样品前处理技术与色谱联用全解27页PPT

样品前处理技术

H2SO4
H2SO4
H2SO4
低温冷冻法
01
盐析、酸沉淀、渗析、掩蔽等方法
02
吹扫共蒸馏法
03
三、浓缩
浓缩过程应注意防止氧化分解，尤其是在浓缩至近干的情况下，更容易发生氧化。分解，这时往往需要在氮气流保护下进行浓缩。常用的浓缩的方法有：
蒸馏或减压蒸馏方法浓缩
2
旋转蒸发器浓缩
KD浓缩器浓缩
2
提高回收率的措施
常用的强氧化剂有浓硝酸、浓硫酸、高氯酸、高锰酸钾、过氧化氢等。
02
原理：样品中加入强氧化剂，并加热消煮，使样品中的有机物质完全分解、氧化，呈气态逸出，待测组分转化为无机物状态（离子态）存在于消化液中。
01
（二）、湿法消化法
优点：有机物分解速度快、处理时间短、方法得当时，元素无损失、……
样品采样后，应用适当的容器储存。
01
在样品运输及保存中，要防止挥发性成分损失及霉变、变质、成分分解。
02
一般样品检验结束后应保留样品一个月，以备复查。
03
保留样品应存放于适当的容器及地方，尽可能保持其原状，对易变质的食品不能保存时，可不保留样品，但应事先对送验单位说明。
04
第四节样品的保存
样品预处理技术
#O1
#2022
试样的前处理过程包括：待测成分的提取、浓缩（或稀释）、排除干扰、转态等通常应根据以下几方面的情况，选择适当的前处理方法，以满足测定的要求。 1．分析项目及待测成分性质 2．样品的性质 3．采用的分析测定方法 4．分析的目的
常用采样器
电动采样器
通过制样，使试样能正确代表全体样品
样品制备就是对原始样品的分取、粉碎、混匀、缩分的过程。

色谱分析中的样品前处理技术

环境食品其他植物性动物性人体土壤、固体废弃物、沉积物、污泥、蔬菜、水果食鱼、肉、蛋肌肉、骨骼、垃圾等用菌、米谷物头发、指甲、生等陆生和水各种组织器生植物官各种水体（河水、湖水、海水、生活污水、工业废水、地下水、雨水、自来水等）大气和室内空气（气体组分、气溶胶、大气颗粒物、挥发性金属化合物）饮料、酒类、奶类、酱油、醋调味品、油食物的蒸煮、焙烤发酵香气、恶臭气体汗液、血液、尿液、胆汁、胃液
源、种类、状态和采集时间而变化，为是导致分析复杂化的二个根源之一。因此在设计前处理方法必须考虑：（1）样品的状态和品种
状态固态
定义为分离因子则如果完全分离， =1；全不分离，趋于0 =（组分：A多B少）/（组分：A少B多）在实际中根据： •分析目的对灵敏度和准确度要求 •实验室条件 •待测物有色谱流出位置无干涉峰 •降低检测限 •减少待测物无损失（回收率）

将待测组分从样品中分离，达到仪器能检测的状态除去样品中的干涉杂质。使待测目标化合物达到可检测的范围；使其溶于可进行分析的介质及转换成可检测的形式等保护仪器设备以及相关的分析部件，如色谱柱等
（五）食品样品的制备
3 . 罐头水果罐头在捣碎前须清除果核；肉禽罐头应预先清除骨头、鱼类罐头要将调味品（葱、辣椒等）去除后再捣碎。常用的捣碎工具有高速组织捣碎机等 *制备好的样品如果需要保存，应放在密闭洁净的容器内，置于干燥、通风、阴暗处保存，如谷物类。易腐烂变质的样品应保存在0～ 5℃冰箱内，如水果、蔬菜。禽肉类及鱼类样品须在 -18℃冷冻保存，同时根据样品自身特性来规定适宜的保存期
奶
蛋
（2）样品特点
尿大部是水，呈黄色、 PH4、含大量无机盐有机酸和含氮硫代谢物尿素嘌呤酸类固醇等水占 90-93% ，其他成分较尿液复杂，可溶性蛋白质、脂肪、糖类、氨基酸、酶样品中药物浓度受生成量和肾功能影响变化较大。与组织浓度相关性差除脂肪随日粮量有关外，其他理化成分性质与组织液相似，比较稳定，调节PH、水解代谢物的轭合态

