第十章沉淀反应与凝集反应-yhl

•方法评价：
半定量试验；简便、快速；敏感度低；可有假阳性。
•应用：
测定相应抗体的效价；可作临床诊断或流行病学调查。
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
试管凝集试验
根据凝集程度记录为：＋＋＋＋（100％凝集）、＋＋＋ （75％凝集）、＋＋（50％凝集）、＋（25％凝集）。以 出现50％凝集以上的血清最大稀释度为该血清的凝集效价。
抗球蛋白试验 又称
Coombs试验
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
（一）直接Coombs试验
检测红细胞上抗体或不完全抗体
单价抗体只能与一方抗原的抗原决定簇结合，不产生凝集 反应，当加入抗球蛋白抗体后，可以将两个各连接一方抗原 决定簇的单价抗体连接起来，出现凝集现象。
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
64 8
512 <2 32 128 32
4
血凝试验强度
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
三、胶乳凝集试验
将待检血清或抗原和致敏乳胶各滴一滴在玻片上，阳 性者5～10min即出现凝集。如妊娠免疫诊：
• 孕妇尿中，绒毛膜促性腺激素（HCG）含量明显增高。
• 反之，非孕妇尿中HCG含量甚微，不能消耗掉抗HCG抗
二）抗体的检测
检测细菌、病毒、寄生虫等感染后产生的抗体。
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
第四节 自身红细胞凝集试验
未经致敏的受检者新鲜红细胞 试剂：抗人O型红细胞的单克隆抗体 临床应用：HIV检测、HBV检测
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
自身红细胞凝集试验
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
第五节 抗球蛋白试验
（二）间接Coombs试验
检测血清中的抗红细胞抗体
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
临床应用：
•在输血上的应用； •血型抗原抗体的检查； •对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断； •对溶血性贫血的研究； •对细菌或立克次体的不完全抗体检查。
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
第二部分 沉 淀 反 应
第一节 沉淀反应的特点 第二节 液体内沉淀试验 第三节 凝胶内沉淀试验 第四节 免疫电泳技术
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
第三节 间接凝集反应
间接凝集反应(indirect agglutination):
将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面， 然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用 下，出现肉眼可见的凝集现象。
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
一、间接凝集反应的类型
1.正向间接凝集试验 2.反向间接凝集试验 3.间接凝集抑制试验 4.协同凝集试验
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
二、间接血凝试验
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 1/1024 Pos. Neg.
Patient
1 2 3 4 5 6 7 8
反向间接血凝试验
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
Titer
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
第一节 沉淀反应原理及特点
1.沉淀反应（precipitation）:
是指可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发 生特异性结合而出现的沉淀现象,其特性与经典的 抗原抗体反应相同。
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
2.沉淀反应分两个阶段
第一阶段：
抗原抗体特异性结合，快速但不可见。
细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原， 或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒 后，它们与相应抗体（或抗原）发生特异性反应，在 适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。参与 凝集反应的抗体有IgM和IgG,IgM的凝集作用比IgG 大数百倍。
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
二、反应阶段
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
1.正向间接凝集试验
用抗原致敏载体--检测抗体
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
2.反向间接凝集试验
用抗体致敏载体----检测抗原
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
3.间接凝集抑制试验
用抗原致敏载体--检测抗原
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
4.协同凝集试验
协同凝集反应与间接凝集反应的原理相类似，但所用载体 既非天然的红细胞，也非人工合成的聚合物颗粒，而是一种 金黄色葡萄球菌。它的菌体细胞壁中含有A蛋白SPA具有与 IgG的Fc段结合的特性，因此当这种葡萄球菌与IgG抗体连 接时，就成为抗体致敏的颗粒载体。如与相应抗原接触，即 出现反向间接凝集反应。协同凝集反应也适用于细菌的直接 检测。
第十章 沉淀反应与凝集反应
第一部分 凝集反应 第二部分 沉淀反应
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
第一部分 凝集反应
第一节 凝集反应的特点 第二节 直接凝集反应 第三节 间接凝集反应 第四节 自身红细胞凝集试验 第五节 抗球蛋白试验
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
第一节 凝集反应的特点
一、凝集反应定义
（一） 玻片凝集试验 （二） 试管凝集试验
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
（一）玻片凝集试验
+
•方法评价:
定性试验，简便和快速；敏感度低。
•临床应用:
菌种鉴定；血清学分型；血型鉴定。
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
（二）试管凝集试验
在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的 作用下，出现肉眼可见的凝集现象。
抗原抗体的特异性结合 出现肉眼可见的凝集现象
三、特点
该方法简便、敏感度高，应用广泛。
四、类型
按抗原的性质和反应方式的不同分为： 直接凝集和间接凝集
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
第二节 直接凝集反应
直接凝集反应(direct agglutination)：
颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用 下，出现肉眼可见的凝集现象。
第二阶段：
形成肉眼可见的大的免疫复合物。
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
3.沉淀反应的类型
①液体内沉 淀试验
•免疫 浊度测
定 •絮状 沉淀试
体。
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
四、明胶凝集试验
将病毒抗原或重组抗原吸附于粉红色明 胶颗粒上，当致敏颗粒与样品血清作用时， 若血清含有抗病毒抗体则可形成肉眼可见 的粉红色凝集。
第十章沉淀反应与凝集反应-yhl
五、间接凝集反应的应用
一）抗原的检测
反向间接凝集试验可用于检测病原体的可溶性抗原， 也可用于检测各种蛋白质成分。