影响试管苗生根的因素

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组培微枝试管外生根的影响因素及其运用

组培微枝试管外生根的影响因素及其运用摘要：介绍了植物组培微枝试管外生根技术的概念,生根环节及技术要求、影响因素、试管外生根的优势及国内外应用情况,为植物试管外生根技术的应用及推广提供参考。

关键词：组织培养; 微枝; 试管外生根;Abstract：In this paper,ex-vitro rooting technology of micro-cuttings and some related factors were introduced,which included the concept,the processes and the technical requirements,the influencing factors,the advantages,and the application of this technology. The paper will provide references for the application and promotion of plant ex-vitro rooting technology.Keyword：Tissue culture; Micro-cuttings; Ex-vitro rooting;随着国内外植物离体快速繁殖研究的飞速发展,组培技术已经成为商业化育苗的重要手段,得到了广泛应用,其过程主要包括:诱导茎芽(shoots或micro-cuttings)发生、增殖增壮、诱导生根、驯化移栽和成苗培育。

这一过程中,每个环节的成败都将决定能否实现产业化微繁。

但是,其中的生根诱导和驯化培育是育苗程序中的关键技术环节,它将关系到离体快繁生产苗木的成活率、根系发育、苗木发育和健壮程度、无性系增益,以及苗木培育成本等诸多问题。

因此,如何提高组培微枝生根和移栽成活率就成为工厂化育苗生产中的重中之重。

在组培体系建立过程中,存在部分植物试管内生根困难、根系发育不好、移栽成活率低等问题,同时为了缩短育苗生产周期、降低培养成本,在原有生根和驯化程序的基础上进行了改进。

桑树试管苗生根因素研究

基本培养基１２，加不同的激素种类／ＭＳ附
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２
蚕
学
通
讯
２２卷
整肌醇浓度，计５个梯度，：ｘ３、ｘ９（中１示肌醇浓度与原来ＭＳ培养基中相同，设即１、ｘ６、ｘ其ｘ表３、６、ｘ分别表示为原来ＭＳ培养基中肌醇浓度的３倍、ｘ９则６倍和９倍）添加ＩＡ．，１２。ＢＯ５以／ＭＳ＋ｍＡ．ｎｓｏ —Ｆｅ０５Ｉｏｉｌｒｅ作为对照。ｔ
பைடு நூலகம்
咖啡、香科柑橘、萄、桐科可可、青科苦丁茶（永林等，９３、薇科苹果（永忠等，芸葡梧冬陆１９）蔷史
１９马宝琨等，９４枣树（泉福等，９３金芳等，９６）胡桃（伟等，９４）植物试管９４．１９）张１９．１９．、陈１９．等的生根已进行了系统的试验，步已经建立起较为完整的培养体系。桑为多年生木本植物，初试管苗难以形成有效根，制了桑树的工厂化育苗。本实验研究各种条件下桑树组培苗的生根限效果，图探索一条诱导桑试管苗高效生根的途径。现将研究结果报道如下。试
（南农业大学农业部蚕桑学重点实验室中国重庆西４０１）０７６

外源激素对远志试管苗增殖和生根的影响

１２１培养基：ｍｕａｉａａｄｓｏｋＭＳ培养基为琏本．．以ｒｇｎｋｏ（）ｓ
培养基，附加不同种类和配比的外源激素（见表１２以及，）
０７．％琼脂和３％蔗糖，Ｈ５８ｐ．。
表１芽增殖培养Ｉ３）交设计正（
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山西医药杂志２００８年２月第３７卷第２期
ＳｍｘＭｅ，ｅｒａｙ２０Ｖｏ３，ｏ２ｈ￣ｉｄＪＦｂｕｒ０８，ｌ７Ｎ．
・
Ｉ８９・
・
中药种植・
外源激素对远志试管苗增殖和生根的影Ｈ向
５ｄ左右、株高２ｃｌｌ左右时，＾牛芽分功为芽，ｌ将＿人转接至添加不同外源激素的１２ＭＳ生根培养基『，养４／｛培１ｌ０ｄ后
００ ● ● ５．０５Ｏ． ● Ｏ ● ０ ● ０
１２３茎段培养：．．取生长约３０ｄ的无菌实生荫，成３切～５
ｃｌｎ长的带芽茎段，别接种于附加不同生长素伽胞分裂分
素组合的ＭＳ培养基中，２在６℃ ，０ｘ１／光照下２００ｌ，４ｈｄｕ０Ｏ ● ０Ｏ ● ０Ｏ ● 系，为远志试管苗的规模化生产及野生资源的保护５Ｏ了５Ｏ培养。３统计芽的增殖数，应Ｊｊｎｔｂ软件分析２５０２提供２０ｄ时并ｆＭｉｉａ筛选出最适合远志快速繁殖的培养恭，培养根据正交实

