萘普生手性HPLC液相色谱(手性分离测定)
手性高效液相色谱法
手性高效液相色谱法手性药物对映体在人体内与受体、酶等生物大分子互相作用，展现出复杂的对映体挑选性，进一步表现为不同的药理作用、代谢过程和毒性反应。
对于手性药物，可能其中一个对映体活性高、疗效好，为活性对映体(优对映体)；另外的活性低甚至没有活性的为劣对映体。
因为劣对映体没有药效或药效较低，甚至可能产生严峻的不良反应，基于此，FDA 于1992年领先发布了手性药物指导原则，我国亦于2006年颁布了《手性药物质量控制讨论指导原则》。
为了评价手性药物的生物活性，监测对映体的光学纯度，建立和进展迅速精确的药物对映体分别办法具有重要的意义。
手性高效液相色谱法通常分为挺直法和间接法。
间接法又称手性衍生化试剂法(chiral derivatization reagent, CDR)，是将对映体与手性光学试剂反应，生成一对非对映异构体之后以常规固定相分别，因此是对手性衍生物的非手性分别。
而挺直法则是采纳手性固定相法(chiral stationary phase, CSP)或将手性化合物加入到流淌相中，再用常规固定相分别的手性流淌相法(chiral mobile phase, CMP)。
手性固定相法因其用法简便快捷、重复性好、精确度高、应用范围广而倍受青睐。
一、手性色谱柱的分类目前，已商品化的手性固定相有100多种，按照手性固定相和溶剂的互相作用机制，Irving Wainer首次提出了手性色谱柱的分类体系：第1类：通过氢键、π-π作用、偶极-偶极作用形成复合物；第2类：既有1类中的互相作用，又存在包埋复合物。
此类手性色谱柱中典型的是由纤维素及其衍生物制成的手性色谱柱；第3类：基于溶剂进入手性空穴形成包埋复合物。
这类手性色谱柱中最典型的是环糊精型手性柱，另外冠醚型手性柱和螺旋型聚合物，如聚(苯基甲基甲基丙烯酸酯)形成的手性色谱柱也属于此类；第4类：基于形成非对映体的金属络合物，是由Davankv 开发的手性分别技术，也称为．手性配位交换色谱(CLEC)；第5类：蛋白质型手性色谱柱，手性分别是基于疏水互相作用和极性互相作用得以实现的。
药物色谱分析 第10章-手性高效液相色谱法
Chiral Drugs (手性药物)
严格地来说，手性药物是指药物的分 子结构中存在手性因素而言。但通常，手 性药物是指由具有药理活性的手性化合物 组成的药物，其中只含有效对映体或者以 含有效的对映体为主。
获得手性化合物的不同途径
天然手性 化合物
发展趋势：
劣映体本身或其代谢物产生毒副作用，不再 使用外消旋体。
外消旋体转换成单一对映体，可以提高质量， 减少副作用。
如：氧氟沙星的左旋异构体活性更强， 左旋氧氟沙星临床使用剂量是消旋体的 一半。
手性药物的现状
临床药物 1850种
天然和半 合成药物 523种
化学合成 药物 1327种
非手性6种 手性517种
.
