人肝细胞生长因子(HGF)elisa试剂盒使用说明书
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书

癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
肝细胞生长因子(HGF)诱导肝癌Huh7细胞发生上皮间质转化(EMT)后细胞膜表面糖蛋白糖谱的变化

肝细胞生长因子(HGF)诱导肝癌Huh7细胞发生上皮间质转化(EMT)后细胞膜表面糖蛋白糖谱的变化莫翠菊;秦雪;康晓楠;彭契六;江凯;卢宇;隋靖喆;翟励敏;刘银坤【摘要】目的应用凝集素芯片技术寻找肝癌细胞表面转移相关的特征性糖谱.方法应用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)诱导建立肝癌上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)细胞模型.通过凝集素芯片比较诱导前后细胞膜的糖谱改变,采用凝集素印迹和荧光细胞凝集素免疫组化方法验证芯片结果.结果诱导后细胞对凝集素ACL、BPL、JAC、MPL、PHA-E、SBA和SNA 的亲和作用减弱,而对凝集素AAL、ConA、DBA、GSLⅡ、ECL、HAL、LCA、LTL、NML、NPL、PHA-L、PTLⅡ和WFL的亲和作用增强.提示诱导后肝癌细胞表面出现了黏蛋白T/Tn抗原、平分型N-乙酰葡萄糖胺、α2,6唾液酸和末端a或β连接的N-乙酰半乳糖胺结构减少;而末端和核心岩藻糖、高甘露糖、N-乙酰葡萄糖胺p 1,6分支和复杂型寡糖分支结构增多.结论肝癌细胞发生EMT过程中细胞膜表面糖链结构改变,提示糖链结构与肝癌的转移密切相关,为有效控制肝癌转移、改善预后提供了新思路.【期刊名称】《复旦学报(医学版)》【年(卷),期】2014(041)002【总页数】7页(P198-204)【关键词】凝集素芯片;糖谱;肝癌(HCC);上皮间质转化(EMT);肝细胞生长因子(HGF)【作者】莫翠菊;秦雪;康晓楠;彭契六;江凯;卢宇;隋靖喆;翟励敏;刘银坤【作者单位】广西医科大学第一附属医院检验科南宁530021;复旦大学附属中山医院肝癌研究所上海200032;广西医科大学第一附属医院检验科南宁530021;复旦大学生物医学研究院上海200032;广西医科大学第一附属医院检验科南宁530021;复旦大学附属中山医院肝癌研究所上海200032;复旦大学生物医学研究院上海200032;广西医科大学第一附属医院检验科南宁530021;广西医科大学第一附属医院检验科南宁530021;广西医科大学第一附属医院检验科南宁530021;复旦大学附属中山医院肝癌研究所上海200032;复旦大学生物医学研究院上海200032【正文语种】中文【中图分类】R392.12蛋白质糖基化是翻译时一种重要的共修饰方式,蛋白质糖基化修饰伴随多种肿瘤的发生和侵袭转移,并会随着病情而改变[1]。
人血管内皮细胞生长因子(VEGF)定量检测试剂盒(ELISA)

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。
人血管内皮细胞生长因子(VEGF)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】人血管内皮细胞生长因子(VEGF)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测人子血清、血浆及相关液体样本中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的含量。
【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。
将标准品、待测样本加入到预先包被人血管内皮细胞生长因子(VEGF))多克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。
依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人血管内皮细胞生长因子(VEGF))浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人血管内皮细胞生长因子(VEGF))含量。
【试剂盒组成】1 酶标包被板12孔×8条7 底物夜A6mL2 标准品:1600pg/ml0.6mL 8 底物夜B6mL3 20倍浓缩洗涤液20mL9 终止液6mL4 标准品稀释液6mL10 说明书1份5 样本稀释液6mL 11 封板膜1张6 酶标试剂6mL12 密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:1600、800、400、200、100、50pg/ml【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。
2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。
艾美捷-elabscience 人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF FGF2)酶联免疫吸附测定试剂盒

