大赛路手性柱Q&A及手性分离经验

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分离柱类型

分离柱类型

用途
保护柱柱芯(×3) 分析柱 分析柱
内径 (mm) 4.0 4.6 4.6
长度 (mm)
10 150 250
填料粒径 (μm) 5 5 5
微径柱
2.1 150
5
半制备保护柱
10
20
5
半制备柱
10 150
5
半制备柱
20 250
5
CHIRLPAK® IC
5 μ 硅胶表面共价键合有纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)
100:0 到
50:50
极性溶剂
CHIRALCEL® OF,OG
100:0 到
80:20 100:0-85:15
和 40:60-0:100
CHIRALCEL® OF,OG CHIRALPAK® AD
甲醇 乙醇 或者两者的混合物
CHIRALPAK® AD(-H),AS(-H)
CHIRALCEL®
乙腈 或者 乙腈与醇类的混合物
微径柱
4.6 150 4.6 250
2.1 150
(μm) 5 5 5
5
83337 CHIRALPAK® IC
半制备保护柱
10
20
5
83335 CHIRALPAK® IC
半制备柱
10 150
5
83345 CHIRALPAK® IC
半制备柱
20 250
5
CHIRALPAK® 和CHIRALCEL®
大赛璐多糖衍生物正相手性柱
19145
CHIRALPAK® AS /SFC
SFC 半制备柱 20
250
10
CHIRALPAK® AD,AS ; CHIRALCEL® OD, OJ这四根手性柱应用最广泛,加起 来能分离 80%以上的手性化合物。

大赛璐手性柱使用注意事项

大赛璐手性柱使用注意事项

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Part. 1-5
正相柱的冲洗与保存
实验完成后:如流动相中有酸性或碱性添加剂,先用不加添加剂的同 比例流动相冲洗柱子(20倍柱体积),再用出厂保存溶剂冲洗保存( 20倍柱体积)。比如ADH柱实验用的流动相是正己烷:乙醇:二乙 胺=70:30:0.1,用完了以后先用正己烷:乙醇=70:30冲洗,最后用正 己烷:异丙醇=90:10冲洗保存。 柱子被污染:按照大赛璐《多糖涂覆型手性柱(正相流动相)冲洗方 法》进行冲洗 注意:醇的黏度大,注意冲洗时的流速; AYH不可以用100%异丙醇冲洗,否则柱效会下降,但这种损 伤是可修复的,用乙醇将异丙醇从柱子中置换出来即可恢复柱效。
B.仪器当前流动相中含有一些会破坏柱子的溶剂(如乙酸乙酯、二氯甲烷和四氢呋喃等) ,仪器先不接柱子,接上两通
1. 用异丙醇或乙醇冲洗所有管路 (至少60ml) -> 置换掉对柱子有损伤的溶剂 2. 用实验所需流动相冲洗所有管路(约30ml) -> 置换醇 C.仪器当前流动相是传统的非水流动相(如正己烷、异丙醇和乙醇),仪器先不接柱子, 接上两通,直接用实验所需流动相冲洗所有管路(约30ml)即可
CHIRALPAK® AD-3/AD-H/AD CHIRALPAK® AS-3/AS-H/AS CHIRALPAK® AY-3/AY-H CHIRALPAK® AZ-3/AZ-H CHIRALCEL® OD-3/OD-H/OD CHIRALCEL® OJ-3/OJ-H/OJ CHIRALCEL® OZ-3/OZ-H CHIRALCEL® OX-3/OX-H CHIRALCEL® OB-H/OB CHIRALCEL® OC-H/OC CHIRALCEL® OA CHIRALCEL® OG CHIRALCEL® OF CHIRALCEL® OK

