串联质谱
仪器分析之 串联质谱
三重四级杆的定性定量方式
三重四级杆的扫描方式
DAU子离子扫描 PAR母离子扫描 CNL中性碎片丢失扫描 SIR选择离子监测 MRM多反应监测
子离子质谱图DAU
MS1
Collision
MS2
Cell
静态
扫描
用MS2质量分析器扫描指定母离子的子离子碎片，所得到的质 谱图只能是由指定母离经碰撞产生。
SIR与单四级杆仪器的SIM方式相当 对于信号强度，SIR方式更强 对于纯净基质，也许SIR的信噪比可能高于
MRM方式 对于复杂样品分析，多数情况下MRM方式
的灵敏度高于SIR方式
TIC\SIM\MRM方式的差别
信噪比（S/N）
信-信号 噪-噪音 用噪音的Standard Derivation表示 信噪比越高，表示结果的可靠性越高
X
去检测器
-
Y+
+
-
来自离子源
X
Y
RF Cycle
四级杆原理2
DC voltage U (volts)
90 80 70 60 50 40 30 20 10
0 0
Y stability boundary
X stable Y unstable
X stability boundary
X unstable Y stable
多电荷离子的MS-MS
一般都用丰度最强的质谱峰进行质谱质谱 分析，即使它是多电荷离子。
多电荷离子一般比单电荷离子需要更高的 碰撞气电压。
碎片离子可能比多电荷离子的质荷比大。
注意要保证流动相pH恒定，否则生成的多 电荷离子比例不同，造成定量误差。
X and Y stable
200
三重四极杆串联质谱
三重四极杆串联质谱一、三重四极杆串联质谱的原理三重四极杆串联质谱是一种基于离子激发和离子分析的技术。
它由三个四极杆组成，每个四极杆都具有一个电场和一个磁场，可以对离子进行加速、分离和聚焦。
首先，样品通过离子源产生离子，然后进入第一个四极杆，通过调节电场和磁场来筛选离子。
接着，离子经过激发，激发成不稳定的离子态，然后再进入第二个四极杆进行进一步的分离和筛选。
最后，离子进入质谱仪进行质谱分析，得到样品的质谱图谱。
二、三重四极杆串联质谱的应用三重四极杆串联质谱在化学、生物和医药领域有着广泛的应用。
在化学领域，它可以用于分析复杂的有机化合物、无机化合物和高分子化合物，如蛋白质、DNA和RNA。
在生物领域，它可以用于分析生物样品的代谢产物、蛋白质组学、脂质组学和糖类组学。
在医药领域，它可以用于药物分析、代谢物分析和药物代谢动力学研究。
此外，三重四极杆串联质谱还可以结合其他分析技术，如色谱和电泳，进行多维分析，提高分析的灵敏度和分辨率。
三、三重四极杆串联质谱的发展趋势随着科学技术的不断发展，三重四极杆串联质谱也在不断改进和创新。
一方面，质谱仪器的灵敏度和分辨率不断提高，可以检测到更多的化合物和离子。
另一方面，质谱数据处理和分析的软件也不断升级，可以更方便地进行质谱数据的解释和应用。
此外，随着生物技术和医学技术的快速发展，三重四极杆串联质谱将会更多地应用于生物医学研究和临床诊断。
总之，三重四极杆串联质谱是一种重要的分析技术，它具有高灵敏度、高分辨率和广泛的应用领域。
随着科学技术的不断进步，三重四极杆串联质谱将会在化学、生物和医药领域发挥越来越重要的作用。
希望本文对读者对三重四极杆串联质谱有更深入的了解，并对相关研究和应用提供帮助。
串联质谱标记
串联质谱标记技术的应用
串联质谱标记（Tandem Mass Spectrometry，简称MS/MS）是一种常
用于分析生物大分子的技术，例如蛋白质和核酸。
它通过两个连续的质
谱过程来实现目标分子的识别和结构解析。
