机能实验家兔肠缺血再灌注损伤
川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤肠组织超微结构的影响
川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤肠组织超微结构的影响王卫;方周溪;王青;金可可;王万铁;徐正介;潘景业【期刊名称】《杭州师范学院学报（医学版）》【年(卷),期】2004(025)002【摘要】目的探讨川芎嗪对小肠缺血再灌注损伤(ⅡRI)肠组织超微结构的影响;方法19只实验兔随机分为2组:肠缺血再灌注组(ⅡR组,n=9)和肠缺血再灌注+川芎嗪治疗组(LGT组,n=10).用电镜观察缺血再灌注损伤及经川芎嗪保护的各实验兔肠管组织的超微结构改变.结果ⅡR组家兔缺血60min、再灌注30min后肠组织超微结构明显受损,肠粘膜上皮细胞及线粒体肿胀,内质网扩张;LGT组肠组织超微结构比ⅡR组明显改善.结论小肠缺血再灌注造成肠组织超微结构的损害,川芎嗪对肠组织超微结构产生保护作用.【总页数】2页(P56-57)【作者】王卫;方周溪;王青;金可可;王万铁;徐正介;潘景业【作者单位】温州医学院,病理生理教研室,浙江,温州,325027;温州医学院,电镜室,浙江,温州,325027;温州医学院,病理生理教研室,浙江,温州,325027;温州医学院,病理生理教研室,浙江,温州,325027;温州医学院,病理生理教研室,浙江,温州,325027;温州医学院,病理生理教研室,浙江,温州,325027;温州医学院第一附属医院,急诊室,浙江,温州,325000【正文语种】中文【中图分类】R363【相关文献】1.超氧化物歧化酶及川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤的保护作用 [J], 周水生;董加喜;胡望平;程正启;刘复兴;李云;雷亚宁;2.红花对兔肠缺血再灌注损伤后血IL-8和肠组织ICAM-1表达的影响 [J], 张华;陈肖鸣;陈聪德;王万铁;李仲荣;王卫;王方岩3.川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤作用的实验研究 [J], 陈悦;单季先4.川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤时一氧化氮水平的影响 [J], 王卫;王万铁;徐正祄;金可可;李东;潘景业5.川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤时血浆TXA2/PGI2水平的影响 [J], 王卫;王万铁;徐正衸;谢克俭;金可可;潘景业因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
家兔后肢缺血再灌注损伤与血清IL-1、IL-6和TNF-α关系的研究
损伤 的关 系。方法
采用新 西兰 白家兔右 后肢缺 血再 灌注
第３ 、 ６ 、 ９ 、 １ ２ 、 １ ５ ｈ各个 时 间点分别 采血 。 １ ． ３ 动 物 模 型 制 作 术 前 １ ２ ｈ禁 食 ， 自由饮 水 。
用 １％戊 巴比妥钠 溶液 ５ ０ ｍ ｇ ／ ｋ ｇ 。仰 卧 固定 ， 右后 肢股 三 角处剪 毛 ， 纵行 切开 右侧 大腿正 中 的皮 肤 ， 暴
１ ． ５ 指 标检 测
１ ． ５ ． １ 血清 Ｉ Ｌ 一 １ 、 Ｉ Ｌ 一 ６及 Ｔ Ｎ Ｆ — ｏ ｌ 浓度
采用双抗
体 一步 夹心 法酶联 免疫 吸附试 验 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 。用 酶 标
体再 损 伤 的可能 机制 ， 为 临床 防治 提供实 验依 据 。
１ 材料 与 方法
中图分 类号
文 献 标 志码 Ａ 文 章 编 号 １ ０ ０ ０—１ ４ ９ ２ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ８— ０ ９ ０ ７— ０ ３
１ ． ４ 动物处 理和 标本 采集
Ｉ Ｒ组 于再 灌 注 的不 同
时点下 肢静 脉放 血并 采 集 血液 ５ ｍ ｌ ， 同 时切 取 双 侧
肢体缺血再灌 注 （ １ ｉ ｍｂ ｉ ｓ ｃ ｈ ｅ ｍ ｉ ａ ． ｒ ｅ ｐ ｅ ｒ ｆ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ ，
模型 ， ２ ０只家兔随机均分成假手术组和缺血 再灌注 （ Ｉ Ｒ） 组，
