植物激素的配制注意事项

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培养基母液配制中的若干关键环节

培养基母液配制中的若干关键环节

培养基母液配制中的若干关键环节培养基母液,也叫浓缩贮备液.它是以培养基配方配制成的高倍的浓缩液,不同组分母液,它的浓缩倍数不同,一般最低为10倍,高的有50倍、100倍、200倍,甚至1000倍.母液是一个方法比较简便、用量比较准确且被广泛采用的配制方法.本文就如何掌握培养基母液配制的操作要领作一阐述,以供参考.以MS培养基为例,其母液的配制包括大量元素、微量元素、铁盐、维生素、氨基酸、植物生长调节物质和有机附加物等种类.(见表1)1 大量元素和微量元素母液的配制按规定用量,称取所需的各种药品,在配制时为减少工作量,可以把几种药品(如大量元素或微量元素)配在同一母液中(见表1).但由于各种药品的混合,可能发生反应,生成沉淀物,以致母液失效.为避免类似现象发生,在大量元素、微量元素和维生素及氨基酸的母液配制时,可采用如下2种做法加以解决:①将要配在同一母液的大量元素、微量元素和维生素及氨基酸等化合物,按“表1”所列药品的先后顺序溶解药品,待前一种药品完全溶解后再加入后一种化学药品,以此类推;②使每种成份分别完全溶解,再把它们彼此混合.2 铁盐母液的配制铁盐的成份含硫酸亚铁(F eSO4·7H2O)和乙二胺四乙酸二钠(Na2-EDTA).这两种化合物的溶解和混合较为严格,必须按如下方法配制,否则将会产生沉淀.该方法是:分别溶解FeSO4·7H2O和 Na2-EDTA,加热并不断搅拌,使之完全溶解,冷却,将2种溶液混合,调PH 至5.5,用蒸溜水加至所需容积,棕色瓶保存于冰箱之中.3 植物生长调节物质母液的配制植物生长调节物质是培养基的重要组分之一,一般是植物激素类物质,如生长素类的IAA、IBA、NAA,赤霉素类的GA3,细胞分裂素类的2,4-D、KT和6-BA等.由于大多数生长调节物质难溶于水,因此配制方法也各不相同:①IAA,IBA和GA3先用少量95%酒精溶解,再加水定容,摇匀后贮于试剂瓶中、贴上标签后,存放在冰箱中;②NAA可用热水或少量95%酒精溶解,再加水定容至所需容积;③2,4-D可溶于少许0.1mol·L-1的NaOH溶液中,然后加水定容;④KT和6-BA可用少量0.1mol·L-1的HCl溶解,再加水定容;⑤玉米素先溶于少量95%酒精中,然后加水定容.植物生长调节物质浓度通常用ppm(mg·ml-1)和mol·L-1表示,在配制母液时,常以ppm较为方便,一般配制成0.5ppm的母液,这个浓度既便于计算,也可避免冷藏时形成结晶.4 有机附加物母液的配制在植物组织培养时,培养基中往往要加入一些有机附加物,如椰子汁,以促进组织培养活性.由于椰子汁的活性成分是耐热的,在配制时,要先把由果实中采集到的汁液加热煮沸以除去其中的蛋白质,过滤,然后置塑料瓶中贮存于的-20℃的低温冰箱内.MS培养基配制中的五点注意1 母液配制必须严格分类配制高浓度的母液是植物组织培养的基本功。

