水飞蓟素检验操作规程
05水飞蓟素质量标准
3、质量标准：
项目
法定标准
内控标准
性状
本品为黄色至浅棕色松散粉末 本品为黄色至浅棕色松散粉末
鉴别
（1）（2）（3）符合规定 （1）（2）（3）符合规定
炽灼残渣 不得过0.5% 检
干燥失重 .0% 百万分之一百
含水飞蓟素以水飞蓟宾计不得 含水飞蓟素以水飞蓟宾计不得
编号: QS 04— 005 00
题目: 水飞蓟素质量标准
第3页 共3页
水飞蓟宾 照高效液相色谱法（SOP03—049 00）测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋 酸（50：50：0.5）为流动相：检测波长为288nm。理论板数按水飞蓟宾峰计算应不 低于5000。
含量测定
少于68%；含水飞蓟宾和异水 少于68%；含水飞蓟宾和异水
飞蓟宾不得少于30%
飞蓟宾不得少于30%
微生物 细菌数 ≤ 1000个/g
≤ 800个/g
限 度 霉菌数 ≤ 100个/g
≤ 80个/g
检 查 大肠杆菌 不得检出
不得检出
4.试剂与试药：甲醇、二硝基苯肼、氢氧化钾、盐酸、醋酸铅试液、锌粉。
题目: 水飞蓟素质量标准
第2页 共3页
7.2 鉴别： 7.2.1 取本品0.1g，加甲醇10ml溶解，振摇，滤过，取滤液，照下述方法试验。 7.2.1.1 取上述滤液3ml，加醋酸铅试液1ml，振摇，即产生黄色沉淀。 7.2.1.2 取滤液1ml，加锌粉少许及盐酸数滴，生成玫瑰红色。 7.2.1.3 取滤液适量，用甲醇稀释制成每1ml中约含16μ g的溶液，照紫外分光光 度法标准操作规程（SOP 03-031 00）操作，在288nm波长处有最大吸收。 7.3 炽灼残渣：取本品1.0g（称至0.0001g），照炽灼残渣检查标准操作规程 （SOP04—002 00）操作，所测结果不得超过0.5%。 7.4 干燥失重：取本品1.0g（精确至0.0001g），在70℃减压干燥3小时，照干燥 失重检查标准操作规程（SOP04—014 00）操作，减失的重量不得超过4.0%。 7.5 重金属：取炽灼残渣项下的遗留残渣，照重金属检查标准操作规程（SOP04 —038 00）操作，重金属含量不得超过百万分之一百。 7.6 含量测定： 7.6.1 试剂配制： 7.6.1.1 二硝基苯肼溶液：称二硝基苯肼500mg，置于50ml容量瓶中，加硫酸 1ml，以甲醇稀释至刻度。 7.6.1.2 氢氧化钾—甲醇溶液配制：称优级纯氢氧化钾10g，置于烧杯中加水 30ml，使溶解，无损地转移至100ml容量瓶中，以甲醇稀释至刻度。 7.6.2 操作： 水飞蓟素（总黄酮） 对照品溶液的制备，取水飞蓟宾对照品约10mg，精密称 定，置25ml量瓶中，加甲醇适量，水浴加热使溶解，冷却至室温，加甲醇稀释至刻度， 摇匀，即得。 供试品溶液的制备 取本品50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇适量， 水浴加热使溶解，冷却至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 测定法 精密量取对照品溶液和供试品溶液各5ml，分别置25ml量瓶中，分别精 密加入2,4二硝基苯肼溶液2ml，置50～55℃水浴中反应50分钟，冷却，加氢氧化钾甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，离心10分钟，精密量取上清液5ml，置25ml量瓶中，用 甲醇稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（SOP 03-031 00），在490nm的波长处分别 测定吸收度，计算，即得。
水飞标准操作作业指导书
