手性色谱分析
手性色谱法
阿替洛尔最佳色谱条件及色谱图
流动相：正己烷-乙醇-二乙胺 –冰醋酸 (80:20:0.1:0.1，v / v / v / v) 流速：0.6mL· min-1 柱温：20℃ 检测波长：230nm
二、手性流动相添加剂法 （一）拆分原理 1.流动相中手性试剂与对映体形成非对映 配合物，在固定相中保留时间和分配不同而 拆分。 2.手性试剂吸附在柱上形成动态的手性固 定相，对映体与之作用不同而拆分。
手性HPLC法
利用手性固定相或含手性添加剂的流 动相分离、分析立体异构体的色谱法。
直接法 手性固定相法(使用手性柱) 手性流动相添加剂法(非手性柱)
间接法—手性衍生化试剂法(非手性柱)
一、手性固定相法
• • • • • • • • • 纤维素手性固定相 淀粉手性固定相 环糊精手性固定相 刷型手性固定相 大环抗生素手性固定相 手性配体交换色谱 蛋白质类 冠醚类 合成手性聚合物类
2.大环抗生素手性固定相（利托菌素、万古霉素、替考拉宁、利 福霉素） 3.蛋白质手性固定相（α—酸性糖蛋白，AGP；人血清白蛋白。 HAS；牛血清白蛋白，BSA：纤维素二糖水解酶） 特点：
(1)操作条件苛刻。（2）适用范围广。（3）主要在反相条件下
分离，流动相为近似生理条件的缓冲溶液和有机溶剂。
有关分离实验
（二）优点
1.使用常规色谱柱;2.手性添加剂选择范围宽；3.可在柱后收集纯
异构体。 （三）缺点 1 .手性添加剂消耗大；2.拆分方法的建立比较困难；3.系统平衡 时间长；4.拆分制备时需分离手性添加剂。 （四）常用的手性添加剂 离子对试剂，配体交换试剂，蛋白质，环糊精及冠醚包合试
剂和手性氢键作用试剂
（二）常用的手性衍生化试剂
1.手性羧酸类（酰氯，黄酰氯，酸酐和氯甲酸酯） 用于衍生手性醇，胺，氨基酸 2.手性胺类( 苯乙胺，二甲氨基萘乙胺和対硝基苯乙胺) 用于羧酸,N-保护氨基酸和醇类药物
手性色谱分析Dr.Yuan
AD，AS，OD，OJ
手性聚合物固定相Chiralcel柱类型与应用
手性聚合物固定相Chiralcel柱类型与应用
柱型号
固定相，官能团
Chiralcel OA
纤维素三乙酯
Chiralcel OB
纤维素三苯甲酸酯
Chiralcel OC
纤维素三苯氨基甲酸酯
Chiralcel OD 纤维素（3，5-二甲苯基氨基甲酸酯）
概念
• 许多药物中存在着分子组成与构造完全相同但分 子的立体结构不同的化合物，他们是立体异构体， 不能完全叠合但能互为镜像，（如左手与右手）， 这就是手性(chirality)。
O
N
O
NH
O
O
沙利度胺（反应停）
手性药物
• 药物作用的靶分子都是手性的，因此药物分子与靶分子的 不对称性必须相匹配（手性识别－手与手套）。
Chiralcel OE
纤维素二苄醚
Chiralcel OF 纤维素三（对氯苯基氨基甲酸酯）
Chiralcel OG 纤维素三（对甲苯基氨基甲酸酯）
Chiralcel OJ
纤酯
Chiralcel AD 淀粉三（3，5-二甲苯基氨基甲酸酯）
Chiralcel AS 淀粉三（S）-1-苯乙基氨基甲酸酯）
Chiralcel OT(+)
聚三苯甲基乙丁烯酸酯
Chiralcel O(+)
聚吡啶二苯甲基乙丁烯酸酯
拆分化合物类型 脂肪酸族小分子化合物 脂肪酸族和芳香族小分子化合物
环戊烯酮类 生物碱，胺，莨菪碱，β－受体拮抗剂
芳香化合物 β－内酰胺，生物碱，二氢吡啶
冠醚固定相结构
大环抗生素型（Macrocyclic antibiotics）
手性高效液相色谱法
手性高效液相色谱法手性药物对映体在人体内与受体、酶等生物大分子互相作用，展现出复杂的对映体挑选性，进一步表现为不同的药理作用、代谢过程和毒性反应。
对于手性药物，可能其中一个对映体活性高、疗效好，为活性对映体(优对映体)；另外的活性低甚至没有活性的为劣对映体。
因为劣对映体没有药效或药效较低，甚至可能产生严峻的不良反应，基于此，FDA 于1992年领先发布了手性药物指导原则，我国亦于2006年颁布了《手性药物质量控制讨论指导原则》。
为了评价手性药物的生物活性，监测对映体的光学纯度，建立和进展迅速精确的药物对映体分别办法具有重要的意义。
手性高效液相色谱法通常分为挺直法和间接法。
间接法又称手性衍生化试剂法(chiral derivatization reagent, CDR)，是将对映体与手性光学试剂反应，生成一对非对映异构体之后以常规固定相分别，因此是对手性衍生物的非手性分别。
