PCR-DGGE技术及其在发酵食品微生物研究中的应用
PCR—DoGE／嗍技术在食品微生物分子生态研究中的应用
预实验 ， 主要是对扩增出的 １ＳｒＮ ６ Ａ片段的解链性质及 Ｄ
所需的化学变性剂浓度范 围或温度梯度进行分析 ， 选择 最佳 的变性梯度 ； ⑤制备 Ｄ Ｇ Ｇ Ｅ凝胶 ； ⑥得到样品的特异 性指纹图谱 ， 进行 Ｄ Ｇ ／ Ｇ Ｅ分析 。 Ｇ ＥＴＧ
２ Ｐ ＣＲ—ＤＧＧ】 Ｔ Ｅ 在微 生 物 生态 研 究 中的 ＧＧ 优 势
中图分类号：Ｑ １ ． 文献标识码： 文章编号 ： ０ － ５ １２１ ）７－ ０４— ３ Ｔ ６ ９８ Ａ １ １ ８８ （（７ ０ ０９ ０ ０ ０ Ａｐ ｉａ ｉ ｎ ｏ ｐｌ ｔｏ ｆＰＣＲ —ＤＧＧＥ／ＴＧＧＥ ｏ Ｆｏ ｄ ｉｒ ｏ ｇ ｎｉｍ ｏ ｅ ｕｌ ｒ Ｅｃ ｌ ｇ ｃ ｔ ｏ Ｍ ｃ ｏ ｒ ａ ｓ Ｍ ｌｃ ａ ｏ ｏ ｙ
ｌｇｃ ｏ ｄ ｔ ｎ ｅ ｎｒ ｄ ｃ ｄ ｉ ｉ ｐ ｐ ｒ ｏ ｉ ａ ｃ ｎ ｉ ｓ ｗ ｒ ｉ ｔ ｕ ｅ ｎ ｔ ｓ ａ ｅ ． ｌ ｉ ｏ ｅ ｏ ｈ
Ｋｅ ｒ ｓ Ｐ ｙ ｗｏ ｄ ： ＣＲ—ＤＧＧ ／ Ｇ Ｅ Ｔ ＧＥ；Ｆ ｏ ｉ ｒｏ ｇ ｎ ｓ ｏ ｄ ｍ ｃ ｏ ｒ ａ ｉｍ；Ｍｏｅ ｕａ ｏｏ ｙ ｌｃ ｒ ｅ ｌ ｇ ；Ａｐ ｌ ａ ｏ ｌ ｃ ｐｉ ｔ ｎ ｃｉ
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江西农业学报
２０ ，９ ７ ：４～ ６ ０７ １（）９ ９
ＡｃａＡｇｉｕｔｒｅＪａ ｇ ｉ ｔ ｒ ｌ ｕａ ｉｎ ｘ ｃ
Ｐ Ｒ— Ｇ Ｅ Ｔ Ｇ Ｃ Ｄ Ｇ ／ Ｇ Ｅ技术在食 品微生物分子生态研 究 中的应 用
徐 振， 徐幸莲， 周光宏
变性梯度凝胶 电泳其原理是使用一对 特异性 引物 Ｐ Ｒ扩增微生物 自然群体的 １ＳｒＮ Ｃ ６ Ｒ Ａ基 因， 产生长度
PCR技术及其在食品微生物检测中的应用
PCR技术及其在食品微生物检测中的应用 马健聪 佛山市食品药品检验检测中心物质生活的高速发展所带来的不仅仅是人们生活水平的不断提高，同时也促使人们对于食品安全问题越发重视。
在当前社会生活中人们已经意识到食品安全对于健康生活的重要影响，同时也能够促进我国快速建成小康社会。
在食品安全检测中，其主要的检测目的是检测食品中的微生物成分。
利用ＰＣＲ技术能够高效快捷且准确的检测出食品中所存在的微生物以及相关病菌，提高了食品安全检测的质量以及效率，同时也能够让人们在日常食用食品时更加的安全放心。
食品安全检测的重要性正所谓民以食为天，保证食品安全，就是在保证我国社会的有序发展。
在当前我国食品种类繁多，但是很多商家的其自身的安全意识不够，进而导致食品问题频发。
ＰＣＲ技术在各种微生物检测中的应用在金黄色葡萄球菌检测中的应用。
在食品中出现金黄色葡萄球菌的情况多存在与日常食用的蔬菜和瓜果中，作为人们日常必须要补充的食物，一旦其中所蕴含的金黄色葡萄球菌难以被清除干净就会导致人们的身体健康出现问题。
金黄色葡萄球菌在经过变异之后，其难去除程度相对于较大，多数情况下普通的农药难以彻底的清除，如果使用过量的农药会导致其中存在农药残留，这种残留物会直接影响人类的身体健康，为此必须要对瓜果和蔬菜的中的金黄色葡萄球菌进行仔细的检查，防止其中存在金黄色葡萄球菌没有清除干净。
金黄色葡萄球菌会在瓜果和蔬菜中大量的繁殖并且会产生对人体有害的ＳＥ类型毒素，这种毒素会导致人类在食用食物的时候直接出现食物中毒，而利用ＰＣＲ技术则可以清楚的检测出在瓜果和蔬菜中是否含有金黄色葡萄球菌，在多数情况下利用ＰＣＲ技术能够准确的检测出金黄色葡萄球菌的实际含量，其能够检测出±１ｐｇ的金黄色葡萄球菌，保证整体的测量结果精确且符合实际情况。
在绿脓杆菌检测中的应用。
在我们当前使用的食品中，还存在着绿脓杆菌这一对于人体有着极大危害的微生物。
