机能实验家兔肠缺血再灌注损伤
家兔缺血再灌流损伤脊髓的病理学研究
图7
缺血 60 分钟组家兔术 后 1 天 L 4 脊髓。 大部分神经 元
变性坏死 , 呈现不 规则 絮状 嗜银 坏死 碎片。 Holmes 还原 银染 色 )
图 5 对照家兔术后 1 天 L 3 脊髓灰质 , 部份神经 元轻度变性 ,
但多数神经元结构基本正常。 Holmes 还原银染色 ) 200
图8
缺血 90 分钟组家兔术 后 1 天 L 4 脊髓。 灰质神经元 变
性坏死 , 呈现海 绵状 改变 , 整 个视 野未 见完整 的细 胞结 构。 Holmes 还原银染色 ) 200
讨
论Hale Waihona Puke 哺乳动物脊髓对损伤的反应十分敏感, 脊髓创 伤后的典型病理特征是急性、 进行性、 中央性、 出血 ∀2, 3# 性坏死 。脊髓 损伤后 数天内 即出现 广泛 性坏 死 , 同时伴有大量的巨噬细胞浸润 , 甚至形成空洞。 本实验中, 脊髓严重缺血损伤( 如缺血 90 分钟) 后再 灌流 1 天时即观察到整个灰质神经元广泛性坏死, 呈现空泡海绵状改变; 在再灌流 3 天、 7 天、 14 天时, HE 染色切片上可见大量的炎性细胞 浸润, 斑片状 出血, 有的出现神经元肿胀、 卫星状态和核固缩、 噬 神经细胞作用等典型神经病理学表现; 同时可见到 受损脊髓的炎性病理反应的动态变化过程 , 再灌流 3 天即见到明显炎性细胞浸润, 再灌流 7 天时炎性 反应达高峰 , 14 天时明显减轻。由 此可见, 炎症反
脊髓缺血损伤的病理改变程度及其变化规律直 ∀1# 接关系到脊髓 继发损伤程度 及损伤机制 。既往 研究表明: 脊髓创伤的 病理特征是脊 髓急性、 进行 ∀2, 3 # 性、 中央性出血性坏死 。是否缺血性损伤 脊髓 也表现出同样的变化特征 , 目前尚无统一认识 , 加强 这方面的研究仍然十分必要。作者在一种新的成年 家兔脊髓缺血再灌流损伤模型研究中, 发现家兔表 现出典型截瘫和脊髓感觉运动传导功能障碍∀4# , 这 种功能障碍与脊髓组织病理损害间关系怎样, 也需 探讨。本实验在上述研究的基础上从神经病理学入 手, 初步观察了缺血再灌流时脊髓组织的形态结构 变化特征 , 现报告如下。
兔急性肠道缺血再灌注损伤模型的建立
兔急性肠道缺血再灌注损伤模型的建立【摘要】目的建立小肠急性缺血再灌注损伤模型，确定合适的肠系膜上动脉阻断时间。
方法将70只新西兰兔按不同的肠系膜缺血时间（0、15、30、45、60 min）分为A、B、C、D、E共5组，每组14只。
每组取8只于恢复血供2 h后留取兔下腔静脉血标本及肠组织，检测血清中丙二醛（MDA）含量的变化，光镜下观察小肠组织形态学变化并对小肠黏膜损伤程度进行评分。
另6只兔用于术后24、48、72 h 生存率的观察。
结果 A、B、C组的术后生存率均>83.3%。
C、D、E 组的MDA含量及肠黏膜损伤评分与A组比较，差异均有显著性（F=12.13、280.24,P<0.01）。
结论肠系膜缺血30 min再灌注2 h 是建立兔小肠急性缺血再灌注损伤的合适时间。
【关键词】肠；缺血；再灌注损伤；模型,动物［ABSTRACT］Objective To create a model of acute intestinal ischemia reperfusion injury in rabbits so as to determine suitable blocking duration of superior mesenteric arteries (SMA). Methods Seventy rabbits were divided into five groups as groups A, B, C, D, and E, based on the different blocking durations of SMA for 0, 15, 30, 45 and 60 minutes, respectively, with 14 rabbits in each group. Eight of the rabbits in each group were detected for serum levels of MDA 2 h after recovery of blood supply, the changes of histomorphology of small intestine observed light microscopically. The other sixrabbbits in each group were used to observe the 24 h, 48 h and 72 