色谱法概论PPT课件

能。
色谱法与其他技术的联用
色谱-质谱联用（GC-MS, LC-MS）
通过将色谱的分离能力与质谱的高灵敏度检测相结合，可实现对复杂样品中目标化合物的定性和定量分析，广泛应用于药物代谢、环境监测等领域。
色谱-光谱联用（GC-IR, LC-UV/Vis）
色谱与光谱技术的联用可以提供更丰富的化合物结构和组成信息，有助于深入了解化合物的性质和行为。
实验材料
确保色谱柱、试剂、溶剂等材料的质量和纯度，
以满足实验要求。
实验设备
检查色谱仪、检测器、注射器等设备的运行状况，确保实验过程中设
备正常工作。
实验设计
根据实验目的和要求，设计合理的色谱条件和
实验方案。
实验安全
注意实验过程中的安全问题，如使用有毒有害
试剂时的防护措施。
实验操作步骤
色谱柱安装与条件设置
数据整理
整理实验过程中记录的数据，包括色谱图、峰面积等。
结果分析
对实验结果进行深入分析，探究可能的原因和影响因素。
03
02
结果判断
根据实验目的和要求，判断实验结果是否符合预期。
结论总结
总结实验结果，得出结论，并提出进一步改进和完善的建议。
04
04 色谱法在分析化学中的应用
在食品分析中的应用
食品成分分析
色谱法用于分离和检测食品中的营养成分，如脂肪、蛋白质、碳水化合物、维生素和矿物质等，以确保食品质量和安全。
食品添加剂分析
食品污染物分析
色谱法用于检测食品中的有害物质，如农药残留、重金属、霉菌毒素等，以防止食品污染和保障食品安全。
色谱法用于检测食品中添加的防腐剂、色素、香料等成分，以控制食品添加剂的使用量，保障消费者健康。

