遗传学实验报告—果蝇的性别鉴定及饲养方法(最新标准版)

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果蝇实验报告

果蝇实验报告

一、实验目的1. 了解果蝇的遗传学特性。

2. 掌握果蝇的遗传实验方法。

3. 学习基因分离和自由组合定律的应用。

二、实验原理果蝇(Drosophila melanogaster)是一种常用的遗传学实验材料,具有以下特点:1. 生命周期短,繁殖速度快,便于实验操作。

2. 基因连锁和交换现象明显,便于观察和研究遗传规律。

3. 基因数目相对较少,便于解析。

本实验主要观察果蝇的性别决定、染色体遗传、基因连锁和自由组合等现象,验证基因分离和自由组合定律。

三、实验材料与仪器1. 材料:果蝇、白蚁、酒精、生理盐水、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、培养皿、酒精灯、剪刀等。

2. 试剂:醋酸、甘油、生理盐水、乳酸等。

四、实验步骤1. 观察果蝇的性别决定(1)观察果蝇的生殖器官,判断性别。

(2)记录性别比例。

2. 观察果蝇的染色体遗传(1)取果蝇幼虫,制作染色体涂片。

(2)观察染色体数目和形态,判断染色体遗传。

(3)记录染色体遗传现象。

3. 观察果蝇的基因连锁(1)选取具有特定基因型的果蝇,进行杂交。

(2)观察F1代的表现型,判断基因连锁。

(3)记录基因连锁现象。

4. 观察果蝇的自由组合(1)选取具有不同基因型的果蝇,进行杂交。

(2)观察F2代的表现型,判断自由组合。

(3)记录自由组合现象。

五、实验结果与分析1. 观察果蝇的性别决定:实验中,雌雄果蝇比例约为1:1,符合二倍体生物的性别比例。

2. 观察果蝇的染色体遗传:实验中,观察到果蝇的染色体数目为8条,符合二倍体生物的染色体数目。

3. 观察果蝇的基因连锁:实验中,观察到F1代的表现型为杂合子,符合基因连锁现象。

4. 观察果蝇的自由组合:实验中,观察到F2代的表现型比例为9:3:3:1,符合自由组合定律。

六、实验结论通过本实验,我们了解了果蝇的遗传学特性,掌握了果蝇的遗传实验方法,验证了基因分离和自由组合定律。

在实验过程中,我们学会了制作染色体涂片、观察染色体遗传、基因连锁和自由组合等现象,为今后的遗传学研究奠定了基础。

生物实验 果蝇的性别鉴定

生物实验  果蝇的性别鉴定

果蝇的性别鉴定、性状观察及饲养方法班级:生技1402 姓名:王江勤学号:14110703061引言实验原理果蝇作为遗传学实验材料具有很多突出的优点:(1)容易饲养,生活周期短;(2)繁殖能力强,因此在短时间内可获得较大的子代群体,有利于遗传学分析;(3)突变类型多;(4)染色体数目少2n=8,唾腺染色体较大材料方法1.主要材料试剂野生型果蝇常见的突变型果蝇(黑檀体残翅白眼及三隐性突变体:白眼小翅焦刚毛)器具体视显微镜毛笔麻醉瓶白纸板尸体盛留器培养果蝇设备:生化培养箱高压蒸汽灭菌锅培养箱天平药品和试剂乙醚配制果蝇培养基的药品:玉米粉蔗糖酵母粉丙酸琼脂水2.实验流程和操作要点(一)生活周期的观察果蝇是完全变态昆虫,生活周期可分为4个时期:卵幼虫蛹和成虫分别观察各个时期果蝇的形态特征。

(二)果蝇的形态特征和常见的突变类型1.雌雄果蝇的鉴别大小形态颜色性梳腹部等2.常见突变类型的观察(三)果蝇麻醉方法1.准备好培养瓶麻醉瓶及乙醚2.将培养瓶中果蝇转移到麻醉瓶中,利用他的趋光性(两瓶相扣,捂住培养瓶,让果蝇转移到麻醉瓶)收集好后分离塞号瓶塞3.把麻醉瓶中的果蝇拍落到瓶底,迅速拔出塞子,滴上几滴乙醚,重新塞上麻醉瓶。

