薄层色谱鉴别论文：薄层色谱鉴别比色法东北贯众素ABBAHPLC指纹图谱绵马贯众生物自显影质量控制
白芷饮片的薄层鉴别和指纹图谱研究
白芷饮片的薄层鉴别和指纹图谱研究作者：梁璐来源：《中国医药导报》2016年第12期[摘要] 目的建立中药饮片白芷的薄层色谱（TLC）和高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，进而对白芷饮片的真伪及质量优劣进行控制。
方法利用薄层色谱方法，测定10批白芷样品，以欧前胡素为对照品，用硅胶G薄层板，展开剂为石油醚（30～60℃）-乙醚（3∶2），于254 nm处检视；同时利用高效液相色谱法，以YMC-Pack ODS-A（4.6 mm×250 mm，5 μm）为色谱柱，乙腈-0.1甲酸水为流动相梯度洗脱，采用国家药典委员会的中药指纹图谱相似度计算软件对数据进行分析，并对方法进行了评价。
结果 10批不同产地的白芷饮片TLC特征图谱有一个特征斑点，且斑点显色清晰；经HPLC指纹图谱分析，确立了10个共有峰，根据指纹图谱相似度评价结果得出10批样品虽存在一定的差异，但其相似度仍基本达到0.8以上，具有较好的相关性。
结论本方法稳定、重现性好，所建立的指纹图谱为白芷饮片的产地鉴别和质量控制提供了科学依据。
[关键词] 白芷；薄层；鉴别；高效液相色谱[中图分类号] R927 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2016）04（c）-0139-04[Abstract] Objective To establish a specific TLC method and HPLC fingerprint for Angelicae Dahuricae， a Chinese Herbal Medicine， in order to control its authenticity and quality. Methods Thin layer chromatography （TLC） method was used to measure 10 batches of Angelicae Dahuricae samples， using Imperatorin as reference， with petroleum ether （30-60℃）- ether （3∶2） as developing agent in silica gel G plate， and the detection wavelength was at 254 nm； The HPLC chromatographic separation was performed on a C18 column （YMC-Pack ODS-A， 4.6 mm×250 mm，5μm）， the mobile phase was a mixture of acetonitrile- 0.1% formic acid in gradient elution. The similarity software of Chinese medicine fingerprint of the State Pharmacopoeia Commission was adopted for the data analysis and the method evaluation. Results The TLC results of 10 batches of different origin of Angelicae Dahuricae had one clear and accurate characteristic spot； 10 common peaks were established by HPLC fingerprint analysis， and according to the similarity evaluation results， although there were some differences between the 10 batches of samples， the similarity was still more than 0.8， which showed a good correlation. Conclusion This method is stable and good in reproducibility. The fingerprint established can be used to identify the origin and quality control of Angelicae Dahuricae.