课后查询：常见的手性拆分的方法和策略
组成相同但空间结构上互成镜像的分子，称 之为对映异构体；不成镜像的分子，称之为 非对映异构体，分子中所含手性碳越多，非 对映异构体的数目越多。
非对映异构体
A(S) A(R) B(R) B(S)
对映体
A(R) A(S) B(R) B(S)
对映体
（-）麻黄碱 （+）麻黄碱
H OH N
CH3 H
. H HCl CH3
（ - ）盐酸伪麻黄碱
（ + ）伪麻黄碱 （ - ）伪麻黄碱
色谱条件：色谱柱：苯基柱150mm×4.6mm，I.D. 5mm；流 动相：三乙胺-水（含50mmol·L-1磷酸二氢钾，磷酸调pH至 4.0）-甲醇（0.01∶90∶10, v/v/v）；流速1.0 mL·min-1；检测 波长：210nm；柱温：室温。
白蛋白柱（HSA、BSA ） 糖蛋白柱：α1-酸糖蛋白柱 （ α1- AGP ） 酶类
萘普生检测分析
萘普生检测分析一、比旋度精密称定，用三氯甲烷溶解，定量稀释（1ml中含10mg）。
比旋度为63—68.5二、干燥失重取样品2.00g，置于表面皿上在105℃条件下烘3小时，计算水分。
减失重量不得超过5%。
三、滴定法测定含量方法原理：供试品加水溶解后，再加甲醇溶液，并加入酚酞指示液数滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，记录氢氧化钠滴定液的使用量，计算，即得。
试剂：1. 水（新沸放置至室温）2. 氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）3.酚酞指示液4. 甲醇5. 基准邻苯二甲酸氢钾仪器设备：试样制备：1. 氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）配制：取澄清的氢氧化钠饱和溶液5.6mL，加新沸过的冷水使成1000mL。
标定：取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.6g，精密称定，加新沸过的冷水50mL，振摇，使其尽量溶解；加酚酞指示液2滴，用本液滴定，在接近终点时，应使邻苯二甲酸氢钾完全溶解，滴定至溶液显粉红色。
每1mL氢氧化钠滴定液（1mol/L）相当于20.42mg的邻苯二甲酸氢钾。
根据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量，算出本液的浓度。
贮藏：置聚乙烯塑料瓶中，密封保存；塞中有2孔，孔内各插入玻璃管1支，1管与钠石灰管相连，1管供吸出本液使用。
2.酚酞指示液取酚酞1g，加乙醇100mL使溶解。
操作步骤：取装量差异项下内容物，混合均匀，精密称取本品适量（约相当于萘普生0.5g），加甲醇45mL溶解后，再加水15mL与酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正，记录消耗氢氧化钠滴定液的体积数（mL），每1mL氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于23.03mg的萘普生（C14H14O3），即得。
c×（V-V’）×23.03X=m式中：c—氢氧化钠标准溶液物质的量的浓度，mol/LV—样品滴定时所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mlV’—空白消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mlm—式样的质量，g23.03—于1.00ml氢氧化钠标准滴定溶液相当的以克表示萘普生的质量；四、液相色谱法测定含量色谱条件：甲醇—0.01mol/L磷酸二氢钾溶液（75:25），磷酸调节pH=3.0为流动相；流速为1.0ml/min，检测坡长为272nm‘测定方法：1、精密称定样品0.1000g，置于100ml容量瓶中，加入流动相超声处理10min后定容至刻度线。
反相高效液相色谱法测定复方萘普生栓中的有关物质的含量