(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)产品货号:E-EL-H6042产品规格:96T/48T/24T人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF/FGF2)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human bFGF/FGF2(Basic Fibroblast Growth Factor) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话************QQ客服800110755具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
用途该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其它相关生物液体中bFGF/FGF2浓度。
灵敏度、检测范围、特异性和重复性●灵敏度:18.75pg/mL。
●检测范围:31.25-2000pg/mL。
●特异性:可检测样本中的人bFGF/FGF2,且与其它类似物无明显交叉反应。
●重复性:板内,板间变异系数均<10%。
检测原理本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。
用抗人bFGF/FGF2抗体包被于酶标板上,实验时样品(或标准品)中的人bFGF/FGF2会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。
后依次加入生物素化的抗人bFGF/FGF2抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,抗人bFGF/FGF2抗体与结合在包被抗体上的人bFGF/FGF2结合,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。
加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。
用酶标仪在450nm波长处测OD值,bFGF/FGF2浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中bFGF/FGF2的浓度。
试剂盒组成及保存未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒并按照下表中的条件分别保存各组分。
人血管内皮生长因子 ELISA 试剂盒说明书

产品说明书人血管内皮生长因子ELISA试剂盒(Human VEGF ELISA KIT)产品货号:H6139S, H6139M, H6139L产品规格:24T, 48T, 96T产品内容:注:终止液和显色剂具有腐蚀性,一旦接触到液体,请尽快用大量清水冲洗。
储存条件4℃避光保存,有效期见外包装。
开封后,保存温度详见说明书。
产品介绍Human VEGF ELISA Kit (Human Vascular Endothelial Cell Growth Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即人血管内皮生长因子ELISA试剂盒,可以定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中的天然和重组VEGF浓度。
人VEGF是由两个相同亚基以二硫键交联组成的二聚体糖蛋白,基因定位于第6号染色体长臂,由8个外显子和7个内含子交替构成,约14 kb。
由于mRNA剪接方式不同,产生了单链分别含121,145,165,183,189和206个氨基酸的不同变异体。
VEGF 121分子量约为34-46 kDa,是可溶性分泌型蛋白质,以游离状态存在,不能与肝素结合;VEGF 165分子量为45 kDa,30-50%以可溶性形式分泌于细胞外基质,其余部分与细胞膜、基底膜或细胞外基质含有肝素的糖蛋白结合。
VEGF 145存在于胎盘细胞和女性生殖道肿瘤细胞。
VEGF 189及VEGF 206分泌后完全结合于细胞膜或基底膜含有肝素的糖蛋白上。
骨骼肌,心肌,肝细胞,成骨细胞,中性粒细胞,巨噬细胞,角质形成细胞,血小板,褐色脂肪组织,CD34+细胞,星形细胞,神经元和内皮细胞等多种细胞和组织均可产生VEGF。
血清和血浆样本均可检测到VEGF,由于血小板可释放VEGF,因此血清中VEGF含量较高。
VEGF是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子,可增加血管通透性、促进血管形成、引起细胞外基质成分改变等。
联科生物技术 细胞因子 ELISA 试剂盒

联科生物技术有限公司 全国免费电话:800 8571 184第四章细胞因子ELISA 试剂盒简介:美国Peprotech公司作为知名的重组细胞因子生产商,开发出了50余种细胞因子的ELISA检测试剂盒,试剂盒的检测灵敏度高,检测范围宽,为您的科研提供了又一有力的工具。
