第四章 实验动物的育种繁殖
实验动物繁殖育种和遗传质量控制方案制订
实验动物繁殖育种和遗传质量控制方案1. 方案目标本方案的目标是制订一套全面的实验动物繁殖育种和遗传质量控制方案，以确保实验动物群体的健康、稳定和高质量。
具体目标包括： 1. 提高实验动物繁殖效率和生产力； 2. 保持实验动物群体的遗传多样性； 3. 控制实验动物群体中潜在的遗传缺陷； 4. 促进实验动物群体的适应性和抗病能力。
2. 实施步骤2.1 确定合适的品系和个体选择策略为了确保繁殖育种的可行性和效率，首先需要根据实验需求选择合适的品系。
品系应具有稳定、健康和高生产力等特点，并且能够满足实验要求。
在选择个体时，应考虑其遗传背景、健康状态、性别比例平衡等因素，并借助基因检测技术对个体进行评估。
2.2 设计合理的交配计划根据所选品系和个体的特点，制定合理的交配计划。
交配计划应考虑到遗传多样性、遗传平衡和遗传优势等因素，以充分利用优质基因并减少潜在的遗传缺陷。
在制定交配计划时，可以借助数学模型和基因组学技术进行辅助分析。
2.3 实施精确的繁殖管理为了保证繁殖育种方案的有效实施，需要实施精确的繁殖管理措施。
包括： - 精确记录个体信息：对每个个体进行详细记录，包括出生日期、性别、健康状态、基因信息等。
- 控制环境条件：为实验动物提供适宜的环境条件，包括温度、湿度、光照等，并定期检测环境指标。
- 健康监测与预防措施：定期进行健康监测，及时发现并处理患病个体。
采取预防措施，如注射疫苗、消毒等。
- 饲养管理：提供合理的饲料和饮水，并定期检查饮食摄入量和营养状况。
2.4 遗传质量控制为了确保实验动物群体的遗传质量，需要进行遗传质量控制。
具体措施包括： -定期进行基因检测：通过基因检测技术，对实验动物群体进行定期监测，发现潜在的遗传缺陷和突变，并进行相应处理。
- 筛选和淘汰：根据基因检测结果和繁殖记录，对携带严重遗传缺陷或不符合繁殖标准的个体进行筛选和淘汰。
- 引入新基因：根据需要，可以引入新的优质基因来增加实验动物群体的遗传多样性和适应性。
(4)实验鼠繁育、保种要求及规则 -- 王桂琴
B6鼠的繁育特点及工作经验
1. 雄性繁殖鼠的年龄应在10周；雌性繁殖鼠应在8周。
检栓操作方法步骤
已见栓雌鼠
• 提前2天将雄鼠单放。配笼 时的第一天下午4:00 将雌 雄按2:1合笼；第二天早晨 8:30至9:00 检栓。 • 对已交配的雄鼠登记日期, 见栓标记“+”、未见栓标记 “-”。 提醒：同一只雄鼠得到的见栓 雌鼠最多可以两只放在一笼 中，且不同雄鼠得到的见栓 雌鼠要分开放置。 注：雄鼠不要连续交配使用。
分笼及预留鼠的管理
• 有的品系小鼠性情活泼，易发生逃逸。
我们在饲养区域如果发现有逃逸的小 鼠，捕获后对背景不明确的应进行安 乐死。或根据实验需要单独 饲养，以防品系错乱。
职业道德与动物福利
• 我们应该以尊重生命的态度尊重实验动物。在工 作中应该重视实验动物的生活和试验环境。 • 以人道主义的态度对待实验 动物在发达国家已经成为共识， 并已形成相关法规。
图示：小鼠因年龄偏大抵抗力下降，造成皮肤严重溃烂
图示：鼠龄为2015年4月 ~ 2017年2月
子宫脱垂小鼠
图示：鼠龄为2016年4月 ~ 2017年5月
肛门脱垂小鼠
图示：繁殖笼内的肿瘤鼠
图示：患老年白内障鼠
繁殖鼠的合笼操作
• 合笼前首先要明确繁殖鼠的遗传背景，品系名称以 及基因型和代数，不可混淆。
针对吃仔问题的解决方法：