h survival rates after the blockage of SMA. Results The survival rates were over 83.3% in groups A, B and C. Serum levels of MDA and score of injury of intestinal mucosa were significantly higher in groups C, D and E than that in group A (F=12.13,280.24；P<0.01). Conclusion The suitable duration for creating a model of acute SMA ischemia reperfusion injury in small bowel is ischemia for 30 minutes and reperfusion for 2 hours.［KEY WORDS］ intestines; ischemia; reperfusion injury; model, animal缺血再灌注损伤(IRI)是指组织缺血一段时间，当血流重新恢复后，细胞功能代谢障碍及结构破坏反而较缺血时进一步加重，器官功能进一步恶化的临床综合征[1]。
家兔肠缺血再灌注损伤ppt课件
端，剪口部位尽量靠近远心
端，成45度角朝向近心端 剪一小口，约为管径的
1/3-2/3，插管方向朝向近
心端，插入2-4cm
【插管的注意事项】
插管内事先应加入少量肝素以防凝血；排净气
泡，记录前应关闭三通管
插管易滑脱，应双线固定，结扎牢靠 勿使插管尖端与血管壁形成角度，避免刺破血
【实验动物】
家兔（性别、体重）
【实验设计原理】
通过肠系膜上动脉结扎，即SMAO(Superior Mesentery Artery Occlusion)来阻断部分 肠的血液供应一段时间后再恢复血流灌注， 以复制肠缺血/再灌注损伤的动物模型，探
讨缺血/再灌注损伤的发生机制
【实验分组】
Байду номын сангаас Ⅰ组：持续缺血组 结扎肠系膜上动脉
（2）再灌注时遵循低压、低温、低钙的原则
（3）清除活性氧
（4） Ca2+拮抗剂的使用
（5） 减少白细胞的激活和炎性介质的释放 （6）补充能量及促进能量生成 （7）启动细胞内源性保护机制
【实验报告要点】
1、实验目的 2、实验动物 3、简单的实验步骤 4、列表记录所有组的实验指标 5、实验讨论 6、实验结论
① ② ③
时间
Ⅰ组：结扎→BP↑→BP↓趋于平稳（相似于结 扎前），肠壁粉红→暗红（淤血）肿胀（水 肿），无出血点 Ⅱ组：结扎→ BP↑→BP↓趋于平稳（机体自身 调节）→再灌→BP↓，肠壁暗红、水肿、出血 点，BP低于正常>1/2时→休克
※ Ⅰ、Ⅱ组比较说明：缺血损伤与I/R是不同的 损伤过程，后者损伤更严重
【结果不明显可能存在的问题】
（1）实验过程中是否发生了大血？ （2）缺血是否完全？ （3）再灌注是否通畅？ （4）记录结果时基线是否改变？
家兔肠缺血再灌注实验
2010 李娜
•实验目的 •实验动物： 家兔2.5 Kg左右 •实验药品： 25% 乌拉坦 2ml/Kg… •实验方法：
1. 全身麻醉后，固定。 2. 颈部手术：① 气管切开插管 （3-4软骨环） 3.腹部手术 ： ① 膀胱颈部结扎，膀胱荷包缝合。 ② 分离肠系膜上动脉。 4. 颈部手术： 分离左侧颈总动脉，动脉插管，接测压装置记录血压 （充分肝素化 充分肝素化）并且做耳缘静脉穿刺，ivgtt 0.3%肝素生理盐水。 充分肝素化 5. 记录生理指征： 心电图，呼吸曲线，肛温等。 6. 动脉夹夹闭肠系膜上动脉，观察并记录各项生理指标的变化。 7. 分离腹主动脉，用肝素化的注射器抽取动脉血0.3 ml，立即针头插入橡皮塞并做血 气分析。 8. 将实验结果及数据整理、制表。 9.写出实验报告，一周后上交 一周后上交。 一周后上交
（一）生理指标的观测 1. 家兔体重： ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱg 2. 生理指标的变化
生理指标 皮肤黏膜 颜色
时间（分钟）
肠袢形态 学改变
呼吸
血压
心率
肛温
尿量
0 10 20 30 40
打开动脉夹
20
家兔正常血气参考值
家兔肠缺血／再灌注损伤的血液自由基改变及川芎嗪的保护作用
家兔肠缺血／再灌注损伤的血液自由基改变及川芎嗪的保护作
用
周水生;董加喜
【期刊名称】《中国中医药科技》
【年(卷),期】1997(004)002
【总页数】1页(P94)
【作者】周水生;董加喜
【作者单位】浙江省咸宁医学院;浙江省咸宁医学院