影响一品红试管苗生根的因素

ｄｕｕｐｅｉＢ．ｅＬ＋ＮＡ０２ｍｅＬＴｅｓｉｂｅｓｅｓｏｃｎａｏｄｃｔｅｔｍｅａｒｇｏｉｍｓｐ￣ｄｗｔＩＡ０５ｍｈ／Ａ．／．ｕｔｌｕＩｅｃｎｅ￣ｆｎａｕｕｐｒｔｅａｏｄｔｈａＤｉｎｌｒｅｕｏ
ａｅ．ｄ１０ｍＬＴｅｐｍｌｕｔｒｍｄｕｒｏｔｇｃｔｒｒｗｒｄｆｕｈｒｉｐｌｅｒａｉ１Ｓｍ－ｒ５ａ．ｅ．ｔａｃｕｅｅｉｍｆｏｎｕｕｅｆｏｂｅｓＥｐｂｈｃｒｍ／Ｍｅ０ｎ／ｈｏｉｌｏｒｉｌｏｔｅｏｏａｈｉｓ２
生根率。
关键词：品红；一组培苗；生根培养
中图分类号：６５２ｓ８．３文献标识码：Ａ文章编号：０２— ４１２０００６１０２８（０７）６— ０２—０３
ＦｃｏｓＥｆｅｔｇＲｏｔｇｏｌｎｌｔｉｐｏｂａＰｌｈｒｍａａｔｒｆｃｉｏｉｆＰａｔｅｎＥｕｈｒｉｈｃｅｉｎｎ
只有在适当的培养基和培养条件下进行培养，才
红、墨西哥红叶，为大戟科大戟属常绿灌木，其红色苞片非常娇艳，具有很高的观赏价值，为装作点冬季的优良花卉，我国北方花卉市场上极为在畅销，供不应求，深受人们的青睐…。
ＺＨＡＯｕｎ，ＷＡＮＧＹｕｘａＪａ－ｕｎ，Ｗ－ＮｎｙａＥＹｉ－ｕｎ，ＷＡＮＧＹｕｇｏ－ｕ
●
（ｑｔｎｎｉｅｈｌｙｏｅｅｏｇｏｏｙＳｎｉｇｉｕｕａｎｖｒｔ，Ｔｉｕ０００，ｈｎ）ＤｍｕｅｔｆＢｏｃｎｏ，ＣｌｇｏｔｏｇｌｆＡｒｎｍ，￣ｘＡｒｌｒｌＵｉｓｙａ３８１Ｃｉｃｔｅｉｇａ

培养基和培养条件对葡萄试管苗生根的影响

关键词：葡萄；体生根Ｉ离培养基；Ｈ值；ｐ培养条件
中圈分类号：６．Ｓ６３１文献标识码：Ａ文章编号：１０ —３５２０）６０２－６０３４１（０５０ —０４０
Ｅｆｅｔｆｄｆｅｅｔｍｅｉｎｕｔｒｏｄｔｏｓｏｏｔｎｆｃｓｏｉｒｎｄａａｄｃｌｕｅｃｎｉｉｎｎｒｏｉｇｆ
ｃｏｅｆｒｒｏｉｇｗａ５～２／ｒｓｏｏｔｎｓ１０ｇＬ．ｐｖｌｅｈｄｓｇｉｃｎｆｅｔｎｒｏｕｅ，ｏｔｄａｔｒｒｏＨａｕａｉｎｆａｔｅｆｃｓｏｏｔｎｍｂｒｒｏｉｍｅｅ。ｏｔｉ
Ａｂｔａｔｓｒｃ．Ｅｆｅｔｆｄｆｅｅｔｃｌｕｅｃｎｉｉｎｎｌｄｎｉｅｅｔｃｎｅｔａｉｎｏｕｒｓｎｇｒｆｃｓｏｉｆｒｎｕｔｒｏｄｔｓｉｃｕｉｇｄｆｒｎｏｃｎｒｔｆｓｃｏｅａｄａａｏｆｏ
ｉｉｒｆｅｔｔｂｌｎｌｔｆｔｓｖｎｆｒ．ｎｖｔｏｏｓ—ｕｅｐａｔｓｏｉｉｉｅａＬｔｅＶｉ
ＬＩＳｅｇ，ＨＡＮＧｈｎＬＩｒｉｇ，ｈｎＺＺｅ，ｎＹＡＮＧａｇｘｎＷＵｉｉｇＹＡＮＧ —ｏｇ。Ｇｕｎ — ｉｇ，Ｊ— ｎ，ｌＤｅｌｎＣＡＯｉｉＺ— ｙ
管苗生根．随着琼脂浓度的增加，根源基产生时间延迟，均根长和根冠比降低，平均根粗和生根数增加；平而生根数在３种温度条件下无显著差异，均根粗随温度的升高略有下降，均根长和根冠比随培养温度的升高而增加，３平平在５℃时降

