人教版生物选修一讲义：专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 含答案
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学习目标：1.明确用培养基对微生物进行选择的原理。
(重点) 2.学会统计微生物数量的方法。
(重点) 3.能进行实验设计与操作，并对实验结果进行分析和评价。
(难点)1．研究思路(1)筛选菌株的思路①自然界中目的菌株的筛选ⅰ依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
ⅱ实例：PCR 技术过程中用到的耐高温的Taq DNA 聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq 细菌中提取出来的。
②实验室中目的菌株的筛选ⅰ原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。
ⅱ方法：利用选择培养基分离。
a ．选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时阻止或抑制其他种类微生物生长的培养基。
b ．实例：选择分解尿素的细菌的培养基，以尿素作为唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。
(2)统计菌落数目①常用方法：稀释涂布平板法。
ⅰ原理⎩⎪⎨⎪⎧a.当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌b.通过统计平板上的菌落数来推测样品中 大约含有的活菌数ⅱ计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M 。
C：代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。
V：代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。
M：代表稀释倍数。
ⅲ注意事项a．为了保证结果准确，一般设置三个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。
b．统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
因此，统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。
c．设置对照：主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
②其他方法：利用显微镜直接计数。
2．实验设计及操作提示(1)实验设计①土壤取样从富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土壤取样。
先铲去表层土，在距地表约3～8 cm的土壤层取样。
②样品的稀释ⅰ稀释原因：样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目。
ⅱ稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证获得菌落数在30～300之间，便于计数。
ⅲ微生物的培养与观察a．培养：不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。
b．观察：每隔24_h统计一次菌落数目，最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
(2)操作提示①无菌操作ⅰ取土样的用具在使用前都需要灭菌。
ⅱ应在火焰旁称取土壤，并在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。
ⅲ在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。
②做好标记：本实验使用的平板和试管比较多。
为避免混淆，最好使用前就做好标记。
③制定计划：对于耗时较长的生物实验，要事先制定计划，以便提高工作效率。
(3)菌种鉴定①原理：分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，使培养基的碱性增强。
②方法：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。
1．判断对错(1)因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离。
()(2)测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同。
()(3)如果得到了两个或两个以上菌落数目在30～300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数。
()(4)牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显少于选择培养基上的菌落数目，说明选择培养基已筛选出一些菌种。
() 提示：(1)√(2)√(3)√(4)×牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显大于选择培养基上的菌落数目，才说明选择培养基具有筛选作用。
2．产生每个标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是()A．一个细菌，液体培养基B．许多细菌，液体培养基C．一个细菌，固体培养基D．许多细菌，固体培养基C[在微生物的培养中产生每个标准菌落的细菌的最初数目是一个细菌，使用的培养基为固体培养基。
]微生物的筛选与计算1．根据选择培养基的原理，如何筛选出耐酸菌？提示：可将培养基的pH调至酸性，再接种培养。
2．如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？提示：统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板上菌落数的平均值，然后按照公式进行计算。
3．稀释涂布平板法和显微计数法对微生物计数产生的实验误差如何？试分析原因。
提示：稀释涂布平板法计数的值比实际值偏小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落；显微计数法计数的结果比实际值偏大，原因是显微镜下无法区分细胞的死活，计数时包括了死细胞。
[归纳总结]1．选择培养基的选择作用(1)原理：根据不同微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性不同而制备培养基。
(2)方法：①在培养基中加入某种化学物质。
