡，同时还可抑制新生血管的形成，具有抗肿瘤的潜力。
此外，蛹虫草虫草素还可提高机体免疫力，促进巨噬细胞和T淋巴细胞的活性，有助于抵御病毒和细菌的侵袭。
目前，蛹虫草虫草素的制备与提取方法主要有两个途径，分别是：从天然蛹虫草中提取和通过发酵工艺生产。
从天然蛹虫草中提取蛹虫草虫草素，需要先将其干燥、粉碎成细粉，再使用水、酸、碱等溶剂进行提取。
其中，水提取得到的多糖含量最高，达到了30%左右，但需要较长的提取时间。
而酸、碱提取则可大大缩短提取时间，但会对多糖的结构和生物活性造成不同程度的损失。
通过发酵工艺生产蛹虫草虫草素，可以保证其品质和稳定性。
目前采用发酵生产蛹虫草虫草素的方法有很多，例如利用Aspergillus oryzae、Bacillus subtilis、Penicillium chrysogenum等微生物进行发酵。
不同的发酵条件和菌株会对产物的含量和生物活性产生不同的影响，因此需要对发酵条件进行优化和调整，以获得最佳的生产效果。
蛹虫草虫草素提取工艺的研究
蛹虫草虫草素提取工艺的研究作者：殷东林，陈琼，孙伟来源：《湖北农业科学》 2015年第18期殷东林，陈琼，孙伟（信阳农林学院生物技术系，河南信阳４６４０００）摘要：以蛹虫草［Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ（Ｌｉｎｎ．）Ｌｉｎｋ］子实体为材料，首先通过单因素分析法探索虫草素的最佳提取溶剂，结果表明，７０％乙醇是虫草素的最佳提取溶剂，并通过正交试验考察了微波助提法中微波功率、微波时间、提取次数和料液比４个因素对虫草素提取功率的影响，最终建立了提取虫草素的最佳工艺条件，即微波功率３５０Ｗ，微波处理时间４ｍｉｎ，提取２次，料液比１∶５０（ｇ∶ｍＬ），提取率可达６．８７％。
关键词：蛹虫草［Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ（Ｌｉｎｎ．）Ｌｉｎｋ］；虫草素；正交试验；微波助提法中图分类号：Ｓ５６７．３＋３；Ｒ２８４．２文献标识码：Ａ文章编号：０４３９－８１１４（２０１５）１８－4560-03ＤＯＩ：１０．１４０８８／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ０４３９－８１１４．２０１５．１８．０42ＳｔｕｄｙｏｎＥｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＣｏｒｄｙｃｅｐｉｎｆｒｏｍＣｏｒｄｙｃｅｐｓ mｉｌｉｔａｒｉｓＹＩＮＤｏｎｇ－ｌｉｎ，ＣＨＥＮＱｉｏｎｇ，ＳＵＮＷｅｉ（ＸｉｎｙａｎｇＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｅｓｔｒｙ，Ｘｉｎｙａｎｇ４６４０００，Ｈｅｎａｎ，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＵｓｉｎｇｆｒｕｉｔｉｎｇｂｏｄｉｅｓｏｆＣ．ｍｉｌｉｔａｒｉｓａｓｍａｔｅｒｉａｌ，ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＣｏｒｄｙｃｅｐｓｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎｗａｓｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅｂｅｓｔｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｏｌｖｅｎｔｗａｓｅｘｐｌｏｒｅｄｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒａｎａｌｙｓｉｓ，ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ７０％ｅｔｈａｎｏｌｗａｓｔｈｅｂｅｓｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｏｌｖｅｎｔｏｆｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎ．Ａｎｄｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｔｅｓｔ，ｔｈｅｍｉｃｒｏｗａｖｅａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓｏｆｍｉｃｒｏｗａｖｅｐｏｗｅｒ，ｍｉｃｒｏｗａｖｅｔｉｍｅ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｓａｎｄｍａｔｅｒｉａｌｌｉｑｕｉｄｔｈａｎｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｆｏｕｒｆａｃｔｏｒｓｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎｐｏｗｅｒｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄ，ｆｉｎａｌｌｙｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｐｒｏｃｅｓｓｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅ：ｍｉｃｒｏｗａｖｅｐｏｗｅｒ３５０Ｗ，４ｍｉｎｍｉｃｒｏｗａｖｅｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｔｉｍｅ，ｅｘｔｒａｃｔ２ｔｉｍｅｓ，ｍａｔｅｒｉａｌｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏ１：５０，ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅｃｏｕｌｄｒｅａｃｈｍｏｒｅｔｈａｎ６．