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.超氧化物歧化酶及川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤的保护作用 [J], 周水生;董加喜;胡望平;程正启;刘复兴;李云;雷亚宁;
2.川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤作用的实验研究 [J], 陈悦;单季先
3.川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤时一氧化氮水平的影响 [J], 王卫;王万铁;徐正祄;金可可;李东;潘景业
4.家兔心肌缺血再灌注损伤及川芎嗪保护作用的超微结构改变 [J], 王宗敏;王万铁
5.川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤肠组织超微结构的影响 [J], 王卫;方周溪;王青;金可可;王万铁;徐正介;潘景业
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家兔肾缺血再灌注损伤时肠微循环的变化及其意义
1.4 统计学分析 : 实验所得的数据采用均数 $ 标准差 (x!S > 表示 , 用 SPSS10.0 for Windows 统计学 软件进
行方差分析 O
缺血 - 再灌注 (ischemia-reperfusion, I-R) 在临床 上也是一种常见的严重的病理生理过程 , 许多因素 均可以引起 I-R 损伤 [1]O 机体缺血再灌注损伤主要 是由自由基 ~ 钙超载所引起的观点基本上得到了公 认 , 但目前缺血再灌注损伤的研究主要集中在缺血 再灌注时某些自由基含量的变化 ~ 自由基对机体的
一步缩小 9微动静脉血流进一步减慢 P!0.0l 表
附表 组别 管袢数 家兔肾缺血再灌注损伤时肠微循环的变化 缺血前 缺血 30min
再灌注 30min 再灌注 60min
7.00$0.53
5.63$0.92*
4.88$0.83**
4.00$0.53**
( 支 /mm)
微动脉管 径 (!m) 微静脉管 径 (!m) 微动脉
1.3 实验方法 : 用 20% 乌拉坦按 1g/kg 的剂量从兔的
耳缘静脉进行全身麻醉 , 行全身血液肝素化后 ,气管 切开并插管 O 从下腹正中切口入腹 , 分离出左右肾 , 结扎右肾动脉 ,分离出左肾动脉穿线识别 O 从右下腹 轻轻拉出一段游离度比较大的小肠肠袢 , 选择小血 管走行丰富 ~ 脂肪少的部位放在显微镜载物台上 ; 让 家兔安静 5min 后 , 用与 BI2000 医学图像分析系统 连接的微循环显微镜观察记录小肠微循环的各项指 标作为正常的对照值 , 然后用无损伤动脉夹夹闭左 肾动脉 30min 后松开动脉夹 ,恢复肾脏的血液供应 O 分别在缺血 30min ~ 再灌注 30min~ 再 灌 注 60min 时 各记录上述指标 1 次 O
家兔肠缺血-再灌注后各器官损伤变化的实验研究
家兔肠缺血-再灌注后各器官损伤变化的实验研究要瑞莉;刘爱东;李宏杰;张一兵【期刊名称】《河北医药》【年(卷),期】2009(31)13【摘要】目的探讨家兔肠缺血-再灌注引起各器官变化的特点.方法选取10只健康家兔,随机分为实验组(5只)与对照组(5只),观察肝、肾、肺、心肌及胃肠的病理改变,检测血浆血浆丙二醛(MDA)、红细胞膜MDA、血浆黄嘌呤氧化酶(XOD)、血浆超氧化物歧化酶(SOD)的变化.结果实验组家兔的肝、肾、肺、心肌及胃肠均有较明显的病理改变.实验组血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量、肌酐含量、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量、血浆和红细胞膜MDA及血浆XOD含量明显高于对照组(P＜0.05),血浆SOD明显低于对照组(P＜0.05).结论家兔肠缺血-再灌注可导致肝、肾、肺、心肌及胃肠损伤,氧自由基对各器官的破坏可能是病理变化的主要因素.【总页数】2页(P1554-1555)【作者】要瑞莉;刘爱东;李宏杰;张一兵【作者单位】063004,河北省唐山市,唐山职业技术学院基础医学部;063004,河北省唐山市,唐山职业技术学院基础医学部;华北煤炭医学院病理生理教研室;华北煤炭医学院病理生理教研室【正文语种】中文【中图分类】R364.12【相关文献】1.肿瘤坏死因子、白细胞介素6活性变化对家兔肠缺血再灌注后急性肺损伤的影响[J], 沈炳玲;邢冬红;秦毅;黎新宪;杨芝红2.异丙酚对大鼠小肠缺血再灌注后肺损伤磷脂酶A2变化的影响 [J], 吴新军;孙艳红;王俊科;邢亚楠3.亚甲蓝预防肠缺血再灌注后肺损伤的实验研究 [J], 吴多志;梁敏;陈揭晓;王俊博4.猕猴肠缺血再灌注后肠道菌群变化与肠黏膜屏障损伤的关系 [J], 范华;吴浩;谭庆华;胡兵;唐承薇5.亚甲蓝对家兔肠缺血再灌注后肺损伤的保护作用 [J], 陈揭晓;吴新民;刘毓和;欧阳碧山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