例如，加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。
②改变培养基中的营养成分。
例如，缺乏氮源时可以分离固氮微生物；石油作为唯一碳源时，可以分离出能消除石油污染的微生物；用含无机碳源的培养基分离自养型微生物。
③改变微生物的培养条件。
例如，将培养基放在高温环境中培养可以得到耐高温的微生物；用普通培养基在无氧条件下分离厌氧型和兼性厌氧型微生物。
2．统计菌落数目的方法微生物生长量的测定有计数法、重量法、生理指标法等方法，但是一般使用计数法，计数法可分为直接计数法和间接计数法。
二者的比较如下表所示：项目直接计数法间接计数法原理利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌主要用具显微镜、细菌计数板培养基计数数据菌体本身培养基上菌落数优点计数方便、操作简单计数的是活菌缺点死菌、活菌都计算在内操作较复杂，有一定误差计算公式每毫升原液含菌数＝每小格平均菌体数×400×10 000×稀释倍数每毫升原液含菌数＝培养基上平均菌落数×稀释倍数÷涂布液体积特别提醒：能在选择培养基上生长的不一定是所需要的目的菌原则上选择培养基只能允许特定种类的微生物生长，但实际上，微生物的培养是一个非常复杂的问题，有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖，自然界中的微生物往往是混杂生长的。
人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。
下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。
步骤如下：①制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。
②为了得到更加准确的结果，应选用________法接种样品。
③适宜温度下培养。
结果分析：(1)测定大肠杆菌数时，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，与事实更加接近的是________。
A．一个平板，统计的菌落数是230B．两个平板，统计的菌落数是220和260，取平均值240C．三个平板，统计的菌落数分别是400、212和256，取平均值289D．四个平板，统计的菌落数分别是210、260、240和250，取平均值240(2)一同学在稀释倍数为106的培养基上测得平板上菌落数的平均值为212，那么每毫升样品中的菌落数约是(涂布平板时所用的稀释液体积为0.2 mL)________。
(3)用这种方法测定菌体密度时，实际活菌数量要比测得的数量________(填“多”或“少”)，因为__________________________________________________________________________________________________________。
[技巧点拨](1)因为题中操作的目的需要对大肠杆菌进行数量的测定，所以接种的方法是稀释涂布平板法。
(2)测定活菌数量时，选择的平板越多误差越小，且选择的平板要能形成30～300个菌落。
(3)所做的多个平板中，如果其中一个平板中菌落的数目明显多于或少于其他几个平板，则说明该平板不符合要求，应重做或舍弃。
[[解析]]若对大肠杆菌进行计数，则需要用稀释涂布平板法接种样品。
(1)应选取多个菌落数相差不大的平板进行计数，取其平均值。
(2)212÷0.2×106＝1.06×109(个)。
(3)因为一个菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多。
[[答案]]步骤②：稀释涂布平板结果分析：(1)D(2)1.06×109个(3)多当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(1)如果某同学的稀释倍数仅为104，则测定的数值要比题中操作的数值高还是低？为什么？(2)第(1)小题C项中菌落数为400的平板不符合要求，试分析该平板中菌落数目多于其他平板的可能的原因。
提示：(1)低，因为稀释倍数太低，则大部分菌落是多个细菌繁殖而成，所以观察到的菌落的数值要低于由单一细菌形成的菌落数值。
(2)①培养基被污染，一些菌落是由杂菌繁殖而成的；②接种过程中由于操作不当感染了杂菌；③取菌液时没有摇晃，所取菌液中细菌个体浓度偏大等。
1．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是()①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A．①③⑤⑦B．②④⑥⑧C．①③⑤⑧D．①④⑥⑦C[要分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中尿素应是唯一的氮源，不能加硝酸盐；在固体培养基上形成菌落，要加琼脂作凝固剂；分解尿素的细菌是异养生物，要加有机碳源(如葡萄糖)。
]2．某同学在稀释倍数为106的培养基上测得平板上的菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)()A．2.34×108个B．2.34×109个C．234个D．23.4个B[平板上菌落的平均数×稀释倍数÷体积＝每毫升样品中的菌落数，即234×10×106＝2.34×109个。
]实验设计与操作1．为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？当测定时为什么要将稀释的范围放宽一些？提示：这是因为土壤中各类微生物的数量(单位：株/kg)是不同的；为确保能从中选择出菌落数在30～300之间的平板进行计数。
2．在稀释涂布平板法中，为何需涂布3个平板？提示：作为重复实验，统计时取平均值，以减少偶然因素对实验结果的影响，增强实验结果的说服力。
3．统计菌落数目的理论依据是什么？提示：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
4．为什么要选取菌落数目稳定时的记录作为结果？提示：尽量缩小统计的菌落数与实际活菌数的差值，因为繁殖慢的菌体开始看不出明显的菌落。
(人教版)高中生物选修1专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 Word版含解析
专题2 微生物的培养与应用课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养细菌后，指示剂将( )A．变蓝色B．变红色C．变黑色D．变棕色解析：细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，加入酚红指示剂将变红。
答案：B 2．测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是( )A．细菌个体小，真菌个体大B．细菌易稀释，真菌不易稀释C．细菌在土壤中数量比真菌多D．随机的，没有原因解析：土壤中的微生物大约70%～90%是细菌，真菌的数量要比细菌少。
