实验二 凝集、沉淀反应

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免疫检验实验凝集沉淀

免疫检验实验凝集沉淀

免疫检验实验凝集沉淀实验一实验名称:免疫凝集类实验实验目的与要求:掌握胶乳凝集试验的原理,熟悉试验方法,了解其应用实验仪器、试剂:RF阳性、阴性对照,胶乳试剂、反应板、血清、生理盐水、吸管、试管、玻片实验原理:凝集反应是完整的细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体在一定条件下出现凝集物的现象。

参与反应的抗原称凝集原,抗体称凝集素。

本实验介绍间接凝集反应。

可溶性抗原与抗体结合后不出现凝集。

如把可溶性抗原吸附在载体微球上,成为人工免疫微球,再与抗体结合即出现凝集,此称间接凝集反应。

由于载体微球增大了可溶性抗原的反应面积,微球上少量抗原存在就足以出现肉眼可见的反应。

这种反应的敏感性比沉淀反应高得多。

操作方法:在反应板上依次滴加待检血清,阳性对照、阴性对照各50μl(一滴),然后垂直滴加胶乳试剂1滴,搅匀2~3分钟,肉眼观察结果。

实验现象与数据:出现凝集为阳性,不出现凝集为阴性。

结果分析与结论:实验二实验名称:免疫沉淀类实验实验目的与要求:掌握抗原抗体反应的特异性和沉淀反应的原理;熟悉双向琼脂扩散的操作方法和结果分析。

实验仪器、试剂:待检血清、抗人IgG血清,琼脂、玻片、打孔器、生理盐水实验原理:双向扩散实验是一种定性及半定量试验方法。

先将一定量琼脂倾注于平板上。

凝固后打孔。

加入待测抗原及抗体。

抗原、抗体向孔四周扩散,在比例恰当处形成抗原抗体复合物,呈白色沉淀线,如将抗体作倍比稀释,根据白色沉淀线逐渐消失的情况可测定抗体效价。

操作方法:1、制备琼脂板:将已溶化的盐水琼脂(15g/L)4ml倾注于水平放置的载玻片上,制成约1.5mm厚的琼脂板。

2、打孔:用打孔器打双孔3、加样:在对应孔中加入抗原抗体4、温育:37℃,湿盒中温育24h后观察结果分析与结论:。

03实验二 细胞凝集反应

03实验二 细胞凝集反应
颗粒状抗原(如细菌、红细胞等)与相应抗体直接 结合所出现的凝集现象。分为玻片法和试管法。
1)玻片法是一种定性试验方法。可用已知抗体来检测 未知抗原。若鉴定新分离的菌种时,可取已知抗体滴 加在玻片上,将待检菌液一滴与其混匀。数分种后, 如出现肉眼可见的凝集现象,为阳性反应。该法简便 快速,除鉴定菌种外,尚可用于菌种分型、测定人类 红细胞的ABO血型等。
四、实验用品
• 1、器材和仪器 • 仪器:电子天平,大烧杯,小烧杯,显微镜,移液 器,离心机,玻璃棒,镊子。 • 耗材:10ml小试剂瓶,载玻片,盖玻片,1.5ml离心 管,擦镜纸,吸头。 • 2、材料: 马铃薯块茎、鸡血
• 2、实验试剂: • PBS缓冲液:称取7.2g NaCl ,1.48g NaH2PO4 ,0.46g KH2PO4 ,用蒸馏水定 容至1000ml,调pH为7.2。 • 生理盐水:称取0.9g NaCl加水定容至 100ml。 • 3.8%柠檬酸钠溶液:称取3.8g柠檬酸钠 (或是4.33g带结晶水的柠檬酸钠)加水定 容至100ml。
• ③ 在1.5ml的离心管中加入0.98ml生理盐水, 混匀,即是2%的红细胞悬液,贴上标签备 用(注:吸取红细胞加入试剂瓶时可吸取 生理盐水清洗几次吸头,使得红细胞全部 在悬液中)。
• 凝集反应现象 • 用移液器吸取红细胞悬液,在三片载玻片 上各滴一滴(50ul),其中一片加一滴土豆 凝集素(50ul),一片再加一滴(50ul) PBS缓冲液,充分混匀,另外一片只有红 细胞悬液(100ul),做空白对照,3-5分钟 后盖上盖玻片,待干后于显微镜下观察血 细胞凝集现象(注:红细胞悬液放置一段 时间会发生沉降,取用之前应当轻轻摇 匀)。
2)试管法是一种定量试验的经典方法。可用已知抗原来 检测受检血清中有无某抗体及抗体的含量。用来协助临 床诊断或供流行病学调查研究。操作时,将待检血清用 生理盐水连续成倍稀释,然后加入等量抗原,最高稀释 度仍有凝集现象者,为血清的效价,也称滴度,以表示 血清中抗体的相对含量。诊断伤寒、副伤寒病的肥达氏 反应(Widaltest)、布氏病的瑞特氏反应(Wright test) 均属定量凝集反应。