大赛璐手性分析进展

大赛璐手性分析进展
mV Detector A Ch2:220nm 7 .2 9 1 2.5 5.0 7.5 125 100 75 50 25 0 -25 0.0 10.0 min 8 .2 3 1
14
一、新型固定相的开发及应用
• 选择性优势 • 苯甲酸仲丁酯 Hexane/IPA=99/1 单峰 • AY-H EtOH/MeOH=95/5 分离度1.8
O
trans-Stilbene oxide
26
Peak-1
24
40
Peak-2
OZ-H
OZ-H
35
22
20 30
HETP (µm)
18
16
HETP (µm)
25
14
OZ-3
20
12
OZ-3
15
10
8
6 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5
10 0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5
HO COOH O
Thalidomide
O
CH 3O N CH 3O OMe
N O O N H
O
OMe
Laudanosine
0
12
24
36
48
60
0
12
24
36
48
60
0
12
24
36
48
60
Retention time (second)
Retention time (second)
Retention time (second)
• 柱效更高 • 相同保留时间,分离度更大
O N O NH
2.3
Rs=3.08

大赛璐柱子使用

大赛璐柱子使用

1、OD柱与ODH柱是不是一种柱子啊,另外还有AD与ADH,OJ与OJH关于手性柱,OD柱与ODH柱是不是一种柱子啊?OD柱与ODH柱是不是一种柱子啊,另外还有AD与ADH,OJ与OJH,谢了柱子的型号不同说明他的手性填充物不同。

OD和OD-H的区别是相同的填充物,OD-H的填充密度大,更紧,效果更好。

CHIRALPAK AD-H柱和CHIRALPAK AD是什么区别?CHIRALPAK AD-H柱和CHIRALPAK AD的填料种类是一样的,表面涂敷的都是直链淀粉-三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯),手性选择性基本相同。

只不过填料的粒径不一样,CHIRALPAK AD-H是5 μm,CHIRALPAK AD是10 μm。

CHIRALPAK AD-H能代替CHIRALPAK AD并且CHIRALPAK AD-H柱效更高。

2.手性柱谱图中异构体的分离度下降了,这可能是什么原因,该怎么办?分离度下降的原因有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化,或者色谱柱受损柱效发生了变化。

首先查看是否是因为温度、流动相成分等外在因素发生了变化导致分离度下降,如果排除了各种外在因素就有可能是分析柱本身的柱效下降导致的。

如果分离度在短时间内急剧下降伴随柱压上升,可能是有强极性溶剂损害了柱子;如果分离度在长时间内慢慢下降,可能是柱头受污染或柱头塌陷,需要更换保护柱或者更换分析柱。

3.正相手性色谱柱柱压高了怎么办?手性柱压力高的原因有可能是流动相中醇的含量太高,或者液相流路中有堵塞,或者柱头有样品析出,或者填料被压缩柱头塌陷等。

针对不同的原因请有针对性的采取相应的措施。

如果是流动相中醇含量太高,则需要升高温度或者降低流速。

如果液相流路中有堵塞需要排除堵塞。

如果柱头有样品析出则需要使用流动相溶解样品以及样品预处理除掉样品中易析出的成分。

如果填料被高压压缩柱头塌陷,则需要重新购买新的手性柱。

4.正相手性柱进了水后,柱子会不会损坏?正相手性色谱柱AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H一旦进了水,柱压会升高,但是只要柱压不超过柱压上限,柱子就不会损坏。

大赛璐手性柱-HPLC操作与维护

大赛璐手性柱-HPLC操作与维护
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2.多糖涂敷型正相手性柱
D Normal Phase 多糖 O.,LT CHIRALPAK® AD-3/AD-H/AD A)C CHIRALPAK® AS-3/AS-H/AS IN CHIRALPAK® AY-3/AY-H (CH CHIRALPAK® AZ-3/AZ-H S CHIRALCEL® OD-3/OD-H/OD IE CHIRALCEL® OJ-3/OJ-H/OJ 涂敷 OG CHIRALCEL® OZ-3/OZ-H DAICEL CHIRAL T正EC相HNOL CHIRALCEL® OX-3/OX-H