而挺直法则是采纳手性固定相法(chiral stationary phase, CSP)或将手性化合物加入到流淌相中，再用常规固定相分别的手性流淌相法(chiral mobile phase, CMP)。
手性固定相法因其用法简便快捷、重复性好、精确度高、应用范围广而倍受青睐。
一、手性色谱柱的分类目前，已商品化的手性固定相有100多种，按照手性固定相和溶剂的互相作用机制，Irving Wainer首次提出了手性色谱柱的分类体系：第1类：通过氢键、π-π作用、偶极-偶极作用形成复合物；第2类：既有1类中的互相作用，又存在包埋复合物。
此类手性色谱柱中典型的是由纤维素及其衍生物制成的手性色谱柱；第3类：基于溶剂进入手性空穴形成包埋复合物。
这类手性色谱柱中最典型的是环糊精型手性柱，另外冠醚型手性柱和螺旋型聚合物，如聚(苯基甲基甲基丙烯酸酯)形成的手性色谱柱也属于此类；第4类：基于形成非对映体的金属络合物，是由Davankv 开发的手性分别技术，也称为．手性配位交换色谱(CLEC)；第5类：蛋白质型手性色谱柱，手性分别是基于疏水互相作用和极性互相作用得以实现的。
手性色谱分析..
1手手性性高高效效液液相相色色谱谱法法**手手性性药药物物分分析析的的概概念念 **常常用用手手性性高高效效液液相相色色谱谱法法 手手性性衍衍生生化化试试剂剂法法 手手性性固固定定相相法法 手手性性流流动动相相添添加加法法2手手性性的的概概念念：：一一种种镜镜像像反反射射的的对对称称性性3手性分子：组成相同但空间结构上互成镜像的分子，称之为对映异构体。
分子结构中含有不对称碳原子是最常见的手性结构。
根据对偏振光的作用不同可分为R、S体，两者的等量混合物称之为消旋体。
OH COOHHCH3OHCOOHHCH34Mirror Mirror手手性性异异构构体体在在药药理理学学效效应应上上的的差差异异 ● Pfeiffer 规则：● 对映异构体之间的生物活性存在着差异； ● 不同的对映体之间活性的差异是不同的；当手性药物的有效剂量越低，即药效强度越高时，则对映体之间的药理作用的差别越大。
外消旋体和其两种单一对映体是不同的3种实体！ 5对对映映体体与与生生物物大大分分子子的的三三点点作作用用c abdabd cαγβαβγ手性分子的a 、b 、c 三个基团与受体分子的活性作用点、、结合，是高活性对映体（优映体）。
手性分子的a 、b 、c 三个基团中只有a 和b 与受体分子的活性作用点和结合，是低活性对映体（劣映体）。
6在未研究清楚两种单一对映体之间的生物学差异时，以消旋体给药往往会影响药物质量，甚至会严重损害人体健康。
“反应停”(Thalidomide)作为人工合成药，当时投入使用时是两种对映体的混合物。
7反应停：五十年恩怨发展趋势：劣映体本身或其代谢物产生毒副作用，不再使用外消旋体。
外消旋体转换成单一对映体，不仅提高质量，还延长药物寿命。
如：氧氟沙星的左旋异构体活性更强，左旋氧氟沙星临床使用剂量是消旋体的一半。
10手性拆分（Chiral resolution）●对映体除了偏振光的偏转方向不同外，其它理化性质完全相同，因而分离难度大。
手性化合物色谱分析方法开发(一)
手性化合物色谱分析方法开发(一)1、概述首先，这里所说的手性化合物是指含有一个或多个不对称碳手性中心的对映或者非对映异构体，而不包含氮磷等含有孤电子对的手性中心化合物。
不对称性碳原子，需要具有四个不同的取代基，空间上形成不对称四面体，对映异构体之间形成镜面对称，就像人的左右手一样，不能够完全重合，如下图1所示。
Fig.1Diagram for enantiomers对映异构体具有不同的使偏振光旋转的能力，据此对映异构体可以分为左旋与右旋。
在非手性环境下，对映异构体具有相同的化学性质(化学反应特性)，相同的物理性质(如溶解度、熔点、沸点、熵焓等)以及同样的色谱保留行为等。
但在手性环境中对映异构体之间的某些性质则表现出不同，这也是手性化合物进行拆分的基础。
对映异构体需要对内消旋体与外消旋体进行区分，如下图2所示。
左右两个示意化合物结构的相同点在于均具有两个手性中心，不同点则在于左图的两个手性碳原子之间不存在对称平面或轴，而右图则存在对称平面。
因此在左图中，1S,2R与1R,2S为外消旋体；右图中1S,2R与1R,2S为内消旋体。
Fig.2Name and distinguish between mesomer and racemate对于手性化合物的拆分，规模比较大的时候，可使用其他手性试剂(如酒石酸钠)与待拆分的化合物形成非对映异构体，然后根据非对映异构体之间具有不同的物理化学性质，进行相应的分离单元操作。