８７％．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Cｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ；ｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ；ｍｉｃｒｏｗａｖｅａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ收稿日期：２０１５－０１－２７基金项目：河南省科技攻关项目（１３２１０２１１００４７）作者简介：殷东林（１９８３－），男，河南潢川人，讲师，硕士，主要从事生物技术研究，（电话）１５１０３７６４６２５（电子信箱）ｙｄｌ６６９＠１２６．ｃｏｍ。
虫草多糖的提取
1.前言 蛹虫草 Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｍｉｌｉｔａｒｉｓ （Ｌ）Ｌｉｎｋ．又称蛹草、北虫草、北冬虫夏草， 为真菌界子囊菌亚门 （Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ）、肉座菌目 （Ｈｙｐｏｃｒｅａｌｅｓ）、麦角菌 （Ｃｌａｖｉｃｉｐｉｔａｃｅａｅ）的虫草属，是一种虫生真菌，与冬虫夏草同属异种［１］。 蛹虫草由虫体与从虫头部长出的真菌子座相连而成，虫体似蚕，长 ３－５ｃｍ，直径 ０．３－０．８ｃｍ ；表面深黄色至黄棕色，有环纹 ２０－３０ 个，近头 部的环纹较细；头部红棕色，足 ８ 对，中部 ４ 对较明显；质脆，易折断，断 面略平坦，淡黄白色。子座细长圆柱形，长 ４－７ｃｍ，直径约 ０．３ｃｍ；表面深 棕色至棕褐色，有细纵皱纹，上部稍膨大；质柔韧，断面类白色。气微腥， 味微苦［２］。蛹虫草在世界各地分布广泛，我国的吉林、河北、四川、湖南、 湖北、山西等省均有生长。其子座于春至秋季在半埋于林地上或腐枝落 叶层下的鳞翅目昆虫蛹上长出［３］。 蛹虫草主要有效成分虫草素，结构为 ３＇－ 脱氧腺苷，结构与腺苷相 似替代腺苷。虫草素是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗菌素，分子 量为 ２５１Ｄ，熔点 ２３０－２３１℃，溶于水、热乙醇和甲醇，不溶于苯、乙醚和 氯仿，紫外光的最大吸收波长为 ２５９ｎｍ［４］ 。虫草多糖被认为是一种活性 物质，关于其结构和生物合成已有一定的研究。虫草多糖的生物合成已 经得到了初步的研究，不同培养方式的多糖产率有一定的差异，可以通 过优化培养条件来提高多糖的产量。虫草多糖产业化生产已成了研究 的热点之一［５］。 蛹虫草作为传统珍贵中药材，我国人民对其药用价值早有认识。 蛹虫草人工栽培成功以来，药理和毒理等方面的研究得到了广泛 的开展。研究表明蛹虫草具有与冬虫夏草极相似的作用，无毒副作用， 近年来，随着人们对蛹虫草的滋补保健功效和多种药用价值的认识，其 开发利用研究倍受关注，并在药理、有效成分及人工栽培等各方面取得 了很大的进展。 蛹虫草是一种具有滋补作用的中药和营养品，其所含的虫草素、虫 草多糖具有独特的药理及保健功效：虫草素具有抗病毒、抑菌、明显抑 制肿瘤生长，与环磷酰胺有明显的协同作用，并有降血糖的作用；虫草 多糖具有提高机体免疫功能、免疫调节，抑制肿瘤作用、降血压、抗衰 老、抗疲劳、调节内分泌、抑菌、抗病毒等多种药理作用，长期以来被视 为珍贵的强壮滋补中药和藏药。 近年来蛹虫草受到了广泛关注，并大面积地种植开发，近年来蛹虫 草人工培养及其活性成分的研究才活跃起来， 而人工培养已有大量药 品、保健食品上市。为了更好地开发利用蛹虫草资源，本研究采用正交 试验对蛹虫草中虫草素和虫草多糖综合提取工艺进行了深入研究，为 进一步开发利用提供有价值的参考数据，也将会对今后产品开发研究 具有重要的意义。 2.材料与方法 ２．１ 实验材料、仪器及试剂 ２．１．１ 实验材料 蛹虫草粉末：由江苏虫草种植基地提供，先用样品均在 ７０℃下真空 低温干燥 ５－６ｈ，干燥后粉碎研成粉末，装瓶备用。 ２．１．２ 主要仪器与设备 高效液相色谱仪：日本 ＨＩＴＡＣＨＩ （由 Ｌ－７１１０ 液压恒波泵、Ｌ－７４２０
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9期
王英娟, 等: 蛹虫草中虫草素、虫草多糖综合提取工艺研究
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草素的提取, 故对蛹虫草虫草素、虫草多糖的综合提 取应选择水热回流提取法. 2. 2 虫草素、虫草多糖综合提取条件选择
用水热回流提取法进行 L 9( 34 ) 正交试验, 结果
见表 4; 虫草素、虫草多糖得率直观分析结果分别见 表 5、表 6; 方差分析结果见表 7、表 8.