样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少。
在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30～300，适于平板计数，所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。
答案：C 3．用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。
原因是( )A．平板上的一个菌落就是一个细菌B．菌落中的细菌数是固定的C．此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D．此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数相同解析：用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌，但偶尔也能来自两个细菌，所以此方法统计的菌落数可能与活菌的实际数不相同。
答案：C4．土壤中的细菌能分解尿素，是因为它们能合成一种( )A．尿素酶B．脲酶C．蛋白酶D．肽酶解析：能够分解利用尿素的细菌，其细胞内含有脲酶，可以把尿素分解成氨，然后进一步利用。
答案：B5．回答有关微生物的培养与应用问题：(1)微生物的培养需要使用培养基，不同培养基的配方不同，但一般都含有________、碳源、氮源；在配制从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基时，需加入____ ____作为唯一的碳源，该培养基属于________培养基；若将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是________，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生________来筛选纤维素分解菌。
2019-2020学年人教版生物选修一讲义：专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 Word版含答案.pdf
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学习目标：1.明确用培养基对微生物进行选择的原理。
(重点) 2.学会统计微生物数量的方法。
(重点) 3.能进行实验设计与操作，并对实验结果进行分析和评价。
(难点)1．研究思路(1)筛选菌株的思路①自然界中目的菌株的筛选ⅰ依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
ⅱ实例：PCR 技术过程中用到的耐高温的Taq DNA 聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq 细菌中提取出来的。
②实验室中目的菌株的筛选ⅰ原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。
ⅱ方法：利用选择培养基分离。
a ．选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时阻止或抑制其他种类微生物生长的培养基。
b ．实例：选择分解尿素的细菌的培养基，以尿素作为唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。
(2)统计菌落数目①常用方法：稀释涂布平板法。
ⅰ原理{a.当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌b.通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数)ⅱ计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M 。
C：代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。
V：代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。
M：代表稀释倍数。
ⅲ注意事项a．为了保证结果准确，一般设置三个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。
b．统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
因此，统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。
c．设置对照：主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
②其他方法：利用显微镜直接计数。
2．实验设计及操作提示(1)实验设计①土壤取样从富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土壤取样。
先铲去表层土，在距地表约3～8 cm的土壤层取样。
高二生物人教版选修一讲义专题二课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、研究思路1．筛选菌株(1)原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。
(2)选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
2．统计菌落数目(1)常用方法：稀释涂布平板法。
当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
(2)测定微生物数量的常用方法还有显微镜直接计数法。
3．设置对照：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
二、实验设计土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察1．土壤取样一般要铲去表层土，因为绝大多数细菌分布于距地表约3～8_cm的土壤层。
2．样品的稀释：不同的微生物需要稀释的倍数不同。
(填表)3.(1)培养：不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。
(2)观察：每隔24_h统计一次菌落数目，最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
三、操作提示1．无菌操作：取土样用的小铁铲和盛土样的信封都要进行灭菌；称取土样要在火焰旁进行，稀释样品要在火焰旁操作。
2．做标记：对平板和试管进行标记，尤其进行系列稀释时要按照稀释度递增的顺序将试管排列成行。