分别于 缺血前 与缺 血 ４ ｈ后 再灌 注 的第 ３ … ６ ９ １ ２ 、 １ ５ ｈ采 血 。Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法测定各组血清 Ｉ Ｌ 一 １ 、 Ｉ Ｌ ． ６ 、 Ｔ Ｎ Ｆ — ｏ 【 的浓 度。结果 与假手术组 比较 ， Ｉ Ｒ组各 时点血清 Ｉ Ｌ 一 １ 、 Ｉ Ｌ 一 ６ 、 Ｔ Ｎ Ｆ — ｄ的浓 度显著升 高 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ， Ｉ Ｌ 一 １ 、 Ｔ Ｎ Ｆ 一 仅在 ９ ｈ达到 峰值 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ， Ｉ Ｌ 一 ６在 １ ２ ｈ达到峰值 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） ， 假手术 组不 同时段 各 炎 性 因子 变 化 差 异无 统 计 学 意 义 。结论 Ｉ Ｌ 一 １ 、 Ｉ Ｌ － ６ 、
灯盏花素注射液对家兔缺血再灌注损伤肠系膜微循环的影响
灯盏花素注射液对家兔缺血再灌注损伤肠系膜微循环的影响刘东华;张新华;刘晓丽【期刊名称】《新乡医学院学报》【年(卷),期】2007(24)6【摘要】目的探讨灯盏花素注射液对家兔缺血再灌注损伤肠系膜微循环的保护作用.方法将15只家兔随机分为模型组、预防组、治疗组,在BI2000医学图像分析系统下观察并记录缺血30 min和再灌注30 min时家兔肠系膜微动脉管径(DA)、微静脉管径(DV)、血液流态(BFS)、微血管数目(CV)和红细胞聚集(EA).结果缺血30 min时,各组与缺血前比较,预防组BFS权分值增加(P《0.05),其他4项指标变化不显著;模型组、治疗组DA、DV缩小(P《0.05),BFS权分值增加(P《0.001),CV减少、EA明显(P《0.01);与模型组比较,预防组DA舒张、EA明显(P《0.05),BFS权分值减小、CV增多(P《0.01),治疗组微循环变化不显著;预防组与治疗组比较DA 舒张、CV增多(P《0.05),BFS权分值减小、EA明显(P《0.01).再灌注30 min时各组与其缺血前比较,模型组DA、DV缩小、CV减少、EA明显(P《0.01),BFS权分值增加(P《0.001),预防组CV增多、BFS权分值减小(P《0.05),治疗组微循环变化不显著;与模型组比较,预防组DA、DV舒张、BFS权分值减小、CV增多、EA明显(P《0.01),治疗组DA、DV舒张(P《0.05),BFS权分值减小、CV增多、EA明显(P 《0.01);预防组与治疗组比较,DV舒张(P《0.05),BFS权分值减小(P《0.01).结论灯盏花素注射液对家兔缺血再灌注时肠系膜微循环损伤有一定的保护作用.【总页数】4页(P576-579)【作者】刘东华;张新华;刘晓丽【作者单位】新乡医学院生命科学技术系,河南,新乡,453003;周口职业技术学院,河南,周口,466001;新乡医学院机能学实验室,河南,新乡,453003【正文语种】中文【中图分类】R972【相关文献】1.兔肾缺血再灌注损伤时肠系膜微循环和血液流变性变化及PGI2的影响 [J], 符庆瑛;李著华;张艳青;张英2.阿加曲班对大鼠肢体缺血再灌注损伤肠系膜微循环影响的实验研究 [J], 杜立清;宓士军;孔晓燕3.长托宁预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤后肠系膜微循环的影响 [J], 吕淼淼4.不同剂量皖南蝮蛇毒PCA对脑缺血再灌注损伤大鼠肠系膜微循环的影响 [J], 张阳;宋思南;高云星5.芸苔生物碱对大鼠血液流变学、肠系膜微循环及家兔视网膜微循环的影响 [J], 戴苏林;朱进因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
缺血-再灌注损伤
机制:
内皮素 （ET） ↑ 一氧化氮（NO）↓
血栓素A2（TXA2）↑
前列环素（PGI2）↓
后果:
有助于无复流现象的发生，加重组织损伤
（3）微血管通透性增高
机制：可能与白细胞释放的某些炎性介质有关
后果：①引发组织水肿
②导致血液浓缩，有助于形成无复流现象
③有利于中性粒细胞从血管内游走到细胞间隙，
直接释放细胞因子造成组织细胞的损伤
(三)心肌超微结构变化
肌原纤维结构破坏 (出现严重收缩带、肌丝断裂、溶解) 线粒体损伤 (极度肿胀、嵴断裂、溶解，空泡形成、 基质内致密物增多)
台湾野柳公园蘑菇石
二、脑缺血-再灌注损伤的变化 (一)脑能量代谢变化
ATP等均在短时间内减少 cAMP含量增加
cGMP含量下降
（二）脑氨基酸代谢变化
诊断: 心肌梗塞 问题:
1、为什么在溶栓后出现严重的心律失常?