• 对产仔胎数多的母鼠在怀孕期间食物中要适当增加葵花籽或 花生给孕鼠补充营养。 • 对当天出生的幼仔尽量避免用手触摸，不要打扰母鼠哺乳， 母鼠产仔的三天内不要换笼，要保持原有的气味。 • 要及时分出离乳小仔，防止母鼠超量哺乳而丧失母性行为。 • 要处理和淘汰年龄大、习惯性吃仔的母鼠。 • 可以将无泌乳能力的孕鼠提前与母性好、 泌乳好的受孕鼠放一笼代养。 • 要控制噪音或有震动等不利的 环境影响。
实验动物饲养与繁殖的方法
实验动物饲养与繁殖的方法一、饲养环境小鼠临界温度为低温10℃，高温37℃，温度中性范围30～33℃。
饲养环境控制应达到如下要求：温度18～29℃;相对湿度40～70%;最好控制在18～22℃,湿度50～60%。
一般小鼠饲养盒内温度比环境高1～2℃，湿度高5～10%。
要保持温度、湿度相对稳定，日温差不超过3℃,否则会直接影响小鼠的生长发育、生产繁殖、甚至导致小鼠发生疾病，从而影响实验结果。
温湿度的相对稳定对于建筑条件较差的地方可用空气调节器、加湿器、在北方用暖气进行调节。
为了保持室内空气新鲜，氨浓度不超过20ppm，换气次数应达到10～20次/小时。
垫料是小鼠生活环境中直接接触的铺垫物，起吸湿(尿)、保暖、做窝的作用。
因此垫料应有强吸湿性、无毒、无刺激气味、无粉尘、不可食，并使动物感到舒适。
垫料必需经消毒灭菌处理，除去潜在的病原体和有害物质。
一般垫料以阔叶林木的刨花或锯末为宜，也可用玉米芯加工粉碎除尘后使用。
在实验中切忌用针叶木(松、桧、杉)刨花做垫料，这类刨花发出具有芳香味的挥发性物质，可对肝细胞产生损害，使药理和毒理方面的实验受到极大干扰。
国外有专门的垫料生产企业，进行垫料的生产，而我国的垫料产业尚需开发。
目前我国实验动物部门大部分采用木材加工副产品如锯末、刨花等，其来源、树木种类很难控制，给实验动物质量控制带来很多不利影响。
二、饲料和饮水1.饲料(feed)不同种类的小鼠有不同的营养标准，如纯系小鼠和种鼠的饲料所含蛋白质成分高于一般小鼠，DBA小鼠需要高蛋白质低脂肪的饲料。
2.饮水(drinkingwater)小鼠的水代谢相当快，应保证足够的饮水。
一级动物饮水标准应不低于城市生活饮水的卫生标准。
二级动物的饮水须经灭菌处理。
也可用盐酸将水酸化(PH2.5～3.0)，使小鼠饮用酸化水，酸化水在一定程度上可抑制细菌的生长并杀死它们，其灭菌效果可达到要求。
三、四级动物饮水用高压高温方法灭菌。
三、一般饲养管理小鼠的饲养管理非常繁琐，要求饲养人员具有高度的责任心，随时检查小鼠状况，出现问题立即加以纠正。
第四章实验动物的育种繁殖
第四章实验动物的育种繁殖引言实验动物的育种繁殖是实验科学中不可或缺的一环。
通过合理的育种和繁殖计划，可以确保实验动物群体的遗传的稳定性，从而保证实验结果的可靠性和可重复性。
本章将介绍实验动物的育种繁殖相关的重要概念、方法和注意事项。
操作步骤1.选种和配对：–根据实验需要和研究目的，选择适合的实验动物品种。
–选择自然健康、无遗传疾病的个体作为育种对象。
–根据遗传和性状选择合适的个体进行配对。
2.性别鉴定：–根据实验动物的性别特征进行鉴定，如外部生殖器的形态等。
–需要特别注意幼仔和年幼个体的性别鉴定可能存在困难的情况。
3.确定交配时间：–根据实验动物的生理周期和繁殖特征，确定最佳的交配时间。
–了解实验动物的生理周期和繁殖相关的生理指标，如发情期等。
4.孕期和分娩管理：–孕期管理包括饲养、环境控制和健康监测等。
–分娩前需为雌性实验动物提供合适的分娩箱，并保持相对稳定的环境。