3．制定计划：对于耗时较长的生物实验，要事先规划时间，以便提高工作效率。
四、菌种鉴定1．原理：分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，使培养基的碱性增强。
2．方法：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。
1．筛选菌株分析下表所示培养基的配方，回答下列问题：为微生物提供碳源的物质是葡萄糖，提供氮源的物质是尿素。
(2)该培养基是否具有选择作用，为什么？提示：是。
绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，本培养基以尿素为唯一氮源，可以分离得到产生脲酶的微生物(即分解尿素的微生物)。
人教版高中生物高二选修一学案专题2 课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
专题1微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数【学习目标】1.研究培养基对微生物的选择作用2.进行微生物数量的测定【重点难点】重点：对土壤的选取和选择培养基的配制难点：对分解尿素的细菌的计数【预习案】任务一、筛选菌株1．尿素只有被分解成之后，才能被植物吸收利用。
2．以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象，要达到的两个主要目的是：⑴；⑵。
3．PCR（）是一种在体外将。
此项技术的自动化，要求使用耐高温的DNA聚合酶。
4．实验室中微生物的筛选应用的原理是：人为提供有利于生长的条件（包括等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
5．选择培养基是指。
任务二、统计菌落数目1.常用来统计样品中活菌数目的方法是。
即当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。
另外，也是测定微生物数量的常用方法。
2.一般来说，统计的菌落数往往比活菌的实际数目。
这是因为。
因此，统计结果一般用而不是活菌数来表示。
任务三、设置对照设置对照实验的主要目的是，提高实验结果的可信度。
任务四、实验设计1．实验设计包括的内容有：、、和，具体的实验步骤以及时间安排等的综合考虑和安排。
2．不同种类的微生物，往往需要不同的培养和培养。
在实验过程中，一般每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以。
任务五、操作提示1．无菌操作应注意什么问题？⑴⑵⑶2．在进行多组实验过程中，应注意做好标记，其目的是。
【探究案】探究点一分析教材P22两位同学测定细菌数量的做法，回答相关问题。
、探究点二解决教材P23关于设置对照的问题。
、探究点三土壤中分解尿素的细菌的分离实验的大致步骤是怎样的？实验操作过程中还要注意、哪些事项？【训练案】1.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是( )A. CO和NB. 葡萄糖和NHC. CO和尿素D.葡萄糖和尿素22232．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( )KHPO、NaHP0、MgS0·7H0、葡萄糖、尿素、琼脂、水．A222444KHPONaHP0MgS0·7H0、葡萄糖、琼脂、水B．、、242244KHPONaHP0MgS0·7H0、尿素、琼脂、水、．C、244422KHPONaHP0MgS0·7H0、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水；、．、D2224443.使用选择培养基的目的是（）A. 培养细菌 C. 使需要的微生物大量繁殖B. 培养真菌 D. 表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别6的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234，那么每克样品中的菌落数是（涂4.某同学在稀释倍数为10布平板时所用稀释液的体积为0.1ml）( )89 C. 234 B.2.34×10 D. 23.4 A. 2.34 ×106培养基上筛选出大约150同学从对应10个菌落，而其他同学只选择5.在做分离分解尿素的细菌实验时，A出大约50个菌落。
生物人教版选修1学案：课堂探究 专题2课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 Word版含解析
课堂探究探究点一选择培养基·问题导引·观察图中的桦尺蠖，体色为黑色的桦尺蠖适于生活在浅色的树干上还是深色的树干上？依据这个思路，要找到耐高温或耐低温的微生物，要到什么环境中去找？要找到能利用尿素的微生物呢？提示：黑色的桦尺蠖适于生活在深色的树干上。
耐高温的微生物适于生活在高温环境中，耐低温的微生物适于生活在低温环境中，其他微生物因为不适应这一环境而被淘汰。
能利用尿素的微生物生活在富含尿素的环境中。
·名师精讲·1．选择培养基的制作方法（1）在培养基全部营养成分具备的前提下，加入特定物质达到分离微生物的目的。
依据某些微生物对某些物质的抗性，在培养基中加入相应的物质，以抑制不需要的微生物，促进所需要的微生物生长。
如培养基中加入高浓度食盐可抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可将该菌分离出来；而在培养基中加入青霉素时可抑制细菌、放线菌的生长，从而分离得到酵母菌和霉菌。
（2）通过改变培养基的营养成分达到分离微生物的目的。
培养基中缺乏氮源时，可分离自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存；培养基中若缺乏有机碳源则异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物。
（3）利用培养基的特定化学成分分离特定微生物。
如当石油是唯一碳源时，可抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，从而分离出能消除石油污染的微生物。
（4）通过某些特殊环境分离微生物。
如在高盐环境中可分离耐盐菌，其他菌在盐浓度高时易失水而不能生存；在高温环境中可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温环境中因酶失活而无法生存。
2．用培养基选择能分解尿素的微生物的原理培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。
缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源，而不能生长、繁殖，所以用此培养基就能够选择出能分解尿素的微生物。