首先，样品经过质谱仪进行单一电荷态离子化，形成带电离子。
然后，
在第一级质谱（MS1）中，这些带电离子会根据它们的质量/电荷比（m/z）进行分离，并生成一个质谱图，其中显示了不同离子的丰度。
接下来，在第二级质谱（MS2）中，选择MS1中感兴趣的一个或多个特
定离子（称为前体离子），将其从MS1中分离出来。
然后，这些前体离
子在碰撞池中与高能量的气体发生碰撞，导致它们进一步解离成更小的
离子碎片。
在碰撞解离过程中产生的离子碎片会根据它们的m/z值在第二级质谱中
进行分离，并形成一个新的质谱图。
这个图谱显示了前体离子所产生的
碎片离子的相对丰度和m/z值，提供了关于目标分子的结构信息。
通过对比实验样品和标准物质的MS/MS谱图，可以确定样品中的目标分
子是什么物质，从而实现化合物的鉴定和结构解析。
串联质谱标记技术在生物学研究、药物开发、代谢组学等领域具有广泛
的应用，可以帮助科学家深入了解生物分子的组成和结构，从而推动科
学研究和医药领域的进展。
串联质谱
质谱法是在高真空状态下 将被测物质离子化，按离子的 质荷比（m/z）大小分离而实现 物质成分和结构分析的方法， 且质谱峰强度与其代表的物质 含量成正比，据此可进行定量 分析。 1
1
色谱与质谱联用技术
HPLC-MS
GC-MS
UPLC-MS
2
SFC-/MS CE-MS
2
气质联用技术
4. 在生物大分子分析中的应用 ESI是一种很温和的电离方法，特别适合分 析强极性、难挥发或热不稳定的化合物；再者， ESI能把许多电荷附着于大分子上，形成多电荷 离子，因而利用常规质荷比范围的质谱仪即可 实现大分子质量离子的测定。因此，LC-MS/MS 可实现蛋白质的快速高灵敏度鉴别和测定。 24
8
8
GC-MS仪器装置
离子阱分析器 特点：
1.单一的离子阱可实现多 级“时间上”的串联质谱 2.结构简单，价格便宜 3.灵敏度高 4.质量范围大
9
9
GC-MS仪器装置
飞行时间分析器
10 特点：1.检测离子的质荷比范围比较宽
2.灵敏度高，适合做串联质谱的二级 3.扫描速度快，适合做研究极快过程
10
14
萘普生
14
应用实例
样品处理方法：
血浆样品0.5ml在 室温解冻
2 混合溶液涡旋混 匀，上SPE柱 4 1
0.75ml水和0.1ml内标溶液(布 洛芬，1.0μg/mL)加入血浆
3
洗脱液在50℃ 氮吹蒸发
6
15
用乙腈-水(2 ml, 15/85)和3ml 正己烷洗脱
5
残留物用乙腈和MSTFA (50:50, v/v)溶解，进样
12
12
质谱定量分析
串联质谱测定肽段序列的原理与方法
串联质谱测定肽段序列的原理与方法串联质谱法（Tandem Mass Spectrometry，简称MS/MS）是一种广泛用于确定肽段或蛋白质的氨基酸序列的分析技术。
这种技术主要基于两个质谱技术：质谱分析（Mass Spectrometry，MS）和串联质谱（Tandem Mass Spectrometry，MS/MS）。
本文将详细讨论串联质谱测定肽段序列的原理和方法。
1.原理：质谱分析（Mass Spectrometry，MS）是一种测量和分析化学物质离子质量和相对丰度的技术。
在质谱仪中，样品被气化并离子化，然后通过离子能量分析器分离出不同质量/电荷比（m/z）的离子。
MS/MS将两个MS仪放在一起使用。
首先，一台MS仪将样品分解为碎片离子，然后这些碎片离子经过质量分析器分离出不同m/z值。
然后，这些碎片离子进入第二台MS仪，通过二次质谱分析进一步鉴定和确定它们的结构。