色谱预处理

色谱预处理一、样品的制备样品制备是色谱预处理的第一步，其目的是将样品中的待测组分转化为适合分析的形式，同时去除杂质和其他干扰物质。

样品制备的方法取决于样品的性质和待测组分的性质。

以下是一些常见的样品制备方法：1.萃取：通过使用适当的溶剂将待测组分从样品中提取出来。

萃取的方法包括液-液萃取、液-固萃取和超临界流体萃取等。

2.蒸馏：通过加热使样品中的待测组分蒸发，然后冷凝收集。

蒸馏的方法包括常压蒸馏、减压蒸馏和分子蒸馏等。

3.吸附-解吸：通过使用吸附剂将待测组分吸附，然后使用适当的溶剂将待测组分解吸下来。

常用的吸附剂包括硅胶、活性炭等。

4.衍生化：通过化学反应将样品中的待测组分转化为更适合分析的形式。

常见的衍生化反应包括酯化、硅烷化等。

在样品制备过程中，需要注意以下几点：1.选择合适的溶剂和试剂，以保证待测组分的充分提取和杂质的去除。

2.控制好温度、压力和时间等条件，以保证最佳的提取效果。

3.注意安全问题，避免使用有毒有害的溶剂和试剂，防止环境污染。

二、样品的提取样品的提取是指将待测组分从样品基质中分离出来的过程。

提取的方法取决于待测组分的性质和基质的类型。

以下是一些常见的提取方法：1.超声波提取：利用超声波的振动将待测组分从样品中释放出来，常用的溶剂包括甲醇、乙醇和水等。

2.微波辅助提取：利用微波能加速样品中的分子运动，从而提高待测组分的提取效率。

常用的溶剂与超声波提取相似。

3.超临界流体提取：利用超临界流体作为萃取剂，将待测组分从样品中提取出来。

常用的超临界流体包括二氧化碳和氨气等。

4.酶辅助提取：通过使用适当的酶将待测组分从样品中释放出来。

常用的酶包括蛋白酶、脂肪酶等。

在样品提取过程中，需要注意以下几点：1.选择合适的溶剂和提取条件，以保证待测组分的充分提取和杂质的去除。

2.控制好温度、压力和时间等条件，以保证最佳的提取效果。

3.注意安全问题，避免使用有毒有害的溶剂和试剂，防止环境污染。

三、样品的净化样品的净化是指去除提取液中的杂质和其他干扰物质，以获得纯净的待测组分的过程。

生物样本样品前处理

4
常用液液提取溶剂
溶剂名称二氯甲烷乙酸乙酯氯代正丁烷
乙醚戊烷环己烷正己烷甲苯异丙醇* 四氢呋喃* 乙腈* 正丁醇* 水*
分子量 84.9 88.1 92.6 74.1 72.2 84.2 86.2 92.2 60.1 72.1 41.1 74.1 18.0
注：“*”表示与水互溶
沸点（℃） 40
5、固相萃取法：可实现自动化，基质效应降低，同时完成样品的富
集与净化；但成本较高
3
液液提取法
利用目标化合物在生物基质和与水不互溶的有机溶剂中溶解度或分配系数的不同，使化合物从生物基质中转移至有机相中。
➢两相的分离需借助两相的密度差来实现
➢原理：相似相溶
➢分配系数：kA=yA/xA yA和xA分别表示在萃取相和萃余相中的质量比率
常见表面活性剂：Triton-X-100，吐温等
Tips
1、表面活性剂需确立一个浓度范围而不是单一浓度。 2、样本已经采集，考虑将待测物从容器中解离出来。
14
讨论和问题
Thank you!
15
0.08 0.36 1.66 1.63 3.92 1.50 1.84
5
固相提取法
◇HLB(Hydrophilic-Lipophilic Balance Copolymer)材料的优点
△水可浸润 △反相保留 △PH1-14范围内稳定 △没有裸露硅羟基
6
固相提取法
7
固相提取法
8
固相提取法
改变化合物PH，酸性保留，碱性洗脱
77.1 77
34.5 36.1 80.7
69 110.6 82.4
66 81.6 117 100
密度（g/mL) 1.33 0.90 0.89 0.71 0.63 0.78 0.66 0.87 0.79 0.89 0.78 1.00 1.00

样品的前处理方法

三种不同型号的ASE
ASE100↑
ASE200 ↓
ASE300 ↑
ASE的突出优点
• 快速，15分钟 • 溶剂用量少 • 萃取效率高 • 样品基体影响小 • 可同时选用四种溶剂萃取 • 安全，全自动 • ASE建立了环境, 药物, 聚合物, 食品, 和化妆品
工业的大量应用
ASE工作流程
加样品
加溶剂
加热加压
时间 (min) 0.5–1
5
溶剂
静态萃取新溶剂冲洗
5 循环
0.5
氮气吹扫
1–2
萃取结束准备分析
Total (min) 12–18
泵
吹扫阀
炉体
萃取池
静态阀
氮气瓶
收集瓶
食品安全评价中ASE的应用
• 水果和蔬菜中的农药 • 动物组织中的二噁英和多氯联苯 • 粮食中的农药 • 粮食中的毒枝菌素 • 熏肉中的多环芳烃 • 葡萄干中的杀真菌剂 • 咸肉中的硝酸盐/亚硝酸盐 • 一些正在发展的方法
研磨
• ⑤对具有坚韧细胞壁的微生物，常用自溶、冷热交替、加砂研磨、超声波和加压处理等方法。
细胞破碎方法的分类
3.生物大分子的提取
• 提取生物大分子样品时条件的选择：
（1）溶剂
常用的溶剂有水、稀酸、稀碱、稀盐等，也可以采用不同比例的有机溶剂，如：乙醇、丙酮、氯仿、四氯化碳
选择溶剂时要注意物质的溶解性，如极性物质易溶于极性溶剂；碱性物质易溶于酸性溶剂；温度升高时一般溶解度相应增大；远离等电点时溶解度增大
–固相萃取样品小柱
样品预处理的过程
去除微粒
• 过滤 – 可重复使用过滤装置/过滤膜 • 有机(0.22μm)/无机(0. 22 μm) • 膜片可更换 – 一次性使用的膜 • 使用方便简单，交叉污染小 • 有更小内径，可用于微量样品的处理