白砂糖对大花萱草‘红运’试管苗生根的影响

ｔｈｅｓｉｎｇｌｅｓｈｏｏｔ，ａｎｄｗｅｒｅｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｉｎｏｃｕｌａｔｅｄｉｎｒｏｏｔｉｎｇｍｅｄｉａ１／２ＭＳ＋０ｗｈｉｃｈｃｏｎｔａｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｕｇａｒｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．
ｍｏｒｅｏｒｉｏｌｅ ’ｕｎｄｅｒｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅ／／ＺＨＡＯＹｕ一ｎ，ＣＨＵＢｏ — ｙａｎ，ＹＩＮＸｉｎ — ｙａｎ，ＬＩＵＭａｎ — ｇｕａｎｇ，ＬＩＪｉｎ — ｘｉａ，ＺＨＡＮＧ
（１．河北省林木良种工程技术中心，河北省林业科学研究院，石家庄０５００６１；２．河北省花卉管理中心）摘要：以白砂糖代替蔗糖，探讨白砂糖对大花萱草 ‘ 红运 ’ 试管苗生根生长的影响。将试管苗分为丛生芽芽块（不分切）和单芽两种，分别接种于含不同白砂糖浓度的生根培养基１／２ＭＳ上。试验结果表明：白砂糖对大花萱草
试管苗生根率和平均生根条数有着重要的影响。不加砂糖培养的试管苗叶片变黄、细弱、生长势极差，无论是丛生芽还是单芽生根率均为０；２．５％的砂糖利于单芽生根，生根率达９５％，平均根条数３．５９条／株；３．５％的砂糖利于丛
生芽生根，生根率达９０％，平均根条数７．５０条／块；丛生芽生根较单芽生根所需砂糖浓度要高；丛生芽生根在１４～

福建山樱花试管苗生根条件的优化

１２研究方法．１２１福建山樱花试管苗生根培养基的筛选．．采用
的青睐。但由于福建山樱花种子具有深度休眠特性且收集贮藏困难以及扦插繁殖技术不成熟… ，各种规格的苗木生产远不能满足市场需求，因此采用组织培养技术快
ｎｓｕｔｒｎｒｏｉｇｏｒｎｓｃｍａｕａａｃｖｔｌｎｌｔｈｅｕｔｓｏｅａＢｅｓｃｌｕｅｏｏｔｆｕｕａｐｎｌｔｕｅｔｐａｔ．Ｔｅｒｓ］ｈｗｄｔｔＡ，ｈｓｌｄｕ，ＡｎａｋｅｓｃｌｕｅｎＰｅｅｓｈＩａａｍｅｉｍＣａｄｄｒｎｓｕｔｒｗｒｅｍａｎｉｆｅｔｌａｔｒｎｒｏｉｇ．ＴｅｏｔｌｃｎｉｏｏｏｉｇＯＰＦｎ￣ｃｍａｕａａｅｖｔｌｎｅａｅｅｔｉｌｎｉｃｏｓｏｏｔｈｎｕａｆｎｈｐｉｏｄｔｎｆｒｏｔｆｕ，ａｐｎｌｔｕｅｔｐａｔｔｓ１／２ＭＳ＋ｍａｉｒｎ／／ｅｌｗ０６ｍｇＩＩ．／￣ＢＡ＋１Ｌｓｇｒｉｅｄｒｎｓｏ４ｄｙ．５ｕａｎｔａｋｅｓｆｒａｓｈＫｅｒｓｒｎｓｃｍａｕａａ；Ｃｕｅｔｌｎｌｔｙｗｏｄ：Ｐｕｕａｐｎｌｔｖｔｐａｔ；Ｒｏｔａｅｅｏｉｇ；Ｏｔｏｏａｅｉｌｒｈｇｎｌｄｓｇｎ；Ｄｒｎｓｕｔｒａｋｅｓｃｌｕｅ
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影响试管苗继代培养的因素及解决措施