柱子与检测器之间
16
2.1多糖涂敷型正相手性柱-使用前
※ 溶剂切换 .,LTD A.仪器当前流动相是水相流动相(如水/缓冲液-乙腈/甲醇等),仪器先不接柱子,接上两通 INA)CO 1. 用水冲洗仪器所有管路(至少60ml) H -> 除去有机相和缓冲盐溶液 S(C 2. 用异丙醇或乙醇冲洗所有管路 (至少60ml) IE -> 置换水 OG 3. 用实验所需流动相冲洗所有管路(约30ml) OL -> 置换醇 CHN B.仪器当前流动相中含有一些会破坏柱子的溶剂(如乙酸乙酯、二氯甲烷和四氢呋喃等),仪 TE 器先不接柱子,接上两通 IRAL 1. 用异丙醇或乙醇冲洗所有管路 (至少60ml) CH-> 置换掉对柱子有损伤的溶剂 EL 2. 用实验所需流动相冲洗所有管路(约30ml) DAIC -> 置换醇
柱子描述:例如AD-H,5μm硅胶表面涂敷有直链 淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)
直链 淀粉
纤维素
×
丙酮、氯仿、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、 乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃等
√ 正己烷、异丙醇、乙醇、甲醇、乙腈

大赛璐多糖衍生物反相手性柱

大赛璐多糖衍生物反相手性柱

大赛璐多糖衍生物反相手性柱产品概述:CHIRALPAK AD-H,AS-H和CHIRALCEL OD-H,OJ-H在正相领域中获得了广泛的应用,大赛璐同时也开发了相应的反相手性柱。

与正相柱相比较,反相柱涂敷的手性聚合物与正相柱相同,但是所用的硅胶不同。

反相高效液相色谱手性系列柱CHIRALPAK AD-RH、CHIRALPAK AS-RH、CHIRALCEL OD-RH和CHIRALCEL OJ-RH是分别将淀粉-3,5-二甲苯基氨基甲酸酯、淀粉-s-a-甲基苄基氨基甲酸酯、纤维素-3,5-二甲苯基氨基甲酸酯和纤维素-4-甲苯甲酸酯涂敷在5μm的硅胶表面。

反相柱也适合应用于LC/MS中。

CHIRALPAK AD-3R、CHIRALPAK AS-3R、CHIRALCEL OD-3R和CHIRALCEL OJ-3R 是填料粒径为3μm 的反相手性色谱柱,使用了高通用性的手性选择剂,可对各类化合物进行光学拆分。

由于能实现很高的理论塔板数,即使是短柱也可以在缩短分析时间的基础上显示出优异的分离能力。

更小粒径填料的优点:更高效更快出峰时间优化HPLC系统一般而言,这四种反相手性柱的应用范围和手性分离性能与它们各自相应的正相柱(CHIRALPAK? AD、CHIRALPAK? AS、CHIRALCEL? OD和CHIRALCEL? OJ)相似,但需要说明的是反相柱里的色谱填料基质与正相柱有所不同。

为避免损坏手性柱,正相与反相两类手性柱不宜混用。

反相柱使用水-有机溶剂流动相,适合分析水溶性样品(比如生物活性样品),或者对pH有特定要求的样品。

要避免极端pH,因为这样会损伤固定相的硅胶基质。

反相柱主要适用于下列分析对象:1. 使用含水的流动相进行手性拆分;2. 手性拆分水溶性样品;3. 离解或可离解样品的拆分;另外,反相手性柱在必要时可以与通常的非手性普通反相柱(如ODS柱)串联使用,以便使待分离组分与样品中的其他杂质分开。