【例题1】现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分和含量如下表，用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，你认为它们适于分离（）A．甲培养基适于分离自养型自生固氮菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌B．甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌C．甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌D．甲培养基适于分离自养型共生固氮菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌解析：固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌。
【人教版】高一生物选修一：2.2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》学案(含答案)
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．研究培养基对微生物的选择作用。
2．进行微生物数量的测定。
一、研究思路1．筛选菌株尿素是一种重要的农业____肥，但不能直接被农作物吸收利用，只有当土壤中的细菌将尿素分解成____之后，才能被植物利用。
土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成______。
（1）实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的______生长的条件（包括营养、______、pH等），同时______或______其他微生物生长。
（2）选择培养基：在微生物学中，将允许________的微生物生长，同时______或______其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
2．统计菌落数目统计的菌落数往往比活菌的实际数目____。
这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
因此，统计结果一般用________来表示。
（2）____________也是测定微生物数量的常用方法。
（3）细菌的数目还可以通过______法来测定。
例如，测定饮用水中大肠杆菌的数目，可将________的水过滤后，将滤膜放到________培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现____色，可以根据培养基上________的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。
3．设置对照（1）设置对照的主要目的是排除实验组中__________对实验结果的影响，提高实验结果的________。
（2）对照实验是指除了________的条件以外，其他条件都______的实验，其作用是比照实验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。
二、实验设计实验设计包括对实验方案，所需仪器、材料，用具和药品，具体的________以及时间安排等的综合考虑和安排。
关于土壤中某样品细菌的分离与计数的实验操作步骤如下：1．土壤取样土壤中的微生物70%～90%是_____，绝大多数分布在距地表______ 的近____性土壤中。
人教版高二生物选修一专题二课题2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》教学设计(共1课时)
板书设计
板书设计：
① 标题：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
② 重点知识点：
- 尿素分解细菌的分离方法：涂抹平板法、比浊法、比色法和稀释涂布平板法。
- 尿素分解细菌在土壤中的作用和意义。
③ 词句：
- 尿素分解细菌：能够分解尿素的细菌，对土壤肥力和植物生长有重要作用。
- 分离与计数：通过实验方法将尿素分解细菌从土壤中分离出来并进行计数。
- 重点：通过实验设计和实践操作，培养学生的创新意识和实践能力。
7. 教学重点：提高学生的科学素养。
- 难点：学生可能对科学素养的具体内容和重要性不够了解，导致科学素养的提高有限。
- 重点：通过讲解科学素养的重要性和培养方法，提高学生的科学素养。
8. 教学重点：帮助学生建立正确的科学观念。
- 难点：学生可能对正确的科学观念和方法不够了解，导致科学观念的建立不正确。
2. 教师提出问题：“你们认为尿素分解细菌对土壤有什么重要意义？”引导学生思考。
六、课后作业（5分钟）
1. 教师布置课后作业，要求学生撰写实验报告，总结实验过程和结果。
2. 教师强调实验报告的要求和注意事项，确保学生能够完成高质量的实验报告。
师生互动环节：
1. 在情景导入环节，教师通过展示图片和视频，激发学生的学习兴趣。教师提出问题，引导学生思考尿素分解细菌在土壤中的作用。
2. 在学习任务环节，教师讲解尿素分解细菌的分离与计数方法，强调实验操作的注意事项。教师回答学生的问题，确保学生能够正确进行实验操作。
3. 在分组实验环节，教师巡回指导，及时解答学生的问题，确保实验的顺利进行。教师观察学生的实验操作，指出需要注意的细节，如涂抹平板法的均匀涂抹、比浊法的正确读数等。
高中生物人教版选修1教案 专题2课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (第一课时)
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（第一课时）一、教材分析本节作为菌种分离与提纯的入门课，教材从研究思路入手，根据生物与环境相适应的特点来说明筛选菌种的原理，也为学生配制选择培养基提供了思路。
至于选择培养基是否具有选择作用，教材通过设置对照来完善学生对于知识点的理解。
对于菌落数目的统计，可利用课题1中学习过的稀释涂布平板法，还可以利用酵母菌种群数量统计中涉及的显微镜直接计数法，两种方法各有千秋，学生可以对比选择，构建完整的知识框架。
二、教学目标1.知识与技能（1）利用选择培养基分离细菌；（2）运用相关技术解决生产生活中有关微生物技术的问题。
2.过程与方法分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性。
3.情感、态度与价值观形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯。
三、教学重难点1.重点对土样的选取和选择培养基的配置。
2.难点对分解尿素的细菌的计数。
四、教学准备多媒体课件。