绿脓杆菌长时间存在在食物中会对人体产生极大危害，利用ＰＣＲ技术对食品药品进行基因序列进行扩增，能够快速地检测出食品中是否含有绿脓杆菌。
PCR_DGGE技术及其在微生物生态学中的应用
PCR -DGGE 技术及其在微生物生态学中的应用张宝涛1,王立群13,伍宁丰2,石鹏君3(1.东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030;2.中国农业科学院生物技术研究所,北京100081;3.中国农业科学院饲料研究所,北京100081)摘要:现代分子生物学技术PCR -DGGE 是一种分析微生物群落的有效工具,可以用于研究生态系统中微生物多样性和群落动态性。
本文简要介绍了PCR -DGGE 技术原理及其在微生物生态学领域的应用,并对该技术的局限性进行了评价。
关键词:PCR -DGGE ,微生物生态学,现代分子生物学技术,微生物多样性,微生物群落动态性中图分类号:Q93811 文献标识码:A 文章编号:1672-5565(2006)-03-132-04收稿日期:2005-10-24;修回日期:2005-10-29作者简介:张宝涛(1980-),男,山东人,硕士研究生,主要从事环境微生物和应用微生物的研究.E -mail :jonbob @ 3通讯作者:王立群,男,黑龙江省人,教授,主要从事应用微生物学研究。
E -mail :W angliqun2@Application of PCR -D GGE in microbial ecologyZH ANG Bao -tao 1,W ANGLi -qun13,W U Ning -feng 2,SHI Peng -jun3(1.College o f life science ,Northeast Agricultural univer sity ,Harbin 150030China ;2.Biotechnology Research Institute Chinese Academy o f agricultural Sciences.Beijing 100081China ;3.Feed Research Institute ,Chinese Academy o f Agricultural Sciences ,Beijing 100081,China )Abstract :As a m odern m olecular technology ,PCR -DGGE is a power ful tool for the analysis of microbial communities ,which can be used to study the diversity and dynamics of microbial communities.The principle and the application of PCR -DGGE in microbial ecology is briefly in 2troduced ,while the limitations of this technique are evaluated in this paper.K ey Words :PCR -DGGE ;microbial ecology ;m odern m olecular technology 在微生物生态研究中,准确地分析测定微生物群体的类型和数量是非常重要的,因为微生物个体微小,结构简单,缺乏明显的外部特征,且难以依据生理生化特征进行分类鉴定。
PCR—DGGE技术及其在云南传统火腿微生物研究中的应用展望
等 ， 提供 优质 的信 息服务 以及 电子 商务 交易 平 台 ， 并 确 保 能够有 效 降低流 通成 本 和费 用 。 同时 还将 开 展 信 息交 流 ， 组织 产销衔 接 ， 可 作 为政 府 有 关部 门开 并