影响试管苗继代培养的因素及解决措施1、影响试管苗继代培养的因素及解决措施当试管苗的瓶内长满并长到瓶塞，或培养基利用完成时就要转接，进行继代，可迅速得到大量试管苗，以便到一定数量时进行移栽。

能否保持试管苗的继代培养，是能否得到大量试管苗和能否用于生产的重要问题。

（1）驯化现象在植物组织培养的早期研究中，发现一些植物的组织经长期继代培养，发生一些变化，在开始的继代培养中需要生长调节物质的植物材料，其后加入少量或不必加入生长调节物质就可以生长，此现象就叫作“驯化”。

如在胡萝卜薄壁组织培养过程中，逐渐消耗了母体中原有器官形成有关的特殊物质。

如初代中加入10-6mol/L IAA，才能达到最大生长量，但经多次继代培养后，在不加IAA的培养基上也可达到同样生长量，一般约在一年以上，或继代培养10代以上。

但并不是出现这种所谓的驯化现象就好，有时长期的“驯化”现象会得到适得其反的结果，如卡德利亚兰实生苗在长期的加香蕉的培养基中继代，最后造成只长芽不长根，芽的增长倍数很高，但芽又细又弱，这时在加入生长素的培养基中培养，几次继代可长出较多的根。

（2）形态发生能力的保持和丧失在长时期的继代培养中，材料自身内部要发生一系列的生理变化，除了前面讲的“驯化”现象外，还会出现形态发生能力的丧失。

不同的植物其保持再生能力的时间是不同的，而且差异很大，在以腋芽或不定芽增殖继代的植物中，在培养许多代之后仍然保持着旺盛的增殖能力，一般较少出现再生能力丧失问题。

一般认为分化能力衰退主要有三个因素：第一，愈伤组织中含有从外植体启动分裂时就包括进来的成器官中心（分生组织），当重复继代会逐渐减少或丧失，这意味着不能形成维管束，只能保持无组织的细胞团。

也有人认为在继代培养过程中，逐渐消耗了原有的与器官形成有关的特殊物质。

为什么有的植物出现形态发生能力丧失的现象，而在另一些植物中，形态发生能力又能很好保持？其原因还有待进一步研究。

第二，形态发生能力的减弱和丧失，也可能与内源生长调节物质的减少或丧失有关，如胡萝卜和菘兰。

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影响试管苗生根的因素
试管苗生根是组织培养快速繁殖的重要环节。

只有当组培苗有了很好的根系时才能保证移栽成活。

试管苗的生根受很多因素的影响，在实际生根时可以通过调节很多因素来使其容易生根。

影响试管苗生根的因素主要有：
（1）植物材料
各种植物种植成活的难易程度不同。

同样的，不同的植物、不同的品种、同一植物的不同部位和不同年龄对生根都有决定性的影响。

生根难易还与母株所处的生理状态有关，因为取材季节和所处环境条件均有影响。

一般的，试管苗生根和扦插苗生根是一样的，即扦插生根容易的植物，试管苗生根也容易；扦插生根困难的植物，试管苗生根也困难。

比如，月季等扦插生根比较容易，试管苗也比较容易。

不同植物生根的规律是：成年的比幼年的生根难，木本植物比草本植物生根难。

试管苗一般都比较幼嫩，但是有些试管苗在培养瓶中生长时间长，茎木化程度比较高，这类苗不容易生根。

生长旺盛幼嫩的试管苗容易诱导生根。

（2）基本培养基
养和水分是植物体的一种本能。

在培养基中有高浓度的营养元素，特别是糖能满足的情况下，试管苗产生依赖性而不易生根，所以减少培养基中的营养成分和糖的含量即可刺激生根。

试管苗生根大多数使用低浓度的MS培养基，其中经常使用1/2MS和1/3MS培养基。

不同植物对培养基的要求也不同。

在无籽西瓜生根中，降低无机盐浓度，有利于生根，而且根多而粗壮，发根也快，加铁盐则更好。

糖的浓度一般用2%,有些植物在无糖培养基上也能生根。

培养基中的其他成分也和生根有关，有机成分中的维生素B
1，维生素B
6
，维
生素B
12
都有利于生根。

培养基的pH 值对试管苗的生根也有一定的影响。

因此需要求一定的 pH值范围，一般在 5.0—6.0。

据报道，pH值显著影响小萝卜幼苗切后侧根的形成，pH为 3.8时，侧根原基为为每平方厘米 60条，pH为 5.8时则降为每平方厘米 18 条。

水稻离体种子根生长，随 pH值由 3.3 升高至5.8而加快。

（3）植物生长调节物质
生长素有促进生长的作用，它一方面使细胞壁疏松，增加可塑性，促进了细胞的纵向伸长；另一方面生长素又促进了蛋白质等物质的合成，从而增加了原生质体的量。

