凝集反应及沉淀反应题库1-1-8
凝集性试验

第十章凝集性试验学习要点:凝集试验的概念、原理、分类,以及常用的凝集试验类型。
沉淀试验的概念、原理、分类,以及常用的沉淀试验类由于所用抗原的性状不同,出现的现象也不同:1、细菌、红细胞或表面带有抗原的乳胶颗粒等不溶性颗粒抗原,当与相应抗体结合,抗原与抗体结合形成凝集团块,即(agglutination)。
2、病毒、蛋白质等可溶性抗原与抗体结合,在两者比例合适时,可形成较大的不溶性免疫复合物,在反应体系中出现不透淀反应(precipitation reaction)。
第一节凝集试验(agglutination test)细菌、红细胞或表面带有抗原的乳胶颗粒等不溶性的颗粒抗原,当与相应抗体结合,在有电解质存在时,抗原与抗体结合形凝集试验。
凝集试验中的抗原称为凝集原(agglutinogen),抗体称为凝集素(agglutinin)一、凝集试验的一般原理通常,细菌和红细胞等颗粒性抗原在悬液中带弱负电荷,周围吸引一层与之牢固结合的正离子,外面又排列一层松散的负子层,使颗粒相互排斥。
当特异抗体与相应抗原颗粒互补结合时,抗体的交联作用克服了抗原颗粒表面的电位,而使颗粒聚集在一起。
二、凝集试验的发生分两阶段1、抗原抗体的特异结合;2、在电解质的参与下,出现可见的凝集颗粒。
三、凝集试验的用途凝集试验方法简便,敏感度高,因而在临床检验中被广泛应用。
1、可用于定性的检测,即根据凝集现象的出现与否判定结果阳性或阴性。
2、也可进行定量检测,即将标本作一系列倍比稀释后进行反应,以出现阳性反应的最高稀释度作为滴度。
四、凝集试验的分类1、直接凝集试验(direct agglutination)细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原,在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集。
直接凝集试验分为:玻板凝集试验和试管凝集试验。
(1)玻板凝集试验:为定性试验方法①用已知抗体作为诊断血清、与待检颗粒抗原悬液各加一滴在玻板上,混匀;②数分钟后即可用肉眼观察凝集结果:出现颗粒凝集的为阳性反应此法简便、快速,适用于:细菌分离株的鉴定与分型;红细胞ABO血型的鉴定。
一、 A1型题(标准型) B.血凝反应效果较新鲜红细胞强 C.可

12.关于直接 Coombs 试验,说法错误的是 A.检测血清中游离的不完全抗体 B.可定性检测 C.可作半定量分析 D.可用于新生儿溶血检测 E.可用于自身免疫性溶血性贫血的检测 13.关于间接 Coombs 试验,说法错误的是 A.检测红细胞上的不完全抗体 B.出现凝集为阳性 C.抗原致敏红细胞 D.用于检测母体 Rh 抗体 E.可检测因红细胞不相容性输血而产生的血型 14.抗球蛋白试验不能应用于 A.配血试验 B.立克次体的抗原检查 C.诊断新生儿溶血性贫血性疾病 D.细菌的不完全抗体的检测 E.抗 D 抗体 15.关于协同凝集试验,说法错误的是 A.致敏颗粒为金黄色葡萄球菌 B.桥连物为 SPA C.检测抗原 D.是一种反向间接凝集试验 E.抗为 IgM 类㈢、B1 型题(配伍题) 问题 1~4 A. 间接凝集试验 B. 反向间接凝集试验 C. 间接凝集抑制试验 D. 协同凝集试验 E. Coombs 试验 1.金黄色葡萄球菌作为载体的试验是 2.抗体致敏载体检测抗原的试验是 3.检测抗红细胞不完全抗体的试验是 4.未出现凝集现象为阳性的试验是
二、填空题
1.凝集反应必须在_______和_______存在下才能发生。 2._______和________是两种特殊的凝集反应。 3.凝集反应分为_______和_________两个阶段。 三、名词解释 1.Agglutination 四、简答题
1.凝集反应与沉淀反应有何异同? 2.抗球蛋白试验主要应用于那些方面? 3.什么是协同凝集试验?主要用于何种检测? 4.何谓间接凝集反应?
