大肠杆菌生长曲线实验报告
大肠杆菌生长曲线实验报告
测定微生物的数量有多种不同的方法，可根据要求和实验室条件选用。本实验用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与光密度（OD值）成正比，因此可利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度，并将所测的OD值与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线，此法快捷、简单。
测量时要等数字变化不大时再读取，可以读三次，最后取平均值，这样能保证实验结果更加准确。
721型分光光度计要先预热，实验过程中最好使用同一台仪器，同一个比色皿，这样可以减少仪器误差，分光光度计的使用操作要规范。比色皿经蒸馏水清洗后，必须经待测样品润洗。比色皿的毛面用吸水纸擦干，而光面只能用吸水纸吸干，以免光面被划破。比色皿用擦镜纸擦干净，上面不要残留有纸纤维和水珠等。
延迟期：又叫调整期。细菌接种至培养基后，对新环境有一个短暂适应过程（不适应者可因转种而死亡）。此期曲线平坦稳定，因为细菌繁殖极少延迟期长短因素种、接种菌量、菌龄以及营养物质等不同而异，一般为1～4小时。此期中细菌体积增大，代谢活跃，为细菌的分裂增殖合成、储备充足的酶、能量及中间代谢产物。
对数生长期：又称指数期。此期生长曲线上活菌数直线上升。细菌以稳定的几何级数极快增长，可持续几小时至几天不等（视培养条件及细菌代时而异）。此期细菌形态、染色、生物活性都很典型，对外界环境因素的作用敏感，因此研究细菌性状以此期细菌最好。抗生素作用，对该时期的细菌效果最佳。
改进措施:在试验过程中应严格按照标准的操作要求，在上述步骤时更加应该规范操作。
指导教师评语及评分：
签名：
年 月 日
2.营养肉汤培养基灭菌:将步骤一包好的培养基置于高压蒸汽灭菌锅121℃灭菌30min.
大肠杆菌生长曲线测定
大肠杆菌生长曲线测定一、目的要求了解大肠杆菌生长曲线的基本特征，从而认识微生物在一定条件下生长、繁殖的规律。
二、基本原理一定量的微生物，接种在适合的新鲜液体培养基中，在适宜的温度下培养，以菌数的对数作纵坐标，生长时间作横坐标，做出的曲线叫生长曲线。
一般可分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期四个时期。
不同的微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。
因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。
测定微生物生长曲线的方法很多，有血球计数法、平板菌落计数法、称重法、比浊法等。
本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可利用光电比色计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度，并将所测得的光密度值（OD值）与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
现已有直接用试管就可以测定OD值的光电比色计（图Ⅶ-10），只要接种一支试管，定期用它测定，便可做出该菌的生长曲线。
三、器材培养18—20小时的大肠杆菌培养液，盛有5ml肉膏蛋白胨液体培养基的大试管12支；72型或72．1型分光光度计，自控水浴振荡器或摇床，无菌吸管等。
四、操作步骤1．编号取11支盛有肉膏蛋白胨液体培养基的大试管，用记号笔标明培养时间，即0、1．5、3、4、6、8、10、12、14、16、20小时。
2．接种用1ml无菌吸管，每次准确地吸取0．2ml大肠杆菌培养液，分别接种到已编号的11支肉膏蛋白胨液体培养基大试管中，接种后振荡，使菌体混匀。
3．培养中心以化工行业技术需求和科技进步为导向，以资源整合、技术共享为基础，分析测试、技术咨询为载体，致力于搭建产研结合的桥梁。
以“专心、专业、专注“为宗旨，致力于实现研究和应用的对接，从而推动化工行业的发展。