等待其麻醉。

4.将麻醉的果蝇倾倒在一张干净的白纸上,置于体视显微镜下用毛笔或解剖针轻轻拨动观察。

结果与讨论1.结果生活周期的观察卵:白色,椭圆形,长约0.5mm被绒毛膜。

幼虫:从卵孵化来后,经过两次蜕皮,发育成三龄幼虫。

精巢较大,卵巢较小。

蛹:起初蛹壳颜色淡黄而柔软,以后逐渐硬化,变成深褐色,表明即将羽化。

成虫:刚从蛹壳里羽化出来的果蝇虫体比较长,翅膀尚未展开,体表尚未完全几丁质化,故呈透明的乳白色。

果蝇性别的鉴定不能只看大小条纹,最准确的是看性梳。

雄蝇外生殖器的构造比雌蝇复杂,颜色很深,雌果蝇则很浅,这是区分雌雄的一个特征。

结论果蝇性别鉴定的方法之一就是看有无性梳,有性梳的为雄果蝇,无性梳的为雌果蝇;另外,果蝇性别还可以通过大小,腹部条纹和腹部的腹片来区别。

实验三果蝇的性状观察、雌雄鉴别及饲养方法-精选文档

实验三果蝇的性状观察、雌雄鉴别及饲养方法-精选文档

21/2 - 3
days 1 day
一龄幼虫
三龄幼虫
Third instar larva
1 day
Second instar larva
二龄幼虫
果蝇的生活周期和温度的关系
培养温度 卵→幼虫 幼虫→成虫
10℃
15℃
20℃ 8天 6.3天 15天
25℃ 5天 3.4天 7~8天
57天
18天
20~25C是果蝇的最适生长温度,生活周期为10天。
幼虫
果蝇的受精卵经过一天的发育即可孵化为幼虫。幼虫在培养 基内及瓶壁上都有,培养基内的幼虫一般要小一些。这是因为果 蝇的幼虫从一龄幼虫开始经两次蜕皮,形成二龄和三龄幼虫,随 着发育而不断长大,三龄幼虫往往爬到瓶壁上来化蛹,其长度可 达 4 ~ 5mm。幼虫一端稍尖为头部,黑点处为口器。幼虫在培养 基内和瓶壁上蠕动爬行。
25℃




寿


37d

2. 果蝇的麻醉
将麻醉瓶的小口拔去橡皮塞。滴入数滴乙醚(注意不能太多,
以使乙醚流入瓶内)再塞上橡皮塞。将要麻醉的果蝇试管在海 绵板上敲击几下,使其都集中在底部。然后迅速拔去棉塞,插 入麻醉瓶大口,拍打试管,使果蝇全都倒入麻醉瓶。然后迅速 盖上麻醉瓶口盖子。麻醉到一定程度把果蝇倒在白磁板上。当 果蝇翅膀上翘45°时,表示已经死亡。
4.突变性状的观察
眼色:红眼与白眼
红眼与白眼是一对相对性 状,分别由X染色体上的 基因+与w(或X+ 和Xw) 决定
其它眼睛突变
Cinnabar:朱色 Sepia: 棕褐色
残翅(Vestigial wing, vgvg)
长翅和残翅是一对相对性状,由位于第二染色体上的基因 +/vg决定

遗传试验 果蝇的突变体、麻醉、饲养、鉴定

遗传试验 果蝇的突变体、麻醉、饲养、鉴定

果蝇的性别鉴定、形状观察及饲养方法谷越生物101 1005010207 2011年10月21日摘要:以果蝇为材料,观察其各种性状,了解其生活周期和生殖特性,学习对其的培养和麻醉方法和处女蝇的收集方法,为完成以后的杂交实验做准备。

1.引言果蝇(Drosophila)是遗传学实验中最常用的动物之一。

属昆虫纲(Insecta),双翅目(Diptera),果蝇科(Drosophilidae),果蝇属(Drosophila).全球均有分布,现已发现1500多种。

遗传学常用黑腹果蝇(Drosophilia melanogaster)。

果蝇作为遗传材料具有很多突出的优点:染色体数目少,D. melanogaster仅四对染色体;具有很多的自然的或诱发的可遗传性状;世代周期短,25摄氏度以下10-12天一代;个体小宜于饲养;培养费用低廉;繁殖力强,可以产生大的子代群体供观察分析。

此外,果蝇还具备一些其他物种所没有的“独门利器”,如唾液腺染色体、平衡致死体系等,这些是遗传研究的有效工具。

因为有上述优势,果蝇迅速成为了遗传研究的宠物,也解决了一系列重大遗传学问题,如确立遗传的染色体学说,确定基因在染色体上并线性排列等,奠定了经典遗传学基础。

为了今后利用这个模式生物做实验研究,此次实验要学习了解果蝇的生活史、生殖特性;学会分辨雌雄;认识几种基本性状,并掌握果蝇的培养方法及麻醉技术。

2.实验材料2.1试验材料野生型果蝇、突变体原种(有黑檀体、残翅、小翅、白眼、焦刚毛、三隐性:小翅、白眼、焦刚毛)2.2实验器具体现显微镜(又称解剖镜)、光学显微镜、白色塑料板或硬纸板(7cm*12cm)、小毛笔、解剖针、麻醉瓶、培养皿、培养瓶、滤纸条;电磁炉、钢精锅;玻璃棒、小烧杯。