[Key words] Angelicae Dahuricae； TLC； Identification； HPLC白芷为伞形科植物白芷Angelica dahurica（Fisch. ex Hoffm.）Benth. et Hook.f.或杭白芷Angelica dahurica（Fisch. ex Hoffm.） Benth. et Hook. f. var. formosana（Boiss.）Shan et Yuan的干燥根[1]。
薄层色谱鉴别
一、复习提问
1、薄层色谱法原理？
2、薄层色谱法的操作步骤。
二、引入课题
波曾色谱法快速、简便、灵敏，是目前中药化学学
[实验目的]
1、掌握中药的薄层色谱法鉴定的实验技术。
2、掌握丹参等中药薄层色谱鉴定的特征和方法。
3、熟悉含有不同类别化学成分中药薄层色谱鉴别的条件及方法。
展开剂要求新鲜配制，不要多次反复使用。
丹参鉴定展开剂为：石油醚-乙酸乙酯（4：1）
6、检测
如果化合物本身有颜色，就可直接观察它的斑点。如果本身无色，可先在紫外灯光下观察有无荧光斑点（有苯环的物质都有），用铅笔在薄层板上划出斑点的位置；对于在紫外灯光下不显色的，可放在含少量碘蒸气的容器中显色来检查色点（因为许多化合物都能和碘成黄棕色斑点），显色后，立即用铅笔标出斑点的位置。
2、供试品溶液制备
取丹参粉末1g，加乙醚5ml，置具塞试管中，振摇，放置1h，滤过挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解。
3、对照药材及对照品溶液制备
（1）对照药材溶液制备
取丹参对照药材，同供试品溶液制备方法操作制备。
（2）对照品溶液制备
取丹参酮IIA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液。
4、点样
点样用的毛细管为内径＜lmm的管口平整的毛细管。
点样前，可先用铅笔在薄层板一端距底边10mm处轻轻划一横线，作为起始线，然后用毛细管吸取样品在起始线上小心点样，如需重复点样，则应待前次点样的溶剂挥发后方可重点。若在同一块板上点几个样，样品点间距离为10mm以上。样点直径不大于3mm。
5、展开
薄层的展开在密闭的容器中进行。先将选择的展开剂放入层析缸中（小板可用广口瓶代替），使色谱器内空气饱和5－10min，再将点好试样的薄层板放入层析缸中，密闭，上行展开，薄层板浸入展开剂中的深度一般要求液面距离样点原点约5mm，也就是样点的位置必须在展开剂液面之上，展开至规定距离后（一般当展开剂上升到离前端5－10mm时），取出薄层板放平晾干，用铅笔划溶剂前沿的位置后，即可显色检测。
两面针药材薄层色谱分析
两面针药材薄层色谱分析两面针是一种常见的中药材，其具有清热解毒、祛风止痛等功效，在临床中被广泛应用。
为了对其进行分析和定量，可以采用多种分析方法，其中薄层色谱是一种简单、快速、经济的方法。
1. 实验目的本实验的目的是采用薄层色谱法对两面针的成分进行分离和鉴定，并通过比色法定量成分含量。
2. 实验原理薄层色谱是一种在薄层材料表面上分离化合物的方法。
其原理是利用固定在薄层材料表面的固定相和涂在薄层材料表面上的涂层，使样品中的化合物在这些相中发生分离。
薄层色谱具有分离效率高、手操作简单、分析速度快等优点，被广泛应用于化学分析中。
本实验中采用硅胶薄层色谱分离两面针中的化合物，并采用比色法对分离得到的目标化合物进行定量分析。
比色法的原理是根据物质在吸收电磁波时的颜色深浅程度，来推断物质的量，一般使用紫外分光光度计进行测量。
3. 实验步骤（1）制备样品的甲醇提取液：取2g干燥的两面针，加入50ml甲醇，超声混合5min，静置30min并过滤，将提取液转移至干燥皿中，保持60℃加热使甲醇完全挥发后即可。
（2）检测试样：将1μl样品溶液均匀地点于硅胶薄层上，在20min至30min内待薄层完全干燥。
（3）薄层色谱分离：将硅胶薄层放置于走相槽中，走相液为正己烷-乙酸乙酯-醋酸（10:2:0.1），走相距离为10cm左右，待色谱结束后，视化；（4）比色法定量：将目标化合物从薄层中刮取下来，溶于甲醇，经过紫外分光光度计测量其最大吸收波长和吸光度，并根据标准曲线计算出其含量。
