实验1-叶绿体的分离与荧光分析

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叶绿体的提取与荧光观察

叶绿体的提取与荧光观察

叶绿体的次生 荧光的来由, 橘红色为叶绿 体的荧光效果 黑色部分来自 叶绿体悬液中 混有的细胞核 碎片中的DNA 和RNA,经吖
应,故观察到 斑状分布的火 红色荧光效 果。
啶橙染色荧光 反应呈现绿 色。.
六)注意事项 1、叶绿体的分离应在等渗溶液(0.35mol/L氯化钠)中进行,以免渗透压的 改变使叶绿体受到损伤。 2、分离过程最好在0~5℃的条件下进行;如果在室温下,要迅速分离和 观察。 3、离心机使用:离心管要平衡 4、凡是荧光染料都有一定毒性,请做好防护 5、在荧光观察时应抓紧时间,有必要时立即拍照。 6、在制作荧光显微标本时最好使用无荧光载片、盖片和无荧光油。 7、汞灯开启后15min内不要关闭,关闭后3min内不要开启。
叶绿体的分离与荧光观察
一)实验目的: 1.通过植物细胞叶绿体的分离,了解细胞器分离的一般原理和方法。 2.观察叶绿体的自发荧光和次生荧光,并熟悉荧光显微镜的使用方法。 二)实验原理:
细胞器分离的过程包括两个主要阶段:破碎细胞和细胞组分的分 离。在等渗溶液中进行组织匀浆、分离,叶绿体的分离采用差速离心或 密度梯度 光(次生/诱发荧光)。离心分离技术是分离细胞组分和生物大分子最 常用的分离方法,因为不同的细胞器和分子有不同的体积和密度,可在 不同离心力不同介质沉降分离。
三)实验用品
材料: 菠菜叶片 试剂:蒸馏水,0.35mol/L氯化钠溶液,0.01%吖啶橙(AO) 仪器:普通离心机,组织捣碎机,天平,荧光显微镜,显微镜,镊子, 培养皿,纸,移液管,滴管,烧杯,无荧光载片,盖玻片,离心管,吸 水纸等 四)实验步骤: 1、叶绿体悬浮液的制备 菠菜叶片(去叶脉)3g → 0.35mol/L氯化钠15ml→研磨→匀浆过滤(6层纱 布)→滤液在1000r/min离心2min→弃沉淀,上清液3000r/min离心5min → 去上清液→沉淀为叶绿体(混有部分细胞核),用0.35mol/L氯化钠溶液悬 浮 →滴片观察 2、叶绿体的显微与荧光观察 取叶绿体悬液1滴置于载玻片上,加盖玻片后用分别用普通光学显微镜 观察叶绿体的形态结构和荧光显微镜观察自发荧光。 将叶绿体悬液滴在无荧光的载玻片上,再滴加1滴0.01%吖啶橙荧光染

叶绿素的提取与分析测定

叶绿素的提取与分析测定

植物叶绿体色素的分析一、实验目的:1、学会叶绿体色素的分离方法。

2、掌握叶绿素的定量测定。

一、3、了解高等植物叶绿体色素的种类组成、性质。

二、实验原理:1、叶绿体色素的提取:(1)原理:叶绿体色素是植物捕获太阳能进行光合作用的重要物质,高等植物的叶绿体色素一般由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素等组成。

叶绿体色素的提取是利用叶绿体色素能溶于有机溶剂的特性,将待测的植物叶片用研钵研磨让植物组织破碎,利用丙酮的溶解能力将叶绿体色素溶于丙酮中,通过用滤纸过滤分离植物组织碎片,即可以得到叶绿体色素的丙酮粗提液。

(2)步骤:称取新鲜的植物叶子(菠菜等)4g,放入研体中加5ml80%丙酮,少许碳酸钙和石英砂,研磨成匀浆,再加入20ml丙酮,以漏斗过滤到棕色瓶中备用2、叶绿体色素的分离:(1)原理:叶绿体色素的分离提纯一般用层析的方法,其中纸层析是最简单的一种。

当溶剂不断地从纸上流过时,由于混合物中各成分在流动相和固定相间具有不同的分配系数,引起它们的移动速度不同,因而使混合物分离。

(2)步骤:1)取滤纸条(6.5×30cm),在离纸边1.5cm处用铅笔划一直线,在另一端两角分别拴上一根线(见图1),用毛细管取吸绿素提取液沿着铅笔线划一条样带,使样带宽度在3mm以内,如色素过淡用电吹风吹干后再点数次,直到样带呈深绿色为止。