大赛璐if色谱柱说明书

大赛璐if色谱柱说明书

大赛璐if色谱柱说明书一、产品概述大赛璐if色谱柱是一种优质、高效的液相色谱分析仪器配件。

色谱柱内填充着特制的大赛璐if固定相,可广泛应用于药物分析、环境监测、食品安全等领域。

本说明书详细介绍了大赛璐if色谱柱的性能特点、使用方法和注意事项,以帮助用户正确高效地使用该产品。

二、产品特点1. 高效分离能力:大赛璐if色谱柱填充物具有独特的表面性质,能够有效分离复杂混合物中的成分,提高分析效果。

2. 快速分析速度:采用高效的填充材料和优化的柱片结构,大赛璐if色谱柱能够在短时间内完成复杂样品的分析,提高工作效率。

3. 耐酸碱性能强:大赛璐if色谱柱的填充物具有良好的耐酸碱性能,能够适应不同样品的酸碱条件。

4. 耐高温性能好:大赛璐if色谱柱能够在高温下保持稳定的性能,提供长时间的使用寿命。

三、使用方法1. 样品前处理:在使用大赛璐if色谱柱进行分析前,需要对样品进行前处理以去除杂质和提纯样品。

2. 柱片连接:将色谱柱与色谱分析仪器连接,在连接过程中要保证连接处密封严密,以避免柱片泄漏。

3. 流动相准备:根据分析要求,准备好合适的流动相,并将其加载到色谱仪中。

4. 参考标准品:准备好参考标准品,在分析过程中进行检测和校准。

5. 样品加载:将经过前处理的样品加载到色谱仪中,控制好样品的注入速度和量。

四、注意事项1. 色谱柱存储:大赛璐if色谱柱应存放在阴凉、干燥的地方,避免阳光直射和高温。

2. 柱片清洗:每次使用完毕后,应将色谱柱进行清洗,以避免污染和交叉感染。

3. 流动相选择:根据样品的性质和分析要求,选择合适的流动相,并进行必要的调整和优化。

4. 柱片更换:当发现色谱柱分离效果下降或柱片出现损坏时,应及时更换新的色谱柱。

5. 操作规范:在使用大赛璐if色谱柱时,应严格按照说明书和操作规范进行操作,以确保分析结果的准确性。

五、售后服务大赛璐if色谱柱提供全面的售后服务,包括产品技术支持、常见问题解答以及售后维修等。

大赛璐手性柱注意事项

大赛璐手性柱注意事项

避免将手性柱暴露在强磁场或电场中,以防影响分离效 果。
使用后应将手性柱妥善存放,避免过度震动或碰撞。
03
使用过程中的注意事项
操作步骤
确保手性柱的安装稳固,避 免在使用过程中发生倾斜或 移动。
流动相的流速应保持稳定, 避免过快或过慢,以免对手 性柱造成损害。
在使用前,应先对手性柱进 行充分的平衡和排气,确保 柱内无气泡。
避免与强氧化剂接触
手性柱应远离强氧化剂和腐蚀性物质,以防损坏。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
使用过程中,应定期检查手 性柱的性能,如有问题应及 时处理。
安全防护
使用手性柱时应佩戴化学防护 眼镜和实验服,防止意外伤害

避免使用带有腐蚀性和氧化性 的流动相,以免对手性柱造成
损害。
在使用过程中,应保持室内通 风良好,防止有害气体积累。
对于易燃、易爆或有毒的试剂 和气体,应严格按照安全规定 进行操作。
适用范围
01
02
03
手性分离
适用于各种手性化合物的 分离,如氨基酸、糖类、 药物等。
生物活性物质分离
可用于生物活性物质如酶、 抗体和细胞等的分离纯化。
复杂样品分离
适用于复杂样品中手性化 合物的分离,如代谢产物、 天然产物等。
操作原理
手性识别
大赛璐手性柱通过手性固 定相与手性化合物的相互 作用,实现对手性分子的 拆分。
柱效降低
总结词
柱效降低可能是由于固定相流失、柱污染或长时间使用导致的。
详细描述
为解决柱效降低的问题,可以检查色谱柱的固定相是否流失,对色谱柱进行适当的清洗和维护。如果色谱柱使用 时间过长,可能需要更换新的色谱柱以恢复其性能。同时,确保流动相的质量和清洁度也是避免柱污染的关键措 施。
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优化手性化合物的分离方法时,如何增加分离选择性?正相手性色谱柱上增加分离度的方法有:降低流动相中醇的含量、降低柱温、更换流动相中醇的种类、更换手性柱。