2、如何防治？
台湾阿里山
3、核酸及染色体破坏 染色体畸变
核酸碱基改变
DNA断裂
（四）判断指标
O2-、OH· 1O2、H2O2 、
XO
MDA ( LPO )
SOD、CAT、GSH-PX VitC、VitE、 VitA
台东八仙台
二、钙超载
（一）钙超载的概念
钙超负荷
calcium overload CO
各种原因引起的细胞内钙含量异常增多 并导致细胞结构损伤和功能代谢障碍的现象
膜磷脂降解→线粒体膜受损→ATP生成↓→细胞膜、 肌浆网Ca2+ 泵功能障碍→胞浆Ca2+↑
（三）钙超载引起缺血-再灌注损伤的机制
1、激活XO→OFR生成↑ 2、激活ATP酶→加重细胞内酸中毒 3、激活PL→膜磷脂降解→直接造成生物膜受损
肠缺血再灌注损伤综述
肠缺血再灌注损伤综述肠缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury，IR）是外科常见的病理变化，是发生于肠道组织的再灌注损伤，经专家证实其在严重感染、创伤休克的致死性疾病发生与进展中起到重要作用，是创伤休克、严重感染等致死性疾病主要直接致死原因。
该研究者从事肠胃工作多年，在这方面具有丰富的工作经验和实践能力，对肠缺血再灌注损伤的具体机有一定的研究，该文针对性提出了疾病防治策略，有助于逆转疾病进程，降低死亡风险，希望能够与同行业的相关技术人员一同分享。
标签：肠缺血再灌注损伤；病理性机制；防治策略缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury，IR）是缺血所引的组织损伤，是致死性疾病的主要原因。
在缺血性疾病抢救和治疗过程中，医学家们渐渐发现，对组织造成损伤的主要因素不是缺血本身，而是恢复血液供应后，过量的自由基攻击顺血供，对功血供恢复细胞造成冲击，而这种冲击损害便是肠IR发生的直接病机。
肠缺血再灌注损伤即发生于肠道组织的再灌注损伤，被证实其在严重感染、创伤休克的致死性疾病发生与进展中起到重要作用，研究其具体机制，并针对性提出防治策略，有助于逆转疾病进程，降低死亡风险。
现报道如下。
1 目前研究的现状，可能存在的机制1.1 细胞层面上的研究现状细胞的死亡可分为坏死与凋亡，过去学术界普遍认为肠IR中伴有大量自由基灌注所造成的毒理损害可直接致细胞坏死，最近有研究表明，肠IR中损伤细胞有相当一部分以细胞凋亡形式死亡。
众所周知，细胞的凋亡是通过基因控制的，是一种“自杀”。
研究证实细胞凋亡是小肠缺血再灌注损伤时豁膜细胞死亡的主要机制，占死亡细胞总数的80%，其诱导机制包括：①氧自由基直接造成细胞损伤；②当小肠细胞受损时，可能会释放炎性递质，加速细胞凋亡反应；③肠豁膜屏障功能不全时，菌群移位促进豁膜细胞凋亡[1]。
Kaszaki J，Wolfard A，Szalay L，Boros M[2]研究结果表明：①病理生理学意义内皮素对受体激活在缺血/再灌注诱导主要从事微循环的变化；②胶体液治疗有效地改善了羟乙基淀粉主要从事微循环血容量减少的后果，这是一个较低的内皮素释放；③缺血预处理在应用前60 min，抑制了缺血再灌注诱导超氧化物生产，改善毛细血管灌注，降低白细胞活化在肠道内移植。