2)在层析缸中加入四氯化碳20ml及少许无水硫酸钠,然后将滤纸吊在层析缸中,使下端浸入溶剂中,色素点要略高于液面,滤纸条边缘不可碰到层析缸璧(如图2)用聚乙烯薄膜两层封住层析缸,直立于暗处层析。

3)0.5小时后,观察色素带分布(最上端是橙黄色的胡萝卡素,其次是黄色的叶黄素,然后是兰绿色的叶绿素a和黄绿色的叶绿素b),记录色谱图。

如图所示:3、叶绿体色素的性质(一)荧光现象:叶绿体色素在吸收光能以后可以从基态跃迁到激发态,当处于第一单线态(激发态)的电子再回到基态时其携带的能量将以光的形式放射出来产生荧光,叶绿素荧光的颜色是红色的。

叶绿体测定实验报告

叶绿体测定实验报告

一、实验目的1. 学习叶绿体色素提取和分离的方法。

2. 掌握叶绿体色素的理化性质和定量分析方法。

3. 了解叶绿素在植物光合作用中的作用。

二、实验原理叶绿体是植物细胞中进行光合作用的细胞器,其中含有多种色素,包括叶绿素、类胡萝卜素等。

叶绿素主要吸收红光和蓝紫光,类胡萝卜素主要吸收蓝紫光。

通过测定叶绿体色素的吸收光谱,可以了解叶绿素的含量和种类。

本实验采用分光光度法,利用95%乙醇提取植物叶片中的叶绿体色素,然后通过层析法分离叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素,最后测定各色素的浓度,以了解叶绿素的含量和种类。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜叶片、番茄叶片2. 实验仪器:分光光度计、研钵、漏斗、100ml三角瓶、玻璃棒、层析柱、层析板、毛细管、剪刀、镊子、滤纸、吸水纸、移液管、量筒、电子天平四、实验步骤1. 提取叶绿体色素(1)将新鲜菠菜叶片和番茄叶片分别洗净、晾干,剪成小块。

(2)将菠菜叶片和番茄叶片分别称取0.1g,放入研钵中。

(3)加入少量石英砂和碳酸钙粉,再加入3~5ml 95%乙醇。

(4)研磨至组织变白,继续研磨3~5min。

(5)将提取液倒入100ml三角瓶中,用玻璃棒搅拌均匀。

2. 分离叶绿体色素(1)将层析板固定在层析柱上,将滤纸剪成适当大小,覆盖在层析板上。

(2)用移液管吸取少量提取液,用毛细管滴加在层析板上,形成一条细线。

(3)将层析柱置于黑暗环境中,用移液管加入适量无水乙醇,使层析板上的色素溶解并开始分离。

(4)观察层析板上的色素带,分别收集叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素。

3. 测定叶绿体色素浓度(1)将收集到的叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素分别置于100ml容量瓶中。

(2)用移液管加入适量95%乙醇,定容至刻度线。

(3)将溶液倒入比色杯中,用分光光度计在特定波长下测定吸光度。

(4)根据吸光度计算叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的浓度。

五、实验结果与分析1. 叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的吸收光谱图根据实验结果,绘制叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的吸收光谱图,分析各色素的吸收特性。

叶绿体的分离与荧光观察

叶绿体的分离与荧光观察

04 实验操作流程
实验材料准备
01
02
03
新鲜植物叶片
选择健康、无病虫害的植 物叶片,如菠菜、豌豆等。
实验试剂
包括分离液、荧光染色剂、 缓冲液等。
实验仪器
包括离心机、显微镜、染 色皿、吸管等。
叶绿体的分离
将新鲜叶片洗净,剪成小段, 放入离心管中。
加入适量的分离液,轻轻摇晃 ,使叶片充分浸泡在分离液中
荧光显微镜的工作原理和使用方法
工作原理
荧光显微镜利用特定波长的光激发细 胞内荧光染料或荧光探针发出可见光 ,通过光学系统放大并显示在屏幕上 。
使用方法
使用荧光显微镜时,需要先对样本进 行染色或标记,然后将其置于显微镜 下观察。观察时需要调整光源和滤光 片,以获得最佳的荧光效果。
荧光观察技术在叶绿体研究中的应用
叶绿体形态观察
荧光染料或荧光探针可以标记叶 绿体,通过荧光显微镜观察叶绿
体的形态、数量和分布情况。
叶绿体功能研究
荧光染料或荧光探针可以结合叶绿 体中的色素或蛋白质,通过观察荧 光信号的变化来研究叶绿体的功能 和代谢过程。
叶绿体动力学研究
利用荧光探针标记叶绿体,可以观 察叶绿体的运动和分布情况,了解 其在细胞内的动力学特征。
荧光观察
在荧光显微镜下观察叶绿体,发现叶绿体发出强烈的绿色荧光,表 明叶绿体含有丰富的叶绿素。
细胞壁与细胞质的分离
通过实验操作,成功将细胞壁与细胞质分离,便于后续实验的进行。
结果分析
1 2
叶绿体分离效果
实验结果表明,采用离心和密度梯度离心法能够 获得较为纯净的叶绿体,分离效果较好。
荧光观察的意义
荧光观察能够直观地展示叶绿体的存在和状态, 对于研究叶绿体的功能和结构具有重要意义。