试剂盒组分及重悬方法:包被抗体--100ug 经抗原亲和纯化的包被抗体,冻干粉重悬--用1ml无菌蒸馏水重悬成100ug/ml的贮存液保存--4-8℃,保存两个月;-20℃分装冻存可贮存6个月检测抗体--100ug 经抗原亲和纯化的生物素标记的检测抗体,冻干粉重悬--用1ml无菌蒸馏水重悬成100ug/ml的贮存液保存--4-8℃,保存两个月;-20℃分装冻存可贮存6个月标准品--准确计量的重组细胞因子冻干粉,具体含量见说明书重悬--按说明书1ml无菌蒸馏水重悬成适当浓度的贮存液保存--4-8℃,保存1周;-20℃分装冻存可贮存2个月亲合素偶联的过氧化物酶--60ul/瓶,液体分装--分装到10只小瓶中,每瓶6ul保存---20℃分装冻存可贮存2年实验所需的材料:ELISA酶标板:推荐Nunc maxisorp,产品编号:442404Tween-20:推荐Sigma,产品编号:P-7949BSA(牛血清白蛋白):推荐Sigma,产品编号:A-7030ABTS底物溶液:推荐Sigma,产品编号:A-3219Dulbecco's PBS(10X):推荐Gibco BRL,产品编号:14200-075相关溶液配制:PBS:用无菌蒸馏水将10X PBS稀释为1X PBS洗涤液:含0.05% Tween-20的PBS封闭液:含1% BSA的PBS,过滤除菌,4℃保存1周稀释液:含0.05% Tween-20和0.1% BSA的PBS,过滤除菌,4℃保存1周注:以上所有试剂在使用前必须复温至室温。
包板:1) 用PBS将包被抗体稀释成1ug/ml,立即加到酶标板中,每孔100ul;2) 密封酶标板,室温孵育过夜;3) 吸除孔中的液体,并用300ul洗涤液洗孔4次;4) 最后一次洗涤后,将酶标板倒置除去残留的液体,并倒扣在吸水纸吸干孔沿上的液体;5) 每孔加300ul封闭液,室温孵育至少1小时;6) 吸除孔中的液体,并洗孔4次。
人 BMP-2 ELISA试剂盒说明书
人BMP-2ELISA试剂盒Human BMP-2ELISA kitCat#:EHC172尊敬的客户,感谢您选用本公司QuantiCyto®ELISA系列产品。
本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用专业体外诊断试剂生产技术制造,仅供科研使用。
本产品可检测血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等多种类型样本中天然和重组人BMP-2浓度,具体适用样本请咨询。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分。
如有疑问,请联系欣博盛生物科技有限公司。
Email:**********************,全国服务热线: 4006800892。
QuantiCyto ®EHC172Human BMP-22试剂盒组成:名称48T 96T 抗体预包被酶标板8×68×12冻干标准品5ng /支×2支5ng /支×3支标准品&标本通用稀释液12ml×1瓶20ml×1瓶浓缩生物素化抗体1支(规格见标签)1支(规格见标签)生物素化抗体稀释液10ml×1瓶16ml×1瓶浓缩酶结合物1支(规格见标签)1支(规格见标签)酶结合物稀释液10ml×1瓶16ml×1瓶浓缩洗涤液20×25ml×1瓶50ml×1瓶显色底物(TMB )6ml×1瓶12ml×1瓶反应终止液具腐蚀性6ml×1瓶12ml×1瓶封板胶纸3张6张产品说明书1份1份储存条件:未开封完整试剂盒4℃保存,请在保质期内使用。
已开封试剂盒抗体包被板条未用完的板条放回带拉链铝箔袋,封好口。
4℃条件下可储存1个月左右。
标准品冻干粉-20℃可储存6个月左右。
稀释后的标准品使用后请丢弃。
浓缩生物素化抗体浓缩液4℃可储存1个月左右,稀释后即用即弃。
浓缩酶结合物(避光)标准品&标本通用稀释液4℃条件下,可储存1个月左右。
碧云天生物技术 Human Angiogenin ELISA Kit PA023说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线:400-168-3301或800-8283301订货e-mail:******************技术咨询:*****************碧云天网站微信公众号网址:Human Angiogenin ELISA Kit产品编号产品名称包装PA023 Human Angiogenin ELISA Kit 96次产品简介:碧云天的Human Angiogenin ELISA Kit (Human Angiogenin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人血管生成素酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的Angiogenin的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。
多次重复检测结果表明,最小检出量为4.75pg/ml,与EGF、GM-CSF、MIP-1α、MIP-1β、TGF-α、TGF-β1,小鼠 EGF、GM-CSF、MIP-1α等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
人血管生成素(Angiogenin, ANG)是一种分子量为14kDa的单链非糖基化蛋白,属于核糖核酸酶中RISBASE家族。
该家族成员不仅具有核糖核酸酶活性,还具有一些特殊的生物学功能。
ANG氨基酸长度为123,包括3个链内二硫键。
人ANG与小鼠ANG具有75%的氨基酸同源性,且具有一定的种间交叉反应。
能够表达ANG的细胞主要有血管内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞、结肠柱状上皮细胞、淋巴细胞和部分肿瘤细胞。
