机能试验家兔肠缺血再灌注损伤
兔急性肠道缺血再灌注损伤模型的建立
兔急性肠道缺血再灌注损伤模型的建立【摘要】目的建立小肠急性缺血再灌注损伤模型，确定合适的肠系膜上动脉阻断时间。
方法将70只新西兰兔按不同的肠系膜缺血时间（0、15、30、45、60 min）分为A、B、C、D、E共5组，每组14只。
每组取8只于恢复血供2 h后留取兔下腔静脉血标本及肠组织，检测血清中丙二醛（MDA）含量的变化，光镜下观察小肠组织形态学变化并对小肠黏膜损伤程度进行评分。
另6只兔用于术后24、48、72 h 生存率的观察。
结果 A、B、C组的术后生存率均>83.3%。
C、D、E 组的MDA含量及肠黏膜损伤评分与A组比较，差异均有显著性（F=12.13、280.24,P<0.01）。
结论肠系膜缺血30 min再灌注2 h 是建立兔小肠急性缺血再灌注损伤的合适时间。
【关键词】肠；缺血；再灌注损伤；模型,动物［ABSTRACT］Objective To create a model of acute intestinal ischemia reperfusion injury in rabbits so as to determine suitable blocking duration of superior mesenteric arteries (SMA). Methods Seventy rabbits were divided into five groups as groups A, B, C, D, and E, based on the different blocking durations of SMA for 0, 15, 30, 45 and 60 minutes, respectively, with 14 rabbits in each group. Eight of the rabbits in each group were detected for serum levels of MDA 2 h after recovery of blood supply, the changes of histomorphology of small intestine observed light microscopically. The other sixrabbbits in each group were used to observe the 24 h, 48 h and 72 h survival rates after the blockage of SMA. Results The survival rates were over 83.3% in groups A, B and C. Serum levels of MDA and score of injury of intestinal mucosa were significantly higher in groups C, D and E than that in group A (F=12.13,280.24；P<0.01). Conclusion The suitable duration for creating a model of acute SMA ischemia reperfusion injury in small bowel is ischemia for 30 minutes and reperfusion for 2 hours.［KEY WORDS］ intestines; ischemia; reperfusion injury; model, animal缺血再灌注损伤(IRI)是指组织缺血一段时间，当血流重新恢复后，细胞功能代谢障碍及结构破坏反而较缺血时进一步加重，器官功能进一步恶化的临床综合征[1]。
家兔肠缺血再灌注损伤ppt课件
端，剪口部位尽量靠近远心
端，成45度角朝向近心端 剪一小口，约为管径的
1/3-2/3，插管方向朝向近
心端，插入2-4cm
【插管的注意事项】
插管内事先应加入少量肝素以防凝血；排净气
泡，记录前应关闭三通管
插管易滑脱，应双线固定，结扎牢靠 勿使插管尖端与血管壁形成角度，避免刺破血
【实验动物】
家兔（性别、体重）
【实验设计原理】
通过肠系膜上动脉结扎，即SMAO(Superior Mesentery Artery Occlusion)来阻断部分 肠的血液供应一段时间后再恢复血流灌注， 以复制肠缺血/再灌注损伤的动物模型，探