高中生物实验 叶绿体的分离和荧光观察 实验报告

高中生物实验 叶绿体的分离和荧光观察 实验报告

实验十一叶绿体的分离和荧光观察一.实验目的了解细胞匀浆和差速离心分级分离细胞组分的原理。

了解提取叶绿体的基本原理及其过程,通过光学显微镜的观察了解体外分离的叶绿体的一般形态,增加对叶绿体的感性认识。

掌握吖啶橙染色叶绿体的方法。

掌握显微数码拍照的方法。

二.实验内容提取叶绿体,吖啶橙染色,观察染色结果。

显微数码拍照。

三.实验原理将组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心,是分离细胞器的常用方法。

在一定的离心场中,同一时间内,密度和大小不同的颗粒其沉降速度不同。

依次增加离心力和离心时间,就能够使非均一悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部。

叶绿体的分离应在等渗溶液(0.35mol/LNacl或0.4mol/L 蔗糖溶液)中进行。

离心后可得沉淀的叶绿体。

四.实验方法与步骤1.取嫩叶3g,洗净去柄去叶脉,剪碎放入研钵中。

2.加4ml0.35mol/LNacl,研磨匀浆,尼龙布过滤于离心管中1ml。

3.1000rpm离心2分钟弃去沉淀。

4.3000rpm离心15分钟,弃去上清液,将沉淀用少量0.35mNacl悬浮。

5.提取叶绿体观察:①普通光镜②荧光光镜③加吖啶橙。

6.撕取叶表皮观察:①普通光镜②荧光光镜③加吖啶橙。

a.在普通光镜下,可看到叶绿体为绿色椒榄形,在高倍镜下看到叶绿体内部含有较深的绿色的绿色小颗粒即基粒。

b.在荧光显微镜下,叶绿体发出火红色荧光。

c.加入吖啶橙染后,叶绿体可发也桔红色荧光。

而其中混有的细胞核发出绿色荧光菠菜叶手切片观察。

d.在普通光镜下可以看到三种细胞:表皮细胞:为边缘吐锯齿表的鳞片状细胞。

保卫细胞:为构成气孔的成对存在的肾形细胞。

叶肉细胞:为排成栅状的长形和椭圆形细胞。

5.显微数码拍照。

五.实验结果。

叶绿体色素的提取分离及理化性质检测实验报告

叶绿体色素的提取分离及理化性质检测实验报告

实验名称:叶绿体色素的提取、分离、理化性质系别:机械工程系班级:机械11实验者:潘霖学号:2011010389同组姓名:肖鹤翀实验日期:2011.10.22Ⅰ提取与分离一、实验目的:1.学习应用薄层色谱法分离叶绿体色素的实验方法。

2.了解叶绿素的组成、性质和测定叶绿素有助于理解光合作用的本质。

二、实验原理:叶绿体是进行光合作用的细胞器。

叶绿体中的叶绿素a,叶绿素b,胡萝卜素和叶黄素与类囊体膜结合成为色素蛋白复合体。

这些色素都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇等有机溶剂提取。

提取液可用薄层色谱法加以分离和鉴别。

薄层层析色谱法是将吸附剂均匀地涂在玻璃板上成一薄层,将此吸附剂薄层作为固定相,把待分离的样品溶液点在薄层板的下端,然后用一定量的溶剂作流动相,将薄层板的下端浸入到展开剂当中。

