纸片扩散法测大肠杆菌对几种抗生素的敏感性(清晰整齐)
纸片琼脂扩散实验报告
一、实验目的1. 了解纸片琼脂扩散法的原理和操作步骤。
2. 掌握纸片琼脂扩散法的应用，评估细菌对不同抗菌药物的敏感性。
3. 分析实验结果，为临床用药提供依据。
二、实验原理纸片琼脂扩散法（Kirby-Bauer法）是一种常用的细菌药敏试验方法。
其原理是将含有定量抗菌药物的纸片贴在涂有测试菌的琼脂平板上，药物在琼脂中扩散，形成递减的浓度梯度。
当纸片周围的药物浓度低于细菌的最小抑菌浓度（MIC）时，细菌生长被抑制，形成无菌生长的透明圈，即抑菌圈。
抑菌圈的大小与药物浓度和细菌敏感性呈负相关。
三、实验材料1. 细菌菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等。
2. 抗菌药物纸片：青霉素、氨苄西林、头孢噻肟、庆大霉素等。
3. 琼脂培养基：水解酪蛋白琼脂（Mueller-Hinton琼脂，MH琼脂）。
4. 无菌器械：接种环、镊子、酒精棉球等。
5. 环形量器、纸片分配器、计时器等。
四、实验步骤1. 准备工作：将MH琼脂培养基熔化，待冷却至约45℃时，倒入平板中，待凝固。
2. 接种：用接种环挑取适量细菌菌种，涂布于平板表面，均匀分布。
3. 贴药片：用纸片分配器或镊子将抗菌药物纸片贴于平板表面，纸片中心距离平板边缘不小于15mm，纸片间距不小于24mm。
4. 观察与记录：将平板放入37℃恒温箱中培养18-24小时，观察并记录抑菌圈的大小。
5. 结果分析：根据抑菌圈的大小，查阅药物敏感谱，判断细菌对不同抗菌药物的敏感性。
五、实验结果与分析1. 金黄色葡萄球菌：对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟均表现为敏感，抑菌圈直径分别为15mm、10mm、20mm；对庆大霉素表现为耐药，无抑菌圈形成。
2. 大肠杆菌：对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟均表现为耐药，无抑菌圈形成；对庆大霉素表现为敏感，抑菌圈直径为18mm。
3. 肺炎克雷伯菌：对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟均表现为耐药，无抑菌圈形成；对庆大霉素表现为敏感，抑菌圈直径为16mm。
根据实验结果，金黄色葡萄球菌对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟敏感，对庆大霉素耐药；大肠杆菌对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟耐药，对庆大霉素敏感；肺炎克雷伯菌对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟耐药，对庆大霉素敏感。
实验十四 纸片法测定五种抗生素对大肠杆
（牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂
20g、蒸馏水1000mL）。
(2) 营养肉汤按常规方法制备（牛肉膏3g、
蛋白胨10g、氯化钠5g、蒸馏水1000mL）。
四 操作步骤
2.菌悬液的制备
3.抑菌活性的测定
四 操作步骤
4.测定抑菌圈直径 抑菌强度判定标准：无抑菌圈者为抗药， 记为“-”；抑菌圈直径小于10mm者为耐药， 记为“+”；在10～15mm者为中度敏感，记 为“++”；在15~20mm者为高度敏感，记为 “+++”；大于20mm者为极敏感，记为
实验十四
纸片法测定五种抗生素对 大肠杆菌的抑制效果实验
一 目的要求
对四种抗生素对大肠杆菌的抑制效果进行
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
比较，掌握抑菌实验中的纸片法操作过程。
二 基本原理