探究丹参对家兔肠系膜上动脉缺血再灌注肾损伤的影响
探究丹参对家兔肠系膜上动脉缺血再灌注肾损伤的影响摘要：目的：初步探究丹参处理对家兔肠系膜上动脉缺血再灌注所引起的肾损伤的作用。
方法：选用健康家兔24只，随机分为3组：肠系膜上动脉缺血前注射生理盐水的对照组（Ａ组）、缺血前注射丹参注射液的实验组（B组）、再灌注前注射丹参注射液的实验组（C组）。
常规动物实验操作找到肠系膜上动脉，夹闭家兔肠系膜上动脉30min造成缺血，再灌注30min。
观察尿量，收集不同时期尿肌酐、血肌酐、丙二醛（MDA）并测定其含量。
结果：家兔肠系膜上动脉缺血再灌注后尿量减少，A组减少最显著，其次是B组，C组减少较轻。
缺血再灌注后血肌酐、血清中丙二醛浓度增加，尿肌酐浓度下降，其中A组变化最明显，其次是Ｂ组，C组变化不明显。
结论：丹参能减轻家兔肠系膜上动脉缺血再灌注所引起的肾损伤，对肾损伤有保护作用。
关键词：肠系膜上动脉缺血再灌注丹参肾损伤肠缺血再灌注（ＩＩＲ）损伤是休克、严重创伤及复苏过程中常见的病理生理过程，普遍存在肠根阻、肠扭转、大手术、烧伤等。
研究表明，小肠缺血再灌注后除对小肠组织本身造成损害外，还会通过全是炎症反应对其他器官造成损伤。
目前认为，缺血再灌注损伤产生的主要机制与活性氧的损伤作用、钙超载的作用、白细胞损伤作用、补体级联的损伤作用有关。
研究表明，丹参具有扩张外周血管、抗血栓形成、改善微循环等作用。
本实验采用家兔肠系膜上动脉缺血再灌注模型造成肠缺血，探讨丹参对家兔肠系膜上动脉缺血再灌注所致的肾损伤的保护作用和影响及其可能的机制。
1.材料与方法1.1材料：1.1.1实验动物：健康家兔２４只，体重２—３㎏，清洁级，由南方医科大学实验动物中心提供。
1.1.2主要仪器：医用计算机记录系统（PcLab）及计算机、家兔手术台、哺乳动物手术器械一套、动脉插管、静脉插管、输尿管插管、压力换能器、离心机、分光光度计，恒温水浴箱、带刻度的试管及试管夹、试管和试管架、EP管、微量加样枪带枪头、电子天平、黑色丝线、纱布等。
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气管平行，颜色鲜红、 较细、触之有搏动感， 长约2-3cm，穿线备用
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9
注意：（1）钝性分离 （2）辨清颈A鞘内的血管神经
血管插管
先结扎远心端，后夹闭近心 端，剪口部位尽量靠近远心 端，成45度角朝向近心端 剪一小口，约为管径的 1/3-1/2，插管方向朝向近 心端，插入1-1.5cm
家兔肠缺血/再灌注损伤
Ischemia-reperfusion Injury in Rabbit (I/R)
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1
【目的要求】
掌握缺血再灌注损伤模型的复制，比较 缺血损伤和缺血再灌注损伤的区别
观察缺血再灌注损伤的表现，理解缺血 再灌注损伤发生的机制
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2
【实验动物】
家兔
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血流30min）
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12
肠系膜上动脉示意图
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【注意事项】
1. 移动内脏时，动作要轻柔 2. 分离肠系膜上A时需小心细致，不要使用锐利
器械，以免损伤血管造成大出血 3. 肠系膜上A夹闭要彻底，缺血再灌注组结扎时
注意垫橡皮管，恢复血流灌流（复流）要完全
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【如何防治I/R】