建立手性化合物的分离方法时,选定了正相手性柱之后,如何选择流动相?流动相首选正己烷和异丙醇的混合溶液,根据样品的酸碱性决定是否添加酸碱性添加剂。

如果是中性样品则不需要添加添加剂,如果是酸性样品需要添加三氟乙酸或乙酸,如果是碱性样品需要添加二乙胺,添加剂的量一般为0.1 %。

流动相中醇的含量一开始可以使用30%,根据样品出峰的快慢和分离度再调整醇的含量。

流动相中醇的种类一般使用异丙醇,也可以使用乙醇。

建立手性化合物的分离方法时,如何选择手性柱?根据文献或者参考大赛璐公司的《应用指南》中结构类似物的分离方法,选择手性柱;另外可以寄少量消旋品,大赛璐公司能免费为您选择分离最佳的手性柱。

手性柱使用完了之后如何清洗保存?正相手性色谱柱如果使用正己烷和醇类的混合流动相之后,只需要用正己烷/异丙醇=90/10(v/v)的保存溶液冲洗30 min即可。

反相手性色谱柱如果使用了水溶液和乙腈的混合流动相之后,只需要用水/乙腈=70/30(v/v)的保存溶液冲洗30 min即可。

CROWNPAK® CR(+)柱流动相中甲醇含量有要求吗?CROWNPAK® CR(+)柱流动相中甲醇含量为0%-15%,甲醇的含量一旦超过15%,CROWNPAK® CR(+)柱会被损害。

正相手性柱进了水后,柱子会不会损坏?正相手性色谱柱(例如AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H)一旦进了水,柱压会升高,但是只要柱压不超过柱压上限,柱子就不会损坏。

只需用无水乙醇低流速(0.1-0.2 ml/min)将水全部充分置换出来,再用正相流动相低流速(0.1-0.2 ml/min)将乙醇全部置换出来就能继续使用该正相手性色谱柱。

样品的保留时间漂移,可能是哪些原因,如何解决?1、温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定。

2、流动相发生变化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。

3、柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡。

该情况在MA(+)柱上出现较多。

4、酸碱性的样品,有时在中性条件下能分开,峰形尚可,但保留时间会漂移;加入相应的酸碱添加剂即可。

5、流动相污染。

溶于流动相中的少量污染物可能慢慢富集到色谱柱上,从而造成保留时间的漂移。

需清洗色谱柱,流动相和样品溶液尽量现用现配。

(小极性样品的溶解)正相方法分析布洛芬时,有时峰形难看甚至达不到基线分离,什么原因?如何解决?该方法为Hexane/IPA=99/1,极性很小;若样品不是溶解在流动相中,则结果很可能达不到基线分离。

采用流动相溶解即可。

通常手性分析时,若流动相为H/I,H/E体系,且Hexane不超过85%,则溶解样品时可用流动相,也可用100%醇直接溶解。

谱图通常差别不大。

但是对小极性样品和流动相,尤其hexane超过90%时,一定注意用流动相溶解。

新柱CHRALPAK IA/IB/IC/ID/IE与原来的大赛璐手性柱有什么区别?CHRALPAK IA/IB/IC/ID/IE是将多糖衍生物共价键合在硅胶上,而大赛璐原来的手性柱固定相都是将多糖衍生物涂敷在硅胶表面的。

正因为是共价键合,所以CHRALPAK IA/IB/IC/ID/IE柱能使用任何液相流动相,比如四氢呋喃、氯仿、丙酮、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯等。