四、简答题 1.凝集反应与沉淀反应都是抗原抗体反应,二者的区别如下: 差异 凝集 沉淀 反应 反应 抗原性质 颗粒性或可溶 可溶性 性抗原致敏颗粒 反应时间 几分钟至 数小时 十几分钟 至数天 反应产物 凝集块 沉淀物 稀释物 抗体 抗原 2.①输血:对于“危险”受体(指曾经输血、肌肉注射过血液制品或母子间血型不合的妊 娠而可能产生免疫性血型抗体的人)的配血试验必须包括各种不完全抗体的检查,以抗球蛋 白法最为可靠。 ②血型抗原抗体的检查:主要检查 Rh— 者,其体内是否有抗-D 抗体,应用抗球蛋白试验对 外表为 D 阴性的供体血液作常规检查。最可靠和灵敏的方法是将待检 D 阴性的红细胞与高效 价的不完全抗-D 血清混合,然后加抗球蛋白血清检查细胞上有无致敏抗体。 ③对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断:母体产生的最常见的免疫性抗体为 Rh 抗体和 ABO 抗 体,一般为 7S 的 IgG,可通过胎盘屏障,作用于胎儿红细胞,引起新生儿溶血性疾病,可
临床医学检验:凝集反应、沉淀反应及免疫电泳技术测试题(题库版)

临床医学检验:凝集反应、沉淀反应及免疫电泳技术测试题(题库版)1、单选Coombs试验的直接法和间接法的主要区别是()A.前者是检测完全抗体的,而后者是检测不完全抗体的B.前者是检测在体内已致敏的红细胞上的不完全(江南博哥)抗体,后者是检测游离在血清中不完全抗体的C.前者主要用于检测IgG型抗体,后者主要用于检测IgE型抗体D.前者主要用于检测IgG型抗体,后者主要用于检测IgM型抗体E.两者判断结果的方法不同正确答案:B2、填空题经典的液相沉淀试验包括_________、_________和免疫浊度试验。
正确答案:絮状沉淀试验;环状沉淀试验3、多选关于双向免疫抗散试验,正确的是()A.抗原或抗体的定性分析B.抗体效价测定C.精确定量抗原或抗体D.抗原或抗体的纯度鉴定E.抗原或抗体相对分子量估计正确答案:A, B, D, E4、问答题在单向扩散试验中,有时会出现结果与真实含量不符,是何原因? 正确答案:在单向扩散试验中,有时会出现结果与真实含量不符,这主要出现在Ig测定中。
如用单克隆抗体或用骨髓瘤纯抗原免疫动物获得的抗血清,都存在结合价单一的现象,若用此作为单向扩散试剂测量正常人的多态性抗原,则抗体相对过剩,使沉淀圈直径变小,测量值降低。
相反,如用多克隆抗体测定单克隆病(M蛋白),则抗原相对过剩(单一抗原决定簇成分),致使沉淀圈成不相关的扩大,从而造成某一成分的假阳性增加。
5、单选间接凝集试验和被动凝集试验()A.是同义词B.是完全不同的两种试验C.二者均属凝集试验,但有区别D.前者属玻片凝集反应范畴,后者属试管凝集反应范畴E.是近义词正确答案:A6、填空题母体所产生最常见的免疫性抗体为Rh抗体和ABO抗体,一般为_____________,可通过胎盘,作用于_____________,引起_______________________。
正确答案:7SIgG;胎儿红细胞;新生儿溶血性疾病7、名词解释免疫电泳正确答案:免疫电泳是将区带电泳和双向免疫扩散相结合的免疫化学分析技术。
临床医学检验技术(师):沉淀反应测试题

临床医学检验技术(师):沉淀反应测试题1、单选环状沉淀试验中要求()A.抗原澄清B.抗体澄清C.抗原和抗体都必须澄清D.对抗原和抗体没有特别要求E.抗原比重大于抗血清正确答案:C参考解析:环状沉淀试验(江南博哥):在一定内径(1.5~2.0mm)的玻璃管中先加入抗血清,再沿管壁加入抗原溶液,因抗血清比重大于抗原,故在两者交界处形成清晰界面,此处抗原抗体生成物在一定时间内形成白色环为阳性。
要求:抗原抗体溶液澄清。
适用于微量抗原测定。