缺血-再灌注损伤Ischemia-reperfusioninjury
(2)细胞内高H+间接激活Na+-Ca2+交换蛋白 质膜Na+/H+交换蛋白主要受细胞内[H+]的变化调节 [Na+]o [H+]o Na+ H+ ＞ [Na+]i [H+]i 缺血时：无氧代谢↑→产生H+增多 再灌时：组织间液H+迅速减少→细胞内外较高的 H+浓度差→激活Na+/H+交换蛋白→细胞内 [Na+]↑ 激活钠泵 激活Na+-Ca2+交换蛋白
- +e →H 0 +e→ OH· O2+e→ O· +e→H20 +O2+e → O· 2 2 2 2
Ca2+进入线粒体使Mn-SOD减少
清除OFR的能力↓
4. 儿茶酚胺
自氧化 自由基
CA
正常代谢
肾排出
（应激时80%O2） 肾上腺素红+ O-2·
Organic substance
O2 Synthesis Metabolism energy Transport
肠管缺血时，液体通过毛细血管滤出而形成间质水肿。 缺血后再灌注，肠管毛细血管通透性更加升高。 从形态学变化来看，严重肠管缺血所致损伤的特征为粘 膜病变（粘膜损伤）。不论人和动物，在出血性休克及局部 肠管缺血后出现肠粘膜损伤。粘膜损伤的特点表现为：广泛 的上皮与绒毛分离，上皮坏死，固有层破坏，出血及溃疡形
2.细胞损伤
小结
代谢、能量改变
钙超载
OFR 血管内皮中粒细胞
钙超载是细胞不可逆死亡的共同通路
第三节 机体的变化
一、 心肌缺血-再灌注损伤的变化
（一）心功能变化 1.再灌注性心律失常 特点： 室性心律失常为主 电生理改变： 兴奋性、传导性↓ ECG改变：缺血心肌对应部位ST段抬高，R波振幅↑ 再灌使R波振幅迅速↓，ST段高度恢复原 水平，Q波出现, 心律失常
缺血再灌注损伤机制
PARALLEL研究是迄今为至规模最大的曲美他嗪随机对照研究。 PARALLEL研究是迄今为至规模最大的曲美他嗪随机对照研究。该研究入 研究是迄今为至规模最大的曲美他嗪随机对照研究 选903例稳定性心绞痛患者，在β受体阻滞剂的基础上随机加用曲美他 903例稳定性心绞痛患者， 例稳定性心绞痛患者 嗪或长效硝酸酯（硝酸异山梨酯）治疗12周 嗪或长效硝酸酯（硝酸异山梨酯）治疗12周，结果联合曲美他嗪组每周 12 心绞痛次数较基线时显著降低75.9%， 心绞痛次数较基线时显著降低75.9%，每周硝酸甘油用量较基线时显著 75.9% 降低78.8%，且显著低于联用硝酸酯组。 降低78.8%，且显著低于联用硝酸酯组。 78.8%
结
果
1.显著降低心绞痛发作次数(75.9％ 61.6％，p<0.0001） ％，p<0.0001 1.显著降低心绞痛发作次数(75.9％比61.6％，p<0.0001） 2.减少硝酸甘油用量(78.8％ 63.2％，p<0.0001） ％，p<0.0001 2.减少硝酸甘油用量(78.8％比63.2％，p<0.0001） 3.联用曲美他嗪抗心绞痛作用更强，尤其对60岁以 3.联用曲美他嗪抗心绞痛作用更强，尤其对60岁以 联用曲美他嗪抗心绞痛作用更强 60 上的患者及糖尿病患者 4.曲美他嗪组对稳定型心绞痛患者的生活质量的 4.曲美他嗪组对稳定型心绞痛患者的生活质量的 改善更佳 5.曲美他嗪组不良反应发生率显著降低。 5.曲美他嗪组不良反应发生率显著降低。 曲美他嗪组不良反应发生率显著降低