2.方法：串联质谱测定肽段序列的方法通常包括以下几个步骤：（1）蛋白质或肽段的酶解：首先，蛋白质样品通过特定的酶进行酶解，将蛋白质降解为短肽段。
常用的酶包括胰蛋白酶、胰蛋白二酶、氨基肽酶等。
（2）质谱分析：酶解后的肽段样品被注入质谱仪进行质谱分析。
常用的质谱仪包括电喷雾质谱（Electrospray Ionization Mass Spectrometry，ESI-MS）和基质辅助激光解吸/电离质谱（Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Mass Spectrometry，MALDI-MS）。
其中，ESI-MS是将样品通过电喷雾离子源转化为带电离子，然后通过毛细管进入质谱仪分析；MALDI-MS是通过激光解吸蒸发样品中的分析物，将其带向质谱仪质量分析器分析。
（3）鉴定肽段：鉴定肽段是将质谱图的离子片段与已知蛋白质数据库进行比对，找到最佳匹配。
鉴定肽段主要是利用质量对电荷比（m/z）值和碎片离子的相对丰度分析。
串联质谱如何定量
串联质谱如何定量串联质谱（tandem mass spectrometry, MS/MS）是质谱技术的一种高级形式，能提供比传统单段质谱更准确和详细的结构信息和定量分析。
串联质谱通过将两个或多个质谱过程连接在一起，可以同时获取目标化合物的质荷比和结构信息，从而实现定量分析。
本文将详细讨论串联质谱的定量方法和技术。
串联质谱的定性分析方法包括以下几种：预先设定法、无损失扫描法、选离子扫描法、多级质谱扫描法以及峰面积比法。
其中，预先设定法是基于连接两个或多个质谱过程，目标化合物将在每个过程中选择性地分离并产生特定的质谱峰。
实验者需要预先了解化合物的反应特性，然后设置适当的质谱条件来获取需要的信息。
例如，一种常用的方法是利用电子轰击（electron impact, EI）产生的质谱碎片特征来进行预先设定。
无损失扫描法是一种通过串联质谱实现碰撞诱导解离（collision-induced dissociation, CID）和多级质谱（multiple stage mass spectrometry, MSn）来分析和确认目标物的结构和组成的方法。
在这种方法中，化合物经过主谱的质谱过程后，在碰撞池中与分子间或分子内发生碰撞，产生与化学反应相关的碎片，然后在子谱中通过CID进一步产生新的碎片，并获得更多的结构信息。
选离子扫描法是通过选择目标离子的特定质荷比进行扫描，在质谱中只记录特定离子质荷比（m/z）范围内的质谱峰。
这种方法可以在样品中进行高选择性和高灵敏度的分析。
多级质谱扫描法是将多个串联质谱过程连接在一起，以获取更详细的结构信息。
例如，通过对前体离子进行CID产生新的碎片离子，然后对新的碎片离子再进行CID。
这种方法可以提供更丰富的结构信息，用于更准确地确定目标化合物。
除了以上定性分析方法外，串联质谱还可以用于定量分析。
串联质谱的定量分析方法包括靶向定量和无靶定量。
靶向定量是通过调整仪器的质谱参数以选择性地监测目标化合物的特定离子峰，从而实现无损失或有损失的定量分析。
串联质谱鉴定蛋白质
百泰派克生物科技
串联质谱鉴定蛋白质
串联质谱鉴定蛋白质原理
串联质谱通过检测在质谱中获得的肽段碎片的分子质量来鉴定蛋白质，鉴定内容包括蛋白质的分子质量、蛋白质或多肽一级结构以及修饰位点等。
经过酶解的肽段在质谱仪中按照一定的规律解离成不同系列的离子，通过分析不同系列相邻离子的质量差等质谱数据推算氨基酸的质量及序列，进一步分析得到蛋白或多肽的分子质量和结构等信息。
串联质谱鉴定蛋白质技术