26知识点聚酰胺色谱简介

26知识点聚酰胺色谱简介聚酰胺色谱是一种广泛应用于分析化学领域的色谱技术，其原理基于样品分子在固定相和流动相之间的相互作用力。

该技术可以用于分离和鉴定各种有机物，具有高效、灵敏、准确和可靠等特点。

本文将介绍26个关键的聚酰胺色谱知识点。

1. 色谱基本原理聚酰胺色谱利用样品在固定相和流动相之间的平衡分配，通过分子间相互作用力的差异来实现样品分离。

2. 固定相的选择聚酰胺色谱中常用的固定相有硅胶、聚合物和离子交换树脂等，选择合适的固定相可以提高分离效果。

3. 流动相的优化流动相的选择和优化对色谱分离起着重要作用，常用的流动相有有机溶剂和缓冲溶液等。

4. 样品前处理样品前处理是为了去除杂质和增加分析物的浓度，常用的方法包括萃取、浓缩和稀释等。

5. 色谱柱的选择色谱柱的选择包括填充剂类型、粒径大小和柱长等，不同的色谱柱可以实现不同的分离效果。

6. 色谱检测器常用的色谱检测器包括紫外-可见吸收检测器、荧光检测器和质谱检测器等，选择合适的检测器可以提高灵敏度和选择性。

7. 分离机理聚酰胺色谱的分离机理涉及吸附作用、分配作用和离子交换作用等，不同的分离机理适用于不同的分析对象。

8. 反相色谱反相色谱是聚酰胺色谱中常用的一种分离模式，基于样品与固定相间的亲疏水性差异来实现分离。

9. 离子色谱离子色谱是一种用于分离和测定离子化合物的聚酰胺色谱方法，常用于水质分析和环境监测等领域。

10. 手性色谱手性色谱是一种用于分离手性化合物的聚酰胺色谱方法，可以鉴别和测定药物、化妆品和农药中的手性杂质。

11. 气相色谱-质谱联用气相色谱-质谱联用技术结合了气相色谱和质谱的优势，可以用于复杂样品的定性和定量分析。

12. 液相色谱-质谱联用液相色谱-质谱联用技术结合了液相色谱和质谱的优势，可以实现更高灵敏度和更好的选择性。

13. 聚酰胺色谱在药物分析中的应用聚酰胺色谱在药物分析中广泛应用，可以用于药物成分分离、杂质检测和药代动力学研究等。

样品前处理技术及应用

3
样品前处理
1 2 分离提取等其他处理
1液液萃取
2蒸馏
（3）液-固萃取
（4）固相萃取
（5）超声提取
（6）微波法
（7）超临界流体萃取（8）膜透析法
（9）生物样品水解蛋白沉淀
（10）离心/过滤（11)蒸发浓缩
（12）消解
4
2 重要性-以农药残留分析为例
2 1 需要检测痕量或超痕量残留水平; 22 待测样品污染源的未知性和样品种类的多样性 23 同时进行多残留检测。 24 结论：萃取净化技术等样品前处理是残留分析
1溶剂和样品基质不能混溶；（2）待测物和溶剂之间应有最大的分配比（3）溶剂必须不含有干扰分析的污染物（4）对检测器的响应值应尽可能小（5）保留时间和待测物应不相同（6）溶剂本身应毒性低且易于纯化。
11
1 3 液液萃取的类型
1分次萃取-通常在分液漏斗中进行;将样品和萃取溶剂混合振荡，静置分层后，分出水相; 一个样品可用若干份的溶剂进行多次萃取，以提高萃取率。（2）连续萃取--是将样品和溶剂在连续萃取仪器中自动混合，由于连续操作，可减少乳化现
柱預处理样品添加柱洗涤分析物洗脫
分析物
干扰物
1 4固相萃取的过程
1 吸附剂的预处理为保证萃取良好的再现现性; 固相柱在使用前必须用适当的溶剂清洗;
-对固相柱进行活化，展开碳氢链增加和分析物作用的表面积；
--对固相柱进行清洗，除去柱上吸附的对分析有影响的物质
加样前预处理好的柱子必须保持湿润
仪器 8%
色谱 7%
积分 6%
进样 6%
操作 19 %
交叉污染 4%
样品处理 30%
3 国际上前处理技术发展