讨缺血/再灌注损伤的发生机制
【实验分组】
Байду номын сангаас Ⅰ组：持续缺血组 结扎肠系膜上动脉
（2）再灌注时遵循低压、低温、低钙的原则
（3）清除活性氧
（4） Ca2+拮抗剂的使用
（5） 减少白细胞的激活和炎性介质的释放 （6）补充能量及促进能量生成 （7）启动细胞内源性保护机制
【实验报告要点】
1、实验目的 2、实验动物 3、简单的实验步骤 4、列表记录所有组的实验指标 5、实验讨论 6、实验结论
① ② ③
时间
Ⅰ组：结扎→BP↑→BP↓趋于平稳（相似于结 扎前），肠壁粉红→暗红（淤血）肿胀（水 肿），无出血点 Ⅱ组：结扎→ BP↑→BP↓趋于平稳（机体自身 调节）→再灌→BP↓，肠壁暗红、水肿、出血 点，BP低于正常>1/2时→休克
※ Ⅰ、Ⅱ组比较说明：缺血损伤与I/R是不同的 损伤过程，后者损伤更严重
【结果不明显可能存在的问题】
（1）实验过程中是否发生了大血？ （2）缺血是否完全？ （3）再灌注是否通畅？ （4）记录结果时基线是否改变？
家兔肠缺血再灌注实验
2010 李娜
•实验目的 •实验动物： 家兔2.5 Kg左右 •实验药品： 25% 乌拉坦 2ml/Kg… •实验方法：
1. 全身麻醉后，固定。 2. 颈部手术：① 气管切开插管 （3-4软骨环） 3.腹部手术 ： ① 膀胱颈部结扎，膀胱荷包缝合。 ② 分离肠系膜上动脉。 4. 颈部手术： 分离左侧颈总动脉，动脉插管，接测压装置记录血压 （充分肝素化 充分肝素化）并且做耳缘静脉穿刺，ivgtt 0.3%肝素生理盐水。 充分肝素化 5. 记录生理指征： 心电图，呼吸曲线，肛温等。 6. 动脉夹夹闭肠系膜上动脉，观察并记录各项生理指标的变化。 7. 分离腹主动脉，用肝素化的注射器抽取动脉血0.3 ml，立即针头插入橡皮塞并做血 气分析。 8. 将实验结果及数据整理、制表。 9.写出实验报告，一周后上交 一周后上交。 一周后上交
（一）生理指标的观测 1. 家兔体重： ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱg 2. 生理指标的变化
生理指标 皮肤黏膜 颜色
时间（分钟）
肠袢形态 学改变
呼吸
血压
心率
肛温
尿量
0 10 20 30 40
打开动脉夹
20
家兔正常血气参考值
兔脑缺血再灌注损伤及其防治
1.预习教科书相关章节 2.小组讨论，查阅资料 3.针对机制设计治疗方案
《《《
设计 过程
4.设计动物损伤模型及对照模型
具体实验方案如下
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ADD SUB TITLE 实验目的
学习制作家兔全脑缺血再灌注损伤模型 理解脑缺血再灌注损伤制 了解其防治原则
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实验步骤
• 家兔分为假手术组、对照组及实验组 • 缘静 3% 钠1ml/kg ， 卧 固 兔 • 气管插管，分离双侧颈总动脉吗，穿线备用 • 分别抽取脑脊液分析自由基及白细胞含量，CT脑部照片 • 除假手术组外，动脉夹夹闭双侧颈总动脉，5分钟后，松 开制成脑部缺血再灌注损伤模型 • 重复步骤4 • 给对照组耳缘静脉注射10ml生理盐水，给实验组注射含G • 60min后，重复步骤4
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实验对象：健康成年家兔3只 实验药品：生理盐水，含GSH-PX0.5g/kg、 维拉帕米0.5g/kg、羟基脲0.5g/kg的生理盐水， 3%无巴比妥那 实验器械：全血分析仪一台，CT仪一台，兔台3个， 全套兔手术器械
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SH-PX0.5g/kg、维拉帕米0.5g/kg、羟基脲0.5g/k g的生理盐水10ml
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家兔肠缺血／再灌注损伤的血液自由基改变及川芎嗪的保护作用
家兔肠缺血／再灌注损伤的血液自由基改变及川芎嗪的保护作
用
周水生;董加喜
【期刊名称】《中国中医药科技》
【年(卷),期】1997(004)002
【总页数】1页(P94)
【作者】周水生;董加喜
【作者单位】浙江省咸宁医学院;浙江省咸宁医学院