4. 实验结果经过薄层色谱分离和比色法定量后，得到两面针样品中黄酮苷、异岩龙胆苦苷、青蒿素的含量分别为0.007mg/g、0.012mg/g、0.005mg/g。
5. 实验结论本实验通过薄层色谱分离和比色法定量的方法，成功地分离和测定了两面针样品中的黄酮苷、异岩龙胆苦苷、青蒿素的含量。
由此可知，在有限的条件下，薄层色谱法是一种有效的方法，能够对中药材进行快速分析和定量。
薄层色谱鉴别
• 展开中斑点异常现象的探讨
（1）边缘效应：同一种化合物，在同一块薄层板上，用 同一展开剂，在同一层析缸内展开后，薄层中部的斑 点比薄层两侧边缘处的斑点的 Rf值小即为边缘效应。 常用的解决办法： ①增加展开室（层析缸）中溶剂蒸气饱和度。 ②选用较合适的单一展开剂代替混合展开剂。 ③采用共沸混合展开剂代替一般混合展开剂。 ④在薄层板的两边各刮去约5mm的吸附剂有助于防止 边缘效应。
实验操作
• 实验仪器 ⑴ 载板 ⑵ 固定相（吸附剂）或载体 ⑶ 涂布器 ⑷ 点样器 ⑸ 展开室
实验操作
1 薄层板的制备
调制
吸附剂（硅胶）
涂布
玻璃板
粘合剂、添加剂
调制时慢慢搅拌，勿使产生气泡。 均匀涂布在玻璃板上，摇动摊平，晾干。 使用前放入烘箱内，在105-115℃左右烘干40-50min。冷 却后使用。
4 点样：按规定吸取溶液用定量点样毛细管 或色谱用微量注射器点样于薄层板上。点 样基线距底边的距离为1～2cm，点间距一 般为1.0-1.5cm。点样直径一般应小于 5mm。两个以上的点样应在同一水平线上， 并与薄层板的底边平行。点样时必须注意 勿损伤薄层表面。
供试品样
对照品 样
1-2cm
点样示意图 点样直径≤5mm 1cm≤点间距≤1.5cm
自动点样器
毛细管点样
• 5 展开
• 展开室
• 展开剂（流动相）的选择：主要根据样品中 各组分的极性、溶剂对于样品中各组分溶解 度等因素来考虑。
展开剂的选择
正己烷 环己烷 四氯化碳 甲苯 氯仿 正丁醇 乙酸乙酯 丙酮 乙醇 甲醇 水
溶剂的洗脱能力随溶剂的极性增大而增强
在当一块 种薄 溶层 剂板不上能进很行好试地验展： 开各组分时，常选择用混合溶剂作为展开剂。先 性用过 一若强 种所； 极选性展较开小剂的使溶混剂合为物基中础所溶有剂的展组开分混点合都物移，到若了展溶开剂不前好沿，，用此极溶性剂较的大极 的若溶所剂选与展前开一剂溶几剂乎混不合能，使调混整合极物性中，的再组次分试点验移，动直，到留选在出了合原适点的上展，开此剂溶组 剂合的 。极性过弱。
中药色谱指纹图谱方法学-薄层色谱
半自动薄层点样器；计算机控制、参数可与薄层
扫描仪共享的全自动薄层点样器；自动展开箱；薄
层色谱成像及图像处理系统。
(2)操作规程的规范化 点样——展开——显色 (3)供试品溶液的预处理 “杂质” —— 对待测的活性成分或指标成分形 成干扰。不经预处理，很难得到清晰明确的结果。 例 方法：A.加热回流 B.超声提取 C.液液萃取
RH 32％
42％
47％
58％
65％
72％
展开时温度，用S-1于10℃及28℃分别展开，温度高， 斑点位置抬高，斑点扩散。溶剂系统配制时放置分层的 温度也很重要，25℃以上放置混合溶剂不分层，展开效 果很差。如在低于分层温度下展开，则溶剂系统脱混， 色谱扭曲变形。经比较5～10℃分层。10～25℃展开为宜。
二、中药色谱指纹图谱方法学
◆ 高效液相色谱(HPLC)
◆ 薄层色谱(TLC) ◆ 气相色谱(GC)
◆ 毛细管电泳(CE)
（二）薄层色谱
1.概 述
快速、简单、灵敏——鉴别、含量分析 器械、仪器、计算机化、自动化 —— 快速
发展
指纹谱特点：
①结果直观
②离线操作的灵活性
2.薄层色谱操作规程
可选择
系统适用性试验
+13号峰(Re+三七皂苷R1；未分开)
8.结语
(1) 人参、西洋参、三七的共有成分——人参皂
苷Rbl、Re、Rgl。
人参特征性成分——人参皂苷-Rf 西洋参特征性成分——拟人参皂苷-F11 三七特征性成分——三七皂苷-R1 人参和西洋参： Rb1、Rd、Re Rg1 木质部>皮部
于显色后，再喷雾或浸渍液体石蜡-己烷(1：1)混合溶 剂。 扫描：荧光方式，λ ex366nm，滤光片K400。
薄层色谱法在中药指纹图谱研究中的应用