随着抗生素的广泛使用，大肠杆菌对抗 生素药物的耐药性逐渐增强。了解大肠杆 菌（革兰氏阴性菌）对抗生素药物的敏感 程度，对微生态制剂的研究及临床用药具 有指导作用。本实验结果表明青霉素对大 肠杆菌有抑菌作用，但是作用不大且易出 现耐药性，出现不敏感。而其他四种抗生 素对革兰氏阴性杆菌作用强，出现敏感性。
三 实验器材与仪器
1.药品：庆大霉素、头孢菌素、四环素、链 霉素的滤纸片和青霉素的滤纸片。 2.菌种：大肠杆菌
三 实验器材与仪器
3.仪器和其他用具 ：高压蒸汽灭菌锅、生化 培养箱、无菌工作台、显微镜、平皿、三 角烧瓶、酒精灯、烧杯、移液管、镊子、 试管、胶头滴管、涂布棒、移液枪、游标 卡尺。
四 操作步骤
“++++”。
K-B 纸片扩散法测定抗生素敏感试验
平板霉素类似物生物活性评价平板霉素对耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和耐万古霉素肠球菌(VREF)等耐药菌具有很好的抑制活性。
抗菌活性的测试主要针对MRSA和VREF进行测定和相比。
最小抑制浓度（MIC）被确定抑制细菌生长的最低浓度。
通过生物活性数据的反馈，进一步指导平板霉素类似物的合成方向，希望获得活性更高、药效活性更好的抗耐药菌抗生素和药物先导化合物。
纸片扩散法测定抗生素敏感试验及MIC：1.原理：将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上。
纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后不断地向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度。
在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制,从而形成透明的抑菌圈。
抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关关系,即抑菌圈愈大,MIC愈小。
2.仪器及试剂仪器：纸片、试管、移液枪、烘箱、培养皿、培养箱、镊子、pH试纸、量筒、天平、高压灭菌锅、三角瓶、打孔器、超净工作台试剂：样品溶液、培养基3.菌液的配置从琼脂平板挑取新鲜分离的菌落数个或从保存的斜面上移种至3～5mL LB肉汤培养液中37℃培养2～8h，以待生长至轻微或中等浊度。
也可直接从孵育18～24h的琼脂平板上挑去纯菌落制成肉汤。
为保证药敏试验的准确度和精度，必须对接种菌液的浓度做相应的控制。
因此，将菌液稀释并校正浊度至0.5麦氏标准浓度，稀释时使用无菌肉汤或生理盐水，此时菌液的浓度约为1.5×108CFU/mL。
4.接种平板在超净工作台中，用量筒量取15mL配置好的灭菌培养基，倒在平板中，冷却凝固。
吸取稀释好的菌液500μL于洁净的灭菌试管中，加入4500μL的培养基，冷却到不烫手，摇匀，均匀倾倒置已凝固的平板表面，放置冷却至凝固。
5.粘贴药敏纸片用纸片分配器或无菌镊子取纸片（直径6mm，厚度1mm），贴于平板表面，并用镊子尖轻压一下纸片，使其贴平。
每张纸片的间距不小于24mm，纸片的中心距平板的边缘不小于15mm。
纸片扩散法药物敏感试验
纸片扩散法药物敏感试验若只根据是否出现抑菌环而不考虑抑菌环的直径大小来判断细菌是否对抗菌药物敏感的实验方法，其结果是不正确的。
而纸片扩散法试验是应用标准的方法学原理，根据抑菌环直径大小与最低抑菌浓度的相关性，结合临床上已知敏感或耐药菌株的状态，其结果是可靠的。
WHO推荐K-B法，其目的在于技术的简单和可重复性。
本法特别适用于肠杆菌科细菌，也可用于快速生长的致病菌，但不适用于其他细菌，如嗜血杆菌、奈瑟菌、专性厌氧菌及酵母样菌等。
无论用哪种方法接种，只要质控菌株的抑菌环在预期范围内，均可按同一解释标准报告结果。
但并非从感染患者分离到的微生物都必须做敏感试验，对于污染、机体共生的正常细菌群和那些与感染无关的细菌，可不必做敏感试验，只有那些被认为引起感染的微生物，应先分离提纯、鉴定菌种后再做敏感试验。
