电泳技术的临床应用-完整版共133页文档
电泳
第二节 常用电泳技术和电泳方法
二、电泳方法简介 指用滤纸作为支持载体的电泳方法。 （一）纸电泳 指用滤纸作为支持载体的电泳方法。是 最早使用的区带电泳。 最早使用的区带电泳。 将滤纸条水平地架设在两 个装有缓冲溶液的容器之 样品点于滤纸中央。 间，样品点于滤纸中央。 当滤纸条被缓冲液润湿后， 当滤纸条被缓冲液润湿后， 再盖上绝缘密封罩， 再盖上绝缘密封罩，即可 由电泳电源输入直流电压 （100V～1000V）进行电 100V～1000V） 泳。
第二节 常用电泳技术和电泳方法
采用两种不同浓度的电解质组成， （五）等速电泳 采用两种不同浓度的电解质组成，一种为 前导电解质，充满整个毛细管柱；另一种为尾随电解质， 前导电解质，充满整个毛细管柱；另一种为尾随电解质， 置于一端的电泳槽中。 置于一端的电泳槽中。前导电解质的迁移率高于任何样品 组分，后者则低于任何样品组分， 组分，后者则低于任何样品组分，被分离的组分按其不同 的迁移率夹在中间，在强电场的作用下， 的迁移率夹在中间，在强电场的作用下，各被分离组分在 前导电解质与尾随电解 质之间的空隙中移动， 质之间的空隙中移动， 实现分离
第一节 电泳原理
二、影响电泳的外界因素 （一）电场强度 （二）溶液的pH值 溶液的pH值 pH （三）溶液的离子强度 （四）电渗作用 （五）粒子的迁移率 （六）吸附作用
第二节 常用电泳技术和电泳方法
一、电泳技术的分类 （一）根据工作原理的不同：可分为移界电泳、区带电泳、 根据工作原理的不同：可分为移界电泳、区带电泳、 等速电泳、等电聚焦电泳、免疫电泳等。 等速电泳、等电聚焦电泳、免疫电泳等。 （二）根据有无固体支持物可分为：自由电泳和支持物电泳 根据有无固体支持物可分为：
第二节 常用电泳技术和电泳方法
电泳技术及其应用
电泳技术及其应用电泳技术电泳技术，是指在电场作用下，带电颗粒由于所带的电荷不同以及分子大小差异而有不同的迁移行为从而彼此分离开来的一种实验技术。
一、电泳技术的基本原理在电场中，推动带电质点运动的力(F)等于质点所带净电荷量(Q)与电场强度(E)的乘积。
F,QE 质点的前移同样要受到阻力(F)的影响，对于一个球形质点，服从Stoke定律，即:F′,6πrην 式中r为质点半径，η为介质粘度，ν为质点移动速度，当质点在电场中作稳定运动时:F,F′即QE,6πrην 上式交换后可写成:V/E=Q/6&r@vν/E的含意为单位电场强度下的移动速度，里可用迁移率μ表示，即( ) 从上式可见，球形质点的迁移率，首先取决于自身状态，即与所带电量成正比，与其半径及介质粘度成反比。
除了自身状态的因素外，电泳体系中其它因素也影响质点的电泳迁移率。
二，电泳技术的分类:电泳法可分为自由电泳(无支持体)及区带电泳(有支持体)两大类。
用支持体的电泳技术:1.纸上电泳2.醋酸纤维薄膜电泳3.薄层电泳4.非凝胶性支持体区带电泳 (支持体有:淀粉，纤维素粉，玻璃粉，硅胶等)5.凝胶支持体区带电泳 ?淀粉液 ?聚丙烯酰胺凝胶 ?琼脂(糖)凝胶不用支持体的电泳技术:1.Tiselius或微量电泳2.显微电泳3.等电点聚焦电泳技术4.等速电泳技术5.密度梯度电泳三、影响电泳的因素1、首先决定于带颗粒的性质，即颗粒所带净电荷的数量，大小及形状一般说来，颗粒带净电荷多，直径小而接近于球形，则在电场中泳动速度快，反之则慢。
泳动度还与分子的形状，介质粘度，颗粒所带电荷有关，泳动度与颗表面电荷成正比，与介质粘度及颗粒半径反比。
带电荷的高分子在电解质溶液中把一些带有相反电荷的离子吸引在其周围，形成一离子扩散层。
加以电场时，颗粒向符号相反的电极移动即带阳电荷颗粒移向负极，带阴电荷颗粒移向正移;离子扩散层由于带有过剩的与颗粒符号相反的电荷，可以向相反方向移动。
电泳综述的原理和应用
电泳综述的原理和应用1. 介绍电泳是一种常用的分离和纯化生物大分子的技术，广泛应用于生物科学、药物研发、环境监测等领域。
本文将介绍电泳的原理和应用。
2. 电泳的原理电泳是利用分子在电场中的电荷和大小、形状、大小等特性而进行分离的技术。
下面是电泳的原理：•电荷：–分子在电场中带有电荷，根据其电荷决定了其在电场中的迁移速度。