ANG主要参与血管的形成过程。
基底膜的降解是血管新生过程中内皮细胞发生迁移的先决条件。
ANG首先与肌动蛋白结合,随后肌动蛋白-ANG复合物发生裂解,激活组织血纤维蛋白溶酶原。
这一过程产生的血纤维蛋白溶酶会降解基底膜中的层粘连蛋白和纤连蛋白。
(完整版)胎盘生长因子定量检测试剂盒(说明书)
胎盘生长因子定量检测试剂盒说明书(PLGF ELISA试剂盒:EIA4529 96T)1、简介PLGF酶免试剂盒可用于血清中人胎盘生长因子的定量检测.此试剂盒仅供体外诊断用。
血管生成和血管转化是胎盘正常发育过程中的重要步骤.血管生成和血管转化不正常是造成先兆性子痫妊娠和宫内胎儿生长迟缓的重要原因.胎盘生长因子是VEGF家族中一员,主要由胎盘分泌,它是一种有效的血管生成因子.PLGF相应的受体(可溶性的fms样酪氨酸激酶1)也具有促血管生成的性质。
2、实验原理PLGF ELISA试剂盒是一种固相的酶联免疫试剂盒,采用三明治夹心法的原理。
包被板的微孔中包被了能识别PLGF分子上独特抗原位点的单克隆抗体。
将含有一定量PLGF的病人样品加入到微孔中温育,之后洗板,洗板后加入对PLGF具有特异性的生物素标记多克隆抗体。
温育后洗板除去未结合的酶复合物.过氧化酶的结合量与样品中PLGF的浓度成正比。
加入底物液后,溶液所显示的颜色与样品中PLGF的浓度成正比。
3、试剂盒成分1)包被板,12*8(可拆),96孔,包被了抗PLGF抗体(单克隆)2)零标准品,1支,1ml,即用,0pg/ml,内含<0.35的proclin防腐剂。
3)标准品1-5,5支,1ml,即用,浓度:25;50;125;500;1000pg/ml,内含<0.35的proclin 防腐剂。
4)质控品,2支,1ml,即用,质控品的浓度值及可允许范围请见试剂瓶标签或质控单。
内含<0.35的proclin防腐剂。
5)检测缓冲液,1支,30ml,即用,内含<0。
35的proclin防腐剂.6)酶联物,1支,14ml,即用,生物素标记的羊抗人PLGF抗体,内含<0。
35的proclin防腐剂。
7)酶复合物,1支,14ml,即用,内含链酶素辣根过氧酶复合物,内含0.01%的methylisothiazolone和0.02% bromonitrodioxane防腐剂。
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
人肝细胞生长因子(HGF)elisa试剂盒使用说明书
Elisa kit规格:48孔配置/96孔配置
标准品稀释液:1.5ml×1瓶
酶标试剂:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)
【人肝细胞生长因子(HGF) elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒组成:
封板膜:2片(48)/2片(96)
说明书:1份
密封袋:1个
标准品: 2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存
样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肝细胞生长因子(HGF) 水平。
用纯化的人肝细胞生长因子(HGF) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(HGF) ,再与HRP标记的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(HGF) 抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,
并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(HGF) 呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人肝细胞生长因子(HGF) 浓度。
目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(HGF) 的含量。
服务承诺:
供货期:款到发货。
工作时间内免费的技术咨询和指导。
请来电咨询
为客户提供来样检测服务,最大限度实验结果的有效性(免费代测)。
保存条件及有效期:
试剂盒保存:2-8℃| 有效期:6个月
【人肝细胞生长因子(HGF) elisa试剂盒】样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1800ng/L,1200ng /L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止液后15分钟以内进行。
【人肝细胞生长因子(HGF) elisa试剂盒】注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围:
0.2IU/L - 6IU/L
樊克生物经营上万种检测试剂盒、ELISA试剂盒,酶免试剂盒,酶联免疫试剂盒,
酶联免疫分析试剂盒,涵盖人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、犬、鸡、马、猴、羊、猪、牛、各类植物等等种属标本。
详情可咨询。