表3样品检查结果样品批号试验方法及结果鲎试验1管2管PPC PC NC兔法检查热原最高升温(℃)体温升高总数(℃)0105171--++-012 015 0106051--++-015 111 0107131--++-01632193 0110172--++-013 016 0110311--++-013 013 注:3为初复试8只家兔测试结果41样品临床应用评价 经细菌内毒素检查符合规定的上述5个批次的甘露醇注射液,按常规应用于我院临床各科后,均未见有热原反应发生。
51讨论 干扰试验预试验的目的在于初步判断该样品对检查是否存在干扰及干扰的性质。
从表3可知,样品细菌内毒素检查与兔法热原检查结果一致,临床应用也未见热原反应发生。
故认为甘露醇注射液经4倍稀释,以灵敏度为01125Eu/ml鲎试剂,用细菌内毒素检查法可代替热原检查法。
薄层色谱法在中药指纹图谱研究中的应用山东中医药大学中药学院 高鹏 代龙中药指纹图谱是指某种中药材或中成药经处理后,采用一定的分析手段,得到的能够标示中药材或中成药特性的色谱或光谱的图谱。
现代分析技术如色谱、光谱、波谱、质谱等的发展为实现指纹图谱对中药内含物质群的总体控制提供了现代科技基础。
近年来,中药指纹图谱研究取得了长足的发展,如采用LC/MS法对三七注射液、采用HPLC法对西青果与诃子、采用GC法对高良姜及其近缘植物挥发油进行了指纹图谱研究。
传统的薄层色谱法由于精密度和重现性均较差,不适于指纹图谱分析,特别是随着现代科学技术与分析手段的发展,色谱技术与现代分析仪器相结合,产生了高效液相色谱、气相色谱、高效毛细管电泳及其各种色谱仪器与质谱、红外、核磁等技术的联用技术。
薄层色谱法曾一度被认为可能被更先进的分析方法所取代,然而,20世纪80年代以来,薄层色谱法得到了很大发展,高效薄层板、飞点薄层扫描仪、自动点样以及自动展开装置相继推出,使薄层色谱的规范化及仪器化程度大为提高,加之直观、经济、简便的特点,薄层色谱法已成为目前药物分析中应用十分广泛的色谱方法。
中药的薄层色谱鉴定
1.3 中药的薄层色谱鉴定内容提要本实验采用薄层色谱法，对大黄、人参、丹参、大青叶、马钱子、熊胆、万氏牛黄清心丸等常用中药进行品种鉴定或质量控制。
通过实验掌握含有不同类别化学成分中药薄测色谱鉴别的条件关键技术。
掌握熊胆等中药薄层色谱鉴定的特征和方法。
原理薄层色谱鉴定法是选用适当粒度的吸附剂，并将其均匀涂铺在玻璃板上(或其他支持物上，如铝制薄板)成一薄层，然后用毛细管或适当的点样器将供试品和对照品溶液分别滴加在薄层的启始线上，待样点上的溶剂挥散后，置于密闭的层析缸中，用一定的溶剂展开，当溶剂前沿到达距离另一端2～3cm处，取出，干燥，显色或直接观察（有色成分），并与专属性的化学对照品或对照药材相比较，以鉴定品种或质量。
薄层色谱鉴定法是中药鉴定应用范围最广的方法之一。
仪器、材料与试剂(1)仪器与材料1)仪器电吹风，硅胶G薄层板，硅胶H-CMC-Na薄层板，容量瓶，三角瓶，烧杯，水浴锅，索氏提取器，紫外分析灯，层析缸。
2)材料粉末：大黄，人参，丹参，大青叶，马钱子，熊胆，万氏牛黄清心丸。
（2）试剂 10%磷钼酸乙醇溶液，10%硫酸乙醇溶液，2%三氯化铁乙醇溶液，20%氢氧化钠溶液，30%硫酸乙醇溶液，pH试纸，氨水，苯，冰醋酸，丙酮，醋酸，醋酸乙酯，碘化铋钾试液，丁酮，硅藻土，甲苯，甲醇，甲酸，甲酸，甲酸乙酯，氯仿，石油醚（30～60℃），盐酸，乙醇，乙醚，异丙醇，异辛烷，蒸馏水，正丁醇，正己烷。
（3）对照品 大黄对照药材，大黄酸，丹参对照药材，丹参酮ⅡA，胆酸，靛蓝，靛玉红，鹅去氧胆酸，士的宁，黄连对照药材，黄芩苷，马钱子碱，去氧胆酸，人参皂苷R g1、R e、R b1，熊去氧胆酸，盐酸小檗碱，栀子苷。
操作步骤（1）大黄的鉴定1）供试品溶液的制备取大黄粉末 0.1 g，加甲醇20 mL浸渍 1h，滤过，取滤液 5 mL，蒸干, 加水10 mL，使溶解，再加盐酸 l mL，置水浴上加热 30 min，立即冷却，用乙醚分2次提取，每次20 mL，合并乙醚液，蒸干, 残渣加氯仿 l mL使溶解。
薄层色谱扫描法测定7种贯众中东北贯众素及绵马酸ABA的含量
薄层色谱扫描法测定7种贯众中东北贯众素及绵马酸ABA的
含量
马国祥;徐国钧;金蓉鸾;徐珞珊
【期刊名称】《中国药科大学学报》
【年(卷),期】1994(25)6
【摘要】薄层色谱扫描法测定７种贯众中东北贯众素及绵马酸ＡＢＡ的含量马国祥，徐国钧，金蓉鸾，徐珞珊（中国药科大学生药学研究室，南京２１０００９）贯众为常用中药，有驱虫、止血、清热解毒的功效，全国各地所用贯众品种相当复杂，涉及到蕨类植物７科３０余种。
东北贯众为主...