反相高效液相色谱法测定复方萘普生栓中的有关物质的含量徐雨佳【期刊名称】《中南药学》【年(卷),期】2005(3)5【摘要】目的应用RP-HPLC测定复方萘普生栓中的6-甲氧基-2-萘乙酮及其他有关物质的含量.方法采用Penomenex C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为甲醇-0.05 mol*L-1磷酸二氢钾(用磷酸调pH至3.0)(65∶35),流速为1.0mL*min-1,柱温为室温,检测波长为240 nm.结果萘普生和6-甲氧基-2-萘乙酮在1.024～9.216 0 μg*mL-1 (r=0.999 91,n=5)、0.302 4～0.705 6 μg*mL-1(r=0.999 7,n=5)线性关系良好;最低检出限6-甲氧基-2-萘乙酮为0.1 ng、其他有关物质以萘普生计为0.1 ng.萘普生栓与6-甲氧基-2-萘乙酮、己烯雌酚及其降解产物之间的分离度>1.5.结论该法专属性强,结果准确,重现性好,灵敏度高,可用已知杂质法测定复方萘普生栓中的6-甲氧基-2-萘乙酮,用自身对照法测定其他有关物质.【总页数】3页(P272-274)【关键词】萘普生;6-甲氧基-2-萘乙酮;反相高效液相色谱法;有关物质【作者】徐雨佳【作者单位】郴州市第一人民医院药剂科【正文语种】中文【中图分类】R927.1【相关文献】1.反相高效液相色谱法测定复方替硝唑栓三组分含量 [J], 郑芳;朱雪松;何婧2.反相高效液相色谱法同时测定复方奥硝唑栓中两组分的含量 [J], 陈吉生;黎行山;陈永3.反相高效液相色谱法测定复方小儿退热栓中对乙酰氨基酚含量 [J], 王巍;余翔;周祥敏4.反相高效液相色谱法测定复方明矾布比卡因注射液中盐酸布比卡因含量及有关物质 [J], 兰文;杨汉初;黄莉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC法测定萘普生钠片的含量
HPLC法测定萘普生钠片的含量目的：采用高效液相色谱法测定萘普生钠的含量。
方法：色谱柱为Diamonsil C18（5 μm，200 mm×4.6 mm），流动相为甲醇-水（75∶25）；流速1.0 ml/min；检测波长为332 nm。
结果：萘普生钠在45.02~162.07 μg的范围内线性关系良好，r=0.999 8（n=7），平均回收率为98.9%（RSD为0.82%，n=6）。
结论：本方法操作简便、精密度好、结果准确，无其他成分的干扰，可用于测定萘普生钠片的含量。
[Abstract] Objective: To determine Content of Naproxen Sodium Tablets by HPLC. Methods: The Diamonsil C18 column (5 μm, 200 mm×4.6 mm) was used, the Methanol-Water (75∶25) as mobile phase; the flow rate was 1.0 ml/min; The detecting wavelength was 332 nm. Results: The linear range for Daidzein was 45.02-162.07 μg/ml, r=0.999 8 (n=7), the average recovery was 98.9% (RSD为0.82%，n=6). Conclusion: The method is rapid, accurate and reliable, it suitable for determination of Naproxen Sodium Tablets.[Key words] HPLC; Naproxen Sodium Tablets; Determination; Recovery; Linear萘普生钠片为芳基烷酸类非甾体抗炎镇痛药，临床常用于治疗风湿性关节炎。
HPLC法测定人血浆中萘普生的浓度
ＨＰＬＣ法测定人血浆中萘普生的浓度【摘要】目的建立高效液相色谱法测定萘普生血药浓度的方法。
方法采用HPLC法测定普生缓释片中萘普生的血浆药物浓度。
大连依利特Hypersil ODS(5 μm，4．6 mm×250 mm)柱，柱温40℃；流动相为甲醇-磷酸二氢钠缓冲液(50 mmol/L磷酸二氢钠水溶液，含0．3%三乙胺，用磷酸调pH值为3．7)=68．9∶31．1；流速1．0 ml/min。
紫外检测波长为230 nm。
结果萘普生在0．93～93．20μg/ml线性关系良好，r2=0．999 9，最低检测浓度为0．10 μg/ml。
结论本法快速、灵敏，适用于萘普生血药浓度的监测。