将接种后的11支试管置于自控水浴振荡器或摇床上，37℃振荡培养。
分别在0、1．5、3、4、6、8、10、12、14、16、20小时将编号为对应时间的试管取出，立即放冰箱中贮存，最后一同比浊测定光密度值。
实验五用大肠杆菌生长曲线的测定
优点：简便快速，适合于自动控制。 缺点：测定结果受培养液成分影响；某些样品 样品不适合用此法。
三、实验器材
菌种 培养不同时段的大肠杆菌。
仪器பைடு நூலகம்其他用具 分光光度计，比色皿等。
30，40，50，60 min）、自来水和橙汁 微生物的测定。（1种/人）
本次实验完
比色皿经蒸馏水清洗后，必须经待测样 品润洗。比色皿的毛面用吸水纸擦干，而光 面只能用吸水纸吸干，以免光面被划破。
比色皿之间吸光度进行比较。
四、实验结果
记录不同大肠杆菌培养液的OD600值， 并绘制大肠杆菌的生长曲线。
培养时间 （h）
光密度值 OD600
4 8 12 16 20 24
五、思考题
•光电比浊计数的原理是什么？这种计数法有何 优缺点？ •如果用活菌计数法制作生长曲线，你认为会有 什么不同？两者各有什么优缺点？
实验67 水、环境中微生物的测定 一、实验目的
比较不同场所和不同条件下细菌的数量和 类型。
观察不同类群微生物的菌落形态特征。 体会无菌操作的重要性。 掌握水和环境中微生物的测定方法。 检测污染水域微生物的类型和数量。
二、实验原理
应用平板菌落计数技术测定污染水的细菌 总数。由于细菌种类繁多，不可能找到一 种培养基在一种条件下，使所有的细菌均 能生长繁殖。因此，计算出来的细菌总数 仅是一种近似值。
通过细菌数量的测量了解大肠杆菌的生物特征和规律绘制生长曲线实验31大肠杆菌生长曲线的测定一实验目的生长曲线将少量纯种单细胞微生物接种到定量的液体培养基中定时取样测定细胞数量以培养时间为横坐标以菌数为纵坐标作图得到一条反映单细胞微生物在整个培养期间菌数变化规律的曲线二实验原理一个典型的生长曲线分为延缓期对数期稳定期和衰亡期四个时期微生物数量的测定方法稀释平板计数法显微镜直接计数法最大概率法光电比浊法稀释平板计数法对样品
大肠杆菌生长曲线实验报告
大肠杆菌生长曲线实验报告抗生素能破坏细菌细胞壁的结构，使细菌的繁殖和生长受到抑制。
但某些细菌对抗生素表现出抗性，原因是其基因发生了改变，产生能抵抗抗生素的性状。
在自然情况下，细菌的基因突变率很低，而且突变是不定向的，因此在自然条件下，想要获得有抗性的细菌是很困难的。
当给与适当的物理条件时，其突变率会大大增加。
如当用α射线、β射线、γ射线、Χ射线、中子和其他粒子、紫外线、微波等物理因素辐射时，能够促进遗传物质突变。
DNA对紫外线（UV）有强烈的吸收作用，尤其是碱基中的嘧啶，它比嘌呤更为敏感。
紫外线引起DNA 结构变化的形式有DNA链断裂、碱基破坏、胸腺嘧啶二聚体等。
因此，紫外线通常作为诱变剂，用于微生物菌种选育。
一般细胞分裂越旺盛，诱变剂量越大，突变率高，诱变最有效的波长253~265 nm。
选择合适的诱变剂量对于获得较高突变率十分关键，过高或过低的辐射剂量会导致菌株死亡或诱变不充分而降低诱变效果。
在紫外线诱变下，菌株发生不定向的突变，想要得到需要的特向变异必须对诱变后的菌株做筛选。
本实验想要得到的是能够抵抗抗生素的菌株，因此可以用抗生素培养基作为筛选培养基对菌种进行筛选。
若菌株没有发生定向突变，则该菌株不能在抗性培养基上正常生长，只有发生了定向突变才可能在筛选培养基上正常生长。
紫外线对于菌株有诱变作用外，对菌株还有较强的致死作用，因为紫外线改变了菌株的基因结构导致菌株无法正常生长繁殖。
因此，通过本实验的操作，在合适的照射剂量的设置下，比较不同不同照射剂量下的致死效果和突变率，并初步分析两者的相关性。
在分析死亡曲线和诱变率曲线的基础上，能了解诱变育种的机理和方法，为做进一步的诱变实验做准备。
2.材料和方法2.1实验材料、仪器和试剂菌种：大肠杆菌仪器：超净台、离心机、高压灭菌锅、培养箱、磁力搅拌器、培养皿、涂布器、移液管、移液器试剂：牛肉膏蛋白胨培养基相关试剂、硫酸卡那霉素水溶液（50mg/ml）、生理盐水2.2实验方法2.2.1制备培养基普通培养基——牛肉膏蛋白胨培养基（400ml）：牛肉膏5g蛋白胨10g Nacl 5g琼脂20g蒸馏水1000ml Ph7.0 按配方配制好培养基后置于灭菌锅中115℃15min，倒平板，4皿*15ml*5组+2皿*15ml=22皿*15ml=330ml筛选培养基(200ml)：含抗生素50mg/L。