CHRALPAKIA/IB/IC/ID/IE与大赛璐原有的正相柱相比,扩大了溶剂选择的范围,增加了新的分离选择性,在原来大赛璐手性色谱柱上分不开的化合物有可能在CHRALPAK IA/IB/IC/ID/IE上得以分开。

键合型手性柱CHRALPAK IA/IB/IC/ID/IE的再生方式?在再生前请先冲洗手性柱,以防止残留物对于再生效果的影响。

IA柱修复方法:先用EtOH小流速冲洗30min,再用DMF,小流速冲洗3小时,然后EtOH过渡,验柱。

若效果不好,再用EtOH 冲洗30min,然后THF冲洗2小时。

IB柱,IC柱修复方法:用乙酸乙酯冲洗30min-120min,在室温下保存2天或更久。

验柱。

CHIRALPAK® AD-H、CHIRALPAK® AS-H、CHIRALCEL® OD-H、CHIRALCEL® OJ-H四款最常用正相色谱柱的区别是什么?区别是固定相的种类不同。

CHIRALPAK AD-H、AS-H的硅胶表面涂敷的是直链淀粉衍生物;CHIRALCEL OD-H、OJ-H的硅胶表面涂敷的是纤维素衍生物。

CHIRALPAK AD-H的硅胶表面涂敷的是直链淀粉-三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯);CHIRALPAK AS-H硅胶表面涂敷有直链淀粉-三[(S)-α-甲基苄基氨基甲酸酯;CHIRALCEL OD-H硅胶表面涂敷有纤维素-三[3,5-二甲苯基氨基甲酸酯]; CHIRALCEL OJ-H硅胶表面涂敷有纤维素-三[4-甲基苯甲酸酯]。

不同种类的多糖衍生物决定了这些手性柱的分离对象各不相同,既相互包含,又相互补充。

CHIRALPAK® AD-3柱和CHIRALPAK® AD-H柱和CHIRALPAK® AD是什么区别?CHIRALPAK® AD-3、CHIRALPAK® AD-H柱和CHIRALPAK® AD的填料种类是一样的,表面涂敷的都是直链淀粉-三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯),手性选择性基本相同。

只不过填料的粒径不一样,CHIRALPAK® AD-3是3μm,CHIRALPAK® AD-H是5 μm,CHIRALPAK® AD是10 μm。

CHIRALPAK® AD-3的柱效最高。

CHIRALPAK AD-H柱和CHIRALPAK AD是什么区别?CHIRALPAK AD-H柱和CHIRALPAK AD的填料种类是一样的,表面涂敷的都是直链淀粉-三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯),手性选择性基本相同。

只不过填料的粒径不一样,CHIRALPAK AD-H 是5 μm,CHIRALPAK AD是10 μm。

CHIRALPAK AD-H能代替CHIRALPAK AD并且CHIRALPAK AD-H柱效更高。

正相手性色谱柱中保存液是什么?正相手性色谱柱AD-H/AD-3、AS-H/AS-3、OD-H/OD-3、OJ-H/OJ-3中的保存液是正己烷/异丙醇=90/10(v/v)。

其它手性色谱柱的保存液请查阅使用说明书上的说明。

正相手性色谱柱使用前需要注意什么?将正相手性色谱柱AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H接上液相色谱仪之前先要保证液相色谱系统中的所有管路均为正相流动相。

如果液相系统里面是反相溶液,比如水/乙腈=50/50(v/v)。

那么需要先用无水乙醇或者无水异丙醇冲洗液相的所有管路(包括所有溶剂入口、六通阀、检测器等),然后用正相流动相冲洗液相的所有管路,最后再接上正相手性色谱柱;如果液相系统的反相流动相中含有缓冲盐,要先用纯水冲洗HPLC系统,然后用无水乙醇或者无水异丙醇冲洗液相的所有管路,最后用正相流动相冲洗。

正相手性色谱柱的柱压范围是多少?正相手性色谱柱(例如:AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H)中的柱压绝对不能超过9.8 MPa,最好不超过5 MPa。