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.超氧化物歧化酶及川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤的保护作用 [J], 周水生;董加喜;胡望平;程正启;刘复兴;李云;雷亚宁;
2.川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤作用的实验研究 [J], 陈悦;单季先
3.川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤时一氧化氮水平的影响 [J], 王卫;王万铁;徐正祄;金可可;李东;潘景业
4.家兔心肌缺血再灌注损伤及川芎嗪保护作用的超微结构改变 [J], 王宗敏;王万铁
5.川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤肠组织超微结构的影响 [J], 王卫;方周溪;王青;金可可;王万铁;徐正介;潘景业
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家兔肠缺血-再灌注后各器官损伤变化的实验研究
家兔肠缺血-再灌注后各器官损伤变化的实验研究要瑞莉;刘爱东;李宏杰;张一兵【期刊名称】《河北医药》【年(卷),期】2009(31)13【摘要】目的探讨家兔肠缺血-再灌注引起各器官变化的特点.方法选取10只健康家兔,随机分为实验组(5只)与对照组(5只),观察肝、肾、肺、心肌及胃肠的病理改变,检测血浆血浆丙二醛(MDA)、红细胞膜MDA、血浆黄嘌呤氧化酶(XOD)、血浆超氧化物歧化酶(SOD)的变化.结果实验组家兔的肝、肾、肺、心肌及胃肠均有较明显的病理改变.实验组血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量、肌酐含量、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量、血浆和红细胞膜MDA及血浆XOD含量明显高于对照组(P＜0.05),血浆SOD明显低于对照组(P＜0.05).结论家兔肠缺血-再灌注可导致肝、肾、肺、心肌及胃肠损伤,氧自由基对各器官的破坏可能是病理变化的主要因素.【总页数】2页(P1554-1555)【作者】要瑞莉;刘爱东;李宏杰;张一兵【作者单位】063004,河北省唐山市,唐山职业技术学院基础医学部;063004,河北省唐山市,唐山职业技术学院基础医学部;华北煤炭医学院病理生理教研室;华北煤炭医学院病理生理教研室【正文语种】中文【中图分类】R364.12【相关文献】1.肿瘤坏死因子、白细胞介素6活性变化对家兔肠缺血再灌注后急性肺损伤的影响[J], 沈炳玲;邢冬红;秦毅;黎新宪;杨芝红2.异丙酚对大鼠小肠缺血再灌注后肺损伤磷脂酶A2变化的影响 [J], 吴新军;孙艳红;王俊科;邢亚楠3.亚甲蓝预防肠缺血再灌注后肺损伤的实验研究 [J], 吴多志;梁敏;陈揭晓;王俊博4.猕猴肠缺血再灌注后肠道菌群变化与肠黏膜屏障损伤的关系 [J], 范华;吴浩;谭庆华;胡兵;唐承薇5.亚甲蓝对家兔肠缺血再灌注后肺损伤的保护作用 [J], 陈揭晓;吴新民;刘毓和;欧阳碧山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
家兔肠造血——再灌注损伤时脂质过氧化的变化及其意义
家兔肠造血——再灌注损伤时脂质过氧化的变化及其意义
张硕森;崔和勤
【期刊名称】《天津医科大学学报》
【年(卷),期】1998(004)004
【摘要】目的：探讨肠缺血－再灌注（Ｉ／Ｒ）损伤时血浆及组织脂质过氧化的
变化及其意义。
方法：复制家兔肠Ｉ／Ｒ损伤模型，检测超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和黄嘌呤氧化酶（ＸＯ）活性及丙二醛（ＭＤＡ）含量，实验分为Ｉ／Ｒ损伤组及假手术（Ｓｈａｍ）对照组，并进行比较。
结果：缺血前两组动物ＳＯＤ，ＸＯ及ＭＤＡ值均无统计学差异，Ｉ／Ｒ组再灌注后２ｈ与缺血前及Ｓｈａｍ组相比，ＳＯＤ活性显著下降，ＸＯ活性及ＭＤＡ含量明显增加（
【总页数】3页(P325-327)
【作者】张硕森;崔和勤
【作者单位】华北煤炭医学院病理生理教研室;华北煤炭医学院病理生理教研室【正文语种】中文
【中图分类】R574.02
【相关文献】