凝集反应、沉淀反应

凝集反应、沉淀反应
29
钩状效应时分析浓度与检测信号关系图:
抗体过剩带 检 测 信 号
抗原过剩带
抗原分析浓度
30
2、抗体的质量 特异性高,无交叉反应; 效价高,避免低效价抗体引起的非特异性浊度; 亲和力高,免疫复合物形成快,结合牢固; R型抗体,等价带宽,亲和力强。 3、抗原抗体反应的溶液 最适pH6.5-8.5;在一定范围内,离子强 度大,IC形成快。 4、增浊剂 PEG,tween-20。消除抗原抗体周围的电子云和 水化层,促进加速IC的形成。
7
第三节

间接凝集反应
将可溶性抗原或抗体预先吸附或偶联在 与免疫无关的大小合适的颗粒上,与相 应抗体或抗原作用,在适当电解质参与 下,出现特异性凝集现象称为间接凝集 反应。 一、间接凝集反应的类型: 1、正向间接凝集试验:用抗原致敏载体检测 相应抗体; 2、反向间接凝集试验:用抗体致敏载体检测 相应抗原;
18
第四节 自身红细胞凝集试验
反应中的红细胞是未经致敏的受检者新鲜 红细胞。主要试剂材料为抗人O型红细胞的 单克隆抗体,这种抗体能与各种血型的红 细胞结合,但不引起凝集反应。这种抗体 与另一特异性抗体连接成的双功能抗体可 用于检测标本中的抗原;如与特异性抗原 连接,则可用于检测标本中的抗体。反应 中的标本为受检者的全血。 检测标本为全血,检测速度快。 灵敏度低,不能用于HIV抗体和HBsAg检测。
22
(二)间接Coombs试验
检测血清中的抗红细胞抗体
23
第六章 沉淀反应
可溶性抗原与相应的抗体混合,在电解质存在的 条件下,两者比例适合,即可有沉淀物出现,叫 沉淀反应。 1898年Kraus首次发现毒素-抗毒素的沉淀现象; 1905年Bechgold 发现沉淀可以在明胶中进行; 1965年Mancini发明单向免疫扩散技术; 上世纪70年代免疫浊度法出现。 上述技术的发明发展,使得沉淀反应向快速、准 确、微量、自动化方向发展,在医学检验中的应用 越来越广泛。