由于吸附剂对不同物质的吸附能力大小不同,吸附力强的物质相对移动慢一些,而吸附力弱的物质则相对移动快一些,从而使各组分有不同的移动速度而彼此分开。

植物活性成分的分离常用薄层层析法和柱层析法,其中柱层析适用于大量制备。

本实验采用薄层层析色谱法,其中固定相用硅胶预制板。

三、实验材料与试剂:1.新鲜的菠菜叶片。

2.体积分数为95%的乙醇,碳酸钙粉末,展开剂(石油醚:丙酮:苯=7:5:1,体积比)。

3.研钵,漏斗,三角瓶,剪刀,点样毛细管,层析缸,硅胶预制板,滤纸。

四、实验步骤:(一)色素提取液的制备1.取新鲜叶片4~5片,洗净,擦干叶表面,去除中脉剪碎,放入研钵中。

2.向研钵中加入少量CaCO3粉末,再加2~3ml体积分数为95%的乙醇,充分研磨至糊状,再加10~15ml体积分数为95%的乙醇,上清液用漏斗过滤出,残渣再用10ml体积分数为95%的乙醇冲洗一次,一同过滤于三角瓶中,即制成叶绿体色素提取液。

提取液应避光保存,因提取量较大,可用于其他相关实验(如后面的叶绿素理化性质的验证)。

(二)叶绿体色素的分离1.取硅胶预制板一个,用点样毛细管吸取上述提取液,平行于硅胶板的短边,距下边缘1cm处用毛细管划线,保证划线细直。

实验1 叶绿体的分离与荧光观察

实验1    叶绿体的分离与荧光观察

中国海洋大学实验报告2019年 3 月30 日姓名杨慧慧学号17050031803 系年级海洋生命学院2017 专业生物技术科目细胞生物学实验上课时间周六12节题目实验一叶绿体的分离和荧光观察一、实验目的1.通过植物细胞叶绿体的分离, 了解细胞器分离的一般原理和方法。

2.观察叶绿体的自发荧光和次生荧光, 并熟悉荧光显微镜的使用方法。

二、实验原理1.将组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心,是分离细胞器的常用方法。

2.叶绿体的分离应在等渗溶液中进行, 以免渗透压的改变使叶绿体受到损伤。

3.因为叶绿体有自发荧光,因此用荧光显微镜进行观察。

三、实验用品1.材料:新鲜菠菜。

2.试剂:0.35mol/L氯化钠溶液,0.01%吖啶橙(acridine orange)。

3.器材:(1)主要设备: 普通离心机、组织捣碎机、粗天平、荧光显微镜。

(2)小型器材: 烧杯, 量筒, 滴管, 刻度离心管, 纱布,无荧光载片和盖片。

四、实验步骤与方法一、叶绿体的分离与观察1.选取新鲜的嫩菠菜叶,洗净擦干后去除叶梗脉,称30g于150ml 0.35mol/L NaCl溶液中,装入组织捣碎机。

2.低速匀浆3~5min。

3.将匀浆用6层纱布过滤于500ml烧杯中。

4.每组取滤液4ml,1000r/min下离心2min,弃去沉淀。

5.将上清液在3000r/min下离心5min,弃去上清液,沉淀即含叶绿体(混有部分细胞核)。

6.将沉淀用0.35mol/L NaCl溶液悬浮。

7.取叶绿体悬液一滴滴于载玻片上,加盖玻片后即可在普通光镜和荧光显微镜下观察。

(1)在普通光镜下观察。

(2)在荧光显微镜下观察叶绿体的直接荧光。

(3)在荧光显微镜下观察叶绿体的间接荧光:取叶绿体悬液一滴滴在无荧光载片上,再滴加一滴0.01%吖啶橙荧光染料, 加盖片后即可在荧光显微镜下观察。

二、菠菜叶手撕片观察轻轻撕取新鲜嫩菠菜叶的表皮,展平置于载玻片上,滴加1~2滴0.35mol/L NaCl溶液,加盖片后置显微镜下观察。

叶绿体特征研究实验报告(3篇)

叶绿体特征研究实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解叶绿体的基本结构、功能和生理特性。

2. 掌握叶绿体色素的提取、分离和鉴定方法。

3. 学习使用显微镜观察叶绿体的形态和分布。

二、实验原理叶绿体是植物细胞中的一种重要细胞器,负责光合作用,将光能转化为化学能,为植物生长提供能量。

叶绿体主要由类囊体、基质和基质蛋白组成,其中类囊体是光合作用的主要场所。

叶绿体中含有多种色素,如叶绿素、类胡萝卜素等,这些色素对光的吸收和传递起着重要作用。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜植物叶片(如菠菜、甘蓝等)、酒精、碳酸钙、石英砂、蒸馏水、滤纸、剪刀、研钵、漏斗、三角瓶、烧杯、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管等。