植物激素配制实验报告

植物激素配制实验报告

本实验旨在学习植物激素的配制方法,掌握不同植物激素的溶解特性及其在植物组织培养中的应用。

通过本实验,了解植物激素在植物生长和发育过程中的作用,以及如何根据实验需求准确配制不同浓度的植物激素溶液。

二、实验原理植物激素是植物体内的一种微量有机物质,对植物的生长发育和生理过程起着重要的调节作用。

本实验涉及的主要植物激素包括生长素(IAA)、细胞分裂素(6-BA)、赤霉素(GA3)等。

这些激素在植物组织培养中具有重要作用,如诱导愈伤组织形成、促进生根、芽分化等。

三、实验材料1. 植物激素:IAA、6-BA、GA32. 溶剂:乙醇、蒸馏水、NaOH溶液3. 实验器具:电子天平、容量瓶、移液管、试管、烧杯、玻璃棒等四、实验方法1. 植物激素母液的配制(1)IAA的配制:准确称取IAA 1g,溶于200ml 95%乙醇中,搅拌至完全溶解。

然后转移至1000ml容量瓶中,加水定容至刻度线,摇匀。

此溶液为1000mg/L的IAA母液。

(2)6-BA的配制:准确称取6-BA 1g,溶于50ml 0.5mol/L NaOH溶液中,微热溶解。

然后转移至1000ml容量瓶中,加水定容至刻度线,摇匀。

此溶液为1000mg/L 的6-BA母液。

(3)GA3的配制:准确称取GA3 10mg,溶于1ml 95%乙醇中,搅拌至完全溶解。

然后转移至100ml容量瓶中,加水定容至刻度线,摇匀。

此溶液为100mg/L的GA3母液。

2. 植物激素工作液的配制根据实验需求,将母液稀释至所需浓度。

例如,配制100mg/L的IAA工作液,取10ml 1000mg/L的IAA母液,加水稀释至100ml。

1. 称取适量植物激素,根据实验需求选择合适的溶剂进行溶解。

2. 将溶解后的激素溶液转移至容量瓶中,加水定容至刻度线,摇匀。

3. 根据实验需求,将母液稀释至所需浓度,配制工作液。

4. 使用移液管准确量取所需体积的工作液,用于植物组织培养实验。

六、实验结果与分析1. 通过本实验,成功配制了不同浓度的植物激素母液和工作液。

植物激素的配制方法灭菌方法

植物激素的配制方法灭菌方法
除菌方式
母液浓度
生长素
IBA(3-吲哚丁酸)用适量无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后,再缓慢加入水定容到一定浓度。
除菌方式:与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
IAA(3-吲哚乙酸)用适量无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后,再缓慢加入水定容到一定浓度。
除菌方式:抽滤除菌。
0.2g/L
α-NAA(a-萘乙酸)可用1M NaOH彻底溶解后,再加水定溶到一定浓度。
0.2g/L
ZT(反式玉米素)先溶于适量1M NaOH中,再加水至一定浓度。
除菌方式:抽滤除菌。(反式用少量1M NaOH溶解后,再加水定容至一定浓度。
除菌方式:抽滤除菌。
0.2g/L
赤霉素
GA3先溶于适量无水乙醇中,再加水定容到一定浓度。
除菌方式:抽滤除菌。
0.2g/L
除菌方式:与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)用无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后,再加水定容至一定浓度。
除菌方式:与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
细胞分裂素
KT(激动素6-糖氨基嘌呤)和6-BA(6-苄氨基嘌呤)先溶于少量1M NaOH中,再加水定容。
除菌方式:与培养基高压共灭菌。
配制生长素类,例如IAA、NAA、2.4-D、IBA,应先用少量95%乙醇或无水乙醇充分溶解,或者用1mol/L的NaOH溶解,然后用蒸馏水定容到一定的浓度。
细胞分裂素,例如KT,应先用少量95%乙醇或无水乙醇加3~4滴1mol/L的盐酸溶解,再用蒸馏水定容。
配制生物素,用稀氨水溶解,然后定容。
配制方法
植物激素配制方法总结
原则
植物激素:每种激素必须单独配制成母液,浓度为0.1mg/ml,0.5mg/ml,1.0mg/ml,激素浓度的表示方法多种,ppm(mg/L)、mol/L、mg/ml,用时根据需要取用。