而在分析实验室中，一般是采用色谱法进行拆分，其中包括使用手性固定相法以及在流动相中添加手性流动相形成手性拆分环境的方式。
其中手性固定相拆分法包括气相色谱以及液相色谱。
对于气相色谱拆分手性化合物，其拆分选择性主要取决于所使用的手性固定相的种类以及色谱分离的温度。
一般气相用于低沸点的手性化合物的拆分，对于有机酸碱等极性手性化合物的拆分，一般需要先进行柱前衍生化处理，使之形成相应的酯或者酰胺。
用于气相手性拆分的手性固定相均为环糊精衍生物类，包括β以及γ环糊精，α环糊精比较少；其最高耐受温度不会超过220℃，而且分离温度超过120℃的时候，固定相的手性选择性开始降低；超过200℃的时候，固定相的手性选择性几近与无。
有机化学的手性分析方法
有机化学的手性分析方法
在有机化学领域中，手性分析是一项十分重要的工作。
手性化合物是指分子的结构镜像不能完全重合的分子。
因此，手性分析的目的就是确定有机化合物中手性中心的配置。
在本文中，将介绍几种常用的手性分析方法。
一、圆二色谱分析法
圆二色谱分析法是一种利用圆二色现象测定有机物的手性的方法。
圆二色现象是指左旋光和右旋光通过具有手性的物质后，光传播方向不变，但相位差发生变化的现象。
通过观察物质在不同波长下的圆二色光谱，可以确定其手性。
二、红外吸收光谱分析法
红外吸收光谱分析法是一种常用的手性分析方法。
在红外光谱中，手性物质通常表现出特定的旋光效应，通过比较旋光贡献可以判断有机物的手性。
三、核磁共振分析法
核磁共振分析法是一种非常重要的手性分析方法。
通过核磁共振技术，可以观察到手性物质中的不对称中心周围原子核的信号差异，从而确定有机物的手性。
四、质谱分析法
质谱分析法是一种高灵敏度的手性分析方法。
通过质谱仪对有机物进行分析，可以观察到手性分子离子的不同质量谱峰，从而确定有机物的手性。
五、氨基酸序列分析法
氨基酸序列分析法主要用于蛋白质的手性分析。
通过氨基酸序列分析仪，可以确定蛋白质中的手性氨基酸的排列顺序，从而确定蛋白质的整体手性。
综上所述，有机化学的手性分析方法主要包括圆二色谱分析法、红外吸收光谱分析法、核磁共振分析法、质谱分析法以及氨基酸序列分析法。
这些方法各自有其优点和适用范围，科学家们可以根据具体情况选择合适的手性分析方法来进行研究。
手性高效液相色谱法
3.配基交换型手性添加剂
配基交换原理：
在流动相缓冲溶液中加入金属离子和配位 体交换剂形成二元络合物，药物对映体再与其 形成稳定性不同的三元络合物而达到手性分离。
常用的手性配合试剂：氨基酸及其衍生物 如L-苯丙氨酸，L-脯氨酸等配位金属有Cu2+、
Zn2+、Ni2+、Cd2+等。
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应用实例
手性衍生化HPLC测定血浆中艾司洛 尔及其代谢物对映体
色谱柱：Aglient Zorbax C18 （250mm×4.6mm，5μm） 流动相：乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲 盐（55:45，用磷酸调pH至4.5） 流速：0.75 ml/min 检测波长：224nm 进样量：20μl 柱温：室温
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环糊精分类-根据空腔大小 α-环状糊精 适合于分子量小的药物对映体分析 β-环糊精 适合于多数对映体的位阻和电子特征 γ-环糊精 适合于较大分子药物的对映体分析
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2.手性离子对色谱法
一类分离可解离对映体的离子对色谱法，已成功分离了β-氨基醇类、氨基醇类、胺 类等对映体化合物。
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手性HPLC法
直接法和间接法异同点 均以现代色谱分离技术为基础，引入手性
环境(不对称中心)，使药物对映体间呈现理化 性质的差异而实现分离，不同的是间接法是将 其引入分子内，而直接发引入分子间。
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手性衍生化试剂法
对映异构体与手性试剂反应，产生相应的非对 映异构体
(R)
传统的拆分方法为非色谱法： 如分步结晶法，具有很大的局限性，操作过程繁复、耗时，难于进行微量分离和
测定。 大多采用色谱法：
色谱分析中的手性分离技术