2. 实验仪器:显微镜、研钵、漏斗、三角瓶、烧杯、剪刀、研钵、滤纸、载玻片、盖玻片、滴管等。

四、实验步骤1. 叶绿体色素的提取与分离(1)取新鲜植物叶片1克,洗净、擦干,去掉中脉,剪碎,放入研钵中。

(2)加入少量石英砂、碳酸钙粉和2-3 mL 95%乙醇,研磨至糊状。

(3)再加入2-3 mL 95%乙醇,继续研磨,直至形成均匀的糊状物。

(4)将糊状物倒入漏斗中,用滤纸过滤,收集滤液。

(5)将滤液倒入三角瓶中,加入少量碳酸钙粉,充分搅拌,静置一段时间。

(6)取少量滤液,滴在滤纸上,用铅笔轻轻画出滤液滴的形状,作为色素带的标记。

2. 叶绿体色素的鉴定(1)观察滤纸上的色素带,记录各色素带的颜色、宽度和位置。

(2)将滤纸上的色素带与标准色素带进行对比,确定各色素带的成分。

3. 叶绿体的观察(1)取新鲜植物叶片,制作临时装片。

(2)将装片置于显微镜下,观察叶绿体的形态、大小、分布和数量。

五、实验结果与分析1. 叶绿体色素的提取与分离实验中,从新鲜植物叶片中成功提取了叶绿体色素,并分离出叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素等色素。

2. 叶绿体色素的鉴定通过观察滤纸上的色素带,并与标准色素带进行对比,确定各色素带的成分。

实验结果与理论相符。

3. 叶绿体的观察在显微镜下观察到叶绿体呈椭球状,分布在细胞质基质中,数量较多。

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中国海洋大学实验报告姓名:常天易系年级:海洋生命学院2012级专业:生物科学
科目:分子细胞生物学实验学号:12050011006
一、实验目的:
(1)、通过对植物叶绿体的分离,了解细胞器分离的一般原理和方法
(2)、观察叶绿体的间接荧光,并了解荧光显微镜的使用方法
二、实验原理
颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状和密度,也同离心力以及悬浮介质的黏度有关。

在一定的离心场中,同一时间内,密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同,一次增加离心力和离心时间,就能使非均一悬浮液中的颗粒按其大小。

密度的先后分批沉降在离心管的底部分批收集,即可获得各个亚细胞的组分。

叶绿体的分离应该在等渗溶液中进行,以免渗透压影响叶绿体,对其造成损伤。

在荧光显微镜下可以观察叶绿体的自发荧光和间接荧光。

三、实验材料
新鲜菠菜。

等渗溶液:0.35mol/L氯化钠溶液,
试剂:0.01%吖啶橙(acridine orange)
四、实验方法
1、叶绿体的分离
选取新鲜的菠菜叶30.0g,放入150ml的等渗溶液中,在组织捣碎机中捣碎3min
取6层纱布将溶液过滤于烧杯中,取滤液4ml在1000r/min下离心2min弃去沉淀
将上清液在3000/min中离心5min,弃去上清液,沉淀即是所需的叶绿体
将沉淀用等渗溶液悬浮
2、菠菜叶手撕片的制备
①、下表皮因海绵组织较疏松,可以直接手撕下表皮的薄膜在显
微镜下观察。

②、上表皮因栅栏组织较致密,可以用刀片将下表皮刮掉,在显
微镜下观察上表皮的细胞和气孔。

3、菠菜的叶绿体的观察
在普通光学显微镜下,将制得的手撕片放在载玻片的等渗溶液中,游离的叶绿体悬浊液点在在载玻片上,轻轻地盖上盖玻片(防止气泡
产生),即可观察。

在荧光显微镜下,将游离叶绿体悬浊液的的标本放在荧光显微镜下,先后用绿光、蓝光对其进行照射,在电脑上观察其产生的自发荧
光。

向手撕片的标本、游离叶绿体悬浊液的的标本中加入1-2滴
0.01% 吖啶橙染液,先后用绿光、蓝光对其进行照射,在电脑上观察
其产生的间接荧光。

五、实验结果
气孔保卫细胞
叶绿体
图1菠菜手撕片的标本中,上表皮及其气孔
图2菠菜手撕片的标本中,下表皮及其气孔图3叶表皮在绿光照射下的间接荧光
游离叶绿体保卫细胞
表皮细胞叶肉细胞
气孔
游离叶绿体
图 4叶表皮在蓝光照射下的间接荧光
图 6 游离叶绿体在绿光照射下的间接荧光
图 5游离叶绿体在蓝光
照射下的间接荧光 气孔保卫细胞
游离叶绿体
表皮细胞
六、讨论
1、本实验证明,在1000r/min离心2min,弃去沉淀上清液在3000r/min下离心5min,弃去上清液的差速离心,沉淀含有叶绿体,混有部分细胞核。