五、课时安排2课时。
六、教学过程【课程导入】在传统发酵技术应用专题，我们强调过，产品制作是否成功很大一部分取决于菌种是否纯净。
在大自然中，如何提取出我们所需要的菌种并加以纯化应用于生产实践，是我们本课时要学习的内容。
在本节，我们先从基础入手，掌握某种菌种提纯的思路以及细菌数目的统计方法，这些内容分也是我们下一课时提取分解尿素的细菌的基础知识。
首先，我们要做的就是思考：如何从土壤所含的众多微生物中分离到我们所需的微生物呢？【研究思路】（一）筛选菌株1.阅读课本，总结Taq DNA聚合酶发现的原理（1）DNA多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量复制的技术。
此项技术的自动化，要求使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能忍受93℃左右的高温；（2）科学家从热泉中的水生耐高温细菌Taq中分离到耐高温的Taq DNA聚合酶，是因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物；（3）案例启示：在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找；2.由点到面，小结微生物的筛选原理（1）实验室筛选微生物的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长；（2）在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基；（3）配制选择培养基的依据：根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
2019-2020学年生物人教版选修1同步检测：专题2.课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数理一理判一判1.选择培养基只允许特定的微生物生长，而抑制或阻止其他微生物的生长。
(√)2．稀释涂布平板法能分离细菌，也能计数。
(√)3．平板划线法只能纯化细菌，不能计数。
(√)4．从土壤中取样时，土层越浅越好。
(×)5．来自土壤的微生物稀释倍数越大越好。
(×)6．测定不同微生物数量时，接种的土壤悬浮液的稀释度相同。
(×) 7．菌落特征是鉴别菌种的重要依据。
(√)8．以尿素为唯一氮源的培养基是选择培养基。
(√)9．可用含酚红指示剂的培养基对筛选出的尿素分解菌作进一步鉴定。
(√)悟一悟1.可利用分离对象对某种营养物质有“嗜好”的原理，专门在培养基中加入该营养物质，并且使该营养物质成为培养基中某类基本营养物质的唯一供给者，如筛选能分解尿素的细菌，就将尿素作为培养基中的唯一氮源。
2．可利用分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑菌物质，经培养后，其他微生物生长受到抑制，而该分离对象却可大量增殖，在数量上占据优势。
3．显微镜直接计数法本身不能区分细菌的死活，因此一般用来统计总菌数。
但是，通过一定的辅助处理，可以实现活菌计数，如在计数前用台盼蓝染液进行染色，可以通过统计无色细胞的个数来进行活菌数的统计。
4．对照实验中除测试因素(自变量)不同外，其他因素要保证和实验组相同且适宜，并遵循单一变量原则。
5．在培养基制作和保存过程中，都易出现培养基被污染、样品被污染等情况，从而对实验结果造成影响，因此必须要设置空白对照或相互对照。
感悟体会： 练一练1.[2019·平遥县第二中学高二月考]在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用以尿素为唯一氮源的培养基，乙组实验的培养基中的氮源除尿素外还含硝酸盐，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养观察，则乙组实验属于( )A．空白对照B．条件对照C．相互对照D．标准对照解析：生物实验中的实验可以分为空白对照，条件对照，自身对照，相互对照等。
人教版高中生物选修一培优练习：专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 含解析
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课时过关·能力提升基础巩固1.在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做()A.鉴别培养基B.加富培养基C.选择培养基D.基础培养基[解析]:选择培养基可选择目标微生物,同时抑制或阻止其他微生物生长。
[答案]:C2.测定土壤中某细菌和真菌数量的过程中,和真菌相比,细菌需要选用稀释倍数更高的稀释液进行平板培养的原因是()A.细菌个体小,真菌个体大B.细菌易稀释,真菌不易稀释C.在土壤中细菌比真菌多D.随机的,没有原因[解析]:在土壤中,细菌比真菌多,所以为了确保获得菌落数在30~300之间的培养平板,测定细菌数量时一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养,而测定真菌数量时一般选用102、103和104倍的稀释液进行平板培养。
[答案]:C3.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是()A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水[解析]:分解尿素的细菌能利用尿素,因此选择培养基中应只有尿素这一种氮源。
此外,培养基中还应含有碳源。
[答案]:A4.能够测定样品活菌数的方法是()A.稀释涂布平板法B.直接计数法C.重量法D.比浊法[解析]:利用稀释涂布平板法能够在不影响细菌生存的情况下将细菌个体从固体培养基上分离出来,并可根据菌落数测定出样品活菌数,故稀释涂布平板法可用于测定样品活菌数。
直接计数法计得的是活菌和死菌的总和。
[答案]:A5.下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是()A.微生物培养前,需对培养基进行消毒B.测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法C.分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源[解析]:微生物培养前,需对培养基进行灭菌,而不是消毒;测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法,而一般不用活菌计数法;分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度以便能选择出菌落数在30~300的平板进行计数;分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源。