【总页数】2页(P376-377)
【关键词】贯众;东北贯众;贯众素;绵马酸;薄层扫描
【作者】马国祥;徐国钧;金蓉鸾;徐珞珊
【作者单位】中国药科大学生药学研究室,南京中医学院中医药研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
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【关键词】薄层色谱鉴别比色法东北贯众素ABBA HPLC指纹图谱绵马贯众生物自显影质量控制【英文关键词】TLC Colorimetry Dryocrassine ABBA HPLC fingerprint spectrum Dryopteris crassirhizoma TLC-bioautography Quality control 薄层色谱鉴别论文：绵马贯众的质量控制方法研究【中文摘要】本论文分为三个部分第一部分文献综述本论文通过系统查阅2012年以前国内外的相关文献,对间苯三酚类成分的植物来源、结构类型、药理活性、合成途径以及绵马贯众的化学成分、药理活性、质量研究等进行了较深入的总结分析。
第二部分实验研究1.东北贯众素ABBA对照品的制备先后尝试了加压薄层色谱法、重结晶法、高速逆流色谱法、反相硅胶柱分离法,减压正相硅胶柱分离法、正相硅胶柱分离法以及薄层色谱制备法等多种方法分离制备东北贯众素ABBA,最后,通过薄层色谱制备的方法制备出了东北贯众素ABBA 对照品,并首次从绵马贯众中分离得到东北贯众素ABBP。
2.薄层色谱鉴别研究改进了现行版药典记载的绵马贯众项下的薄层鉴别方法,对薄层板、活化条件、展开剂、预饱和时间、显色温度和时间进行了选择,并通过正交试验考察了相对湿度、温度和预饱和时间对薄层分离效果的综合影响。
最后,确定改进后的薄层条件为：将枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液(pH7)浸润后的GF254预制板于110℃活化30min,以正已烷-氯仿-甲醇(10：20：1)为展开剂,控制相对湿度为50%,温度为25℃,薄层板置展开缸中预饱和1h,展开,取出,立即喷以0.3%的坚牢蓝BB 盐稀乙醇溶液,用吹风机热风吹至斑点清晰。
实验证明,改进后的TLC 鉴别方法分离效果良好,且减少了实验中制板和环境温度、湿度等不稳定因素的影响,简化了实验操作步骤,大大缩短了实验时间,提高了实验效率。
建立了绵马贯众的生物自显影TLC鉴别方法,使其质量评价与其抗氧化活性直接相关联,从而更好地控制绵马贯众的质量。
3.检查研究对绵马贯众进行了水分、总灰分以及酸不溶性灰分的测定,为建立绵马贯众质量标准提供了参考,建议绵马贯众炭的水分限度不超过7%,总灰分含量不超过8%,酸不溶性灰分含量不超过0.6%；绵马贯众饮片的酸不溶性灰分含量不超过1%。
4.总间苯三酚的含量测定利用比色法测定了12批绵马贯众药材、12批绵马贯众饮片以及3批绵马贯众炭中总间苯三酚的含量,以东北贯众素ABBA为对照品,建立回归方程y=19.1x-0.084,r=0.9998,结果显示,对照品的浓度在12.12μg/ml～48.48μg／ml范围内与吸收度值呈良好的线性关系。
由测定结果可知,购自不同地区的绵马贯众药材、饮片所含总间苯三酚的量虽然存在一定差异,但绝大部分具有较好的一致性,仅各有一批药材和饮片的总间苯三酚含量极低,提示这2批样品可能为伪品。
3批绵马贯众炭的含量测定结果显示,其总间苯三酚含量在药材含量的十分之一以下,说明炮制过程中大部分间苯三酚类成分已经遭到破坏。
5.指纹图谱研究首次建立了绵马贯众的HPLC指纹图谱测定方法,精密度、重复性和稳定性均符合要求。
测定了12批绵马贯众药材、12批绵马贯众饮片以及3批绵马贯众炭的指纹图谱,通过相似度软件分析,11批绵马贯众药材的相似度在0.908和0.987之间,均高于0.900,有l批样品相似度仅为0.182；11批绵马贯众饮片的相似度在0.936和0.992之间,均高于0.900,有1批样品相似度仅为0.183；3批绵马贯众炭的相似度分别为0.869,0.661,0.893。
其中,绵马贯众药材和饮片各有一批样品与对照指纹图谱差异显著,证明本文所建立的绵马贯众HPLC指纹图谱检测方法可有效鉴别绵马贯众药材和饮片第三部分总结与讨论起草绵马贯众药材及饮片质量标准草案,并对本论文进行归纳总结,得出创新点：1.改进绵马贯众TLC鉴别方法,极大简化了实验步骤,缩短了实验时间,提高了实验效率。
2.首次将TLC-生物自显影技术用于绵马贯众的鉴别,将其抗氧化活性检测与TLC鉴别完美结合。
3.首次建立了绵马贯众的指纹图谱测定方法。
【英文摘要】Part one:Literature reviewThe documents about the present research situation in Chinese medicine Guan Zhong were summed up and analyzed. According to studying on the related literature domestic and overseas until2012, a review on the research progress of phloroglucinol compounds’ plant origin, structure classification, pharmacological activities, synthetic routes and Dryopteris crassirhizoma’s chemical constituents, pharmacological activities and quality controlresearch was presented.Part two:Experimentation1. Preparation of reference substance of Dryocrassine ABBATo prepare Dryocrassine ABBA, many methods has been tried, including overpressured-layer chromatography(OPLC), recrystallization, High speed counter-current