具有正电荷的分子会向阴极迁移，而具有负电荷的分子会向阳极迁移。
•大小：–分子的尺寸也会影响其在电场中的迁移速度。
较小的分子通常会迁移得更快，而较大的分子则迁移得更慢。
•形状：–分子的形状也会影响其在电场中的迁移速度。
球状分子通常迁移得比较快，而椭圆形或线状分子迁移得比较慢。
3. 电泳的类型电泳可分为几种不同的类型，根据电场和分离介质的不同。
下面是几种常见的电泳类型：•疏水凝胶电泳：–在电泳过程中，使用疏水凝胶作为分离介质，通过限制分子在凝胶中的扩散来实现分离。
适用于较大分子的分离。
•聚丙烯酰胺凝胶电泳：–聚丙烯酰胺凝胶是一种常用的分离介质，可以根据分子的大小、形状和电荷来实现分离。
适用于DNA和蛋白质等分子的分离。
•聚丙烯酰胺纤维素毛细管电泳：–在毛细管中进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，可以实现高分辨率和快速分离。
适用于DNA测序和肽段分析等应用。
•聚丙烯酰胺连续电泳：–聚丙烯酰胺连续电泳是一种快速、高效的电泳方法，适用于大规模分离和纯化。
主要用于蛋白质的分离和纯化。
4. 电泳的应用电泳在生物科学、医药研发、环境监测等领域有广泛的应用。
下面是一些电泳的应用示例：•DNA测序：–电泳可以用于DNA测序中的分离和检测，通过电泳可以确定DNA序列。
•蛋白质分离：–电泳可以用于蛋白质的分离和纯化，可以根据蛋白质的大小、电荷和形状等特性来进行分离。
•转基因检测：–电泳可以用于转基因检测中，通过分离和检测目标基因来确定是否存在转基因物质。
•环境污染监测：–电泳可以用于环境监测中的分离和检测，通过检测环境样品中的污染物来评估环境污染程度。
蛋白电泳临床应用
血清蛋白电泳的临床应用九九重阳君搜集整理蛋白质在人体的生理、病理活动中发挥着极其重要的作用，许多疾病及其过程会显示出其特别的血清蛋白图谱，因此，利用血清电泳能帮助诊断和鉴别诊断各种疾病，以及帮助监视疾病的预后和治疗效果。
血清蛋白电泳是临床实验室检测蛋白质的常用方法。
它的扫描曲线可以直观的显示各种蛋白质组分，为此，血清蛋白电泳图谱至今仍然是了解血清蛋白全貌有价值的方法，用作初筛试验，以提供较全面的信息。
一、正常人血清蛋白电泳图谱及解释正常人血清蛋白电泳图谱，见图3-1，第一幅。
其主要包括五个区带，即白蛋白区带、α1球蛋白区带、α2球蛋白区带、β球蛋白区带、γ球蛋白区带。
（1）白蛋白区带主要有白蛋白构成，正常范围为57-68% ；（2）α1球蛋白区带主要包括抗胰蛋白酶、α1脂蛋白、α1酸性糖蛋白、甲状腺结合球蛋白、凝血酶原等；正常范围为1-5.7%；（3）α2球蛋白区带主要含有α2巨球蛋白、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、α2脂蛋白、红细胞生成素等，正常参考范围4.9-11.2%；（4）β球蛋白区带主要含有转铁蛋白、β脂蛋白、补体C3、补体C4、β2微球蛋白等，正常参考范围为7-13%；（5）γ球蛋白区带主要含有IgG、IgM、IgA、IgD、IgE免疫球蛋白，正常参考范围为9.8-18.2%。
二、血清蛋白电泳与疾病在影响蛋白质生产、代谢、分泌的疾病中，可以见到各种常可鉴别的血清蛋白电泳图谱。
比如在单克隆γ球蛋白病、肝硬化、肾功能衰竭、低免疫球蛋白血症及多发性骨髓瘤等病症上，血清蛋白电泳是一项有助于建立诊断的技术。
疾病状态下电泳图谱的解释原则（1）有许多蛋白血清含量很低，往往难于在图谱上显示出明显区带，而被其它高浓度的蛋白所遮盖。
如铜蓝蛋白通常被α2巨球蛋白及结合珠蛋白所覆盖。
（2）有些蛋白如糖蛋白、脂蛋白，染色后着色较差，区带显示不明显。
（3）观察病人电泳图谱时，必须与正常人对照比较。
（4）遇到异常电泳图谱时，应当用免疫化学法做进一步分析，用以决定异常蛋白的性质和含量。
Sebia全自动凝胶电泳仪的临床应用
Sebia全自动凝胶电泳仪的临床应用随着生物技术的不断发展，分子生物学在临床诊断和治疗中的应用越来越广泛。
其中，全自动凝胶电泳仪作为一项重要的技术，为临床应用提供了强有力的支持。
本文将重点介绍Sebia全自动凝胶电泳仪及其在临床应用中的优势。