实验一培养基的配制与灭菌

实验一培养基的配制与灭菌

实验一培养基的配制与灭菌一、目的掌握培养基母液的配制方法;培养基的配制和灭菌技术;不同质地实验用品的灭菌方法。

二、方法步骤1、母液配制一般大量元素、微量元素和其它成分分别配制成100-200倍母液,使用时按比例稀释即可。

配好的母液需贮存于2~4℃的冰箱中,定期检查有无沉淀和微生物污染,如果出现沉淀或微生物污染,则不能使用。

2、植物激素配制植物激素一般配制成浓度为0.1—1.0mg/ml的溶液,贮存在2~4℃下备用。

由于多数激素难溶于水,所以配制时应按下面步骤进行:IAA:先用少量95%乙醇使之充分溶解,再加蒸馏水定容至需要浓度的体积。

NAA:可溶于热水中,也可采用与IAA同样的方法配制。

2,4-D:先用少量1mol/L的NaOH溶液充分溶解,然后缓慢加入蒸馏水定容至需要浓度体积。

细胞分裂素类:KT和BA等细胞分裂素类物质均溶于稀盐酸,应先用少量1mol/L的HCl溶解后再稀释至需要浓度。

赤霉素:赤霉素的水溶液稳定性较差,一般用95%的乙醇配制成5~10mg/ml的母液低温保存,使用时再稀释。

3、培养基配制按实际配制培养基体积,取各母液的需要量加入一适当体积的烧杯或其它配制培养基的容器中,再加入实际配制培养基体积约2/3—3/4的蒸馏水,然后以每升所用蔗糖的量称取放入培养基并使其溶化。

用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl调整pH至5.6—5.8,以0.6%—0.8%的比例加入琼脂,并搅拌加热使琼脂完全溶化,用蒸馏水定容至终体积,混合均匀后分装于培养器皿中,然后进行高压灭菌。

4、培养基灭菌分装好的培养基置于高压蒸汽灭菌锅中灭菌,灭菌条件为温度121℃,压力0.105MPa,灭菌时间与培养基容量的关系如下表所示。

培养基体积与灭菌时间的关系三、结果与分析1、培养基的母液配制情况。

2、培养基配制时的注意事项。

四、提交实验报告附:MS培养基配方。

不同激素浓度培养基的配制

不同激素浓度培养基的配制

无机微量元素
主要有:铁、硼、锰、锌、铜、钼、钴、氯
有机成分:
糖、 维生素、肌醇、氨基酸及有机附加物。
植物生长调节物质:
生长素类:NAA、IAA、IBA、2,4-D 细胞分裂素类:BAP, KT,TDz,ZT 其他类: GA3, ABA, PP333
琼脂 pH值
配制培养基最方便的方法是预先配制不同组分 的培养基母液,贮藏在冰箱,待配制培养基时取出, 按比例稀释。 配制母液时为了减少工作量可以把几种药品配 在同一母液中,但是应该注意各种化合物的组合以 及加入的前后顺序,应该把钙离子、锰离子、钡离 子和硫酸根和磷酸根例子错开,以免发生沉淀。 把每种试剂单独溶解后再加入后一种化合物。 混合已溶解的各种矿质盐时还应该注意加样顺序。
铁 盐 单 独 配 制 , 其 配 法 为 5.57g 的 硫 酸 亚 铁 ( Fe SO4.7H2O)和7.45g乙二胺四乙酸二钠(Na2-EDTA)溶于 1L水中,用时每配1L培养基,取该溶液5ml。
IAA 、 IBA、 NAA 等可用少量的乙醇溶解,然后在加 水定容。2,4-D可用1 N的Na OH 溶解然后再定容; KT和 6-BA应先定容于少量的 1 mol/L 的HCl中,再加水定容。 玉米素应该溶于95% 的乙醇中再定容。 pH值对培养基的凝固情况和植物材料的生长有很大的 影响,因此,等培养基配好后,应该立即调整培养基的 pH ,最好用酸度计,既快又准。培养基配好后应该立即分 装,体积一般为容器的 1/4 或者1/3为好。
容50 ml (浓度为0.2 mg/ml), 用同样的方法配制2,4-D母液。 称取 50 mg 6-BA, 加少量的1 mol/L HCl,使其充分溶解,然后加水至 50 ml (浓.MS基本培养基的配制:分别吸取MS贮备液30.0 ml( 大量元素)、3.0 ml微量元素、 3.0 ml铁盐、 3.0 ml有机, 加入1 L的搪瓷缸中,然后称取蔗糖18.0g, 加入琼脂4.8g ,加蒸馏水约550 ml,在电炉上加热,煮沸,融化琼脂 ,然后加水至560ml。