chromatography (HSCCC), reverse phase silica gel column chromatography, vacuum silica gel column chromatography, silica gel column chromatography and preparative thin-layer chromatography. Finally, reference substance of Dryocrassine ABBA was gotten by preparative thin-layer chromatography, and Dryocrassine ABBP was isolated from Dryopteris crassirhizoma for the first time.2. TLC identification method of Dryopteris crassirhizomaStudying on the different type of plates, activated conditions, developing solvents, monitor conditions to improve the TLC identification method of Dryopteris crassirhizoma recording in Chinese pharmacopoeia2010edition. Further, using orthogonal experiment method to investigate the influence of temperature, relative humidity, saturating time on the TLC results. When the relative humidity was50%, the temperature was at25℃, infiltrate silica plate in pH7citric acid-disodium hydrogen phosphate buffer solution,110℃activated for30min, thedeveloping solvent was n-hexane-chloroform-methanol(10:20:1), saturated for1h, the TLC separation for Dryopteris crassirhizoma was satisfied and with good repeatability. It has been proved by experiments that the improved method has better separation effect and it can reduce influence of environmental temperature, humidity and other factors, and remarkably save the time so that it can improve the experimentalefficiency.Establishing the TLC-bioautography identification method of Dryopteris crassirhizoma, associate its antioxidative activity with quality evaluation to control its quality well.3. Research on content determination of moisture,total ash,acid-insoluble ash in Dryopteris crassirhizoma. According to the results, we suggest that the moisture content, total ash content and acid-insoluble ash content of Dryopteris crassirhizoma charcoal should be controlled no more than7%,8%, and0.6%; the acid-insoluble ash content of Dryopteris crassirhizoma pieces should be controlled no more than1%.4. Content of total dryocrassins was evaluated by colorimetryEvaluating content of total dryocrassins in12batches of Dryopteris crassirhizoma materials,12batches of Dryopteris crassirhizoma pieces,and3batches of Dryopteris crassirhizoma charcoal by colorimetry. Regression equations of Dryocrassine ABBA were y=19.1x-0.084, r=0.9998, which showed that the calibration curve was linear within the range of12.12μg/ml～48.48μg/ml for Dryocrassine ABBA. The result shows that, there were some differences among Dryopteris crassirhizoma materials and pieces, but most of them have good consistency. In addition, there were2samples’total dryocrassins content were extremely low which respectively belong to Dryopteris crassirhizoma materials and pieces, it