大肠杆菌细胞生长曲线的测定实验报告思考题
大肠杆菌细胞生长曲线的测定实验报告思
考题
在大肠杆菌细胞生长曲线的测定实验报告中，以下是一些可能的思考题：
1. 实验结果显示大肠杆菌细胞在培养基中的生长呈现出典型的生长曲线，包括潜伏期、指数期、平台期和死亡期。
这种生长曲线的形成是由什么因素引起的？
2. 在实验中，为了测定大肠杆菌细胞的生长曲线，我们选择了什么样的培养基和培养条件？这些选择是否对实验结果产生了影响？
3. 在实验过程中，我们通过测量光密度或细胞数量来确定大肠杆菌细胞的生长情况。
这种测量方法可能存在的缺陷是什么？有没有更准确的测量方法可以应用于该实验？
4. 实验中，我们还讨论了大肠杆菌细胞生长的影响因素，如温度、pH值和营养成分等。
在未来的研究中，我们可以采取哪些控制变量的方法来深入探究这些影响因素对大肠杆菌细胞生长的具体影响？
5. 大肠杆菌细胞生长曲线的测定在哪些领域有广泛的应用？如何利用实验结果来研究和解决实际问题，比如食品安全、环境污染等？
这些思考题可以帮助你对实验结果进行进一步的思考和讨论，深化对大肠杆菌细胞生长曲线的理解并应用于更广泛的领域。
大肠杆菌生长曲线实验报告-xiang
E.coli growth curve measurement一、目的1、瞭解細菌生長曲線特徵，測定細菌繁殖的代時；2、學習液體培養基的配製以及接種方法；3、反復練習無菌操作技術；4、瞭解不同細菌，不同接種方法在同一培養基上生長速度的不同；5、掌握利用細菌懸液混濁度間接測定細菌生長的方法6、複習光電比濁法測量細菌數量的方法7、學習平板塗布技術二、原理1、大腸桿菌生長：將一定量的細菌接種在液體培養基內，在一定條件下培養，可觀察到細菌的生長繁殖有一定的規律性，如以細菌的活菌數的對數作縱坐標，以培養時間作橫坐標，可繪成一條曲線，成為生長曲線（如圖一）。
圖一微生物生長曲線示意圖單細胞微生物的發酵具有四個階段，即Ⅰ調整期（延滯期）、Ⅱ對數期（生長旺盛期）、Ⅲ平衡期（穩定期）、Ⅳ死亡期（衰亡期）。
生長曲線可表示細菌從開始生長到死亡的全過程的動態。
不同的微生物有不同的生長曲線，同一種微生物在不同的培養條件下，其生長曲線也不一樣。
因此，測定微生物的生長曲線對於瞭解和掌握微生物的生長規律是很有幫助的。
測定微生物生長曲線的方法很多，有血球計數板法、平板菌落計數法、稱重法和比濁法等。
本實驗採用比濁法測定，由於細菌懸液的濃度與混濁度成正比，因此，可利用分光光度計測定細菌懸液的光密度來推知菌液的濃度。
將所測得的光密度值（OD600）與其對應的培養時間作圖，即可繪出該菌在一定條件下的生長曲線。
注意，由於光密度表示的是培養液中的總菌數，包括活菌與死菌，因此所測定的生長曲線的衰亡期不明顯。
2、平板塗布技術：塗布法接種是一種常用的接種方法，不僅可以用於計算活菌數，還可以利用其在平板表面生長形成菌苔的特點用於檢測化學因素對微生物的抑殺效應。
原理:將一定濃度，一定量的待分離菌懸液加到已凝固的培養基平板上，再用塗布棒快速地將其均勻塗布，使長出單菌落或菌苔而達到分離或計數的目的。
其目的:用於目的微生物的分離；用於藥物的抑菌試驗；觀察菌苔的形狀和特點。
实验4测定细菌生长曲线
测定（OD）
每小时吸取200ul培养液到2800ul蒸馏水中摇匀， 以蒸馏水为对照，选420nm波长进行光密度（OD 值）的测定（注意应测定0h的光密度值）。
每台分光光度计固定在1个参比杯，每人只能在同 一台分光光度计上测量（注意波长调好后，不要动 波长旋钮）。
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六、结果与讨论
1）绘制大肠杆菌和枯草杆菌在两种接种方法下的生长曲线。 （标出生长曲线中四个时期的位置和名称）
2）为什么用比浊法测定的细菌生长只是表示细菌的相对生长状 况？
3）生长曲线中为什么会出现稳定期和衰退期？在生产实践中怎 样缩短延迟期？怎样延长对数期及稳定期？怎样控制衰退期？