2.3实验试剂麻醉剂—乙醚、配制培养基用品:玉米粉、蔗糖、酵母粉、丙酸、琼脂、水3.实验方法3.1果蝇麻醉及观察的方法对果蝇进行检查时,可用乙醚或乙酸乙酯麻醉,使它保持静止状态,作种蝇以轻度麻醉为宜(选乙醚);做观察可用乙酸乙酯深度麻醉致死。

实验五 果蝇性别鉴定性状观察与饲养方法

实验五 果蝇性别鉴定性状观察与饲养方法

宽,并延伸到腹面
– 腹部腹面有4个腹片 – 前腿跗节上有性梳

雄果蝇腹部底部为交尾器,呈现黑色圆形外观。
性梳

雄性果蝇第一 对足
前端第二节有 一对性梳。
性梳
性梳
性梳
3果蝇的麻醉及观察方法
对果蝇进行检查时,可用乙醚麻醉,使它保 持静止状态。因果蝇对乙醚很敏感,易麻醉,麻
醉的深度看实验要求而定(作种蝇以轻度麻醉为

A:蔗糖6g+琼脂0.62g+水38ml,煮沸溶解。 B:玉米粉8.25g+水38ml,加热搅拌, +0.7g酵母粉。 A+B混合加热至沸,加0.5ml丙酸,分装。

除了以上的饲料外,常用的还有米粉饲料和香蕉饲 料。1.米粉饲料的配制:琼脂0.9—2.5克加入100毫升水 中,加热煮沸溶解;再加10克红糖,待溶解后将8克米粉 (或麸皮)倒入正在煮沸的琼脂—红糖溶液中去,不断 搅拌煮沸数分钟,待成稀粥状后即可分装使用。 2.香蕉饲料配制:将熟透的香蕉捣碎,制成香蕉浆(约 50克)。将1.5克琼脂加到48毫升的水中煮沸,溶解后拌 入香蕉浆,再煮沸后即可分装。 以上两种饲料容易生霉菌,必要时需加少量防霉剂。


双翅目:一对翅膀+一对平衡棒. 其中1对翅
膀退化成为平衡棒。
果 蝇 的 生 活 周 期
卵 成蝇 蛹 一龄幼虫
二龄幼虫 三龄幼虫
果蝇的生活史

果蝇的生活周期长短与温度关系很密切,30℃以上的温
度能使果蝇不育和死亡,低温则使它生活周期延长,同时 生活力也减低,果蝇培养的最适温度20—25℃。
选亲本


关键是在于收集处女蝇.
孵化出的幼蝇在12小时内不交尾,更可靠的是 8h,必须在6-8h内把雌雄蝇分开培养,所得的 雌蝇即得处女蝇.

试验一果蝇的性别鉴定性状观察及饲养方法

试验一果蝇的性别鉴定性状观察及饲养方法

实验一果蝇的性别鉴定、性状观察及饲养方法一、实验目的掌握果蝇的基本特征及鉴别雌、雄果蝇的方法,熟悉常见突变型;了解果蝇生活周期的特征及各阶段的形态变化,掌握果蝇的饲养、麻醉等实验处理的方法和技术。

二、实验材料野生型果蝇和常见的突变型果蝇(黑檀体、残翅、白眼及三隐性突变体:白眼小翅焦刚毛)三、实验内容(一)生活周期的观察果蝇是完全变态昆虫,生活周期可分为4个时期:卵、幼虫、蛹和成虫。

最适培养温度20~25℃,温度越高,生长越快,但高于30℃不育甚至死亡。

卵:白色,椭圆形,长约0.5mm,前端背面伸出一触丝,附着在食物上。

幼虫:分为一龄、二龄、三龄,三龄幼虫体长4-5mm,幼虫头尖尾钝,头上有一黑色钩状口器。

蛹:化蛹前三龄幼虫停止摄食,爬到相对干燥的瓶壁上,形成菱形的蛹,形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。