Sebia全自动凝胶电泳仪是一种高效、自动化的分子生物学分析仪器，主要应用于DNA、RNA和蛋白质的分析。
该仪器具有高分辨率、高灵敏度和高重复性的特点，能够提供准确、可靠的检测结果。
疾病诊断：全自动凝胶电泳仪能够通过对特定基因的表达水平进行分析，帮助医生对疾病进行早期诊断和预后判断。
例如，通过对肺癌、乳腺癌等肿瘤相关基因的表达水平进行检测，有助于医生对患者的病情进行准确诊断。
药物筛选：全自动凝胶电泳仪可以用于药物筛选过程中，通过对药物作用靶点的检测和分析，筛选出具有潜在疗效的药物。
这有助于缩短药物研发周期，提高药物研发效率。
遗传病诊断：全自动凝胶电泳仪能够对基因突变进行检测，帮助医生对遗传病进行诊断。
例如，通过对地中海贫血基因的检测，有助于医生对地中海贫血进行诊断。
微生物鉴定：全自动凝胶电泳仪可以用于鉴定细菌、病毒和其他微生物。
通过对微生物的基因组进行分析，有助于医生确定感染源，为感染性疾病的诊断和治疗提供依据。
血液分析：全自动凝胶电泳仪可以用于血液分析，帮助医生对血液疾病进行诊断。
例如，通过对血红蛋白、白细胞和血小板等血液成分的分析，有助于医生对贫血、白血病和血小板减少等疾病进行诊断。
优势：全自动凝胶电泳仪具有自动化、高分辨率和高灵敏度等优势，能够提供准确、可靠的检测结果。
该仪器操作简便，能够大大缩短检测时间，提高检测效率。
局限性：全自动凝胶电泳仪的价格较高，限制了其在临床的广泛应用。
该技术的灵敏度和特异性受限于检测样本的质量和数量，需要严格控制样本采集和处理的各个环节。
Sebia全自动凝胶电泳仪作为一种高效的分子生物学分析仪器，在临床应用中具有广泛的前景。
1. 电泳技术的临床应用-完整版
MGUS携带者特征:
-未出现临床和影像学特征 -未出现不良反应, 未检测到血钙升高,也未出现肾功 能衰竭 -未见骨髓瘤的临床特征 -单克隆免疫球蛋白 < 20g/l -其他免疫球蛋白都是正常的,同时在患者尿液中未检 测到本周氏蛋白 -单克隆免疫球蛋白的浓度随着时间的推移未发生增 加现象 -其他的免疫球蛋白的浓度也未随时间推移而出现下降
更快.Βιβλιοθήκη 溶血的标本出现在a2区域的单克隆免疫球蛋白
下列情况下Alpha2区域会出现增加现象:
- 炎症症状 - 肾病综合征 - 出现游离轻链
肾病综合征
Beta globulins(β球蛋白区带)
在下列情况下会出现下降 :
- 肝功能不全 - C3 长期缺乏 或者 C3 代谢过快
(also in aging sample,C3 denaturation, splitted in up to 4 fractions: 1 between a2and b 1 on b1 1 on b2 and 1 on g)
(C Hepatitis, HIV disease, CMV(巨细胞病毒), EBV,…)
- 免疫抑制治疗
Oligoclonal pattern(寡克隆免疫球蛋白)
血清蛋白电泳是 M蛋白 (Monoclonal Protein) 多克隆 (polyclonal Protein) 寡克隆 (Oligoclonal Protein) 的首选检测项目
双白蛋白血症
双白蛋白血症
在下列情况下白蛋白会出现下降 :
- 肾病综合症, 蛋白流失, 胃肠病: 检查尿蛋白
-
淋巴细胞增生综合征 营养不良 肝脏功能不全 慢性炎症 严重烧伤 血液稀释
在下列情况中白蛋白会出现增加:
电泳技术及临床应用
**市中心医院检验科生化室
操作步骤-点样
**市中心医院检验科生化室
操作步骤-选择电泳类型
**市中心医院检验科生化室
操作步骤-烘干染色
**市中心医院检验科生化室
操作步骤-扫描
**市中心医院检验科生化室
电泳结果
**市中心医院检验科生化室
2.血清蛋白电泳看的是什么？
含量的变化 : 条带中蛋白含量增或减
血清蛋白成分简介— β1区