2、单选下列关于免疫浊度法的优点不正确的是()A.稳定性好B.敏感度高(达ng/L)C.精确度高(CV<5%)D.简便快速,易于自动化E.不适于大批量标本的检测正确答案:E参考解析:免疫浊度法最大的优点是稳定性好,敏感度高(达ng/L),精确度高(CV<5%),简便快速,易于自动化,无放射性核素污染,适合于大批量标本的检测,为此已在免疫分析中奠定了坚实的基础。
3、单选免疫电泳的优点不包括()A.加快了沉淀反应的速度B.电场规定了抗原抗体的扩散方向,使其集中,提高了灵敏度C.具有抗原抗体反应的高度特异性D.可将某些蛋白组分根据分子量的不同而将其分开,再分别与抗体反应E.具有电泳技术的高分辨率和快速、微量等特性正确答案:D参考解析:免疫电泳可以将某些蛋白组分根据所带电荷的不同分开,再分别与抗体反应。
4、单选下列关于单向扩散试验检测时的注意点,错误的是()A.抗血清必须特异性强B.每次测定都必须做标准曲线C.应用单克隆抗体测量多态性抗原时,测定值偏高D.用多克隆抗体测量单克隆病时,测定值偏高E.每次测定时必须用质控血清做质控正确答案:C参考解析:单向扩散试验检测时的注意点:①抗血清必须特异性强、效价高、亲和力强、在良好的条件下保存。
②每次测定都必须做标准曲线。
③每次测定时必须用质控血清做质控。
④注意双环现象(出现了两种抗原性相同成分)。
⑤应用单克隆抗体测量多态性抗原时,测定值偏低,用多克隆抗体测量单克隆病时,测定值偏高。
凝集反应和沉淀反应

自身红细胞凝集试验
RBC为未经致敏 的受检者新鲜红 细胞,试剂:抗 人O型红细胞的 单克隆抗体
临床应用: HIV检测 HBV检测
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四、胶乳凝集试验
致 敏 于 胶 乳 颗 粒
23
24
五、明胶凝集试验
将病毒抗原或重组抗原吸附于粉红色明 胶颗粒上,当致敏颗粒与样品血清作用 时,若血清含有抗病毒抗体则可形成肉 眼可见的粉红色凝集
抗体球蛋白
带负电荷较少,籍 +
电渗作用向负极泳
动
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对流免疫电泳
结果分析: ✓ 无沉淀线出现则表明无相
应的抗原。 ✓ 沉淀线位于抗原抗体孔中
间,说明两者比例较适合 。 ✓ 沉淀线偏向抗原孔一方, 表示抗体浓度>抗原,反 之,则是抗体浓度<抗原 浓度。
44
二、火箭免疫电泳
+
Ab
-
单向免疫扩散+电泳,定量检测技术 注:只能测定ug/ml以上的含量
反应特点:
IgM 的作用比IgG大数百倍 IgG与抗原结合后,常不出现凝集反应,称不完全抗 体
5
可见反应形成
6
第二节 直接凝集反应和间接凝集反应
一、直接凝集反应(direct agglutination): 颗粒性抗原直接与抗体结合,在电解质的作用
下,出现肉眼可见的凝集现象
常用的凝集试验有玻片法和试管法
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第三节 抗球蛋白参与的血凝试验
抗球蛋白试验是 抗球蛋白参与的 间接血凝试验, 又称Coombs试验
直接Coombs试验 间接Coombs试验
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(一)直接Coombs试验
抗球蛋白抗体
全血操作
检测红细胞上不完全抗体
应用:检测新生儿溶血症、自身免疫性溶血症、特发性自
凝集反应、沉淀反应