健 全 ， 往直 接减 弱宏 观调 控 的实 际效 果 全 国范 围 内合 理规划 建设 区域 集散 中心 ． 根 据我 国生 猪 产 业 发 展 规 划 ， 来 生 猪产 业 向 未 具 有 比较优 势 的地 区转移是 生 猪产 业 区域结 构 调整
聚 合 酶 链 式 反 应技 术 （ Ｃ Ｐ Ｒ技 术 ） 快 速 的研 究 传 统 发 酵 肉制 品 微 生 物 物 种 的 多样 性 ， 确 地 获 取 复 能 准
杂样品 中微生物的消长规律而不需要进 行微 生物 的传统培养 ， 因此被 广泛应 用 于各领 域的研 究。主要 介绍 了各种
Ｐ Ｒ—Ｄ Ｇ Ｃ Ｇ Ｅ技 术 在 发 酵 肉制 品 微 生 物 方 面的 应 用 ， 并对 其 在 云 南传 统 火腿 微 生 物 中的 研 究 应 用做 出展 望 。 关键词 Ｐ Ｒ—Ｄ Ｇ Ｃ Ｇ Ｅ 微生物 火腿 发 酵 肉制 品
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２ １ 第 ９期 ０ ２年 总 第 ３７期 ７
Ｐ Ｒ—Ｄ Ｇ Ｃ Ｇ Ｅ技 术 及 其 在 云 南 传 统 火腿 微 生物 研 究 中的应 用 展 望
王
摘 要
燕
朱仁俊 云南农 业大学食品科 学技术 学院
云 南昆明 ６ ０ ０ ５２ １
川 火腿 ， 中宣威火 腿 以其 “ 穿绿 袍 ， 香 味美 ， 其 身 色 咸 淡相 宜 ， 味独特 ， 而不腻 ” 特点 名扬 海 内外 ， 风 食 等 与
PCR 技术在食品微生物检测中的应用
3 结语
随着 PCR 技术的快速发展与不断 完善，将食品微生物检测中发挥出越 来越重要的作用。站在长远发展角度 来看，免疫学、分子生物学、自动化 和计算机技术发展过程中，能够促使 食品微生物检测更加便捷，灵敏度更 高。这要求人们继续加大对 PCR 技术 的研究力度，朝着高效率、高精度和 高标准方向不断发展，提升食品微生 物检测质量，为人类食品安全和营养 健康创造更有利的条件。 参考文献
Technology 科技 分析与检测
PCR 技术在食品微生物检测中的应用
□ 袁 莹 重庆化工职业学院
摘 要：食品安全与人体健康、国计民生等密切相关，其中微生物是引起各种疾病的主要根源之一，如何准确、快速将 食品中的微生物检测出来显得尤为重要。PCR 技术在食品微生物检测中应用非常广泛，不仅检测速度快，准确性较高，也在 抗原结构复杂的细菌鉴定上优势非常显著。本文将简述 PCR 技术的优势，并探讨其在食品微生物检测中的具体应用方法。
[1] 刘 杰 , 陈 璐 .PCR 技 术 在 食 品 微生物检测中的运用 [J]. 食品安全导 刊 ,2018(15):113-115.
[2] 张媛 .PCR 技术在食品微生物检 测中的应用 [J]. 现代食品 ,2018(7):8990.
110 食品安全导刊 2019年1月
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PCR-DGGE技术在环境微生物研究中的应用
PCR-DGGE技术在环境微生物研究中的应用摘要：PCR-DGGE技术目前已被广泛应用于环境微生物领域。
介绍了PCR-DGGE技术的原理及其优点，概述了PCR-DGGE技术在环境工程废水微生物处理中的应用，分析了PCR-DGGE技术用于生物处理系统中微生物群落多样性和动态性研究的现状，并展望了其应用前景。
关键词：PCR-DGGE技术；微生物；应用变性梯度凝胶电泳（denatured gradient gel electrophoresis，DGGE）技术是目前研究微生物群落结构主要分子生物学方法之一[1]。
该技术系由Fischer和Lerman于1979年最先提出一种用于检测DNA突变电泳技术，该技术使传统琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测分辨精确度提高至一个核苷酸残基差异水平。
Muyzer等在1993年首次将DGGE电泳检测技术应用于微生物群落结构研究，并指出该技术在揭示自然界微生物群落遗传多样性和种群差异方面具有明显优势。