工作报告之对流免疫电泳实验报告

工作报告之对流免疫电泳实验报告

对流免疫电泳实验报告【篇一:实验十一免疫电泳】免疫电泳技术抗原与抗体的结合在沉淀反应中,呈一定的分子比例。

不同抗原和抗体之间的分子比例是不同的,但只有在分子比例合适时,才出现可见的沉淀。

所以沉淀能否出现并不完全反映抗原和抗体是否存在和发生结合。

抗原结合多个抗体分子,称抗原为多价;抗体一般只能结合两个抗原分子(igm类抗体分子通常可以结合5个抗原分子)的抗原决定法簇,故为二价。

只有在彼此的结合价饱和时,才出现大量的抗原-抗体复合物沉淀。

当抗原与抗体的比例合适时,即二者结合价彼此饱和,就可形成网状结构的大分子抗原-抗体复合物沉淀,称为等价带。

若比例不合适时,抗体或抗原过量,则虽有抗原、抗体的结合,但不能大量形成网状结构的大分子复合物,沉淀量很少,甚至不出现沉淀。

在抗原、抗体数量关系曲线中,抗体过剩区域称为抗体过剩带,抗原过剩区域称为抗原过剩带。

如图1所示,在等价带的反应液中加入过量的抗原或抗体,沉淀复合物就会有部分溶解,甚至全部溶解的现象。

这是由于新加入的抗原或抗体竞争地结合相应的抗体或抗原,使网状大分子结构破坏,形成小分子复合物,致使沉淀出现溶解,沉淀量减少甚至完全消失。

在沉淀反应中,由于抗原过量而不出现沉淀的现象,称为前带现象。

此时不能误认为无沉淀就是无抗原存在,为了检测就必须稀释抗原。

抗体过量时,称为后带现象,同理需要稀释抗体进行检测。

图1的位置抗原与抗体的结合是依赖于两者分子结构的互补性,故其特异性高。

这种结合也是相当稳定的。

在一定条件下(过酸、过碱或浓盐存在下),二者可以分开,即结合是可逆的。

解离后的抗原、抗体的活性一般保持不变。

双向免疫扩散测定法原理双向扩散法(double diffusion)又称琼脂扩散法,是利用琼脂凝胶为介质的一种沉淀反应。

琼脂或琼脂糖凝胶是多孔的网状结构,大分子物质可以自由通过,这种分子的扩散作用可使分别处于两处的抗原和相应的抗体通过扩散相遇,形成抗原-抗体复合物,比例合适时出现沉淀。

凝集反应与沉淀反应

凝集反应与沉淀反应

凝集效价的判断:与相应菌液发生++凝集反应的血清最高稀释浓度为该被 检血清的凝集效价
双向琼脂扩散实验
1.材料
琼脂液,待测血清(未提供),肝癌患者AFP阳性血清(阳 性对照),生理盐水(阴性对照),AFP诊断血清(含AFP抗 体),载玻片,打孔器,毛细滴管
2.实验原理
AFP诊断血清中含有AFP的特异性抗体,肝癌患者阳性血清中含有AFP抗原作 为阳性对照,当待测血清中含有AFP抗原时,就会和AFP诊断血清中的AFP特异 性抗体发生抗原抗体反应,产生免疫沉淀线,反之则无免疫沉淀线,通过观察免 疫沉淀线的有无并和阳性对照对比,就可以判断待测血清中AFP的阳性或阴性。
Ag Ag + 生理 盐水 Ab Ag:肝癌病人AFP阳性血清 Ab:AFP诊断血清
实验结果 Ag与Ab间应出现乳白色免疫沉淀线 Ag与生理盐水间无乳白色免疫沉淀线出现
3. 实验方法
(1) 将配好的1%琼脂放到电炉子上融化,室温自然冷却 到 约60摄氏度。 (2)用玻璃吸管吸取琼脂液加入到载玻片上,使其铺满玻 片,等待其自然凝固。 (3)玻片下垫上打孔纸,用打孔器在凝固的琼脂板上打四 个相邻的孔。每两个相邻的孔不要太远,便于抗原抗体相遇。
对流免疫电泳
(4) 抗原孔内分别加入待测血清和AFP阳性血清,抗体孔 内加入AFP诊断血清和生理盐水阴性对照。 (5)将加好样的琼脂板置于电泳槽支架上,抗原孔置于负 极端,抗体孔置于正极端,琼脂板两端用纱布搭桥,使琼脂 板两端电流连通。设置电压60v,电泳40min开始电泳,电泳 结束观察结果。
Ab
Ab:AFP诊断血清
(4) 中心孔内加甲胎蛋白诊断血清,四周孔内分别加入待 测血清和肝癌患者阳性血清及生理盐水阴性对照。 (5)将琼脂版放入湿盒,置37摄氏度孵箱,24h后观察结果。