(整理)植物组培中药品试剂配制方法及纯度的选择

(整理)植物组培中药品试剂配制方法及纯度的选择

植物组培中药品试剂配制方法及纯度的选择发布时间:[2012-08-16] 点击率(164)随着生物技术普及,植物组培技术,又称植物克隆技术,在农业生产上得到了广泛应用,越来越多的客户也正计划涉足此领域,但对植物组培又不是很了解,对各类药品试剂的配制感觉很难把握,为此,下面以MS培养基为例,对组培上使用的常用化学药剂特点及配制方法做些介绍:一大量元素类(1)硝酸铵:亦称硝铵。

化学式为NH4NO3,式量为80.048,其纯品为无色透明菱形结晶,比重1.73,易溶于水,并吸收大量的热,在空气中容易潮解。

水溶液呈中性反应。

由于硝酸铵是一种易燃、易爆物,因此在使用中应该贮存在阴冷之处。

已经结块的硝酸铵切忌敲打、撞击,可用水进行溶解。

(2)硝酸钾:亦称火硝。

化学式为KNO3,式量为101.104,其纯品为无色透明的棱柱结晶,比重2.10,易溶于水,几乎不溶于无水乙醇。

(3)氯化钙:亦称无水氯化钙。

化学式为CaCl2,式量为110.99,其纯品为白色结晶,比重2.15,在空气中具强吸湿性,易溶于水同时放出大量的热。

(4)硫酸镁:亦称泻盐。

化学式为MgSO4•7H2O,式量为246.50,其纯品为透明菱形结晶,比重1.68,具苦味,易溶于水,不溶于乙醇,在空气中稍风化。

(5)磷酸二氢钾:亦称磷酸钾复合肥。

化学式为KH2PO4,式量为136.09,其纯品为正方形无色结晶,比重2.33,有较强的酸味,易溶于水,不溶于乙醇。

溶液呈微酸性反应。

磷酸二氢钾在96℃时会溶化成透明的液体,这样就会转化为偏磷酸钾,因此在使用时注意不要使它经受高温环境。

二微量元素类(6)碘化钾:化学式为KI,式量为166.02,其纯品为透明的小块结晶,比重3.115,在干燥的空气中稳定,易溶于水,其水溶液在遇光后因析出游离碘而逐渐变黄。

(7)硼酸:亦称正硼酸。

化学式为H3BO3,式量为61.84,其纯品为六角形白色鳞片状结晶,具珠光,比重1.46,溶于水,易溶于乙醇,当加热至107℃时会失去部分的水,而转变为偏硼酸。

植物生长调节剂的使用方法及注意事项

植物生长调节剂的使用方法及注意事项

花卉知识植物在生长过程中适当地进行人工生长激素的调节会对植物有着意想不到的效果。

植物生长调节剂是人工合成、人工提取的具有植物激素的生理活性的外源物质,在植物体内有些可以移动,如防落素、多效唑等,有些移动性差或不能移动,如氯吡脲、6-苄氨基嘌呤等。