ABC制药有限公司操作规程管理文件目录1 目的： (2)2 范围： (2)3 使用设备及操作标准 (2)4 职责 (2)5 内容 (2)6质量控制 (3)1目的：建立本文件使炮制工序的整个生产过程标准化、规范化、合理化，以确保中药饮片生产质量，生产过程的人员安全与设备安全。
2范围：本文件适用于《中国药典》2015版一部、《全国中药炮制规范》、《广西中药炮制规范》中需水飞的生品饮片的生产操作。
3使用设备及操作标准3.1操作人员按照《水飞SOP》对其进行操作。
4职责4.1操作人员：严格按本文件对中药饮片生产过程中需水飞的中药材进行操作和控制。
4.2QA现场监控员：监督和检查炮制工序的操作是否规范化、标准化、合理化。
5内容5.1生产用具的领取与班前检查5.2由操作人员在容器存放间及其它相关辅助房间领取能满足生产需求的盛药器具（如盛装用桶、口袋）、工具等，由中间站管理员发放，双方应核对领取物料的数量是否准确，盛药器具、工具是否为已清洁场物品与完好状况，与生产要求无误后填写《生产用具领发台帐》。
5.2.1操作人员将根据《中国药典》2015版一部、《全国中药炮制规范》、《中国药典》2015版一部、《全国中药炮制规范》、《广西中药炮制规范》炮制要求对药材进行炮制。
5.2.2开工检查：清场合格。
无与生产无关的指令及记录。
环境符合要求（饮用水、动力供应）水飞生产设备完好。
生产状态、设备状态、清洁状态标志明显。
QA现场监控员检查符合上述规定后认可，准予生产。
5.2.3炮制工序物料的领取：5.2.4炮制岗位操作人员凭《批生产指令》在中间站领取生产药材。
5.2.5领料时操作人员在领取时要与复核人、中间站管理员一起核对中药材的产品名称、批号切制程度。
5.2.6三方核对无误后操作人员领取中药材并与中间站管理员一起填写《物料进出中间站台帐》。
5.2.7操作人员将所领取的中药材和生产用具分别按管理要求放在蒸煮间规定位置。
5.2.8水飞操作5.2.9操作人员在“生产状态卡”上如实填写品名，批号，数量，开始生产时间，班次，岗位负责人在操作间门上挂有“生产状态卡”取下“已清场”状态标记。
水飞蓟素中活性黄酮的测定
总黄酮质量分数
水飞滨质量分数
平均值 变异系数 Χς
结论
对水飞蓟素采用 二硝基苯肼衍生后 再用 紫外分光光度法分析 不但操作过程十分繁琐 条件 难以控制 无法单独测得各个异构体的质量分数 而 且重复性较差∀ 采用高效液相色谱梯度淋洗法分析 水飞蓟素中的活性黄酮 能够将其中的异构体及杂 质完全分离 可以单独测得水飞滨的质量分数 方法
法以甲醇磷酸盐缓冲液为流动相直接进行分析 种
主要成分可完全分离 方法简单 快速 可作为分析
和控制水飞蓟素的有效手段∀
甲醇中 必要时加热 再用同一溶剂 甲醇 稀释
到
摇匀∀ 用移液管吸取
该溶液到
容量瓶中∀ 另外准备
的甲醇作空白∀
分别向上述样品溶液和空白甲醇中加入
新鲜
配制的 二硝基苯肼溶液 将 的 二硝基
制 但对同一批样品所测定的结果重复性极差 而且
该分析过程十分繁琐 只能测定总的黄酮质量分数
不能给出其中最为重要的成分水飞滨的数据∀ 因此
我们采用
方法进行了对比∀
高效液相色谱条件的选择
在实验中 分别改变流动相中甲醇与缓冲液的
比例 发现该化合物的分离对醇水比例十分敏 感∀
当流动相中甲醇的浓度增大时 活性组分
分离较好 但活性组分
与杂质不能完全分开
当流动相中甲醇浓度减小时
可与杂质完全分
线性回归方程与实验结果
在
梯度淋洗条件下 将不等量的水飞蓟
素标准对照品按 节方法分别配制成质量浓度
为 Ù 的溶液∀然后 分
别以水飞汀 水飞泞 水飞滨 水飞滨 异水飞滨
各自的质量浓度为横坐标 Ù 以各自的峰
苯肼溶解在
浓硫酸中 用甲醇稀释到
水飞蓟提取物中水飞蓟宾的含量测定
水飞蓟提取物中水飞蓟宾的含量测定目的：建立水飞蓟提取物中水飞蓟宾的含量测定方法。