4）接种时种子在什么条件下为宜，液体种子比斜面种子为什么 优越？
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实验4、测定细菌生长曲线
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一、识微生物在一定条 件下生长繁殖的规律。
2.掌握用细菌悬液的浑浊度间接测定细菌生长的方 法。
3.学习液体培养基的配制及接种方法。
二、 实验内容
测定大肠杆菌、枯草杆菌的生长曲线
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三、实验原理
将一定量的细菌接种在液体培养基内，一定条件下 培养，细菌的生长繁殖具有一定的规律性。 以细菌活菌数的对数作纵坐标，培养时间作横坐标， 可绘成一条曲线，称为生长曲线。
• 将所测的光密度值（OD）与其对应的培养时间作图， 即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线（注意：由于 光密度表示的是培养液的总数，包括活菌与死菌所测 的生长曲线衰亡期不明显）。
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微生物的典型生长曲线图 Ⅰ.延滞期，Ⅱ.指数期，Ⅲ.稳定期，Ⅳ.衰亡期
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四、实验仪器、材料和用具
仪器： 摇床、分光光度计、取液器。
细菌的生长曲线分为：迟缓期、对数期、稳定期和 衰退期。其表示细菌从开始生长到死亡全过程的动 态。测定微生物的生长曲线对于了解和把握生物的
实验十二 大肠杆菌生长曲线的测定
测OD 值
五 实验结果与讨论
1.绘图 绘制大肠杆菌的生长曲线。 2.思考题 （1）影响细菌生长曲线走向的因素有哪些？ （2）比浊法和平板计数法绘出的生长曲线有 何区别？哪个方法更科学？
为纵坐标绘出生长曲线。
本实验利用细菌数量与菌悬液的浊度 （OD值）成正比这一规律，用721分光光度 计测生长曲线。
三 实验器材与仪器
1.菌种：大肠杆菌
三 实验器材与仪器
2.培养基：LB培养基 3.仪器和其他用具：
恒温振荡培养箱
721分光光度计
四 操作步骤
接种
试管 编号
培养
测 520nm 处最大 吸收值
细菌生长的规律和生长曲线的测定原 理。 • 学习光电比浊法测定大肠杆菌的生长曲线。
二 基本原理
在适宜条件下培养细胞要经历延迟期、 对数期、稳定期和衰亡期四个阶段
二 基本原理
实验中每隔一定时间测定培养液的菌量，
一培养时间为横坐标，以细菌数目的对数
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一、实验方案设计
实验数据原始记录：
随时间的变化大肠杆菌液吸光度的数据（括号内数字表示稀释倍数）
3.5
曲线图时间/h 0 1 3.75 6 7 8 8.5 9 10
OD600 0.073 0.073 0.079 0.282 0.456 1.105 1.168 1.662 2.284
时间/h 11 12 13 14 18.33 20.5 23 24
OD b。
2.564 2.016 3.020 2.605 3.315 2.860 3.024 3.324
时间/h 0 1 3.75 6 7 8 8.5 9 10 11 13 18.33 20.5 0应0 0.073 0.073 0.079 0.282 0.456 1.105 1.168 1.662 2.284 2.564 3.020 3.315 2.86
时间/h 0 1 3.75 6 7 8 8.5 9 10 11
OD6b0 0.073 0.073 0.079 0.282 0.456 1.105 1.168 1.662 2.284 2.564
前小时的大肠杆菌的吸光度数据
六•参考文献
前12小时的大肠杆菌的生长曲线图
[1] .牛天贵•食品微生物学实验技术•第1版•北京：科学出版社，2010.