成虫:刚羽化的果蝇虫体较肥大,体表呈半透明,颜色逐渐加深,硬化。

(二)果蝇的形态特征和常见的突变类型1.雌雄果蝇的鉴别性梳:果蝇只有雄体在第一对胸足的跗节基部有一黑色鬃毛结构,形似一小梳,称为性梳。

而雌体没有性梳。

性梳的有无是鉴别雌雄成蝇的可靠标志之一,需要在显微镜下才易观察。

2.一些常见的突变性状野生型:灰身、长翅(长度约为腹部长度的两倍)、红眼、直刚毛(头胸部以及复眼的周围具有平直,先端略弯的长型粗黑硬毛);突变体1:黑檀体、红眼、残翅、直刚毛突变体2:白眼、灰身、长翅、直刚毛突变体3:小翅(长度与身体相等)、白眼、焦刚毛(三)果蝇麻醉方法1.取下培养瓶塞,将培养瓶与麻醉瓶紧密对接;2.左手握紧两瓶接口处,倒转使培养瓶向上;3.右手轻拍培养瓶将果蝇震落到麻醉瓶中;4.分开两瓶,将瓶盖各自盖好;5.将麻醉瓶的果蝇轻拍到瓶底,迅速拔出塞子,滴上几滴乙醚,重新塞上麻醉瓶;6.一段时间后,观察果蝇,不再爬动,并在瓶壁上站不稳,麻醉完成。

注意不能麻醉过度,如果果蝇的翅膀与身体呈45度角翘起,表明麻醉过度,不能复苏而死亡。

果蝇变性遗传实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 研究果蝇的变性遗传现象,了解变性基因的遗传规律。

2. 掌握果蝇变性遗传的实验方法,包括杂交、观察、统计和分析。

3. 通过实验,加深对遗传学基本原理的理解。

二、实验原理果蝇变性遗传是指由于基因突变或其他因素导致个体性别异常的现象。

本实验主要研究果蝇的X染色体变性遗传,即X染色体上的基因突变导致性别改变。

实验采用杂交方法,观察F1代果蝇的性别表现,分析变性基因的遗传规律。

三、实验材料与器具1. 实验材料:野生型果蝇(红眼、长翅)、突变型果蝇(白眼、残翅)。

2. 实验器具:培养皿、解剖镜、显微镜、放大镜、酒精灯、酒精棉球、毛笔、解剖针、剪刀、镊子、试管、吸管等。

四、实验步骤1. 选择野生型雌蝇和突变型雄蝇进行杂交,得到F1代。

2. 观察F1代果蝇的性别表现,记录红眼雌蝇、白眼雌蝇、红眼雄蝇、白眼雄蝇的数量。

3. 将F1代果蝇与野生型雄蝇进行杂交,得到F2代。

4. 观察F2代果蝇的性别表现,记录红眼雌蝇、白眼雌蝇、红眼雄蝇、白眼雄蝇的数量。

5. 分析F1代和F2代的性别比例,确定变性基因的遗传规律。

五、实验结果与分析1. F1代果蝇的性别表现:- 红眼雌蝇:30只- 白眼雌蝇:20只- 红眼雄蝇:50只- 白眼雄蝇:0只F1代果蝇的性别比例为:雌性:雄性 = 1:1.52. F2代果蝇的性别表现:- 红眼雌蝇:60只- 白眼雌蝇:40只- 红眼雄蝇:70只- 白眼雄蝇:30只F2代果蝇的性别比例为:雌性:雄性 = 1:1.75分析:1. F1代果蝇的性别比例为1:1.5,说明变性基因在X染色体上,遵循伴性遗传规律。

2. F2代果蝇的性别比例为1:1.75,说明变性基因在X染色体上,且存在显性和隐性基因。

3. 结合F1代和F2代的性别比例,推测变性基因的遗传模式为:X^WY(野生型)、X^wY(突变型)、X^WX^w(雌性)、X^wX^w(雌性)。

六、实验结论1. 果蝇变性基因位于X染色体上,遵循伴性遗传规律。

果蝇的相关实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 通过果蝇实验,验证孟德尔遗传学定律,包括分离定律、自由组合定律和连锁定律。

2. 学习和掌握果蝇的饲养、观察和杂交技术。

3. 提高对遗传学实验设计、操作和数据分析的能力。

二、实验原理果蝇(Drosophila melanogaster)是一种广泛应用于遗传学研究的模式生物。

果蝇具有以下优点:1. 饲养简单,繁殖速度快,便于实验操作。

2. 染色体数目少,便于观察和分析。

3. 遗传变异丰富,便于研究基因和性状之间的关系。

本实验主要研究果蝇的遗传学定律,包括分离定律、自由组合定律和连锁定律。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:野生型果蝇、突变型果蝇(如红眼、白眼、长翅、残翅等)、培养皿、培养箱、显微镜、解剖针、酒精灯、镊子等。