生长素中主要有吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸(NAA)和吲哚丁酸(IBA)。

这三种生长素一般都能有效促进生根。

但不同种类的植物对生长素的种类和浓度的要求也不同。

使用不同种类的生长素，不但影响生根的数量，而且影响生根的质量。

一般用IAA诱导生成的根比较细长，NAA诱导生成的根比较短粗，而IBA诱导的根则介于二者之间。

生根与生长素的浓度有关，生长素浓度越高，根越向短粗方向发展，进一步增加生长素的浓度，超过一定极限，则引起愈伤组织化，影响根的形成和生长。

植物生长调节物质的使用方法有2种:一种是将适宜浓度的生长素预先加入到培养基中，然后将无根的试管苗接种上使其诱导生根；另一种是在无菌条件下将五根苗的茎段剪下来，用一定浓度的无菌生根溶液浸泡1~2小时后，再接种
到不含激素的培养基中培养生根。

（4）培养条件
温度
试管苗在试管内生根，或在试管外生根，都要求一定的适宜温度，一般在16℃—25℃，过高过低均不利于生根。

不同植物最适生根温度不同。

据报道，草莓继代培养芽的再生是32℃，生根是 28℃最好，16℃时根长增加 5mm—8mm，根数为 5 条，而 28℃时根长可增加 11mm，产生 19 条根。

温度对马铃薯块茎离体培养物发根也有影响，发根最适温度高于分枝的最适温度。

光照
光照强度和光照时间对发根的影响十分复杂，结果不一。

一般认为生根不需要光照。

例如，试管苗转入生根培养基后，先进行一周左右的暗培养，再转入正常关照培养，有利于根的形成。

但是暗培养影响上部植物的生长，不利于培养壮苗。

若在生根培养基中加入0.1%-0.3%的活性炭，不仅使生根处于较暗的条件下，而且还能吸附一些有毒物质，使根不易褐变，有利于根的形成和生长。

影响安祖花生根的因素有一下几方面:
（1）转入生根培养基的芽苗的高度
一般实验中都是将长度大于1.0cm的生长健壮的芽苗切成单苗接种于生根培养基上培养。

而在丛状芽继代培养过程中发现在同一种培养基上,无菌苗高的易生根，当高度在3.0cm以上时，生根率最高达85.4%；在2.0cm以下时, 诱导生根率较少,仅53.5%。

(2)植物生长调节剂
三种生长素（IAA、NAA、IBA）对安祖花的生根均有促进作用，其生根作用的效应依次为 IAA、IBA、NAA。

IAA在 0.2～1.0 mg/L 的范围内生根效果最好；IBA 在 0.2～1.0 mg/L 的范围内效果最好；NAA 在 0.1～0.4 mg/L 的范围内效果最好。

不定芽真根发生率随着IAA浓度增大而增大。

IAA，IBA，NAA利于生根的适宜浓度分别为1.0 mg/L、1.0 mg/L、0.4 mg/L，生根率分别为91 %，70 %，63 %。

IAA为 1.0 mg/L在培养约2 周后有根长出；当IBA的浓度为1.0 mg/L、当NAA的浓度为0.4 mg/L时培养20 d后才有根长出。

高浓度生长素不利于根发生。

生长素浓度过大，则外植体会分化出较多的愈伤组织，使根条数降低，不利于生根，而且较高的生长素浓度会使苗木生长表现茎叶白化等异常现象。

因此，安祖花组织培养中理想的生根培养基是1/2 MS+IAA 1.0 mg/L。

另外，由于IAA不稳定，受热容易分解，组织培养中需要过滤灭菌，操作麻烦，不适宜大规模生产。

用培养基：1/2 MS+1.0 mg/L IBA生根时，试管苗生根率可达70 %，因此在实际生产中，应用IBA进行安祖花不定芽生根培养也是可行的。

(3)培养条件
因为安祖花原产在南美洲热带地区，喜高温多湿的环境，因此，要求温度在20℃-30℃，相对湿度也较高，在80%以上。