《兽医免疫学》实验课件:实验二 沉淀反应

《兽医免疫学》实验课件:实验二 沉淀反应

B
B
A
A抗体中针对B抗原 的抗体可以 跨越透过C抗原来自BCA
二、双向琼脂扩散试验
实验材料:
1、鸡传染性法氏囊病毒标准抗原; 2、鸡传染性法氏囊病毒标准阳性血清; 3、待检血清:来自受检鸡的新鲜血清; 4、平皿(Φ6cm)、打孔器、微量加样器等;
二、双向琼脂扩散试验
5、琼脂凝胶板: 将琼脂糖1.0克、NaCl 8.0克、蒸馏水100ml装
入三角烧瓶,煮沸,然后用吸管吸取7ml加入平皿 内(勿有气泡)使成约3mm厚的凝胶,待冷却凝 固后按如下图方式打孔。 注意:孔间距为孔的直径大小,打孔完毕要封底)
二、双向琼脂扩散试验
实验步骤:
中间孔加标准抗原, 外周孔加被检血清及阳性 血清(如要测被检血清的 效价,外周孔可倍比稀释 后依次加入)。加样后盖 上皿盖,37℃扩散24小时, 观察结果。
实验二 沉淀反应
一、环状沉淀反应 二、双向琼脂扩散试验
一、环状沉淀反应
目的:以炭疽环状沉淀反应为例,掌握 沉淀反应原理、操作方法及结果 的判定方法。
原理:将可溶性抗原层积于抗体之上,如 果二者相应,则可在抗原、抗体两 液接触界面形成白色的沉淀环。
一、环状沉淀反应
实验材料:
1.被检抗原(沉淀原)的制备: (1)热浸法 取可疑材料约1克,研碎,加入510mL生理盐水混合,转至试管内,煮沸30min,取出 冷却,用滤纸过滤,滤液即为被检的沉淀原。 (2)冷浸法 取疑为炭疽的皮革和兽毛,高压灭 菌后,取1cm2或兽毛数克浸于5-10倍的0.5%石炭酸生 理盐水中,4℃浸渍18-24小时,同上法过滤。
原理:
可溶性Ag与Ab在含有电解质的半固体(1%)琼 脂内进行自由扩散,当两者由高浓度向低浓度扩散相 遇时,如果二者相对应而且比例适当,则可在相遇处 形成白色的沉淀线,为阳性反应。另外,沉淀带对于 组成它的Ag、Ab具有特异地不可透过性,而对其它 的Ag与Ab是可透过的,所以一条沉淀带仅代表一种 AgAb系统的沉淀物。

实验二凝集沉淀反应

实验二凝集沉淀反应

材料:
待测血清、 AFP阳性血清、AFP诊断血清(兔抗人AFP )、 生理盐水、琼脂板、打孔器、针头、毛细滴管、酒精灯。
.
15
双向扩散法测血清中AFP操作步骤
1、制备琼脂板:
1%盐水琼脂加热溶化,取5ml均匀铺与载玻片上。
2、打孔:
琼脂凝固后,用打孔器打孔成梅花型,针头取出孔中琼脂。
3、封底:
用酒精灯轻烤平皿底部至琼脂刚刚要熔化为止,封闭孔的底部,以防侧漏。
应用:
检测 AFP 、HBsAg, 协助疾病诊断.
.
14
双向琼脂扩散法测血清中AFP
甲胎蛋白(AFP):
是一种在胚胎期由肝细胞和卵黄囊合成的α球蛋白, 存在于胎儿血清中,出生后血清中AFP几乎消失。正常 成人血清中仅含极微量的AFP,经典的免疫学方法检测 不出。
当肝细胞发生癌变时,AFP含量增高,测血清中AFP, 可协助诊断原发性肝癌。
本试验方法简单,容易观察结果,可测定抗原的灵敏度 约为10~20μg/ml.
应用:
人血清中IgG、IgM、IgA和C3的定量检测。
.
12
单向琼脂扩散实验:
琼脂中含抗体
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
1:80
1:40 1:20
1:10
未知
沉淀环直径平方
抗原浓度
.
13
(二)双向琼脂扩散试验 (操作)
原理:
将可溶性抗原与相应抗体两种溶液置于琼脂糖凝胶的不 同位置,使两者在凝胶中各自向四周扩散,抗原与抗体相遇并 在比例合适处形成可见的乳白色沉淀线。
伤寒血清 +
待测菌液
阴性
.

8
直接凝集反应玻片法--菌种鉴定

沉淀反应实验报告

沉淀反应实验报告

沉淀反应实验报告沉淀反应实验报告引言:沉淀反应是化学实验中常见的一种反应类型,通过溶液中的离子相互作用形成固态沉淀物。

本次实验旨在通过观察和分析沉淀反应的过程和结果,探究反应条件对沉淀形成的影响。

实验目的:1. 理解沉淀反应的基本原理和过程;2. 掌握沉淀反应的实验操作技巧;3. 研究不同条件下沉淀反应的变化规律。

实验材料和仪器:1. 实验材料:氯化银(AgCl)、氯化钡(BaCl2)、硝酸银(AgNO3)、硫酸钡(BaSO4)、盐酸(HCl)、硝酸(HNO3)、蒸馏水;2. 实验仪器:试管、滴管、玻璃棒、烧杯、热水浴。

实验步骤:1. 实验前准备:清洗实验仪器,准备所需试剂;2. 实验一:向两个试管中分别加入等量的氯化银溶液和硝酸银溶液,观察并记录反应结果;3. 实验二:向两个试管中分别加入等量的氯化钡溶液和硫酸钡溶液,观察并记录反应结果;4. 实验三:在一试管中加入氯化银溶液,滴加盐酸,观察并记录反应结果;5. 实验四:在一试管中加入氯化银溶液,滴加硝酸,观察并记录反应结果;6. 实验五:在一试管中加入氯化银溶液,加热至沸腾,观察并记录反应结果。