表 1 正交试验条件 因素
T able 1 T he co ndit ions of the or thog onal test
水平编号 Level code
1 2 3
A 提取温度 A Ext ract ion t emperat ure
( ℃)
60
80
100
B 提取次数 B Ext ract ion
18 64
西 北 植 物 学 报
25 卷
用提供有价值的参考数据.
液, 用水定容至 200 m L .
1 材料与方法
超声波醇提法: 取蛹虫草粉末 2. 50 g, 用 50 mL 50% 乙醇, 超声波提取 30 min, 重复提取 3 次, 合并
1. 1 材料和仪器
滤液, 用 50% 乙醇定容至 200 mL .
3. 256 667 3. 830 000 4. 020 000 372. 916 6 124. 305 5 0. 947 789
m L 蒸馏水, 超声波提取 30 min, 重复提取 3 次, 合
1. 2. 2 单因素确定虫草素最佳提取方法 水热回 并滤液, 以下同上.
流提取法: 取蛹虫草粉末 2. 50 g , 用 50 mL 蒸馏水
超声波醇提法: 取蛹虫草粉末 10. 00 g, 用 100
于 95～100℃热回流提取 2 h, 重复提取 3 次, 合并 m L 50% 乙醇, 超声波提取 30 min, 重复提取 3 次,
摘 要: 以蛹虫草为材 料, 采用超 声波水提法、超声波 醇提法、水热回流 法和醇热回 流法 4 种提 取方法选 择虫草素 和虫草多 糖的最优提取方法, 并用正交 试验方法考 察水热回 流法中提取 温度、提取次数、提取时 间、料液 比 4 个因 素对虫草素、虫草多糖综合提取效率的影响, 以确定从 蛹虫草中综合提取虫草素、虫草多糖最佳工艺. 结果表明, 水 热回流法 是提取虫草多糖和 虫草素的最优提取方 法, 其最佳 工艺条件为: 用 10 倍量 的水于 80℃ 热回流提取 3 次, 每次 90 min. 关键词: 蛹虫草; 虫草素; 虫草多糖; 提取工艺; 正交试验法 中图分类号: Q 949. 325 文献标识码: A
1525 型高效液相色谱系统( 美国 Wat ers 公司) 1. 2. 3 单因素确定虫草多糖最佳提取方法 水热
由 1525 型液压恒波泵、2487 双通道紫外检测器和 回流提取法: 取蛹虫草粉末 10. 00 g 用 10 倍量蒸馏
Br eeze 系统 软 件 组成; 三 用 恒 温 水 浴箱 ( 北 京) ; 水 95～100℃热回流提取 2 h, 重复提取 3 次, 合并
合并滤液, 用 50% 乙醇定容至 200 m L .
度 A、提取次数 B、提取时间 C 及料液比 D) , 分别取
超声波水提法: 取蛹虫草粉末 2. 50 g , 用 50 m L 3 水平对虫草素、虫草多糖综合提取的影响, 以确定
蒸馏水, 超声波提取 30 min, 重复提取 3 次, 合并滤 最佳提取条件. L 9( 34) 正交试验条件因素见表 1.
X 收稿日期: 2004-11-05; 修改稿收到日期: 2005-08-11 基金项目: 陕西省科技攻关项目[ 2004, K -G 12( 7) ] ; 西北大学校基金资助项目( 2005, N W 0036) 作者简介: 王英娟( 1971- ) , 女, 陕西泾阳人, 讲师, 硕士研究生, 从事生物技术研究工作.