在蓝光照射下发出的间接荧光可见到细胞核物质发出的绿色荧光。

(图5)
2、在制备菠菜叶手撕片时,由于下表皮上方的海绵组织较为疏松,所以可以较容易地制得下表皮的手撕片;上表皮下方的栅栏组着较为致密,所以可以通过从下表皮轻轻地挂掉下表皮和叶肉的方法来制备上表皮的手撕片。

3、在对上下表皮的对比中可以发现,上表皮的气孔比下表皮的气孔更少,上表皮的细胞间隙比下表皮的细胞间隙更狭窄;其原因可能是上防止上表皮的水分蒸发过于强烈,以保水。

4、菠菜是双子叶植物,其保卫细胞呈肾形,明显内壁薄,外壁厚,保卫细胞中含有叶绿体,支持淀粉——糖变化学说和苹果酸生成学说。

5、在对菠菜手撕片标本在绿光照射下发出的间接荧光进行观察,叶片的背景颜色呈现红色,叶绿体处红色最深,可以较为清晰的显示出叶绿体的位置;同时说明叶片中还有其他物质在绿光的照射下发出红色的荧光(图3)。

6、在对菠菜手撕片标本在蓝光照射下发出的间接荧光进行观察,叶片的背景颜色呈现绿色,部分呈现红色,不能清晰的显示叶绿体的位置。

这可能是由于细胞中的核物质在蓝光的照射下造成了绿色
的背景(图 4)。

7、在绿光照射下游离叶绿体的自发荧光呈红色,观察到的叶绿体数目较多(图3),蓝光照射下叶绿体的自发荧光也呈红色,观察到的叶绿体数目较少(图5)。

8、游离的叶绿体在绿光照射下的间接荧光呈现红色。

9、游离的叶绿体在蓝光照射下下的间接荧光呈现红色,有部分绿色是细胞核物质在蓝光照射下发出的。

显示的叶绿体数目比在蓝光照射下的自发荧光显示的数目多。

10、综上比较,游离的叶绿体由蓝光照射发出的间接荧光的颜色强度比手撕片中叶绿体由蓝光照射发出的间接荧光的颜色强度强,游离的叶绿体由绿光照射发出的间接荧光的颜色强度和手撕片中叶绿体在由绿光照射发出的间接荧光的颜色强度差距不大;叶绿体在绿光照射下的荧光颜色强度比同样标本蓝光照射下的荧光颜色强度强;叶绿体在蓝光照射下的间接荧光强度比叶绿体在蓝光照射下的自发荧光强度强;叶绿体在绿光照射下的间接荧光强度比叶绿体在绿光照射下的自发荧光强度稍强。

七、作业
1. 在荧光显微镜下,观察叶绿体的自发荧光时,更换滤镜系统,叶绿体的颜色是否有变化?
答:
实验观察到,在观察叶绿体自发荧光时,在不同的光的照射下,叶绿体的自发荧光波长没有明显的变化,因为叶绿体在吸收相应波长的光达到激发态时只会发射出一定波长的光。

绿光为叶绿体的最适激发波段。

在蓝光的照射下,叶绿体的自发荧光的颜色强度明显低于在绿光照射下的叶绿体自发荧光的颜色强度。

实验中滤镜的作用是吸收对人眼会造成危害的光线。

2. 游离叶绿体和整体细胞内的叶绿体,在荧光显微镜下,其颜色和强度有无差异?为什么?
答:
有。

游离叶绿体在蓝光照射下发出的间接荧光颜色比整体细胞在蓝光照射下发出的间接荧光颜色要深,因为游离叶绿体进行光合作用积累了大量的胞内物质其中大多没有被及时利用,因此其中的糖类等物质要高于细胞内的叶绿体,因此荧光更强。

游离的叶绿体在绿光照射下发出的间接荧光强度和整体细胞在绿光照射下的间接荧光强度差距不是很大,因为绿光是激发叶绿体间接荧光的最适波长光;但整体细胞的背景会变红,可能细胞内还存在其他在绿光照射下会发出红色荧光的物质。

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