试验方法：一、试验材料：(一)培养基：Kirby-Bauer法指定用Mueller-Hinton琼脂。
多年大量的有关敏感试验的方法学研究，均采用该培养基；维持细菌正常发育，绝大多数细菌在此培养基上生长良好。
此培养基不拮抗抗菌药物活性以及商品的批次间差异等方面均优于其他培养基。
若检测肺炎链球菌的敏感性时，须在培养基中加5％的脱纤维羊血，制成血平板。
测嗜血杆菌及淋病奈瑟菌的敏感性时，在培养基中须加入1％血红素和 2.5mg/ml 辅酶I后应校正pH 7.2～7.4。
制备MH琼脂平板应用直径90cm平皿。
在水平的实验台上倾制。
琼脂厚为4mm，允许误差为土1mm。
琼脂凝固后，应测一下pH。
琼脂于板应放4℃保存，在7日内用完。
若当天不用，用塑料袋密封包装贮藏于冰箱（2-8℃）。
每批平板都应抽样，在30-50℃下培养24h或更长时间检查是否被感染。
MH琼脂培养基配方(1L)：Beef Extract 2.0g Acid Hydrolysis of Casein 17.5gStarch 1.5g Agar 17.0gFinal PH 7.3 at 25℃高压灭菌后立即水浴冷却至45-50℃。
实验6：纸片扩散法测定微生物的药敏性
实验6 抗生素等对细菌的药敏性检测antimicrobial susceptibility testing in vitro（圆盘滤纸片法disc diffusion test）一、实验目的：1、了解抗生素及化学试剂对微生物生长的影响2、掌握不同化学试剂的作用原理、常用浓度及使用方法二、实验原理许多微生物可以产生抗生素，能选择性的抑制或杀死其他微生物。
凡是抗菌谱即抗菌范围不广泛的抗生素称为窄谱抗生素，如青霉素只对革兰氏阳性菌有抗菌作用，而对革兰氏阴性菌、结核菌、立克次体等均无疗效，故青霉素就属于窄谱抗生素。
原来窄谱的抗生素如青霉素经过改造，产生了许多半合成的青霉素，扩大了原来的抗菌范围，如氨苄青霉素，不但对革兰氏阳性菌有效，而且对革兰氏阴性菌也很有效，对伤寒杆菌、痢疾杆菌效果也不错。
不同化学药品或同一化学药品对不同微生物的杀菌能力不同，此外，试剂浓度、作用时间及环境条件不同，其效果也不同。
应用前需进行试验，灵活选择。
三、实验器材1、菌种：培养24~28 h大肠杆菌、金黄色葡萄球菌斜面菌种。
2、培养基和试剂：牛肉膏蛋白胨培养基，大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的菌液3、仪器与其他用品：无菌平皿，无菌吸管（1ml），酒精灯，接种环，涂布棒，无菌滤纸片，无菌镊子，记号笔, 消毒棉球和培养箱。
四、实验步骤（以金黄色葡萄球菌操作为例）（1）菌液制备：将待检菌接种于普通营养琼脂平板，37℃培养16～18小时，然后挑取普通营养琼脂平板上的纯培养菌落，悬于3ml生理盐水中，混匀后与菌液比浊管比浊。
以有黑字的白纸为背景，调整浊度与比浊管（0.5麦氏单位）相同。
（2）倒平板：将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基溶化后倒平板，注意平皿中培养基厚度均匀，倒3套平板。
（平板厚度均匀，滤纸片大小一致）（3）涂平板：无菌操作，用无菌棉棒儿蘸取菌液（金葡）。
将多余菌液在液面上方管壁内轻轻旋转挤出，涂布在MH琼脂平板整个平面三次，每次旋转60度，最后沿周边绕两圈，保证涂均匀。
大肠杆菌对几种抗菌药物的药敏试验
Ｄｏ Ｉ ．９ ９Ｊ １ Ｎ．６ １ ６ ２ ２ ．８ ０ ３ ：０ ３ ６ ／ ． １ ＳＳ １ ７ — ０ ７．０１ Ｏ ．２ ２
肟、 普康 和阿莫 西林 ， 进行 药敏试验 ， 有筛选 有效 的抗菌药
物。 １ 材 料 与 方 法
已经灭 菌的空平皿 内 ， 每皿约 １～ ０ （ ４ ｍ厚 ）冷却后 ８ ２ｍＬ 约 ｍ ，