【Abstract】Objective To establish an HPLC method for the determination of naproxen in the human plsamw.Methods The concentrations of Naproxen were determined by HPLC．The chromatographic column was Hypersil OD S(5 μm，4．6 mm×250 mm)and the temperature was 40℃.The mobile phase wasmethanol-Sodium Dihydrogen Phosphate buffer solution(50 mmol/L Sodium Dihydrogen Phosphate，contain0．3%TEA，use phosphoric acid adjust pH was 3．7)=68．9∶31．1Results The range of naproxen 0．93~93．20 μg/ml，r2=0．999 9，the lowest determineconcentration was 0．10 μg/ml.Conclusion The method is rapid、sensitive and efficient．It applies to defermine naproxeninplasma.【Key words】Naproxen；HPLC萘普生(Naproxen)为苯丙酸类非甾体镇痛药，其吸收迅速、起效快、毒副反应小、作用时间长。
生产工艺研究——萘普生
题目：萘普生的生产工艺研究姓名：***学号：************所在院系：医药学院指导教师：***目录一、概述 (2)二、研究进展 (3)三、合成路线及选择 (3)（一）、（±）—萘普生的合成路线 (3)（二）、（±）—萘普生的拆分 (8)三、萘普生的不对称合成 (9)四、生产工艺原理及过程 (12)一、1—氯—2—甲氧基萘的制备 (12)二、1—（5—氯—6—甲氧基—2—萘基）丙—1—酮的制备 (13)三、2—溴—1—（5—氯—甲氧基—2—萘基）丙—1—酮的制备 (14)四、5，5—二甲基—2—（1——溴乙基）—2—（5—氯—6—甲氧基—2—萘基）—1，3—二氧己环的制备 (16)五、（±）—萘普生的制备 (17)六、萘普生的制备 (19)五、三废处理及综合利用 (20)一、概述1、名称：萘普生，化学名为（+）—6—甲氧基—α—甲基—2—萘乙酸，英文名为（+）—6—methoxy—α—methyl—2—naphthaleneacetic aid。
结构式：萘普生为白色或类白色结晶粉末；无臭或几乎无臭，无味。
熔点为153~158℃.萘普生在甲醇或氯仿中溶解，在乙醚中略溶，微溶于乙醇，在水中几乎不溶。
日光照射下颜色变深。
萘普生为S构型。
3、药物作用：萘普生为芳基丙酸类非甾体消炎镇痛药（NSAIDs），具有明显一直前列腺素合成的作用，并可稳定溶酶体活性。
具有较强的抗炎、抗风湿和解热镇痛作用。
动物实验证明，萘普生的抗炎作用约为保泰松的11倍、镇痛作用是阿司匹林的7倍、解热作用是阿司匹林的22倍。
即使在切除了肾上腺的动物身上也表现出消炎效能，这表明此作用并非通过垂体——肾上腺传输。
临床上主要用于治疗风湿、类风湿性关节炎、骨关节炎、强直性脊椎炎、急性痛风、运动系统的慢性疾病及轻、中度疼痛。
二、研究进展20世纪60年代末，第一个芳基丙酸类消炎镇痛药布洛芬投入市场，标志着此类药物的研究进入一个新时代，先后开发了萘普生、酮基布洛芬、氟比洛芬等。
手性药物萘普生的光学拆分法制备
实验步骤
3. （-）-萘普生的消旋化
❖ 将制备得到的（+）-萘普生•（-）-葡辛胺盐母液按上法用 5%（1.25mol/L）氢氧化钠溶液碱化至pH大于10，滤去析出 的（-）-葡辛胺，滤液以盐酸酸化，调节pH 1~2，得（-）萘普生。
❖ 将（-）-萘普生置于100ml烧瓶中，加氢氧化钾4 g、水5 ml， 加热回流，于130 ℃反应3h。反应毕，倾注到装有100 ml 水 的烧杯中，以盐酸酸化，析出固体，抽滤，滤饼用少量水洗 涤，抽干，干燥，得消旋萘普生，称量，测比旋光度。
实验指标一
❖ 对映体过剩：反应结束后得到的产物（+）-萘普生， 需测定其对映选择性，即产物的对映体过剩（e. e. 值）。 其测定方法有多种，本实验利用的是旋光仪的方法。
对映体过量 ( % ee ) (enantiomeric excess)
ee
=
∣
[R [R
] ]
_ +
[ S ]∣
[S ]
×100%
O
手性药物萘普生的光学拆分法制备
手性
H OH
c
CH3
HO H
c
H3C
(S)-苯乙醇
(R)重合
手性药物分子 与生物大分子之间的手性匹配
药物名称
氯霉素
(治疟药)
心得安
(-受体阻断剂)
反应停
(镇静药)
手性药物的药性
手性药物两种对映体的药理作用
HO
* * OH
NHR
(S)-异构体 完全无药效
O
OH NHR
*
OH
HO * *
NHR
(R)-异构体 有杀毒作用
RHN
OH O