实验结果和分析:1. 实验一中,氯化银溶液与硝酸银溶液反应后生成白色沉淀,即氯化银(AgCl)。

这是因为氯化银溶液中的氯离子与硝酸银溶液中的银离子发生反应,生成不溶于水的氯化银沉淀。

2. 实验二中,氯化钡溶液与硫酸钡溶液反应后生成白色沉淀,即硫酸钡(BaSO4)。

这是因为氯化钡溶液中的钡离子与硫酸钡溶液中的硫酸根离子发生反应,生成不溶于水的硫酸钡沉淀。

3. 实验三中,氯化银溶液与盐酸反应后生成白色沉淀,即氯化银(AgCl)。

这是因为盐酸中的氯离子与氯化银溶液中的银离子发生反应,生成不溶于水的氯化银沉淀。

此外,盐酸的加入使反应溶液的酸碱度增加,促进了沉淀反应的进行。

4. 实验四中,氯化银溶液与硝酸反应后生成白色沉淀,即氯化银(AgCl)。

这是因为硝酸中的硝酸根离子与氯化银溶液中的银离子发生反应,生成不溶于水的氯化银沉淀。

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2、3两孔(待测血清)如与中心孔之间也出现了沉淀线,且一端与 相邻的阳性对照血清形成的沉淀线相吻合,则该待测血清为阳性。
如待测血清与中心孔出现了沉淀线,但与阳性对照血清的沉淀线相 交叉,不判为阳性。 如待测血清24h内与中心孔间无沉淀线则为阴性。
双向扩散法测血清中AFP注意事项
1、琼脂板一定平整、光滑 (无气泡),琼脂不可过厚; 2、打孔不要划破边缘; 3、加样要加满而不溢出为止; 4、合理分配吸管,Ag、Ab吸管不能混淆。
原理 玻片凝集试验是一种快速简便的检测方法,即抗
原抗体的反应在玻片上进行,是一种定性的试验。用 已知抗体检测未知抗原。
本试验用已知的伤寒杆菌标准诊断血清鉴定未知 细菌。
材料
伤寒杆菌诊断血清、伤寒杆菌菌液、生理盐水、 载玻片、接种环、蜡笔、酒精灯等。
直接凝集反应玻片法--菌种鉴定
操作步骤
❖ 取洁净玻片1张,用蜡笔划分2等份,如下图所示 ; ❖ 无菌操作,用接种环分别于一、二格内各加2~3环伤
注意事项
1、接种环在伤寒菌液取菌前后均需严格灭菌,以免出现假阳 性。 2、注意涂菌时,先涂生理盐水侧,以免污染血清产生错误结 果。 3、摇动玻片时不要把两凹内液体混在一起。
二、沉淀反应:
➢ 经典抗原抗体反应的一种。