倒 置放入 ３ ￣恒温箱过夜 ， ７Ｃ 经无 菌检验合格后置冰箱备用 。 料 高压灭 菌锅 ，规格 ＨＶ 一 ０型 ， ｔ Ｅ５ Ｅ
每管 ５ ，２ ℃高压 １ｍｉ， ｍＬ １ １ ５ ｎ 冷却后放入 ３ ｃ恒温箱过夜进 ７Ｃ
行无菌检验 。见液体 清澈 ， 透明 ， 无菌产生 ， 证明合格 ， 备用。
或少数几种抗生素 ， 而且能够耐药多种抗生素。由此而造成 的危害 十分严 重 ， 它不 仅使抗生素 的疗 效降低 ， 而且使用剂 量增大 ， 疗程延长 ， 死亡率升高 和增加 了治疗 的费用 ， 不但给 养殖业带来巨大的经济损失 ，也极 大地影响 了食 品的安全 ， 危害 了人类 的身体健康 。 本实验应用 了 ８ 种血清型的大肠杆
学实验兽药厂实验室提供 。 １ ． 培养基 ．２ １ 普 通 肉汤 ， 营养琼脂 ， 麦康 凯琼脂均购 自杭
州天和微生物试剂有 限公司。 按说明书方法制成营养琼 脂斜
１ ． 干燥药敏试纸 的制备 ： ．４ ２ 用杭州天 和微生物有 限公 司提 供 的直径 ６６ ． ｍｍ的滤纸片 ５ ０片 ， 置青霉素小瓶内 ， 包扎好瓶 口，２ 。高压灭菌 ３ ｒｎ 取 出小瓶置于温箱烘干 ， １１ｃ ０ ｉ， ａ 按每张纸
抗生素对细菌的选择作用实验的优化
在本轮实验的第六代培养物中，仅有两种抗生 素(庆大霉素、氨节西林)培养物抑菌圈直径与第一 代表现为极显著差异，而其余12种抗生素培养物抑 菌圈直径则与第一代无差异(P>0.05)。从本探究活 动的实验原理看，抑菌圈直径的缩小显然是细菌通 过基因突变产生了获得性耐药性。但基因突变概 率较低，一般仅为10-'°~ IO",且自发突变是随机且 非定向性的⑶。可见，在连续培养过程中，观察到“某 种抗生素培养物抑菌圈直径变小”的现象是小概率事 件。因此,在教学实践中，为提高观察概率，建议以分 组的形式至少选择10种以上抗生素实施活动。 3.3抑菌圈直径误差的来源及操作建议
最后，科学处理数据。为增加实验结果的可信 度，建议使用相关统计软件(如SPSS等)对不同代数 培养物抑菌圈直径的测量数值进行方差分析，有统 计学差异的方能视为抑菌圈直径发生了改变。
参考文献 [1] 朱正威，赵占良.普通高中教科书生物学必修2•遗传与进
化[M].第一版.北京:人民教育出版社,2019. [2] 杜丛，王继华，马志玲，等.常见肠杆菌属细菌的耐药性研
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实验谶十与际
显著差异(P<0.01),其余12种抗生素培养物抑菌圈直 径则与第一代无差异(P>0.05)。
氨节西林和庆大霉素组培养物抑菌圈直径变化 如图1所示。在培养过程中，庆大霉素组抑菌圈直径 呈现持续下降趋势，氨节西林组则从第四代开始出 现较为明显的下降。两组第六代培养物抑菌圈直径 分别较第一代减小16.8%和28.4%,表明在这两种抗 生素的选择用力下，已逐代筛选出部分耐药菌株。
教材采用的纸片扩散法只是一种定性的实验方
大肠杆菌药敏试验简易方法
大肠杆菌药敏试验简易方法近年来，随着养鸡业的迅猛发展，鸡大肠杆菌病的发病率和死亡率也不断增加，现已成为危害养鸡业（特别是肉鸡）最为重要的疾病之一，为细菌病之首。
因此，广大养鸡户谈之色变，没有比感染病毒病又继发大肠杆菌病更糟糕的了。
正因为如此，抗生素得到了大量广泛的应用，又由于大肠杆菌对抗生素容易产生耐药性，所以大肠杆菌的耐药性问题日益突出。
如何解决这个问题将是畜牧兽医工作者今后工作的重点。
而就目前来说，通过抗菌药物敏感性试验（药敏试验）选择敏感药物对鸡群进行预防和治疗是降低大肠杆菌病发病率和死亡率的有效手段。
标准的药敏试验（纸片扩散法）比较繁琐，要先进行细菌培养，再进行药敏试验，试验设备要求高，基层兽医诊疗机构很难做到，现介绍一种简易药敏试验方法（纸片扩散法［1］）。