方法：本实验采用Diamonsi（TM）C18（4.6mm×250mm，5？滋m）色谱柱；流动相为甲醇：水：冰醋酸=42：58：0.5；检测波长为288nm；每次进样量20？滋L；流速：0.8mL/min；结果：水飞蓟宾在2.12～64.36？滋g范围内与其峰面积呈良好线性关系。
回归方程是y=41676X+178737，R2=0.9984。
结论：本实验采用HPLC测定水飞蓟提取物中主要成分水飞蓟宾的含量，方法简便、结果准确、重现性好，可用于水飞蓟提取物中水飞蓟宾的含量测定方法。
标签：水飞蓟；水飞蓟宾；HPLC水飞蓟中黄酮类物质是自菊科植物水飞蓟种子中提取的药用有效成分，是一类以二氢黄酮醇与苯丙素类衍生物缩合而成的具有C-9取代基的黄酮木质素类化合物[1，2]。
其中主要成分有水飞蓟宾、异水飞蓟宾、水飞蓟宁、水飞蓟亭四种同分异构体。
其中水飞蓟宾含量最高，保肝活性最强[3，4]，是水飞蓟中黄酮类物质含量测定的标准物质[5，6]。
本文采用Diamonsi（TM）C18（4.6mm×250mm，5？滋m）色谱柱，以甲醇：水：冰醋酸=42：58：0.5为流动相；在288nm检测波长下，采用HPLC测定水飞蓟提取物中主要成分水飞蓟宾的含量，取得了较理想效果。
1 实验仪器与材料PL203电子天平（上海江仪仪器有限公司）；KQ-100E型超声波处理器（济南华舜仪器有限公司）；Waters 2695高效液相色谱仪（美国沃特世waters有限公司）；水飞蓟宾对照品（中国生物药品检验所）；水飞蓟黄酮类物质提取物（东宁县龙翔中药饮片有限公司）；其他试剂均为色谱纯。
2 方法与结果2.1 色谱条件本实验采用Diamonsi（TM）C18（4.6mm×250mm，5？滋m）色谱柱；流动相为甲醇：水：冰醋酸=42：58：0.5；检测波长为288nm；每次进样量20？滋L；流速：0.8mL/min；理论板数按水飞蓟宾峰计算应不低于4000。
水飞蓟素磷脂复合物面膜的制备及其含量测定_刘志刚
51第15卷 第6期 2013 年 6 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 15 No. 6 Jun .，2013水飞蓟为菊科植物水飞蓟SiLybum marianum（L.）Gaertn.的干燥成熟果实。
水飞蓟素是其主要活性成分，药理学研究表明水飞蓟素具有抗肝纤维化、抗肿瘤、抗炎等作用。
以其为原料的益肝灵片对急慢性肝炎、早期肝硬化、中毒性肝炎、脂肪肝及药物中毒性肝损伤及酒精性肝损害有较好的疗效，并取得了较好的市场效益。
但水飞蓟素难溶于水、口服吸收效果不理想、生物利用度低，影响了其临床疗效。
研究表明，将水飞蓟素制备成磷脂复合物，可提高水飞蓟素的溶解度和生物利用度。
以水飞蓟素磷脂复合物为原料制备面膜，基于其具有抗肿瘤、抗炎的药理作用，将新剂型与日化用品结合，综合开发利用，并建立了水飞蓟宾含量测定方法，保证了其质量。
1 仪器与试药高效液相色谱仪（Agilent 1100 系列：Agilent G1311A 泵、Agilent G1316A 紫外检测器、Agilent G1313A 自动进样器）；HH-S2数显恒温水浴锅（金坛市医疗仪器厂）；SL4001N 电子天平（上海民桥精密科技仪器有限公司）；超声波振荡器（功率100 W，频率40 kHz）；水飞蓟素（由惠州九惠制药公司提供）；大豆磷脂（天津西玛科技有限公司）；PVA-1788（Aladdin Chemistry Co. Ltd.）；羧甲基纤维素钠（广州市医药公司化学试剂玻璃仪器批发部）；甘油（天津市富宇精细化工有限公司）；尼泊金乙酯（天津汇英化学试剂有限公司）；维生素E（河南兴源化工产品有限公司）；氧化锌（天津市大茂化学试剂厂）；水飞蓟宾对照品（购自中国药品生物制品检定所，批号：110856-200604）；辅料均为药用级，乙腈为色谱纯（天津市康德科技有限公司），水为双蒸水，其它试剂为分析纯。