所以建议在实际使用过程中,在液相仪器上设置泵的保护压力为6 MPa,这样一旦系统的压力超过6 MPa,泵就会自动停止运行,保护手性柱不受高压破坏。

蛋白质柱AGP的使用条件和限制?∙IPA含量最好低于25%,其他有机相含量最好低于15% λ∙建议使用温度:20℃-25℃λ∙ pH范围:4-7 λ∙缓冲盐溶液浓度不超过100mM λ∙AGP的负载量不大,通常情况下配置样品浓度0.05-0.5mg/ml,进样量1µl-20µl比较合适。

不同样品,可以适度调整。

负载过大时将导致分析结果不准确,表现为分离度显著下降和柱效降低。

使用手性柱时若柱压过高,会对柱子有影响吗?另外,柱压过高是什么原因造成的呢?有什么解决办法吗??长期超压会引起柱头塌陷,反压上升,柱效下降。

原因:λ∙流动相或样品溶液过滤不彻底,固体颗粒堵塞管路或柱头,会引起柱压过高。

λ∙样品中成分在柱头析出或强烈吸附,会引起柱压升高。

λ∙流速过快,会引起柱压过高,特别是当使用粘度高的溶剂,如IPA, EtOH,流速应控制在0.1-0.3 ml/min解决办法:λ∙每种柱子有特定的承压范围,请仔细参照相应的《色谱柱说明书》。

λ∙彻底过滤流动相及样品溶液。

λ∙样品预处理λ∙更换流动相时,或者刚把柱子刚接上仪器的时候,逐步增加流速λ∙仪器设定保护柱压化合物在手性柱中的“残留效应”经常会对影响手性柱的分离度和出峰时间等,该如何处理?如何冲洗?残留物在普通流动相中可长时间地稳定保留1.用醇洗涤可除去大部分的碱性残留物2.用酸洗涤也可除去碱性残留物3.用碱洗涤可除去酸性残留物推荐分开使用酸性条件手性柱和碱性条件手性柱手性柱谱图中异构体的分离度下降了,可能是什么原因,该怎么办?分离度下降的原因有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化,或者色谱柱受损柱效发生了变化。

首先查看是否是因为温度、流动相成分等外在因素发生了变化导致分离度下降,如果排除了各种外在因素就有可能是分析柱本身的柱效下降导致的。

如果分离度在短时间内急剧下降伴随柱压上升,可能是有强极性溶剂损害了柱子;如果分离度在长时间内慢慢下降,可能是柱头受污染或柱头塌陷,需要更换保护柱或者更换分析柱。

手性柱谱图中的峰出现裂分,可能是什么原因,该怎么办?峰裂分的原因有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化,或者色谱柱受损柱效发生了变化。

有时样品溶液浓度太高,进样量太大也会裂缝,这种情况只需减少浓度进样量即可。

如果排除了各种外在因素,那么色谱柱本身的原因可能是柱头被污染,或者柱压太高导致柱头塌陷。

柱头污染的话,可以按照说明书采用不同的溶剂溶剂冲洗色谱柱,最好是反方向冲洗;或者更换保护柱。

如果是压力太高导致柱头塌陷,那么除了增补填料,基本没有其他方法补救了,只能更换色谱柱。

基线不稳定可能是哪些原因,如何解决?1.仪器刚从反相置换到正相系统时,基线会不稳定,只需要多平衡一会儿即可。

2.检测器污染。

卸下检测器,更换透镜;或者取出透镜,用甲醇、异丙醇、水或其他溶剂(根据该仪器平时的使用情况而定)超声清洗。

安装时注意透镜的方向,一面是平面,一面凸透。

3.确认使用的两元(或三元四元)流动相彼此互溶性良好。

4.确认正使用的流动相和仪器之前刚用过的流动相彼此互融;若不互融,需要选择合适的溶剂过渡。

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