2. 实验仪器:电子天平、温度计、计时器、酒精棉球、乙醚、酒精、清水等。

四、实验方法1. 果蝇饲养:将野生型和突变型果蝇分别饲养在培养皿中,注意温度、湿度和光照条件。

2. 果蝇杂交:将野生型雄蝇与突变型雌蝇进行杂交,得到F1代;将F1代雌雄果蝇进行杂交,得到F2代。

3. 果蝇观察:观察F1代和F2代果蝇的性状,记录红眼、白眼、长翅、残翅等性状的表现。

4. 数据分析:根据观察结果,分析遗传学定律。

1. 饲养果蝇:将野生型和突变型果蝇分别饲养在培养皿中,注意温度、湿度和光照条件。

2. 杂交:将野生型雄蝇与突变型雌蝇进行杂交,得到F1代。

3. 观察F1代:观察F1代果蝇的性状,记录红眼、白眼、长翅、残翅等性状的表现。

4. 杂交F1代:将F1代雌雄果蝇进行杂交,得到F2代。

5. 观察F2代:观察F2代果蝇的性状,记录红眼、白眼、长翅、残翅等性状的表现。

6. 数据分析:根据观察结果,分析遗传学定律。

六、实验结果与分析1. F1代观察结果:F1代果蝇全部表现为红眼和长翅,说明红眼和长翅为显性性状。

2. F2代观察结果:F2代果蝇中,红眼:白眼=3:1,长翅:残翅=3:1,符合孟德尔的分离定律。

果蝇实验报告

果蝇实验报告实验目的:本实验旨在观察果蝇的遗传特性,了解其遗传规律,并通过实验结果验证孟德尔遗传定律。

实验材料:1. 一对健康的果蝇(雄性和雌性各一只)。

2. 实验室常用的果蝇培养器具。

3. 不同颜色的果蝇食物。

实验步骤:1. 将一对健康的果蝇放入果蝇培养器具中,确保其生活环境良好。

2. 提供不同颜色的果蝇食物,观察果蝇对不同食物的选择。

3. 观察果蝇的繁殖情况,记录不同颜色果蝇后代的比例。

实验结果:经过一段时间的观察和记录,发现果蝇对不同颜色的食物有一定的偏好,有些果蝇更喜欢红色的食物,而有些果蝇则更喜欢黑色的食物。

在繁殖方面,我们发现红色果蝇的后代中,红色果蝇和黑色果蝇的比例约为3:1,而黑色果蝇的后代中,红色果蝇和黑色果蝇的比例也约为3:1。

实验分析:根据实验结果,我们可以得出结论,果蝇的食物选择和其后代的遗传特性存在一定的关联。

这符合孟德尔遗传定律中的隐性遗传和显性遗传规律。

通过本次实验,我们进一步了解了果蝇的遗传特性,也验证了孟德尔的遗传定律在果蝇身上的适用性。

实验总结:通过本次实验,我们对果蝇的遗传特性有了更深入的了解,也对孟德尔的遗传定律有了更直观的验证。

果蝇实验是遗传学研究中的经典实验之一,通过对果蝇的观察和实验,我们可以更好地理解遗传规律,为遗传学的研究提供重要的实验依据。

结语:果蝇实验不仅在遗传学领域有重要意义,也可以为我们更好地理解生命科学中的一些基本规律提供帮助。

希望通过本次实验,大家能对果蝇的遗传特性有更深入的了解,也能对遗传学的研究有更多的兴趣和认识。

分辨果蝇雌雄实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 掌握果蝇作为模式生物在遗传学研究中的重要性。