植物生长调节剂根据作用方式,可分为植物生长促进剂、植物生长延缓剂和植物生长抑制剂三大类。

植物生长促进剂在适宜浓度下,能促进植物细胞分裂和伸长、新器官的分化和形成,防止果实脱落等。

一、赤霉素(GA)又称九二〇,商品名有奇宝、瑞雪宝、金哥等。

剂型包括粉剂、可溶片剂、乳油、膏剂、可湿性粉剂等。

低毒,对人、畜、蜜蜂安全。

应用现在人类已从高等植物和微生物中分离出70多种赤霉素,活性较高的有GA3、GA4、GA7等。

其中GA3在赤霉素类中活性最高,能显著促进植物茎叶生长,特别是对遗传型和生理型的矮生植物有明显的促进作用;能代替某些种子萌发所需要的光照和低温条件,促进种子发芽;可使长日照植物在短日照条件下开花,缩短生长周期;能诱导开花和单性结实,促进果实生长。

注意1.赤霉素纯品水溶性低,85%或75%结晶粉剂用前先用少量酒精溶解,再加水稀释至所需浓度。

2.赤霉素在干燥状态下不易分解,药剂应贮存于干燥处。

其水溶液在5℃以上时,易被破坏失效。

遇碱易分解,不能与碱性农药或肥料混用,尽量现配现用。

3.与叶面肥配用,更利于形成壮苗。

单用或用量过大会产生植株细长、瘦弱及抑制生根等副作用。

二、防落素(4-CPA,PCPA)又名对氯苯氧乙酸,商品名为番茄灵。

剂型有水剂、可溶性粉剂。

对人、畜低毒。

应用作为一种内吸性植物生长调节剂,其可经根、茎、叶、花、果吸收,生物活性持续时间长。

具有促进生长,阻止离层形成、促进坐果、诱导单性结实等功能。

注意1.施药浓度与气温高低有关,气温低对水量要减少,气温高反之。

2.本品对苗木嫩梢、幼叶敏感,喷洒时要严格控制浓度,不可重复喷洒。

选择晴天早晚喷洒,以免产生药害,若发生药害要加强肥水供应。

植物生长调节剂用法大全

植物生长调节剂用法大全

植物生长调节剂用法大全1.吲哚乙酸、吲哚丁酸快浸法:配制l000mg/L高浓度溶液放于底盆内,药液深度为3~100px,然后将一小捆一小捆的插条直立于容器内,浸5秒后取出晾干即可扦插于苗床中。

此法操作简便,设备少,同一溶液可重复使用,用药量少,速度快。

慢浸法:将吲哚乙酸配制成浓度为25mg/L (易生根的品种)~200mg/L(不易生根品种)溶液,再将插条基部浸入药液中8~12h后取出扦插。

此法浸蘸时间长,大批量插条点需较多的容器,用药量大。

蘸粉法:取lg吲哚乙酸,用适量95%酒精或60度烧酒溶解,然后再与1000g滑石粉充分棍合,酒精挥发后即成1000mg/L 的吲哚乙酸粉剂。

扦插时先将插条基部用水浸湿,再在准备好的吲哚乙酸粉剂中蘸一蘸,抖去过多的粉末,插入苗床中。

萘乙酸选择品种优良、生长健壮、芽跟饱满、无病虫的一年生杖条,将插条基部2~75px处浸于萘乙酸50~100mg/L药液中8~12h,取出后埋于潮湿沙中促根,可促进生根,又会抑制插条芽过早萌发,从而缩短插条萌芽与新根产生的时间差,提高扦插成活率。