[2] .杨革.微生物学实验教程.第2版.北京：科学出版社，2010.
[3] .何国庆，贾英民，丁立孝等.食品微生物学.第2版.北京：中国农业大学出版社，2009.
[4] .周德庆，胡宝龙.微生物学实验教程.第2版.北京：高等教育出版社，2006.
七•教师对实验方案设计的意见
签名：
年月日
、实验报告
宴验现象验现象、实验结果的分析及其结论
分随着培养时间的增加，培养基里的液体变得越来越混浊，所散发出来的味道也越来越浓，味道很难闻。
实验结果随着培养时间的增加，培养基里的液体变得越来越混浊，所散发出来的味道也越来越浓，味道大肠杆菌难培养基因为大肠杆菌增长迅越来越后来数量达一定数量后此时培养基内的营养物质已被进行营尽，养和空间肠杆菌进行营些大肠杆间的死亡争，最后数量肠杆菌死亡，直最后数量不断减尙，。
直至变为0。
②通过对大肠杆菌生长曲线的测定，了解了细菌生长
的特点，是：刚开始时细菌缓慢增长，后来增
长迅速，呈“ J”型，最后细菌生长缓慢，数量达到顶峰，在一段时间内保持不变。
因实验测量的时间不够合理等各种因素，因此用原始数据绘制出来的大肠杆菌的生长曲线图不够有规律，经修正后生长曲线比较好。
结论:
细菌的生长曲线分为延缓期、生长期、稳定期和衰亡期。
体内及自然界细菌的生长繁殖受机体
免疫因素和环境因素的多方面影响，不会出现象培养基中那样典型的生长曲线。
掌握细菌生长规律，可有目的地研究控制病原菌的生长，发现和培养对人类有用的细菌。
这4个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所不同。
因此通过测定微生物的生长曲线，可了解细菌的生长规律，对于科研和生产都具有重要的指导意义。
实验总结
1 •本次实验成败及其原因分析
总的来说，本实验算是成功的。
在一定程度生探讨出了大肠杆菌生长曲线的测定。
通过此次试实验，了解了细菌生长的特点，综合训练了微生物实验的基本实验技能。
巩固培养基的配制、灭菌、仪器的包扎、倒平板。
在一定程度上掌握了用比浊法测定细菌的生长曲线的方法。
但有两点不足：一是一开始忽略了0D值必须在0.10-0.65 之间才有效；二是时间的间隔不太合理，开始的阶段应该时间安排紧密一点，还有晚上的一段数据没有测，实验时间不够长，延迟期和衰亡期曲线不明显。
实验中若能考虑全面，这样测出来的数据才更有代表性，更加准确。
2 •本实验的关键环节及改进措施
本试验的关键环节有以下四点：
①整个过程最好是在无菌操作台上操作，这样培养基受空气中微生物的影响就较小，同时也可以减少污
染，保证培养基里大肠杆菌纯度较高，否则会在一定程度上影响结果的准确性。
②每隔半小时或一个小时（测量时间要安排合理，时间要控制好：在实验初期30min对菌悬液进行一次测
定。
实验中期每小时测一次，后期1〜2小时测定一次，依次持续到20小时后。
）从恒温摇床取出锥
形瓶，用无菌移液管移取少量，操作要快，先进行预测，OD值应在0.10-0.65 之间，如果超过这个
范围则需要进行稀释后再测量。
③测量时要等数字变化不大时再读取，可以读三次，最后取平均值，这样能保证实验结果更加准确。
④721型分光光度计要先预热，实验过程中最好使用同一台仪器，同一个比色皿，这样可以减少仪器误差，分光光度计的使用操作
要规范。
比色皿经蒸馏水清洗后，必须经待测样品润洗。
比色皿的毛面用吸水纸擦干，而光面只能用吸水纸吸干，以免光面被划破。
比色皿用擦镜纸擦干净，上面不要残留有纸纤维和水珠等。
改进措施：在试验过程中应严格按照标准的操作要求，在上述步骤时更加应该规范操作。
指导教师评语及评分：
签名：
年月日。