色谱分析中的手性分离技术色谱分析是一种常见的分离和检测技术，它可以通过不同成分在色谱柱上的运移速度差异，实现样品中组分的分离。
而手性分离技术则是其中一种具有广泛应用的技术。
手性分离技术又称拆分体分离技术，是指将具有手性的化合物分离成其对映异构体的过程。
手性分离技术主要有两种：手性凝胶色谱和手性高效液相色谱。
手性凝胶色谱是一种传统的手性分离技术，它利用具有手性结构的聚合物凝胶作为色谱填料，通过样品分子与凝胶之间的分子识别作用实现分离。
手性凝胶色谱是一种相对简单的手性分离技术，但是由于其分离程度较低，通常用于对手性分析的初步筛查。
手性高效液相色谱是一种高效手性分离技术，它基于手性色谱填料的表面手性区分作用和反相分离作用，实现对手性化合物的高效分离。
在手性高效液相色谱中，手性色谱柱成为关键的分离工具，色谱柱内填充了各种具有手性结构的填料，如纳米结构材料、束缚配体、离子交换树脂等。
手性高效液相色谱技术需要精密的操作和控制技术，同时对手性填料的选择和性能也十分关键。
常见的手性高效液相色谱模式包括正相模式、反相模式和杂相模式。
正相模式下，填料是手性站点，流动相是水/有机溶剂混合物，溶液的极性越强，分离能力越高；反相模式下，填料是非手性的，分离基于无手性分子和手性分子与填料的相互作用，流动相是弱极性有机溶剂/水混合物；杂相模式是正相和反相模式的结合。
手性高效液相色谱技术在制药、化妆品、食品、医疗诊断等领域得到了广泛应用。
例如，在药物研发中，手性高效液相色谱可以对药物的对映异构体进行分离和鉴定，以确定对映异构体的药效和安全性；在食品领域，手性高效液相色谱可以对添加的手性能呈现不同风味的香料成分的组成比例进行分离和鉴定。
当然，手性分离技术也存在一些困难和局限性。
一方面，手性化合物的对映异构体之间的物理和化学性质非常相似，因此分离困难。
另一方面，手性化合物的分离需要精密的手性填料和色谱柱控制技术，手性柱的制备和使用成本也较高。
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• 分子结构
（１）在其手性原子上均具有两个环状取代基 或环内含有手性碳原子，而不能拆分的化合物 在其手性碳原子上只含有一个环状取代基。
（２）空间效应对手性识别的影响更为显著。
（３）环糊精浓度增加有利于手性分离，但 β-环糊精溶解度受限制。
09:26:22
手性流动相HPLC法拆分萘普生对映体
外消旋体和其两种单一对映体是不同的3种实体！
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对映体与生物大分子的三点作用
d
c
a
b
d
a
b
c
手性分子的a、b、c三个 基团与受体分子的活性作 用点、、 结合，是高 活性对映体（优映体）。
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手性分子的a、b、c三个基 团中只有a和b与受体分子的 活性作用点和结合，是 低活性对映体（劣映体）。
流速为0.5 ml/min；紫外检测波长为259 nm； • 柱温为25℃；进样体积为20 μl。
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• 环糊精类（包容色谱 ）
D-葡萄糖单元通过α-1,4-糖苷键连接的环状 分子结构 ，其疏水性内腔的包容作用和腔外上 的羟基与药物对映体的氢键作用是手性识别的 基础。
有α、β、γ三种类型，其中β环糊精及其衍 生物应用范围最为广泛。
前处理：药物溶于含三乙胺乙腈水溶液，取50 μl该溶 液，加入50 μl含2 g/L GITC的乙腈溶液，混合均匀
后室温下放置10 min ~ 30 min，进样分析。
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拉贝洛尔的GITC衍生化
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不同结构的药物衍生化策略
• 胺基类手性药物 ：运用异硫氰酸酯（ITC）、异氰酸酯（IC） 类、手性酰氯、磺酰氯类试剂，将其衍生化为酰胺、氨基甲 酸酯、脲、硫脲和磺酰胺 。
• 将手性试剂加到流动相中，利用下面两种方式 实现拆分：
① 流动相中手性试剂与对映体形成非对映体配 合物，在固定相中的保留时间和分配不同而得 到拆分；
② 手性试剂吸附在柱上形成动态的手性固定相， 对映异构体与之作用不同而得到拆分。