当抗原与相应抗体结合时,抗体的交联作 用克服了抗原颗粒表面的Z电位,而使颗粒 相互靠拢,聚集在一起。 当抗体的分子太少或分子量小,不能克服 相当厚度的离子云层时,则不能使颗粒聚 集。在凝集反应中IgM的作用远大于IgG。 为促使凝集现象的出现,可采取以下措施: 1、增加蛋白质和电解质,缩短颗粒间的距 离;2、增加溶液的黏稠度;3、用胰酶和 神经氨酸酶处理;4:以离心的方式克服颗 粒间的排斥力。
第五章
凝集反应
颗粒性抗原与特异性抗原结合后,在适当 的电解质存在下,形成肉眼可见的凝集现 象,称为凝集反应。 可溶性抗原或抗体与载体颗粒结合形成致 敏颗粒后,与相应的抗原或抗体结合,也 能发生凝集反应。
1
第一节 凝集反应的特点 凝集反应的发生分为两个阶段:1、抗原抗 体的特异性结合阶段;2、出现肉眼可见的 凝集现象。 颗粒性抗原在悬液中带负电荷,周围吸引 一层与之牢固结合的正离子,外面又排列 一层松散的负离子,构成一个双层电子云。 在松散层内界和外界间的电位差形成Z电位。 溶液中负离子强度越大,Z电位也越大,Z 电位使颗粒间互相排斥。
示意图
标准品抗原浓度测定
抗原浓度 1.测定沉淀环直径 2.在标准曲线上查找
不同病人抗原浓度测定
相应抗原浓度
35
单向扩散试验 (平板法)
沉淀环的直径与待测标本含量两种计算方法
Mancini曲线: 大分子抗原 时间扩散>48h, 常数K=C∕d2 普通坐标纸曲线
Fahey曲线: 小分子抗原 扩散时间24h 常数K=logC∕d 半对数坐标纸曲线
C为抗原浓度, d为沉淀环直径
36
Mancini曲线
Fahey曲线
T1为16~24h;T2为24~48h;T3为48h以 上,可见T3为直线,T1为反抛物线
主管检验师资格考试临床免疫学和免疫检验 复习习题第六章沉淀反应(附答案解析)

主管检验师资格考试临床免疫学和免疫检验复习习题第六章沉淀反应(附答案解析)一、A1题型1、免疫比浊实验属于()A、中和反应B、凝集反应C、沉淀反应D、补体结合反应E、溶血反应2、免疫固定电泳的英文缩写是()A、ECLB、RIEC、RIAD、IFEE、IEP3、对流免疫电泳的原理是()A、单向免疫扩散与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术B、双向免疫扩散与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术C、单向免疫扩散与两相反向的规律改变的电流相结合的免疫扩散技术D、双向免疫扩散与两相反向的规律改变的电流相结合的免疫扩散技术E、抗原抗体反应与电泳相结合的定向免疫扩散技术的统称4、能够定量测定待检标本的免疫学试验是()A、间接凝集试验B、协同凝集试验C、单向扩散试验D、双向扩散试验E、对流免疫电泳5、免疫比浊法对抗体的要求不正确的是()A、特异性强B、效价高C、亲和力强D、使用H型抗体E、使用R型抗体6、免疫比浊法的基本原则是()A、反应体系中保持抗原过量B、反应体系中保持抗体过量C、反应体系中保持抗原抗体为最适比例D、抗体特异性强E、抗体亲和力强7、直接影响絮状沉淀实验的因素是()A、抗原分子量B、抗体分子量C、抗原抗体比例D、反应体系的PHE、反应体系的例子强度8、免疫沉淀法目前应用最广、定量比较准确的主要是下列哪种方法()A、免疫比浊法B、絮状沉淀试验C、单向扩散试验D、双向扩散试验E、棋盘滴定法9、关于双向扩散试验,下列说法错误的是()A、可用于抗原抗体定性分析B、抗原或抗体相对分子量的分析C、可用于抗原纯度分析D、可用于抗原抗体半定性分析E、可用于抗体效价的滴定10、关于免疫电泳技术的基本原理,说法正确的是()。
A、应将凝胶扩散置于交流电场中B、抗原及抗体在一定条件下离解成为带正电或负电的电子,在电场中向同相电荷的电极移动C、电子所带净电荷量越多、颗粒越小,泳动速度越慢D、电流会阻碍抗原、抗体的运行速度,延长两者结合的时间E、多种带电荷的物质电泳存在,抗原决定簇不同的成分可得以区分11、下列说法错误的是()。