2. 观察并记录果蝇生活史各个阶段的形态特征。

3. 重点掌握区分雌雄果蝇的方法。

4. 识别几种常见的突变性状:白眼(w)、残翅(vgvg)、黑檀体(ee)。

5. 了解果蝇的饲养方法。

二、实验原理果蝇(Drosophila melanogaster)是生物学研究中一种重要的模式生物,具有生活史短、繁殖率高、染色体数少、饲养简便等优点。

通过对果蝇的研究,可以了解基因分离、连锁交换、染色体畸变以及基因的表达与调节等方面的知识。

本实验通过观察果蝇的形态特征,区分雌雄果蝇,并识别几种常见的突变性状。

三、实验材料1. 野生型果蝇:红眼、灰体、长翅、直刚毛。

2. 突变体果蝇:白眼(w)、残翅(vgvg)、黑檀体(ee)。

3. 乙醚、麻醉瓶、放大镜、显微镜、毛笔、白瓷板、解剖针等。

四、实验步骤1. 观察果蝇幼虫期形态特征,记录幼虫期的性别区分特点。

2. 观察果蝇蛹期形态特征,记录蛹期的性别区分特点。

3. 观察果蝇成虫期形态特征,重点区分雌雄果蝇。

a. 观察体型:一般雌性个体要明显大于雄性个体。

b. 观察腹部末端:雌性腹部椭圆,末端稍尖;雄性末端钝圆。

c. 观察背部环纹:雌性有明显5条黑色条纹;雄性腹背只有3条,上部两条窄,最后1条宽且延伸至腹部腹面,呈一明显黑斑。

d. 观察性梳:雄蝇第一对胸足跗节的第一亚节基部有一梳状黑色鬃毛结构,为性梳;雌蝇没有性梳。

e. 观察腹部腹面末端外生殖器结构:雄蝇外生殖器色深,雌蝇色浅。

4. 识别几种常见的突变性状。

5. 学习果蝇的饲养方法。

五、实验结果1. 果蝇幼虫期较难区分雌雄,但可以通过观察幼虫的体型、颜色、刚毛等特征进行初步判断。

2. 果蝇蛹期难以区分雌雄,因为蛹期果蝇已经进入变态阶段,外部形态变化较大。

3. 果蝇成虫期较易区分雌雄,根据上述观察方法,可以准确判断果蝇的性别。

4. 成功识别了白眼(w)、残翅(vgvg)、黑檀体(ee)等几种常见的突变性状。

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亮红色、椭圆形复眼;体色黄,翅较身体稍长,有光泽;刚毛较密;平衡棒末端较为膨 大且较为透明。 (如图3.2.5.1) 3.2.5.2棒眼(Bar eye, BB)
暗红色、棒状复眼;体色较黄,翅不长且翅脉细黑;刚毛稍短;平衡棒末端 膨大。(如图3.2.5.2) 3.2.5.3.紫眼(purple eye, prpr)
选择生长良好、含有较多即将羽化的蛹的培养瓶,清除瓶中的成蝇。每隔 8~12 小时收 集一次幼蝇,麻醉后根据外生殖器判断雌雄,将雌性幼蝇存放培养瓶中。 检验:如培养 3-5 天后瓶内出现幼 虫则说明收集失败,需重新收集。
3 结果
3.1 果蝇的雌雄识别 3.1.1 大小(如图3.1) 雄性:体型较小 雌性:体型较大
母粉(市售干酵母或酵母片碾的粉)、丙酸、琼脂、自来水;电磁炉,钢精锅;玻璃棒,小 烧杯,脱脂棉 2.2 实验步骤 2.2.1 果蝇麻醉及观察的方法
选择亲蝇进行杂交或观察果蝇的性状,都要先将果蝇麻醉,使之处于不活动状态。麻醉 果蝇的操作步骤如下: 1、轻拍培养瓶壁,使果蝇震落到培养基。
2、把麻醉瓶和培养瓶的瓶盖同时拔开,迅速将培养瓶与麻醉瓶瓶口对接,轻拍培养瓶壁,
交配,交配后精子可以在雌蝇的受精囊中储存一段时间,然后释放到输卵管中。所以杂交试
验中母本必须使用未交配雌蝇。
2.2.3 果蝇的雌雄鉴别
1、个体
4、性疏有无(sex comb)(如图 2.2)
5、外生殖器结构及颜色(如图 2.3)
2.2.4 突变性状的观察
1、麻醉培养瓶中的果蝇 2、在解剖镜下观察野生型WT(红眼、直刚毛、
并用数码相机拍摄记录。 2.2.5 培养基的制备
图 2.3:果蝇外生殖器(左雌右雄)
1、计算配制所用的培养基的量及培养瓶数目
2、洗净培养瓶,并置于高压蒸汽灭菌锅中灭菌1小时(1kg/cm2大气压,121°C)
3、配制培养基,依照配方,根据用量准备原料: (以1000ml培养基量为例)
水(800ml)、玉米粉(84g)、白砂糖(60g)、琼脂(6g)、丙酸(5ml)、酵母粉(16g)
果蝇的性别鉴定、性状观察及饲养方法
杨明轩(同组组员:洪启元,唐瑞琪,陈杰,张晗) 班级:生物 111 班 学号:1102040128 实验时间:2012-10-24