1.实验高压电烧伤家兔肠黏膜的微循环变化及意义 [J], 张庆富;王佳哲
2.家兔肝缺血再灌注损伤脂质过氧化的动态变化及川芎嗪干预的机制 [J], 徐正;王万铁;李东;林丽娜
3.家兔肾缺血再灌注损伤时肠微循环的变化及其意义 [J], 焦勇钢;张耀东;李希忠;
陈予
4.大鼠肠缺血再灌注损伤后肠黏膜免疫功能的变化与意义 [J], 李斌;文亮;郭毅斌;尹昌林
5.卡巴胆碱对肠部分缺血-再灌注损伤家兔血浆促炎细胞因子含量的影响及对烧创伤后防治的意义 [J], 白玉梅;胡森;刘秀华;曹卫红;黎君友;孙丹;吕艺
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机能学创新实验：维拉帕米对家兔心肌缺血性再灌注损伤的影响PPT课件
健康家兔24只 雌雄各半 体重2.0~2.5kg
由遵义医学院动物中心提供
肌酸激酶试剂盒(CK) 肌酸激酶同工酶试剂盒 (CK-MB)
0.25%盐酸维拉帕米溶液 10g/L肝素 250g/L乌拉坦溶液
1、Байду номын сангаас醉和固定 2、接心电图电极：
给家兔四肢剃毛后连接好心电图电极,记录波形。
3、颈部手术： 分离一侧颈总动脉，做颈总动脉插管待用。
在缺血再灌注前，缺血40min后和再灌注3h后这3个时 刻段分别在颈总动脉取血2ml按以下步骤测量出肌酸激酶和 肌酸激酶同工酶。
肌 酸 激 酶
肌酸 激酶 同工 酶
与A组相比,若再灌注末B组的CK含量增加、而 CK-MB含量差异不显著（P<0.05），则说明B组 家兔已造成心肌损伤。
与B组比较，C组的CK、CK-MB含量均降低，（ P<0.05）则说明缺血后适应对缺血心肌具有保 护作用。
如C组和D组的CK、CK-MB含量相同或降低（ P<0.05），则可初步说明药物后处理具有与缺 血后适应发挥同样的保护效应。
近年来，随着休克治疗的进步以及动脉搭 桥术、心肺复苏、心脏外科体外循环和器官移 植等方法的建立和推广运用，使许多组织器官 缺血后重新得到血液再灌注。
心肌
1、氧自由基生成增多 2、 3、白细胞的激活
药物后处理（P-postC）
“药物后处理”即在再灌注时或再灌注前用药物代替" 再灌—停灌"的循环处理过程，模拟缺血后适应的某些机 制而发挥保护心肌缺血再灌注损伤作用，若能证实其与缺 血后适应发挥同样的保护效应，那药物使用更加方便，同 时避免了因机械干预对心肌及血管的损伤作用，固临床上 将具有更为广泛的前景。
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?【实验动物】
?
家兔
?
【实验器材】
? 兔 手 术 台 、 BL-420生物信息采集系动物常用手术器械一套、橡皮管、三通管、1%肝素、 25%乌拉坦、生理盐水
【实验设计原理】
?通 过 肠 系 膜 上 动 脉 结 扎 ， 即
流30min
【实验方法与步骤】
? 1. 称重
? 2. 全 麻 （ 耳 缘 静 脉 注 射 25% 乌 拉 坦 4ml/kg ）
? ★注意：从耳缘静脉的远心端开始注射，
? 排尽气泡，速度不宜太快
? ★麻醉效果：角膜反射
?
基本消失，钳夹家兔
?
舌头无回收，四肢松软
? 3. 仰卧固定（背部交叉）、备皮 ? 颈部正中（甲状软骨下缘 →胸骨上切迹） ? 腹部正中（剑突下 1.5cm 起向下5cm ） ? ★注意：平贴皮肤剪毛，勿拎起皮肤！
SMAO(Superior
Mesentery
Artery
Occlusion) 来阻断部分肠的血液供应一段时
间后再恢复血流灌注，以复制肠缺血 / 再灌
注损伤的动物模型，探讨缺血 / 再灌注损伤
的发生机制
【实验分组】
?Ⅰ组：持续缺血组 夹闭肠系膜上动脉 1h
?Ⅱ组：再灌损伤组 夹闭肠系膜上动脉 30min ，再恢复血
? 4. 颈部正中切口行动脉插管
p 切口范围：颈部正中，甲状软骨下缘 上切迹，长约 5cm
→ 胸骨
?分离左侧颈总动脉：胸 骨舌骨肌与胸锁乳突肌之 间深面的颈动脉鞘内，与
气管平行，颜色鲜红、 较细、触之有搏动感， 长约2-3cm ，穿线备用
注意：（1 ）钝性分离 （2）辨清颈A 鞘内的血管神经
血管插管
? 家兔肠缺血/再灌注损伤
? Ischemia-reperfusion Injury in Rabbit (I/R)
组员：张景帧 孙艺 王燕 李蓉蓉 宋天冬 宋子夜
【目的要求】
p 掌握缺血再灌注损伤模型的复制，比较 缺血损伤和缺血再灌注损伤的区别
p 观察缺血再灌注损伤的表现，理解缺血 再灌注损伤发生的机制