Integrated Extracting Technology of Cordycepin and Polysaccharides in Cordycep s militaris
WA NG Ying -juan, L I Duo-w ei, WANG Yi-chao, ZHENG T ing -t ing
蛹虫 草[ Cordy cep s mil itar is ( F r. ) Link. ] , 别 名北虫草, 属子囊菌 亚门( Ascomyx ot inae ) 麦角菌 科 ( Clavicipitaceae) 虫草属[ 1] , 与冬虫夏草 同属,草多糖具有独特的药理及保健功效: 虫草素具 有抗病毒、抑菌、明显抑制肿瘤生长, 与环磷酰胺有
( College of Lif e S ciences, N ort hw es t U n ivers ity , X ipan 710069, Chin a)
Abstract: Supersonic w at er ex t ract ion, supersonic et hanol ex tract io n, hy drot hermal ref lux ing ext ract ion and ethanol t hermal ref lux ing ex t ract ion were screened w it h Cordy cep s mili tari s t o f ind out w hich of t hem w ould be t he opt im al m et hod t o ex tr act cordy cepin and poly saccharides and an ort hogo nal ex periment w as carr ied out t o study t he integr at ed ef fect s of the t em perat ure, number , period, raw mat er ial -ex tr act ing solutio n rat io of hydr ot herm al ref luxing ext ract io n on t he ex tr act ing r ates o f cordycepin and po lysaccharide and t hus f ind out t he best int eg rat ed t echno logy t o ex t ract cordycepin and po lysaccharide f rom Cordycep s militar is. T he result s show ed t hat hydrot her mal r ef luxing ex t ract ion w as t he best ex t ract ion m et hod of cordycepin and poly saccharide and it s opt imal t echnolo gical condit io ns w ere t hat t he ex tract io n w ere run t hr ee t imes w it h t he raw m at erial-w at er ratio at 1/ 10 and it last ed 90 minut es each t im e. Key words: Cordy cep s mil itar is; cor dycepin; pol ysaccharide; ext racting technolo gy; ort ho gonal ex periment
滤液, 用水定容至 200 m L .
合并滤液, 以下同上.
醇热回流提取法: 取蛹虫草粉末 2. 50 g , 用 50 1. 2. 4 虫草素、虫草多糖最佳提取条件 用正交试
mL 50% 乙醇 80℃热回流提取 2 h, 重复提取 3 次, 验法 L 9( 34) 对水热回流提取法中 4 个因素( 提取温
超声萃取器.
馏水溶解, 并定容于 50 mL 容量瓶中( 用于测定虫
蛹虫 草由江 苏虫 草种植 基地 提供, 样品 均于 草多糖) . 所有乙醇上清液合并, 并用水定容至 200
70 ℃干 燥后研 成粉 末待 用.
m L ( 用于测定虫草素) .
虫草素对照品为 Sigm a 公司产品; 所有化学试
醇热回 流提取 法: 取 蛹虫草 粉末 10. 00 g, 用
明显的协同作用, 并有降血糖的作用; 虫草多糖具有 提高机体免疫功能, 抑制肿瘤作用[ . 2～ 5] 近年来蛹虫 草受到了广泛关注, 并大面积地种植开发, 已有大量 药品、保健食品上市. 为了更好地开发利用蛹虫草资 源, 本研究采用正交试验对蛹虫草中虫草素、虫草多 糖综合提取工艺进行了深入研究, 为进一步开发利
剂均为分析纯.
100 mL 50% 乙醇 80℃热回流提取 2 h, 重复提取 3
1. 2 方 法
次, 合并滤液, 以下同上.
1. 2. 1 分析测 试方法 用 HP L C 法测虫 草素含
超声波水提法: 取蛹虫草粉末 10. 00 g, 用 100
量[ 6] , 用苯酚-硫酸法测虫草多糖含量[ 7] .
SHZ-95 型循环水真空泵( 河南) ; UV -265 型分光光 滤液, 减压浓缩至 1∶1( w / v) , 冷却后加入 3 倍量乙
度计( 日本 Shimadzu 公司) ; RE-52A 型旋转薄膜蒸 醇使其沉淀, 浸出上清液, 沉淀再加少量水溶解, 加
发器( 上海) ; JA2003 型电子天平( 上海) ; HS3120 型 入 2 倍量使其沉淀, 重复 3 次, 将最后的沉淀物用蒸
西北植物学报, 2005, 25( 9) : 1863—1867 Acta Bot. Boreal. -Occident . Sin.