因缺血、 生成减少， 因缺血、缺氧使 ATP 生成减少，钙离子进入细胞 增多，使细胞膜损伤，以及线粒体功能受损。 增多，使细胞膜损伤，以及线粒体功能受损。 1.再灌注时，氧气的增多，就会生成大量的氧自由 1.再灌注时，氧气的增多，就会生成大量的氧自由 再灌注时 基。由于线粒体功能此时尚未恢复，所以对于氧自由基 由于线粒体功能此时尚未恢复， 的 清除能力不足，导致氧自由基增多。氧自由基的增 清除能力不足，导致氧自由基增多。 多，就会对膜磷脂造成损伤，包括细胞膜，细胞器膜 就会对膜磷脂造成损伤，包括细胞膜， 如线粒体膜，溶酶体膜，内质网膜等等的损伤， 如线粒体膜，溶酶体膜，内质网膜等等的损伤，会进 一步损伤细胞。同时氧自由基的增多还会对蛋白质， 一步损伤细胞。同时氧自由基的增多还会对蛋白质， 核酸及细胞外基质造成损伤，从而加重了细胞的凋亡 加重了细胞的凋亡。 核酸及细胞外基质造成损伤，从而加重了细胞通透性增强， 2.再灌注时，由于细胞膜的损伤，通透性增强，使大量的 再灌注时 钙离子顺浓度梯度内流，造成细胞内钙超载 钙超载； 钙离子顺浓度梯度内流，造成细胞内钙超载；同时线 粒体功能的障碍，ATP生成减少， 粒体功能的障碍，ATP生成减少，肌膜及肌浆网膜钙泵 生成减少 功能障碍，不能排出和摄取细胞浆中过多的钙，致使 功能障碍，不能排出和摄取细胞浆中过多的钙， 细胞浆中游离钙浓度增加而进一步造成钙超载。 细胞浆中游离钙浓度增加而进一步造成钙超载。而钙 超载会进一步加重细胞的凋亡。 超载会进一步加重细胞的凋亡。 加重细胞的凋亡
缺血-再灌注损伤 (Ischemia-reperfusion injury)
NADH(I) NADPH(II) + O2
NADH氧化酶 NADPH氧化酶 + + O H
激活中粒
己糖旁路活化
+H 2· 2O2
3. 线粒体功能障碍（心肌细胞源性）
Ca2+进入线粒体 缺氧 MnSOD 氧经单电子还原↑
·↑ O 2
4. 儿茶酚胺
Adr
甲基转移酶
第十章
缺血-再灌注损伤
（Ischemia-reperfusion injury)
简史
认识就从这简单现象开始
1 ９ ５ ５ 年 ， Sewell 结
扎狗冠状动脉后，如 突然解除结扎，恢复 血流，动物室颤而死 亡，临床类同
１９６０年，Jennings第一次
提出心肌再灌注损伤的概念
在心肌缺血恢复血流后， 缺血心肌的损伤反而加重
SLOW
Fenton 型Haber-Weiss反应
O 2 + H 2O 2
－
Fe
3
O2 + OH +OH
FAST
3 氧自由基的清除
（1）低分子清除剂
胞浆：还原性辅酶Ⅱ
细胞内外水相： 半胱氨酸、Vit C、谷胱甘肽
细胞脂质： Vit E、 Vit A
（2）酶性清除剂
超氧化物歧化酶
MnSOD CuZnSOD
单胺氧化酶
应激时80%O2
香草扁桃酸（正常代谢） 肾排出
O- 2 ·
肾上腺素红
（三）OFR的损伤机制
1. 膜脂质过氧化(lipid peroxidation) （1）膜脂质微环境改变 （2）膜蛋白功能受抑 （3）促花生四烯酸代谢 （4）线粒体膜 ：ATP生成障碍