+
可溶性抗原
➢ 分类:
✓ 琼脂扩散 ✓ 环状沉淀反应 ✓ 絮状沉淀反应 ✓ 免疫电泳
材料:
待测血清、 AFP阳性血清、AFP诊断血清(兔抗人AFP )、 生理盐水、琼脂板、打孔器、针头、毛细滴管、酒精灯。
双向扩散法测血清中AFP操作步骤
1、制备琼脂板:
1%盐水琼脂加热溶化,取5ml均匀铺与载玻片上。
2、打孔:
琼脂凝固后,用打孔器打孔成梅花型,针头取出孔中琼脂。
3、封底:
用酒精灯轻烤平皿底部至琼脂刚刚要熔化为止,封闭孔的底部,以防侧漏。
4、加样:
中间孔加抗AFP抗体,1、4孔加AFP阳性对照,2、3孔加待检血清,5、6孔加 生理盐水。
5、反应:
于湿盒,37C 24h。
1
6
2
5
3
4
抗AFP抗体
A1g
6
2 Ag?
Ab
5
3 Ag?
4
Ag
双向扩散法测血清中AFP实验结果
1
6
2
5
3
4
1
6
2
5
3
4
1、4两孔(阳性对照孔)与中心孔之间应出现清晰的乳白色沉淀线, 5、6(阴性对照孔)两孔与中心孔之间无沉淀线。
(一)单向琼脂扩散试验 (示教)
原理:
适宜浓度的抗体预先在琼脂中混匀后制成琼脂板,以 适当距离打孔,将可溶性抗原至孔中,抗原向周围扩散,与 琼脂中抗体相遇,抗原与抗体比例适宜时,出现沉淀。沉淀 环的直径与孔中抗原浓度呈正相关,可根据沉淀环直径大小 从预先绘制成的标准曲线查出待测标本中抗原含量。
本试验方法简单,容易观察结果,可测定抗原的灵敏度 约为10~20μg/ml.
谢谢
实验目的
1.熟悉凝集反应、沉淀反应的概念。 2.了解单向琼脂扩散实验的原理、方法及应用。 3.掌握直接凝集反应玻片法的原理、方法及其
用途。 4.掌握双向琼脂扩散实验的原理、方法、结果
判断。
实验原理
1.直接凝集反应:颗粒性抗原与相应抗体结合后所呈 现的肉眼可见的凝集现象。 。
2.沉淀反应:可溶性抗原与相应抗体在适当条件下结 合而出现的沉淀现象。
实验材料
伤寒杆菌诊断血清、伤寒杆菌菌液、生理盐水、 载玻片、接种环、记号笔、酒精灯;琼脂板、 打孔器、针头、毛细滴管、待测血清、 AFP阳 性血清、AFP诊断血清(兔抗人AFP )等。
实验内容
1.直接凝集反应:玻片法(操作) 2.沉淀反应: (1)单向琼脂扩散试验(示教) (2)双向琼脂扩散试验(操作)
常见抗原抗体反应的种类
抗原抗体反应又称血清学反应,主要有:
1、凝集反应 2、沉淀反应 3、补体参与反应 4、中和反应 5、免疫标记技术
一、凝集反应
(一)概念
颗粒性抗原(细菌、细胞等)与相应抗体结合,在 一定条件下,出现肉眼可见的凝集物,称为凝集反应。
颗粒性Ag 又称凝集原 相应Ab 又称凝集素
直接凝集反应玻片法--菌种鉴定
相应抗体
沉淀线或沉淀环
琼脂扩散试验:
琼脂是一种含有硫酸基的多糖体,高温时溶于 水,冷却后凝固,形成凝胶,呈多孔结构,充满水 分,允许各种抗原抗体分子自由扩散。二者于比例 适当处相遇,发生沉淀,形成可见的沉淀带。
分类:
单向琼脂扩散实验: 仅抗原或抗体扩散 —— 定量实验
双向琼脂扩散实验: 抗原和抗体同时扩散 —— 定性实验
寒杆菌诊断血清、生理盐水; ❖ 用接种环取待测菌液,分别涂布于生理盐水和伤寒血
清中,混匀; ❖ 轻轻摇动玻片,1~2分钟后观察结果。
生理盐水 +
待测菌液
阴性
伤寒血清 +
待测菌液

直接凝集反应玻片法--菌种鉴定
结果及判断
❖ 盐水侧无凝集颗粒; ❖ 血清侧出现肉眼可见的凝集块为阳性,仍为均匀一致乳浊
液者为阴性。
应用:
人血清中IgG、IgM、IgA和C3的定量检测。
单向琼脂扩散实验:
琼脂中含抗体
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
1:80
1:40 1:方
抗原浓度
(二)双向琼脂扩散试验 (操作)
原理:
将可溶性抗原与相应抗体两种溶液置于琼脂糖凝胶的不 同位置,使两者在凝胶中各自向四周扩散,抗原与抗体相遇并 在比例合适处形成可见的乳白色沉淀线。
凝集反应与沉淀反应的比较
抗原性质 反应时间 反应产物
凝集反应
沉淀反应
颗粒性或可溶性抗原致 可溶性 敏颗粒
几分钟
数小时至数天
凝集块
沉淀物
思考题
❖ 1、凝集反应的原理及直接凝集反应玻片法的 用途是什么?
❖ 2、沉淀反应的原理是什么?
作业
1 写出实验报告 2 分析凝集反应的结果和意义 3 绘出双向琼脂扩散试验结果图
应用:
检测 AFP 、HBsAg, 协助疾病诊断.
双向琼脂扩散法测血清中AFP
甲胎蛋白(AFP):
是一种在胚胎期由肝细胞和卵黄囊合成的α球蛋白, 存在于胎儿血清中,出生后血清中AFP几乎消失。正常 成人血清中仅含极微量的AFP,经典的免疫学方法检测 不出。
当肝细胞发生癌变时,AFP含量增高,测血清中AFP, 可协助诊断原发性肝癌。
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