转铁蛋白（TRF）是血浆中主要的含铁蛋白质，分子量7.7万，等电 点5.7，半寿期7天，点泳位于β 1区带。血浆中TRF水平可用于贫血 的诊断和对治疗的监测。TRF在急性时相反应中往往降低。因此在炎 症恶性病变时常随着白蛋白和前白蛋白同时下降，在慢性肝病及营 养不良时亦下降，可作为营养状态的一项指标。妊娠及口服避孕药 或雌激素注射可使血浆TRF升高。 血红素结合蛋白（Hpx）分子量为5.7万。和游离血红素有特异结合 能力，可配合结合珠蛋白对血红蛋白进行处理。当广泛溶血时，血 浆结合珠蛋白耗竭，循环中游离的血红可降解为珠蛋白和血红素两 部分，Hp可与血红素可逆结合，而在血循环中反复利用，这是机体 有效地保存铁的又一种方式。 β -脂蛋白：分子量300万。主要功能脂类的运输。肾病患者或某些 肠道疾病患者，常见导致血浆蛋白丢失，由于肝细胞补偿性的合成 增加，β -脂蛋白可有增加。 C4：补体成分，分子量20.6，属急性时相反应蛋白之一，在炎症、 创伤、心肌梗死、感染、肿瘤等情况下可见升高。
**市中心医院检验科生化室
血清蛋白电泳图谱
白蛋白 α1球蛋白区 α2球蛋白区 Β球蛋白区 Γ球蛋白区
**市中心医院检验科生化室
血清蛋白电泳图谱—正常sebia质控
电泳技术及其在医学中的应用--常若云
双白蛋白血症
1、肾功能不全病人，大剂量应用β 内酰胺类抗生素引
起，抗生素与蛋白质结合所致，此为一过性。
2、遗传性，一般无病理学改变及影响。
3、胰腺炎患者大ห้องสมุดไป่ตู้胰酶进入血液降解白蛋白，使白蛋 白迁移率改变引起。
电泳的目的是什么?
检测异常:
定量: 组分的增加或减少 定性: 异常成分的存在
包括琼脂糖凝胶电泳和免疫沉淀两个操作过程，检测标 本可以是血清、尿液、脑脊液等，主要用于分泌型多发
性骨髓瘤M蛋白、Waldenstrom巨球蛋白血症、轻链病、
重链病等的分型与鉴定。已列入临床实验室的常规检测 工作。
Oligoclonal patterns (several faint bands) associated with:
原发性肝癌型特征：甲胎蛋白(AFP)> 1000mg/L， 白蛋白和α1球蛋白之间出现一个小峰, 球蛋白增高
。
多克隆增高见于:
- 炎症 - 肝硬变 - 亚急性或慢性感染
异常条带
- 单克隆成分 - 寡克隆模式
M蛋白血症（Monoclonal gammap-athies, MG）： 是由于单一克隆浆细胞无限增殖产生的均一蛋白所导
α1 α2
M 蛋 白
α1 α2 γ
α1 α2
慢性感染
肝硬化型
• 主要特征： Alb均有不同程度的降低，α1、α2 和β球蛋白正常或降低，γ-G明显增高且宽度增 加，可见β-γ桥。 • 病理生理： 肝细胞受损导致Alb明显降低，β-γ 桥的出现与血清免疫球蛋白，特别是IgA、 IgM、IgG同时增加有关，其中以IgA影响较大， 当IgA和IgM泳动在β和γ之间，使β区带与γ区 带融合而形成β-γ桥。
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电泳技术的临床应用-完整版
6
、
露
凝
无
游
氛
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天
高
风
景
澈
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7、翩翩新 来燕，双双入我庐 ，先巢故尚在，相 将还旧居。
8
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吁
嗟
身
后
名
，
于
我
若
浮
烟
。
9、 陶渊 明（ 约 365年 —427年 ），字 元亮， （又 一说名 潜，字 渊明 ）号五 柳先生 ，私 谥“靖 节”， 东晋 末期南 朝宋初 期诗 人、文 学家、 辞赋 家、散
1
0
、
倚
南
窗
以
寄
傲
，
审
容
膝
之
易
安
。
1、最灵繁的人也看不见自己的背脊。——非洲 2、最困难的事情就是认识自己。——希腊 3、有勇气承担命运这才是英雄好汉。——黑塞 4、与肝胆人共事，无字句处读书。——周恩来 5、阅读使人充实，会谈使人敏捷，写作使人精确。——培根
文 家 。汉 族 ，东 晋 浔阳 柴桑 人 （今 江西 九江 ） 。曾 做过 几 年小 官， 后辞 官 回家 ，从 此 隐居 ，田 园生 活 是陶 渊明 诗 的主 要题 材， 相 关作 品有 《饮 酒 》 、 《 归 园 田 居 》 、 《 桃花 源 记 》 、 《 五 柳先 生 传 》 、 《 归 去来 兮 辞 》 等 。