注意,萘乙酸可与吲哚乙酸混合使用提高促根效果。

ABT生根粉使用50mg/L浓度药液浸泡4~8h,可促进生根。

2.丁酰肼使用丁酰肼可使葡萄生长枝节间缩短,叶色加深,叶片小而厚,叶绿素增加。

丁酰肼控制葡萄新梢生长不如矮壮素强烈,同时,抑梢效应的产生时间也较迟缓。

据试验,对玫瑰香葡萄用丁酰肼200mg/L处理效果较好,对巨峰、康可等葡萄则要提高到2000~3000mg/L。

喷施丁酰肼的时间要比矮壮素早7~10d,喷施浓度则在2000~3000mg/L,根据葡萄品种确定喷施浓度。

注意事项:使用丁酰肼时,要对当地品种作好试验后再推广;巨峰用丁酰肼4000mg/L处理未发生药害。

在葡萄新梢生长6~7片叶时,以1000mg/L~2000mg/L丁酰肼喷1次,可抑制新枝生长,提高产量。

也可与赤霉素混用,提高无核果的比例,增加果实硬度,减少运输过程中的破损率。

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●可高压灭菌:IBA,NAA ,6-BA,2,4-D
●不可高压灭菌:IAA,GA3
●水杨酸不是很清楚,参考wiki上“科尔贝-施密特反应(Kolbe-Schmitt反应)是干燥
的酚钠或酚钾与二氧化碳在加温(125-150°C)加压(100atm)下生成羟基苯甲酸的反应。

它是向芳环上引入羧基的一种常用方法,常用的工业原料水杨酸(邻羟基苯甲酸)就是利用此法,通过苯酚盐与二氧化碳作用制得的。

”而高压灭菌锅的温度和压强分别为121°C和0.15Mpa(压力表的数值,实际为0.25MPa即2.5atm),我个人认为水杨酸高压灭菌会分解。

因为从上可以看出水杨酸的分解就是科尔贝-施密特反应的逆反应,看反应式便明白加压有利于正反应,而减压有利于逆反应,而121°C的灭菌温度基本与合成反应的温度相持,2.5atm的压强却远小于合成反应,明显是有利于逆反应进行。

故我认为水杨酸不宜高压灭菌。

如果不确定的话可以做个实验,配一小瓶水杨酸溶液高压灭菌,灭过后观察其会不会有粉红色,有的话就说明产生苯酚并氧化成对苯醌了。

●配制生长素类,例如IAA、NAA、2.4-D、IBA,应先用少量95%乙醇或无水乙醇充分溶解,
或者用1mol/L的NaOH溶解,然后用蒸馏水定容到一定的浓度。

●细胞分裂素,例如KT,应先用少量95%乙醇或无水乙醇加3~4滴1mol/L的盐酸溶解,
再用蒸馏水定容。

●配制生物素,用稀氨水溶解,然后定容。

一般来说感觉用醇溶后较容易析出,而且溶解也不容易,还是用少量酸或碱溶,再用蒸馏水定容
●植物激素配制方法
●植物激素:每种激素必须单独配制成母液,浓度为0.1mg/ml,0.5mg/ml,1.0mg/ml,
激素浓度的表示方法多种,ppm(mg/L)、mol/L、mg/ml,用时根据需要取用。

由于多数激素难溶于水,它们的配法如下:
●生长素:
1 IAA,IBA用适量无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后,再缓慢加入水定容到一定浓度。

为了使用方便,市场上有相应的盐形式如IAA-Na,IBA-K,可以直接溶于水中。

除菌方式:与培养基高压共灭菌。

2 α-NAA可用1M NaOH彻底溶解后,再加水定溶到一定浓度。

除菌方式:与培养基高压共灭菌。

3 2,4-D用无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后,再加水定容至一定浓度。

除菌方式:与培养基高压共灭菌。

细胞分裂素:
1 KT和6-BA先溶于少量1M NaOH中,再加水定容。

除菌方式:与培养基高压共灭菌。

2 反式玉米素先溶于适量1M NaOH中,再加水至一定浓度。

除菌方式:抽滤除菌。

(特别注意,反式玉米素是天然酶,不可以高压灭菌!)
3 2ip可用少量1M NaOH溶解后,再加水定容至一定浓度。

除菌方式:抽滤除菌。

赤霉素:
1 GA3先溶于适量无水乙醇中,再加水定容到一定浓度。

除菌方式:与培养基高压共灭菌。

(±)脱落酸
1 (±)ABA可用少量1M NaOH溶解后,再加水定容至一定浓度。

除菌方式:与培养基高压共灭菌。

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