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环糊精手性固定相与流动相
• 流动相添加环糊精法拆分时，与流动相中环糊精 包合越好的对映体，随流动相较快地被洗脱；
• 如：氧氟沙星的左旋异构体活性更强， 左旋氧氟沙星临床使用剂量是消旋体的 一半。
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手性拆分（Chiral resolution）
• 对映体除了偏振光的偏转方向不同外，其它理 化性质完全相同，因而分离难度大。
• 手性色谱拆分方法：创造（或引入）手性环境， 构造非对映异构体，使药物对映体间呈现理化 特性的差异，从而实现药物对映体的色谱分离。
在未研究清楚两种单一对映体之间的生物 学差异时，以消旋体给药往往会影响药物 质量，甚至会严重损害人体健康。
“反应停”(Thalidomide)作为人工合成药， 当时投入使用时是两种对映体的混合物。
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反应停：五十年恩怨
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手性药物的现状
临床药物 1850种
天然和半 合成药物 523种
分子结构中含有不对称碳原子是最常见的手性结构。
根据对偏振光的作用不同可分为R、S体，两者的 等量混合物称之为消旋体。
COOH
COOH
OH
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HH CH3
CH3 OH
手性异构体在药理学效应上的差异 • Pfeiffer规则：
对映异构体之间的生物活性存在着差异； 不同的对映体之间活性的差异是不同的； 当手性药物的有效剂量越低，即药效强度越 高时，则对映体之间的药理作用的差别越大。
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多糖及其衍生物类手性固定相
• 纤维素的单体D-葡萄糖以β-1,4-糖苷键相 连而成的线型聚合物，将羟基衍生化 成 酯以增强手性识别能力。
• 由于水和卤代烃都能溶解纤维素及其衍
生物，故流动相大都为正相色谱系统，
使用极性较小的非卤代烃有机溶剂。
OH
OH
*
O
O OH
**
*
OH *
*
OH *
CHIRALPAK
AS系列
直链淀粉-三[(S)-α-甲苯基氨基甲酸酯]衍生物 ；适合于分离β-内酰胺类、环氧化物、酸类、 杂环类化合物化合物。
纤维素-三[3,5-二甲苯基氨基甲酸酯]衍生物； CHIRALCEL 适用于分离β-受体阻滞剂、具有相同功能的化
OD系列 合物、类固醇类化合物，如：阿普罗尔、美 托洛尔、氧烯洛尔。（芳氧丙醇胺类）
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GITC衍生化分离胺类对映异构体
• 反应原理
OAc AcO
AcO
O NCS
OAc
NHR R1 R2
OAc
AcO AcO
O
S R R1
NH C N
OAc
R2
• 在三乙胺存在条件下进行，于乙腈、二 氯甲烷或DMF中进行。
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色谱分离和前处理条件优化
• 流动相组成和流动相pH对拆分的影响
• 在CSP表面所形成的非对映体对，可根据其稳 定常数不同而获得分离。（三点结合模型）
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“三点相互作用 ”
●对映体和手性固定相之间，至少需要三个同时发 生的分子间相互作用力起作用，而其中至少有一个 必须是立体化学相互作用。
●手性选择剂与对映体中的一种进入一个与立体相 关的三点相互作用的稳定状态，而另一对映体则只 能两点作用形成不稳定状态。
（1）降低甲醇含量改善分离度，保留时间增加；
（2）未衍生化的羧酸基对pH值比较敏感。
• 衍生化时间及GITC用量的优化
（1）反应时间：10 min ~ 30 min （2）用量：过量两倍
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手性拆分结果
色谱条件： C18色谱柱，流动相：甲醇∶1%三乙基乙 二氨四乙酸TEAA 缓冲（pH = 5.5），检测波长254 nm； 1 ml/min。
OH
O
*
**
O
*
O OH
O
**
*
OH *