（1）尽早恢复血流灌流，缩短缺血时间 （2）再灌注时遵循低温、低压、低钙的原则 （3）清除活性氧 （4）Ca2+拮抗剂的使用 （5）减少白细胞的激活和炎性介质的释放 （6）补充能量及促进能量生成 （7）启动细胞内源性保护机制
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5
【实验分组】
Ⅰ组：持续缺血组 夹闭肠系膜上动脉1h
Ⅱ组：再灌损伤组 夹闭肠系膜上动脉30min，再恢复血
流30min
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6
【实验方法与步骤】
1. 称重
2. 全 麻 （ 耳 缘 静 脉 注 射 25% 乌 拉 坦
4ml/kg）
★注意：从耳缘静脉的远心端开始注射，
pt
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Ⅰ组：结扎→BP↑→ BP↓趋于平稳（相似于结 扎前）， 肠壁粉红→暗红（淤血）肿胀（水肿），无出血点
Ⅱ组：结扎→ BP↑→BP↓趋于平稳（机体自身调节） →再灌→BP↓，肠壁暗红、水肿、出血点BP低于正常 >1/2时→休克
※ Ⅰ、Ⅱ组比较说明：缺血损伤与 是不同的 损伤过 程， 损伤过程，后者损伤更严重
3
【实验器材】
兔 手 术 台 、 BL-420生物信息采集系统、Y型气管插管、 动脉夹、动脉插管、静脉插管、注射器、纱布、棉线、 实验动物常用手术器械一套、橡皮管、三通管、1%肝素、 25%乌拉坦、生理盐水
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4
【实验设计原理】
通 过 肠 系 膜 上 动 脉 结 扎 ， 即 SMAO(Superior Mesentery Artery Occlusion)来阻断部分肠的血液供应一段时 间后再恢复血流灌注，以复制肠缺血/再灌 注损伤的动物模型，探讨缺血/再灌注损伤 的发生机制
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【结果分析】
① 峰表示：结扎肠系膜上A→ 血管床容量↓→ 有效循环血量相 对↑→BP↑ 压力感受器 (+) 减压 反射→BP↓
② 峰表示：松开肠系膜上A→ 血管床容量↑→有效循环血量相 对 →BP↓升压反射（再灌注损 伤还未来得及发生）有时②峰
不出现，BP↓直到死亡
③ 血压持续下降，有再灌注损
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【典型结果】
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【结果不明显可能存在的问题】
（1）实验过程中是否发生了大血？ （2）缺血是否完全？ （3）再灌注是否通畅？ （4）记录结果时基线是否改变？ （5）个体差异
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【I/R的发生机制】
（1）活性氧的作用 ） （2）钙超载 ） （3）白细胞的作用 ） （4）高能磷酸化合物生成障碍 ）
腹主动脉分出的肠系膜上动脉，穿双线备用，注意避免
损伤其他血管（缺血再灌注夹闭时注意垫橡皮管）
7.记录一段正常血压曲线 8.复制肠缺血-再灌注模型，轻轻提起肠系膜上动脉
的穿线，用动脉夹夹闭，同时观察各项生理指标变化。
9.分组进行实验并记录各项指标。（Ⅰ组：夹闭肠系 膜上动脉1h Ⅱ组：夹闭肠系膜上动脉30min，再恢复
★麻醉效果：角膜反射
基本消失，钳夹家兔
舌头无回收，四肢松软
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3. 仰卧固定（背部交叉）、备皮 颈部正中（甲状软骨下缘→胸骨上切迹） 腹部正中（剑突下1.5cm起向下5cm） ★注意：平贴皮肤剪毛，勿拎起皮肤！
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4.颈部正中切口行动脉插管
切口范围：颈部正中，甲状软骨下缘→胸骨 上切迹，长约5cm
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【插管的注意事项】
插管内事先应加入少量肝素以防凝血；排净气 泡，记录前应关闭三通管
插管易滑脱，应双线固定，结扎牢靠 勿使插管尖端与血管壁形成角度，避免刺破血
管
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5.腹部正中切口：
腹正中线自剑突下1.5cm起向下做5cm切口
※6.寻找肠系膜上动脉：
将家兔腹腔内脏左移，找到齐右肾门对侧垂直向