DGGE技术能快速、准确鉴定自然环境或人工环境中微生物种群，并能揭示复杂微生物群落结构演替规律、微生物种群动态、基因定位和表达调控的评价分析，已被广泛应用于微生物分子生态学研究各领域。
1 PCR-DGGE技术原理DGGE技术是使用具有化学变性剂梯度的聚丙烯酰胺凝胶对DNA进行电泳，该凝胶电泳时能够有区别地解链PCR扩增产物。
在进行变性梯度凝胶电泳时，长度相同而在碱基序列上存在差异的DNA双链的解链需要不同的变性剂浓度。
序列不同的DNA片段就会在各自想用的变性剂浓度下变性，发生空间构型的变化。
起初双链DNA以现状向正极移动，随着变性剂浓度的增加，DNA中具有低G+C含量的序列的部分被打开，而高G+C含量的部分仍保持双链。
DNA双链一旦解链，DNA分子形成端部的叉状或中间的环节（即DNA部分熔化）。
其在聚丙烯酰胺凝胶中的电泳速度将会急剧下降，以至停留在其相应的不同变性剂梯度位置，染色后可以在凝胶上呈现为分开的条带。
PCR-DGGE技术及其在发酵食品微生物研究中的应用
品的 Ｄ Ｇ Ｇ Ｅ分析 ； ⑦图谱分 析 ； 带序列分 析。 ⑧条 ２ Ｐ ＲＤ Ｃ －‘ 技术在食品微 生物研 究中的应用
（） 析食 品 中微 生 物 的 多样 性 。从 食 品直 接 提 取 总 １分 Ｄ Ａ， Ｐ Ｒ扩 增 ， 过 Ｄ Ｇ Ｎ 经 Ｃ 通 Ｇ Ｅ得 到带 谱 。因为 每个 条 带很
江 芸 一 高峰 徐幸莲 ， ， ， 周光宏 （南 农 大 农 部 畜 品 工 质 控 重 开 实 室江 南 ２０；南 １ 京 业 学 业 农 产 加 与 量 制 点 放 验 ，苏 京 ｌ ５． ． ｏ ２ ９
京师范大学金陵女子学院食品科学系 ， 江苏南京 ２０９ ） １０ ７
摘要 多聚酶链反 应 一变性梯度 凝胶 电泳 分析技术 （（ ．Ｇ Ｅ 是近 年 来微 生 物学研 究 中应 用较广 泛的分 子技 术之 一 。介 绍 了 Ｄ Ｇ Ｐ Ｄ Ｇ ） ＧＥ 的基 本原理及 其在 食品微 生物 学研 究 中的应 用 ， 着重 阐述 了 Ｐ ＲＤ Ｇ 在 发酵食 品研 究中的应 用进展 。 Ｃ －Ｇ Ｅ 关键词 变性梯度 凝胶 电泳 ； 食品微 生物 学； 酵食品 发 中图分 类号 Ｑ ０ 文献标识 码 Ａ ５３ 文章编 号 ０ １ — ６ １２０ ）１ ０５ １ ０ ５７ ６ １ （ ＂２ — ６９ — ３ ０／
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安徽农业科学，ｏｒａ ｏ Ａ ｈｉ ｇ ． ｃ．０ ７３ （１ ：５ １ ５ ３ Ｊｕｎｌ ｆ ｎ ｕ Ａ ｉ Ｓｉ２０ ，５２ ）６９ —６９
责任编辑
孙红忠
责任校对
李菲菲
Ｐ Ｒ Ｄ Ｅ技 术 及 其在 发 酵食 品微 生物 研 究 中的应 用 Ｃ ． ＧＧ
￣ Ｒ－ ＤＧＧＥ ｎｄ ｉ ｐｌ ａｉｎ ｉ ｌｅＲｅｅ ｒｈ ｎ ｒ ｅ ｔｄ Ｆｏ ｄ １ｆ ｒｂｉｌｇｃ ｌ ａ ｔ Ａｐ ｉ ｔｏ ｎ ｈ ｓａ ｃ ｏ Ｆｅｍ ｎ ｅ ｏ ｉ ｏ ｏｏ ｉａ ｓ ｃ Ｖｃ
DGGE技术及其在微生物研究中的应用
变性梯度凝胶电泳--DGGE摘要：变性梯度凝胶电泳（DGGE）技术具有精确、快速、易操作等特点, 能克服传统微生物研究方法的不足，作为一种分析微生物群落的有效工具被广泛的应用于现代微生物研究。
本文介绍了DGGE技术的原理、操作步骤及应用情况，并讨论了其缺点及应用前景。
关键词：DGGE 分子生物学微生物群落菌群分析1 引言变性梯度凝胶电泳（Denaturing gradient gel electrophoresis，DGGE）技术是由Fischer 和Lerman[1]于1979 年首先提出了, 并将其用于医学上基因点突变的检测。
与传统的琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳相比, 这项技术可以分辨只有一个碱基差异的基因序列。