蛋白质串联质谱鉴定技术基于肽段中氨基酸序列的特异性对蛋白质进行鉴定，一次性分析蛋白酶解的所有肽段，解析其序列，比传统的蛋白质鉴定方法更简便、更准确、灵敏度更高。
适当调整后还可以鉴定蛋白翻译后修饰。
串联质谱技术在蛋白组学研究中发挥着越来重要的作用，已成为蛋白组学研究最先进的工具。
百泰派克生物科技使用Thermo公司最新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪结合Nano-LC，可实现来自蛋白质提取物、SDS-PAGE蛋白条带、2D蛋白胶点、pull-down及co-IP等样品中的蛋白质进行高效精准的蛋白质谱鉴定服务，欢迎免费咨询152-****7680。
气相色谱串联质谱原理
气相色谱串联质谱原理气相色谱串联质谱（GC-MS）是一种广泛应用的分析技术，通过将气相色谱（GC）与质谱（MS）相结合，可以提供高分辨、高灵敏度和高特异性的化学分析结果。
GC-MS在环境科学、食品安全、药物分析等领域被广泛使用。
GC-MS的原理基于两个关键技术：气相色谱和质谱。
气相色谱是一种用于分离和分析化合物的技术，它利用物质在气相中的分配系数差异来分离混合物。
质谱则是一种分析化合物结构和组成的技术，它通过测量碎片离子的质量/电荷比（m/z）来鉴定和定量分析样品中的化合物。
在GC-MS中，样品首先通过气相色谱柱进行分离。
气相色谱柱通常是一种长而细的管道，表面涂有化学物质，用于增加化合物与柱材之间的相互作用和分离效果。
当样品进入气相色谱柱时，插入柱口的进样针将样品注入，然后通过加热来蒸发，使其转化为气态物质。
样品分子在柱材上的分配系数差异导致它们以不同的速率通过柱子，从而实现分离。
待分离的化合物将以一定的时间间隔进入质谱仪。
质谱仪由离子源、质谱仪和数据系统组成。
离子源将进入的化合物转化为气态离子，然后将其传输到质谱仪，质谱仪在不同的m/z比下进行检测和记录。
质谱仪的第一部分是质子化室，它使用高能电子束或化学离子化技术将进入的化合物转化为正离子或负离子。
然后，在质谱仪的分析器中，离子按照它们的质荷比被分离为不同的离子流，每个离子流都表示一种特定的化合物。
分离后，离子在检测器中被收集，产生一个离子当量和m/z比的电流。
GC-MS的输出是质谱图，其中x轴表示m/z比，y轴表示所生成离子的相对信号强度。
通过与数据库中的标准化合物的质谱进行比对，可以确定样品中存在的化合物。
GC-MS有许多应用，如食品安全领域中的残留农药和有毒物质的分析，医药领域中药物代谢产物的鉴定，环境科学中有机污染物的监测等。
其优点包括高灵敏度、高分辨率、高特异性和广泛的分析能力。
总之，GC-MS利用气相色谱和质谱技术的结合，提供了一种高效、高分辨的化学分析方法。
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优点
• 可以避免底物分子产生的干扰，大大降低背景噪音。 • 其次，可使分子离子通过与反应气的碰撞来产生断裂。 • 因此能提供更多的结构信息，所以串联质谱特别适合于复 杂组分体系且干扰严重的样品中低含量组分分析测定，具 有比GC-MS和LC-MS等一级质谱更高的选择性和灵敏度。
串联质谱及其作用
两个或更多的质谱连接在一起，称为串联质谱。最简 单的串联质谱（MS|MS）由两个质谱串联而成，其中第一 个质量分析器（MS1）将离子预分离或加能量修饰，由第 二级质量分析器（MS2）分析结果。常见的形式有串联 （多联）四级杆质谱、四级杆离子阱质谱、四级杆和磁质 谱混合式串联质谱和采用多个扇形磁铁的串联磁质谱。