1试验方法和步骤1.1试验设备恒温培养箱1台、干燥灭菌箱1台、酒精灯1个、接种棒（带接种环）1个（接种环可用回形针自制）、手术剪1把、镊子1个、普通营养琼脂1瓶、玻璃平皿（直径90mm）数个、烧杯（500ml）1个、玻璃棒1个、普通电炉1台、定性滤纸1盒、蒸馏水适量、生理盐水适量、小玻璃瓶（如链霉素瓶）数个（洗净晾干）、钢笔1支、细针头数个、高压蒸汽灭菌锅（可选）1个、普通天平1台、药勺1个、尺子1个。
1.2普通营养琼脂平皿制备1.2.1平皿消毒将玻璃平皿洗净，晾干。
用干燥灭菌箱120℃灭菌1小时；也可用酒精灯火焰消毒，将玻璃平皿内壁靠近火焰，同时慢慢转动平皿使之均匀受热，待平皿内壁上水珠烤干并发烫为止。
1.2.2琼脂消毒营养琼脂与蒸馏水（或生理盐水）以3g：100ml的比例加入烧杯（先加蒸馏水，后加营养琼脂），用电炉加热同时用玻璃棒搅拌，使营养琼脂溶化均匀。
如有高压蒸汽灭菌锅可将溶化的琼脂液装入生理盐水瓶中（不超过其容量的2/3），瓶口留一通气孔（一般用16号针头刺入瓶盖），将瓶站立放入锅内，加热至121℃保持15分钟即可；如无高压锅可直接用电炉加热至沸腾后立即将烧杯从炉上拿下来，待泡沫消了，再放到炉上，如此煮约20分钟（煮时不断搅拌）。
抗菌药物敏感试验实验
无菌试管、刻稀释法
K-B法操作方法
操作注意事项：
菌液应在15分钟内接种完毕 接种后，平板放置时间不要超过5min 注意纸片距离
肉汤稀释法操作方法
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
M-H肉汤(ml)
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
抗生素(ml) 菌液(ml)
2
2
2
2
2
2
2
2
2弃 －
去
0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
35℃孵育16~18h，观察结果
实验内容
第二次 1.观察K-B法的结果 2.观察肉汤稀释法的结果
K-B法结果解释
测量抑菌圈直径，参照CLSI的标准解释结果。
20mm
金黄色葡萄球菌抗菌药物敏感性试验结果判断
大肠埃希菌抗菌药物敏感性试验结果判断
实验目的 1.掌握纸片扩散法（K-B法）和肉汤稀释法
的原理、操作方法、结果的判读及其临床 意义。 2.掌握纸片扩散法和肉汤稀释法的质量控制。
实验内容 纸片琼脂扩散法（K-B法） 肉汤稀释法
实验器材
1. 菌种： 金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌 2. 培养基：水解酪蛋白琼脂（MH琼脂）、MH肉汤 3. 抗菌纸片：青霉素（PEN）、庆大霉素（GEN）、
临床常用细菌药敏试验方法
临床常用细菌药敏试验方法
临床常用的细菌药敏试验方法主要包括：
1. 纸片扩散法：常用于测定细菌对抗生素的敏感性。
将含有不同抗生素的纸片放置在含有细菌的琼脂平板上，通过观察纸片周围出现的抑菌圈直径来判断细菌对抗生素的敏感性。
2. 微量稀释法：通过在微孔板中加入不同浓度的抗生素溶液，然后加入含有细菌的培养基，通过观察不同抗生素浓度下对细菌的抑制情况来确定细菌对抗生素的敏感性。
3. E测试法：通过在含有细菌的琼脂平板上放置带有梯度抗生素浓度的试纸，然后观察梯度上的细菌生长抑制情况，从而确定细菌对抗生素的敏感性。
4. 斑点法：将细菌培养在琼脂平板上，再在平板上分别滴入不同的抗生素溶液，通过观察抗生素对细菌的杀灭程度来判断细菌对抗生素的敏感性。
这些方法在临床中常用于确定细菌对各种抗生素的敏感性，以指导医生选择合适的抗生素治疗感染。
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纸片扩散法测大肠杆菌对几种抗生素的敏感性
1 实验原理
将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测定菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分，溶解后便不断的向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度。