1985年, Myers RM[2]等人首次在DGGE中使用“GC夹板”和异源双链技术, 使该技术日臻完善。
1993年，Muyzers[3]等人首先将PCR技术与DGGE结合，在微生物生态学领域首次采用PCR-DGGE方法分析检验rRNA的基因,证实了该技术在揭示自然界微生物区系的遗传多样性和菌群差异方面具有独特的优越性。
此后的十几年内DGGE技术在研究微生物多样性和种群差异上已成为一种重要工具, 并被广泛用于活性污泥、池塘底泥、污染土壤、海洋、冰川等环境样品以及食品、动物肠道中的微生物多样性检测和种群演替的研究。
2 基本原理PCR-DGGE技术主要是先利用特定的引物合成一定长度的rRNA的基因序列，然后利用梯度变性胶来分离DNA片段。
梯度变性胶是在一定的浓度聚丙烯酰胺凝胶中添加不同浓度的变性剂，使变性剂形成由低到高的线性梯度。
电泳时，DNA在胶中的迁移速率仅与其分子大小有关，当DNA到达具有一定浓度变性剂时，DNA双链开始解链，迁移速率开始降低。
当DNA双链完全分开时，其电泳速率急速下降。
由于不同的DNA片段碱基组成存在差异，其变性条件也有所不同，在凝胶上会停留在不同的位置，经染色后形成不同条带。
PCR技术在食品微生物检测中的应用
PCR技术在食品微生物检测中的应用作者：张昳来源：《中国食品》2018年第19期摘要：本文介绍了PCR方法的几种原理，主要就PCR技术的各种特性、检测速度、准确性、在食品微生物检测中的应用等进行分析讨论。
关键词：微生物检测;PCR;食品聚合酶链反应就是常说的PCR技术，是由美国学者提出的一种特定DNA片段扩增的方法。
因为该技术存在其特殊的性质特征，又不断应用于食品微生物检测工作中，因此，该技术的运用不但可以让食品微生物的检出率不断提高，更重要的是可以让微生物一些导致人类患病的安全隐患问题排除。
一、关于食品微生物的PCR检测技术PCR的通用检测。
PCR检测技术的原理非常简单，在DNA模板与其对应引物的混合物质当中添加适当的聚合酶，利用催化的DNA片段逐渐进行扩增，在此过程中主要是按照DNA 模板来进行，并且需要通过各个周期，在这些周期内均会创造出各有差别的DNA片段，聚合酶链式反应的产物在此过程中会不断增加。
其实，早在几十年前就有研究人员对沙门氏菌的基因进行设计，而研究过程也就是对PCR检测技术进行使用，在检测过程中，检测出的菌类极多，其检出率大約可达到99.5%左右。
由此可知，PCR检测方式是可以大幅度推广的[1]。
PCR的多重检测。
PCR多重检测技术和以往的PCR检测技术具有较为相似的大量构成，在此当中，综合的反应体系应该由大量的引物构成，混合物内的引物主要呈现出互补关系。
在反应罐内添加进种类各异的DNA片段，不仅能够令以往检测的特征仍然存在，还能够简化检测的流程，对更多的基因进行检测。
不过，这种检测方式也存在一定缺点，比如敏感度、检测效率等，因此，需要较为客观的对问题进行分析。
在多年的发展中，各类学者以及专家都对其检测方式进行了研究，而其中最有典型意义的菌种就是沙门氏菌以及大肠杆菌。
通过研究数据可以看出，其检测率大约在63%，具有一定的可行性。
RT-PCR。
逆转录聚合酶联反应是其全称，原理是对细胞中的RNA进行提取并作为模板来进行CDNA获取，分析并作为模板来对PCR进行扩增，以较好地表示基因。
PCR技术在食品微生物检测中的应用
PCR技术在食品微生物检测中的应用摘要：食品安全是公众关注的热点问题，也是世界公认的最难解决的公共卫生问题。
近年来，随着经济水平的大幅提高，人们的物质生活比过去有了很大的改善，对食品安全也提出了更高的要求。
如何提高食品微生物检测的结果和质量，已成为当前食品安全工作的发展趋势。
常见的致病菌包括副溶血性孤菌和沙门氏菌等。
对这些致病菌的高效检测可以有效保证食品安全。
但要做好上述工作，需要成熟的检测技术。