水飞蓟提取物质量要求-2023标准
水飞蓟提取物质量要求1 范围本文件规定了水飞蓟提取物的技术要求、检验方法、检验规则、包装、标签、运输、贮存要求。
本文件适用于以菊科植物水飞蓟Silybum marianum (L.)Gaertn的干燥成熟果实，经乙醇或乙酸乙酯提取、纯化和精制而成的提取物产品。
2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应版本适用于本文件，不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 4789.2 食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定GB 4789.3 食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数GB 4789.4 食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验GB 4789.10 食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验GB 4789.15 食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数GB 5009.3 食品安全国家标准食品中水分的测定GB 5009.4 食品安全国家标准食品中灰分的测定GB 5009.11 食品安全国家标准食品中总砷及无机砷的测定GB 5009.12 食品安全国家标准食品中铅的测定GB 5009.15 食品安全国家标准食品中镉的测定GB 5009.17 食品安全国家标准食品中总汞及有机汞的测定GB 5009.74 食品安全国家标准食品添加剂中重金属限量试验GB 5009.262 食品安全国家标准食品中溶剂残留量的测定《中华人民共和国药典（2020 版）》第四部通则2341 农药残留测定法3 术语与定义3.1 水飞蓟素水飞蓟素通常指的是水飞蓟中主要的几种主要水飞蓟黄酮，包括水飞蓟宾A、水飞蓟宾B、异水飞蓟宾A、异水飞蓟宾B、水飞蓟亭、水飞蓟宁六种物质，水飞蓟素含量为水飞蓟宾A、水飞蓟宾B、异水飞蓟宾A、异水飞蓟宾B、水飞蓟亭、水飞蓟宁六种物质含量的总和。
3.2 水飞蓟宾水飞蓟宾是水飞蓟宾A、水飞蓟宾B两种黄酮类物质的统称，水飞蓟宾的含量为水飞蓟宾A和水飞蓟宾B含量的总和。
水飞蓟素平衡溶解度及表观油水分配系数的测定
2
2． 1
方法与 、 12． 24 、 15． 30 、 16． 32 、 18． 36 μg·mL － 1 的水飞 蓟宾系列溶液。 按照紫外可见分光光度法在 285 nm 处测定吸光度。 以水飞蓟宾质量浓度 （ ρ， μg · mL － 1 ） 为横坐标， （ A ） 吸光度 为纵坐标进行线性回 r = 0 ． 999 4 。 归， 得线性方程 A = 0. 0453 ρ + 0 ． 0434 ， －1 表明水飞蓟宾质量浓度在 5． 10 ～ 18． 36 μg · mL 范围内与吸光度线性关系良好。
溶液稀释至刻度， 摇匀。按照紫外可见分光光度法 测定水飞蓟素在不同 pH 值溶液中的最大吸收波长 （ λ max ） 和吸光度（ A） ［12］， 结果见表 1 。 结果显示： pH 值 6． 8 以上， 最大吸收波长紫移 1 ～ 3 nm； 以 pH 3． 0 时的吸光度值最大。因此选择 pH 3． 0 作为测定 pH 值， 其余 pH 值溶液均调至 pH 3． 0 后再进行测定。 2 ． 2 ． 2 标准曲线的绘制 精密移取水飞蓟宾对照