在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成透明的抑菌圈。
该抑菌圈表示药物对该种细菌的生长繁殖具有抑制作用。
通过测定抑菌圈的直径大小，可以判定药物的抑菌强弱，抑菌圈直径越大表示药物抑菌作用越强，抑菌圈直径越小表示药物抑菌作用弱，没有抑菌圈表示该药物没有抑菌作用。
并且，经稀释法测得的MIC的对数和用纸片测定相应的菌株得到的抑菌直径之间大致呈直线相关，因此将两种方法相对应地测试各种据菌株所得数据，进行统计学的相关回归分析处理，可得到一条回归线，依此可推断该菌株的MIC，两者呈负相关关系，即MIC 愈小，抑菌圈直径愈大。
2 实验材料
2.1 菌液
江山大农庄拉稀的猪仔肠道黏膜物中提取的大肠杆菌。
2.2药品
链霉素、四环素、多粘菌素B、万古霉素、庆大霉素、红霉素、氨苄青霉素、新霉素、利福平、青霉素、菌必治、羧苄青霉素。
3 实验步骤
3.1药敏纸片的准备
纸片内抗菌药物含量
抗生素纸片浓度
U/μg/片
抗生素
纸片浓度
U/μg /片
抗生素
纸片浓度
U/μg /片
氨苄青霉素10μg 链霉素10μg 万古霉素30μg 羧苄青霉素100μg 新霉素30μg 多粘菌素B 300U
头孢菌素类30μg 庆大霉素10μg 四环素类30μg
菌必治30μg 利福平5μg 红霉素15μg
3.2细菌的制备
从琼脂平板挑取新鲜分离的菌落数个或从保存的斜面上移种至3～5mLMH肉汤培养液中37℃培养2～8h，以待生长至轻微或中等浊度。
为保证药敏试验的准确度和精度，必须对接种菌液的浓度做相应的控制。
因此，将菌液稀释并校正浊度至0.5麦氏标准浓度，稀释时使用无菌肉汤或生理盐水，此时菌液的浓度约为1.5×108个/L。
3.3 接种平板
制备好的接种菌液必须在15min内使用。
用灭菌好的棉试子蘸取菌液，在管壁上旋转挤压几次，去掉过多的菌液。
然后用试子涂布整个培养基表面，反复几次，每次将平板旋转60°，最后沿平皿周边绕两圈，保证涂布均匀。
3.4 粘贴药敏试纸
待平板上的水分被琼脂完全吸收后开始贴纸片。
用镊子取纸片一张，贴在琼脂平板表面，用镊子尖轻压，使其贴平，纸片一旦贴上就不能再拿起，因为纸片中的药物已经扩散到琼脂中。
纸片间距离不小于24mm，纸片中心距平皿边缘不小于15mm。
直径为90mm的平板最好贴6张。
贴好纸片后，需在15min内置35℃培养箱内培养。
培养时，平板需在培养箱内单独摆放，否则中间的平板达不到培养箱内的温度而产生预扩散作用，平板培养18～24h后，读取结果。
4 结果判定
培养后取出平板，测量抑菌圈的直径。
抑菌圈的边缘以肉眼看不到细菌明显生长为限。
有的菌株可出现蔓延生长进入抑菌圈，磺胺类药的抑菌圈内会出现轻微生长，这些均不作为抑菌圈边缘。
按抑菌圈直径判断细菌的敏感性。
抑菌圈直径（mm）敏感度
20mm及以上极敏
15～20mm 高敏
10～14mm 中敏
10mm以下低敏
0mm 不敏
5 实验结果
如图
大肠杆菌对12种药物的敏感性
抑菌药物抑菌圈直径（mm）敏感度
链霉素12.56 中敏
多黏菌素B 9.61 低敏
庆大霉素14.57 中敏
羧苄青霉素24.51 高敏菌必治10.51 中敏
新霉素0 无敏
红霉素0 无敏
四环素0 无敏
利福平0 无敏
青霉素0 无敏
氨苄青霉素0 无敏
万古霉素0 无敏
大肠杆菌对12种抗菌药物的敏感性如上表所示。
从表中可以看出，大肠杆菌对多粘菌素、链霉素，庆大霉素三种抗菌药物抗菌药物敏感性是有所下降。
对羧苄青霉素还是有极高的敏感性。
由此可见，实验中所采用的大肠杆菌还未产生明显的耐药性。
该株大肠杆菌对多粘菌素、菌必治、链霉素和庆大霉素的敏感性有轻微的降低，说明有耐药性的产生。
所以应注重平时抗生素的合理使用。