聚合酶链反应(PCR)因其方便、快速、灵敏而被广泛应用于食品微生物的检测。
本文从PCR技术的应用特点出发，分析了PCR技术在食品微生物检测中的应用，希望能为食品检验人员和相关研究人员提供参考。
关键词： PCR技术；食品微生物检测；应用引言食品微生物检验直接关系到人们的健康，随着人们对食品安全的重视，对食品微生物检验的质量要求越来越高。
为了改进食品生物检测模式，保障人们的食品安全，有必要采用新的检测方法。
聚合酶链反应(PCR)作为新兴的食品微生物检测技术之一，不仅可以优化检测过程，还可以提高检测的准确性。
1PCR技术的基本应用特点1.1操作便捷在食品微生物检测过程中，工作内容非常繁琐和复杂。
全面提高检测效率和质量，需要以科学便捷的检测操作模式为核心条件。
根据对传统食品微生物检测方法的分析，大多数检测方法在具体应用过程中相对复杂。
虽然实现了自动检测模式，但其整体工作效率难以进一步提高，进而影响整体工作效果。
PCR技术的逐渐完善，可以在食品微生物检测工作中起到极强的促进作用，其主要优势特点是具备较强的便携性，自动化检测技术十分完善，可以实现一人操控目标，这不仅提升了食品微生物检测工作效率，同时可以进一步拓展食品行业发展范围，强化食品微生物检测工作水平。
1.2准确率高在当前的社会背景下，随着食品工业的不断扩大和发展，食品微生物的种类也逐渐增多。
如果坚持使用传统的单一检测技术和检测方案，而不善于更新和完善检测手段，就会影响食品微生物检测的准确性。
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3.2 PCR-DGGE技术在収酵食品微生物研究中的应用 3.3 DGGE技术在土壤微生物多样性中的应用
3.1 PCR-DGGE技术在食品微生物研究中的应用
(1)分析食品中微生物的多样性 (2)食品中微生物变化的动态监测 (3)食品中微生物的快速鉴定
3.2
PCR-DGGE技术在发酵食品微生物研究中的应用
PCR-DGGE技术可用于鉴定収酵食品中某些特
定细菌,检测収酵食品中微生物多样性,跟踪収酵食品
中微生物生态变化,在线监测収酵过程,比较丌同产地
丌同生产工艺収酵食品的微生物生态特点等,该技术
在収酵食品微生物研究方面是一种有效、快速、简
捷、可靠的工具。
2 PCR-DGGE技术的操作过程
①样品预处理；
②样品DNA(或RNA)提叏及纯化； ③16S rDNA或基因片段的PCR(或RT-PCR)扩增； ④预实验(DGGE条件优化); ⑤制胶; ⑥样品的DGGE分析; ⑦图谱分析;
⑧条带序列分析。
3 PCR-DGGE技术的应用进展
PCR-DGGE技术及其应用
多聚酶链反应-变性梯度凝 胶电泳分析技术(PCR-DGGE) 可提供微生物种群的结构和进 化谱图，是近年来微生物学研 究中应用较广泛的分子技术之 一。
1
PCR-DGGE技术的基本原理
2 PCR-DGGE技术的操作过程 3 PCR-DGGE技术的应用进展
1 PCR-DGGE技术的基本原理
3.3 DGGE技术在土壤微生物多样性中的应用
(1) 土壤中难培养微生物生理类群多样性的调查
(2) 研究自然条件下土壤微生物的变化趋势 (3) 污染土壤微生物的多样性研究
DGGE是一种Байду номын сангаас将长度相同而序列丌同的DNA片段分离开
的电泳方法。其基本原理是：DNA分子中4种碱基的组成和排
列差异,使丌同序列的双链DNA分子具有丌同的解链温度。当双 链DNA分子在含梯度变性剂(尿素、甲酰胺)聚丙烯酰胺凝胶中
进行电泳时,因其解链的速度和程度不其序列密切相关,所以当某
一双链DNA序列迁移到变性凝胶的一定位置,并达到其解链温度 时,即开始部分解链,部分解链的DNA分子的迁移速度随解链程 度增大而减小,从而使具有丌同序列的DNA片段滞留于凝胶的丌 同位置,结束电泳时,形成相互分开的带谱。理论上认为,只要选 择的电泳条件如变性剂梯度、电泳时间、电压等足够精细,有一 个碱基差异的DNA片段都可被分开。