凝集反应与沉淀反应

凝集效价的判断:与相应菌液发生++凝集反应的血清最高稀释浓度为该被 检血清的凝集效价
双向琼脂扩散实验
1.材料
琼脂液,待测血清(未提供),肝癌患者AFP阳性血清(阳 性对照),生理盐水(阴性对照),AFP诊断血清(含AFP抗 体),载玻片,打孔器,毛细滴管
2.实验原理
AFP诊断血清中含有AFP的特异性抗体,肝癌患者阳性血清中含有AFP抗原作 为阳性对照,当待测血清中含有AFP抗原时,就会和AFP诊断血清中的AFP特异 性抗体发生抗原抗体反应,产生免疫沉淀线,反之则无免疫沉淀线,通过观察免 疫沉淀线的有无并和阳性对照对比,就可以判断待测血清中AFP的阳性或阴性。
Ag Ag + 生理 盐水 Ab Ag:肝癌病人AFP阳性血清 Ab:AFP诊断血清
实验结果 Ag与Ab间应出现乳白色免疫沉淀线 Ag与生理盐水间无乳白色免疫沉淀线出现
3. 实验方法
(1) 将配好的1%琼脂放到电炉子上融化,室温自然冷却 到 约60摄氏度。 (2)用玻璃吸管吸取琼脂液加入到载玻片上,使其铺满玻 片,等待其自然凝固。 (3)玻片下垫上打孔纸,用打孔器在凝固的琼脂板上打四 个相邻的孔。每两个相邻的孔不要太远,便于抗原抗体相遇。
对流免疫电泳
(4) 抗原孔内分别加入待测血清和AFP阳性血清,抗体孔 内加入AFP诊断血清和生理盐水阴性对照。 (5)将加好样的琼脂板置于电泳槽支架上,抗原孔置于负 极端,抗体孔置于正极端,琼脂板两端用纱布搭桥,使琼脂 板两端电流连通。设置电压60v,电泳40min开始电泳,电泳 结束观察结果。
Ab
Ab:AFP诊断血清
(4) 中心孔内加甲胎蛋白诊断血清,四周孔内分别加入待 测血清和肝癌患者阳性血清及生理盐水阴性对照。 (5)将琼脂版放入湿盒,置37摄氏度孵箱,24h后观察结果。
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凝集反应及沉淀反应
题库1-1-8
问题:
[单选]关于单向扩散试验检测时的注意点,错误的是()
A.抗血清必须特异性强
B.每次测定都必须做标准曲线
C.应用单克隆抗体测量多态性抗原时,测定值偏高
D.每次测定时必须用质控血清做质控
E.用多克隆抗体测量单克隆病时,测定值偏高
问题:
[单选]下列哪项实验不是采用试管凝集试验方法()
A.A.肥达试验
B.B.外斐试验
C.C.输血交叉配血试验
D.D.ABO型鉴定
E.E.寒冷凝集试验
问题:
[单选]下列哪项试验不是凝集反应()
A.ABO血型鉴定
B.免疫妊娠试验
C.快速血浆反应素环状卡片试验
D.肥达反应
E.中和反应
(天津11选5 )
问题:
[单选]对流免疫电泳中,抗体向阴极移动原因是()
A.A.抗体带正电
B.B.抗体带负电
C.C.电渗作用大于电泳作用
D.D.电泳作用大于电渗作用
E.E.抗原带正电
问题:
[单选]影响沉淀试验的因素是()
A.A.抗原与抗体的比例
B.B.盐浓度
C.C.温度
D.D.以上三项
E.E.仅B+C
问题:
[单选]用于检测抗溶血素O的方法属于()
A.直接凝集试验
B.双向琼脂扩散
C.单向琼脂扩散
D.明胶凝集试验
E.胶乳凝集试验
间接凝集反应可用于检测细菌、病毒和寄生虫等感染后产生的抗体,例如间接凝集试验或明胶颗粒凝集试验用于检测抗人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体以诊断艾滋病,胶乳凝集试验用于检测抗溶血素O等。
【考点】:间接凝集反应
问题:
[单选]玻片凝集试验()
A.只能检测抗原,不能检测抗体
B.既能检测抗原,又能检测抗体
C.只能检测抗体,不能检测抗原
D.为半定量实验
E.不能用于ABO血型鉴定。