*
OH *
OH
O
*
**
O
O
OH
OH
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纤维素固定相手性识别作用
手性中心附近带有羰基的外消旋化合物与纤 维素衍生物通过偶极－偶极作用，带有羧基 、羟基或氨基的外消旋化合物通过氢键发生 手性识别作用。
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• 直链淀粉是D-葡萄糖以α-1,4-糖苷键相连 而成的线型聚合物，和纤维素的手性识 别能力的不同，主要在于其葡萄糖单元 的构象差异。
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异硫氰酸酯（ITC）、异氰酸酯（IC）类
• 常用试剂有苯乙基异氰酸酯（PEIC）、2,3,4,6-四-O-乙 酰基-β-D-吡喃葡萄糖异硫氰酸酯（GITC） 。
• 与大多数醇类和胺类化合物反应，形成相应氨基甲酸 酯或脲的非对映异构体。
• 广泛应用于氨基酸及其衍生物、麻黄碱类、肾上腺素 类、肾上腺素拮抗剂、儿茶胺类等药物的分离分析。
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色谱分离和前处理条件优化
• 有机相对拆分的影响
（1）相比于乙腈，乙醇可以使保留时间缩短； （2）随着乙醇体积分数的逐渐增大，其容量因子呈逐步减
小的趋势，分离因子和分离度也减小。
• 流动相中HP-β-CD浓度的优化
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手性试剂衍生化法（CDR）
• 原理： 光学活性药物与有高光学纯度的手性试剂
于柱前衍生化，在药物对映体中引入另外一个 手性，形成非对映异构体，再以HPLC分析。
(R) SA (R) SE (R) SA
(R)
SE
(S)
SA
(R)
SE
(S)
SA
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手性反应注意事项
• 手性试剂为高光学纯度试剂，光学稳定性好： 异硫氰酸酯（ITC）、异氰酸酯（IC）类：氨基酸 羧酸衍生物：胺类、醇类 胺类：羧基化合物。
• 手性待测物必须具备反应活性基团，如胺基（-NH2） 醇基（-OH），羧基（-COOH），以保证与CDR反应 完全 ；
• 生成的非对映体光学稳定，柱效源自高，能有效检测。CH3*
COOH
H3CO
优化的流动相添加剂： (a) L-脯氨酸、 (b) β-环糊精（β-CD）、 (e)羟丙基-β-环糊精（HP-β-CD） (c、d)甲基-β-环糊精（Me-β-CD）
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• 流动相体系：乙醇∶水相（不同手性添 加剂，1%三乙胺水溶液，pH为4.4）；
HP-β-CD比甲基-β-CD拆分效果好
• 羧基类手性药物 ：运用手性胺类衍生化试剂，将其衍生化 为酯和酰胺 。
• 醇类手性药物 ：运用手性酰氯、磺酰氯类试剂 ，将其衍生 化成酯 。
• 烯类手性药物 ：衍生化成水性铂复合物 。
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手性固定相法（CSP）
• 原理：将手性试剂化学键合到固定相上与药物 对映体反应形成暂时的非对映体对复合物，这 种固定相称作CSP。
●这种稳定性相差越大，则相互分离的可能性就越
大。
Y为S性手性选择剂，X为外消旋体
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手性固定相
吸附型 蛋白质类
多糖衍生物 环糊精类
反相、防有机 溶剂
正相、防水
正、反相均可
电荷转移型
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蛋白质类手性固定相
• 将蛋白质固定到硅胶上，利用蛋白质分子结构 中的L-氨基酸提供手性作用位点与手性药物对 映体产生不同的氢键作用、静电作用、疏水作 用、离子对作用等达到手性拆分。
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最常用的多糖型手性色谱柱 （Daicel ，大赛璐 ）
• 淀粉柱：Chiralpak AD、Chiralpak AS、 • 纤维素柱：Chiralcel OD、Chiralcel OJ