水飞蓟素（ silymarin） 是从菊科植物水飞蓟果实 和种子中提取分离得到的类黄酮混合物， 其主要成 分水飞蓟宾具有保肝作用， 临床上主要用于治疗急 慢性肝炎、 酒精性肝损伤等， 是世界公认的护肝药 物
［1 ］
响产品的临床效果。目前水飞蓟素产品在国内外市 场上， 仅有 SFDA 批准的水飞蓟素原料药， 以及成药 水飞蓟宾葡甲胺片和水飞蓟宾胶囊、 德国 Madus 公 司生产的利肝素糖衣片和德国马博士大药厂生产的 ［2 － 3 ］ 。如何增加水飞蓟素的溶解度以提高其 利加隆
水飞蓟素胶丸的制备及其含量测定
水飞蓟素胶丸的制备及其含量测定
梁文权;赵航
【期刊名称】《华西药学杂志》
【年(卷),期】2004(19)4
【摘要】目的制备水飞蓟素胶丸 ,建立测定胶丸中水飞蓟宾含量的方法。
方法水飞蓟素原料制成微粉 ,研磨乳化后制丸 ,并用HPLC测定主要成分水飞蓟宾的含量。
结果胶丸符合中国药典标准 ;胶丸中水飞蓟宾的含量为6 2 .7mg·g-1,平均回收率为 97.5 % ,RSD =0 .80 % (n =6 )。
结论所制制剂工艺简单 ,有效成分的检测方法准确可靠。
【总页数】3页(P254-256)
【关键词】水飞蓟素胶丸;含量测定;保肝药物;色谱条件;HPLC测定
【作者】梁文权;赵航
【作者单位】浙江大学药学院;杭州泰士生物科技有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】R94;R917
【相关文献】
1.氯考胶丸的制备及含量测定 [J], 李建春;李曾欣
2.水飞蓟素明胶微球的制备及含量测定 [J], 刘海燕; 萧秀云; 王润珍; 谢志辉
3.HPLC法测定水飞蓟素胶囊中水飞蓟素异构体的含量 [J], 曹志胜;杨晓云;吴爱英;宿洁
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目的：建立一个水飞蓟素检验操作规程。
范围：水飞蓟素检验。
责任：检验员、质检科长、QA监控员、质保科长、质量总监。
内容：
［性状］本品为淡黄色至棕色的松散粉末。
本品在甲醇、乙醇、丙酮、醋酸中溶解，在水中不溶。
［鉴别］
1仪器设备：电子天平、量筒、试管、滴管。
2试剂溶液：甲醇、锌粉、盐酸、醋酸铅、试液。
3操作方法：取本品0.1g，加甲醇10ml溶解，滤过，滤液做如下实验：
（1）取滤液1ml，加锌粉少许及盐酸数滴，即显玫瑰红色。
（2）取滤液3ml，加醋酸铅试液1ml振摇，即产生黄色沉淀。
［检查］乙酯中不溶物
1仪器设备：电子天平、恒温水浴锅、4号垂熔玻璃坩埚、量筒、锥形瓶、减压干燥箱、蒸发皿。
2试剂溶液：醋酸乙酯。
3操作方法：
取本品约0.5g，精密称定，加醋酸乙酯50ml，置热水浴中加热20分钟，并时时振摇使溶解，趁热用已恒重的4号垂熔玻璃坩埚滤过，容器和滤渣用醋酸乙酯20ml分次洗涤，在105℃干燥至恒重，精密称定，取本品在60-70℃减压干燥4小时，减失重量不得超过4.0％。
［含量测定］
1仪器设备：电子天平、量瓶、移液管、紫外分光光度仪
2试剂溶液：无水乙醇。
3操作方法：
精密称取本品约15mg，置50ml量瓶中，加无水乙醇溶解后，加至刻度，摇匀，精密量
取5ml，置100ml量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，照“紫外分光光度法操作规程”，在288±1nm的波长处测定吸收度，按C25H22O10的吸收系数(Ecm)为471计算，即得。
本品按干燥品计算，含水飞蓟素以水飞蓟宾计算，不得少于70.0％。
A ×100
471
―――――――×10×100%
100×g
A：供试品的吸收度。
471：为吸收系数。
g：为供试品的重量（g）。