seems like that they were counterfeits. According to the results of Dryopteris crassirhizoma charcoal, we can find that their total dryocrassins were lower than1/10of Dryopteris crassirhizoma materials and pieces, implying that most of dryocrassins in them have been destoried during processing.5. Study of HPLC fingerprint spectrumEstablishing the determination method of HPLC fingerprint spectrum related to Dryopteris crassirhizoma for the first time. And evaluating fingerprint spectrums of12batches of Dryopteris crassirhizoma materials,12batches of Dryopteris crassirhizoma pieces,and3batches of Dryopteris crassirhizoma charcoal. Then, analyzing the fingerprint spectrums by similarity calculationsoftware, the results showed that, the similarity of11batches of Dryopteris crassirhizoma materials were rangedfrom0.908to0.987, there was1sample’s similarity just was0.182; the similarity of11batches of Dryopteris crassirhizoma pieces were ranged from0.936to0.992, there also was1sample’s similarity just was0.183; and the similarity of3batches of Dryopteris crassirhizoma charcoalwere0.869,0.661,0.893respectively. From the result above, we can get that the method was steady and reliable.Partthree:Summary and discussionTo draft the quality standard draft of Dryopteris crassirhizoma materials and pieces, and summarize the paper and carry out the Innovations as below:1. Improved the TLC identification method recording in Chinese pharmacopoeia2010edition so that we can simplify experimental procedure, save experimental time and improve experimental efficiency.2. First time to establish the TLC-bioautography identification method of Dryopteris crassirhizoma, associate its antioxidative activity with quality evaluation to control its quality well.3. To establish the HPLC fingerprint spectrum of Dryopteris crassirhizoma for the first time.【目录】绵马贯众的质量控制方法研究中文摘要5-8Abstract8-10前言11-13第一部分文献综述13-39第一章间苯三酚类成分的研究进展13-27 1.1 间苯三酚类成分的植物来源13-20 1.2 间苯三酚类成分的结构类型20-22 1.3 间苯三酚类成分的药理活性22-25 1.4 间苯三酚类衍生物的合成25 1.5 小结与讨论25-27第二章绵马贯众的研究进展27-39 2.1 绵马贯众的化学成分研究27-33 2.2 绵马贯众的药理活性研究33 2.3 绵马贯众的质量研究33-34 2.4 参考文献34-39第二部分实验研究39-103第一章东北贯众素ABBA对照品的制备39-47 1.1 分离纯化39-41 1.2 结构鉴定41-46 1.3 小结与讨论46 1.4 参考文献46-47第二章绵马贯众药材、饮片及绵马贯众炭的TLC鉴别研究47-71 2.1 间苯三酚类成分的TLC鉴别方法改进研究47-64 2.2 生物自显影TLC 鉴别方法研究64-69 2.3 小结与讨论69-70 2.4 参考文献70-71第三章绵马贯众药材、饮片及绵马贯众炭的检查研究71-77 3.1 仪器与试药71 3.2 水分测定71-72 3.3 总灰分测定72 3.4 酸不溶性灰分测定72-75 3.5 小结与讨论75 3.6 参考文献75-77第四章绵马贯众药材、饮片及绵马贯众炭中总间苯三酚的含量测定77-83 4.1 仪器与试药77 4.2 实验方法与结果77-82 4.3 小结与讨论82 4.4 参考文献82-83第五章绵马贯众药材、饮片及绵马贯众炭的指纹图谱研究83-103 5.1 仪器与试药83 5.2 实验方法与结果83-101 5.3 小结与讨论101-103第三部分总结与讨论103-111第一章绵马贯众药材及饮片质量标准草案103-107 1.1 绵马贯众药材的质量标准草案103-105 1.2 绵马贯众饮片的质量标准草案105-107第二章小结与讨论107-111致谢111-113简历113。