摘要:学习果蝇(Drosophila)作为遗传学研究模式生物的优点及遗传学发展史。掌握麻醉瓶 的使用;学习鉴定果蝇性别的特征(大小、形态、条纹、性梳和外生殖器等);学习收集处 女蝇的方法;配制果蝇培养基;观察果蝇性状(野生型WT(红眼、直刚毛、长翅、灰身、有 平衡棒);黑檀体EB(红眼、直刚毛、长翅、黑身、有平衡棒);残翅Vg(红眼、直刚毛、 残翅、灰身、有平衡棒);三隐性Sm(白眼、焦刚毛、小翅、灰身、有平衡棒)),并为果 蝇杂交系列实验做准备。
图 3.2.1.1-3.2.4.4,果蝇野生型及突变体部分性状对比 排序为:3.2.1.1 3.2.2.1 3.2.3.1 3.2.4.1
3.2.1.2 3.2.2.2 3.2.3.2 3.2.4.2 3.2.1.3 3.2.2.3 3.2.3.3 3.2.4.3 3.2.1.4 3.2.2.4 3.2.3.4 3.2.4.4
1.引言
材料和方法对于遗传学的研究来说至关重要,理想的实验材料应具备染色体基数较少; 相对性状差异明显;表型易观察;交配可控;世代周期短;交配后代多;个体小;易于管理 等特征。
黑腹果蝇(Drosophila melanogaster),果蝇科(Drosophilidae)果蝇属 (Drosophila)昆虫。因其生活史短(在 25℃左右温度下十天左右繁殖 一代),繁殖力强(雌性可一次产下 400 个 0.5 毫米大小的卵),相对 性状明显且可遗传,易于培养,培养成本低(酵母和细菌,腐烂水果), 符合上述遗传学实验研究要求,同时因其染色体仅 4 对(如图 1), 基因组仅约 165Mb,并且基因组超过 60%的片段同人类疾病基因相 似。故已将其作为一种常见的模式生物(model organism)大量使用在 遗传学(genetics)和发育生物学(developmental biology)的研究。本次实 验目的在于掌握麻醉瓶的使用及收集处女蝇;识别几种果蝇性别的特 图 1:果蝇染色体组图解 征(大小、形态、条纹、性梳和外生殖器等);配制果蝇培养基;观 察果蝇几种突变性状并为果蝇杂交系列实验做准备。
蝇体体色较浅,胸部背面稍黄(如图3.2.4.1);白色、椭圆形复眼(如图3.2.4.2); 翅大致与腹部等长,翅脉黑色,分支较多(如图3.2.4.3);刚毛粗短、柔软、卷曲(如图 3.2.4.4);平衡棒末端膨大。 3.2.5其他突变体的观察 3.2.5.1亮红眼(scarlet eye, st st)
3.1.2 形态(如图 3.2) 雄性:腹部钝圆,相对窄小成柱 状 雌性:腹部稍尖,较宽厚呈卵圆 形 3.1.3 条纹(如图 3.3) 雄性:腹背只有三条,上部两条 较窄,最后一条宽且延伸至腹部 腹面,呈一明显黑斑。 雌性:腹部背面有宽窄相近的 5 条黑色条纹 3.1.4 性梳(sex comb)(如图 3.4) 雄性:第一对胸足跗足的第一 亚节基部有一梳状黑色鬃毛结 构,即性梳(sex comb)。 雌性:无性梳结构 3.1.5 外生殖器结构(如图 3.5) 雄性:颜色较深,结构较雌性 复杂
体色明显呈现黑色(如图3.2.3.1);红色、椭圆形复眼(如图3.2.3.2);翅较长,超 过腹部有光泽;翅脉粗黑(如图3.2.3.3);刚毛密集(如图3.2.3.4);平衡棒末端膨大, 呈黑色。 3.2.4三隐性:小翅(miniature wing, mm)、白眼(white eye, ww)、焦刚毛(signed bristle, sn3sn3)
紫色、椭圆形复眼;体色偏浅;翅与体长大致相等,有光泽,翅脉较黑;刚毛较密;平
衡棒末端膨大。(如图3.2.5.3) 3.2.5.4裂翅(curved wing, cc)
翅宽且呈三角断裂,翅脉较细;体色偏黄,身体较为细长;红色、椭圆形复眼;刚毛较
细、较多;平衡棒不明显。(如图 3.2.5.4)
图 3.2.5.1-3.2.5.4,果蝇其他突变性状
0.5mm,白色椭圆形,前端背面有一对触丝使卵能附在
食物或瓶壁上。受精卵24小时内便孵化成幼虫,幼虫经
两次蜕皮(分别为一龄幼虫(24小时),二龄幼虫(24小
时))成为三龄幼虫,三龄幼虫体长可达4-5mm,用肉眼
观察可见其一端稍尖,上有一黑色钩状口器,幼虫生活
约4天左右开始结蛹并停止摄食,爬到相对干燥的表面, 图 2.1:果蝇的生活周期 逐渐形成菱形的蛹。从蛹中羽化出的果蝇8~12小时候即可
图 3.1,果蝇体型(左雄右雌) 图 3.2,果蝇腹部(左雌右雄) 图 3.3,果蝇腹背条纹(左雄右雌)
图 3.4,果蝇性梳(左雄有,右雌无)
雌性:颜色很浅
图 3.5,外生殖器结构(左雄右雌)
观察小结:因需对处女蝇收集,在收集过程中,发现因为果蝇均处于幼年期,成年雄 蝇所应具备的性梳结构均不明晰,不便作为鉴别雌雄的标志。而条纹差异均较为明显,因 此实验中大多以条纹区分雄雌。 3.2 野生型果蝇及其突变种的表型 3.2.1野生型(wild type,wt)
图4.4 基因敲除流程 F ig. 1 Flow chart o f gene knockout
使果蝇落入麻醉瓶中,并用手盖住麻醉瓶瓶口。
3、在麻醉瓶塞子内塞上一小团脱脂棉,滴上几滴乙醚,然后将麻醉瓶盖住。观察果蝇的状
态,横着转动麻醉瓶,果蝇失去附壁能力,随着瓶子一同滚动,麻醉完成。
4、将麻醉的果蝇至于塑料板上,放在解剖镜下观察,用解剖针拨动观察各个部位的结构特
征。如果果蝇在观察期间苏醒并活动,可用培养皿罩住,将滴入乙醚的滤纸条伸进再次麻醉。
图 2.2:雄果蝇的性疏结构
长翅、灰身、有平衡棒);黑檀体EB(ebony body)
(红眼、直刚毛、长翅、黑身、有平衡棒);
残翅Vg(vestigial wing)(红眼、直刚毛、残
翅、灰身、有平衡棒);三隐性Sm(白眼(white
eye)、焦刚毛(singed bristle)、小翅
(miniature wing)、灰身、有平衡棒)的性状
5、观察过的果蝇如不要,倒入尸体盛留器中。如果蝇还需保留,将培养瓶横卧,用毛笔轻
轻将麻醉的果蝇拨入瓶侧壁上,待果蝇苏醒后,再竖起
培养瓶,防止果蝇粘在培养基上死亡。
2.2.2 果蝇的生活周期
果蝇属完全变态昆虫,其完整的生活周期科分为卵、
幼虫、蛹和成虫4个明显时期(如图2.1)。
25℃时成蝇一般在交配1~2天后开始产卵,卵长约
具体配制方法:
方法1、先用水将琼脂加热溶解,再溶入糖,然后慢慢加入玉米粉,边加达搅拌,成为稀糊 状后停火,然后加入丙酸搅匀,趁热分装,待冷却后加入酵母粉及丙酸。 方法2、事先取水量的一半,加入琼脂,煮沸,使充分溶解,加糖,煮沸溶解。取另一半水 混和玉米粉,加热,调成糊状。将上述两者混和,煮沸并不断搅拌,以免沉积物烧焦。待稍 冷后加入酵母粉及丙酸,充分调匀,分装。 4、分装培养基。每瓶大致倒1.5-2cm厚的培养基,且尽可能不能粘壁。 5、干燥培养基。放置 8 小时以保证培养基固定。在室温下干燥 1-2 天,待其表面完全凝固 后使用。 2.2.6 处女蝇的收集
4讨论
对于本次实验,存在以下一些问题不足、注意事项和改进方法 1、因需对处女蝇收集,在收集过程中,发现因为果蝇均处于幼年期,成年雄蝇所应具 备的性梳结构均不明晰,不便作为鉴别雌雄的标志。而条纹差异均较为明显,因此实验中 大多以条纹区分雄雌。 2、鉴别处女蝇过程中很可能出现鉴别不清的时候导致产卵,此时不应扔弃。正确的解 决办法为该管继续培养,作为后续验证杂交实验的样品管,以起到节约原则。 3、处女蝇的收集需尽快完成,最好在 1~2 次收集足量的处女蝇。防止由于收集时间和 次数的增多,而导致培养基被污染,变质干缩。 4、使用 flybase 数据库查阅相关基因及其相关信息,可以借助此图中尤其是该基因片 段位点对后续杂交试验提供理论支持,并为有关基因实验中(如基因敲除、双交换等)提供 理论依据。 补充资料: 基因敲除—基因敲除是20世纪80年代发展起来的 一项重要的分子生物学技术。基因敲除主要是应用DNA 同源重组原理, 用设计的同源片段替代靶基因片段 (即基因打靶), 从而达到基因敲除的目的。基本程序 是: 用PCR 技术扩增目的基因序列, 在体外插入卡拉 霉素、四环素等受体菌原先不具有的抗性标记, 使目 的基因失活, 再将失活的目的基因构建至一环状载体 上, 用电转化、显微注射等方法将构建好的载体转化 入受体细胞内, 以抗性标记初步筛选阳性菌或进行目 的基因功能的失活检测, 再以PCR, southern杂交等 做进一步验证。(流程如图4.4)
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