5.繁殖记录和标识：–对实验动物的繁殖过程进行详细记录，包括交配时间、分娩时间、幼仔数量等。
–对幼仔进行个体标识，可采用耳标、尾标或皮肤标记等方法。
6.仔鼠饲养和断奶：–仔鼠出生后需提供适合的饲养环境和食物。
–根据实验需要和动物生长发育特点，确定断奶时间点。
7.遗传良种选育：–根据实验需要和研究目的，选择具有特定遗传特征的个体进行选育。
–鉴定动物的遗传和具体性状，通过选择和交配等方法进行优良个体的选育。
8.动物福利和伦理：–在进行实验动物的育种繁殖过程中，要注重动物福利和伦理问题。
–提供适宜的饲养环境、保障动物健康和减少动物痛苦等。
注意事项1.选择适合的实验动物品种，确保其适应实验环境和实验要求。
2.需要充分了解实验动物的生命周期和繁殖特征，合理安排交配时间。
3.注意实验动物的健康状况，选择健康的个体进行育种繁殖。
4.保持适宜的饲养环境和良好的动物福利，减少动物痛苦和不适。
5.注意遗传的稳定性，避免杂交和混合育种导致的遗传变异。
6.严格按照伦理和法律法规要求进行实验动物的育种繁殖。
4实验动物学的基本技术操作
4实验动物学的基本技术操作实验动物学是一门研究动物行为、生理、遗传等方面的科学，同时也需要运用一系列的基本技术操作才能开展实验研究。
下面将介绍实验动物学的四个基本技术操作。
一、动物饲养与繁殖技术1.饲养技术：实验动物需要适应良好的饲养环境，包括合适的饲料、饮水、温度、湿度、通风等条件。
饲养员需要按照动物的特性，合理配给饲料，并保证饲养环境的清洁卫生。
2.繁殖技术：实验动物的繁殖对于科研工作至关重要。
繁殖技术包括选配合适的种配、控制营养、饲料等因素，合理管理饲养环境，以提高繁殖率和血缘纯度。
二、动物体内注射技术1.注射剂选择：根据实验需求和动物特性，选择合适的注射剂。
常用的注射剂有生理盐水、葡萄糖溶液、激素、抗生素等。
2.注射器选择：根据注射液体的性质和目的选择合适的注射器。
一般分为无菌注射器、玻璃注射器和胰岛素注射器等。
3.注射部位选择：注射部位的选择需根据实验目的和动物特性，例如，静脉注射一般选择尾静脉、后肢静脉等，肌肉注射一般选择胸肌、腹肌等。
4.操作技巧：进行体内注射前，需要提前准备好所需的注射器和注射液，并将动物固定位置，消毒注射部位。
然后按照注射动作快速、准确地操作。
注射结束后，要观察动物的反应状况。
三、动物行为观测技术1.设定观测指标：根据研究需求，在进行动物行为观测前，需要明确观测指标，例如行为频率、行为时长、社交行为等。
2.观测设备准备：根据观测目的，选择合适的观测设备，如摄像机、传感器、记录表等，并进行准确校准。
3.观测方法选择：根据动物的行为特征和观测目的，选择合适的观测方法，如直接观察法、电子监测法、定点观测法等。
同时也要注意避免过度打扰动物的行为。
4.数据处理与分析：观测结束后，需要对所得到的数据进行整理和分析，以得出科学结论。
通常可以利用计算机软件进行数据的统计和图表化处理。
四、动物解剖技术1.动物解剖准备：进行解剖前，需要准备好所需的解剖工具，如手术刀、镊子、剪刀、解剖针等，并确保工具的消毒和清洁。
动物繁殖学实验探索动物繁殖学的实验操作和繁殖技术
动物繁殖学实验探索动物繁殖学的实验操作和繁殖技术动物繁殖学是研究动物如何通过繁殖、生殖和育种等方式保持种群多样性和繁衍后代的学科。
为了更好地探索动物繁殖学，科学家们进行了各种实验，以寻找更好的实验操作和繁殖技术。
本文将介绍几个常见的动物繁殖学实验及其操作方法，以及一些先进的繁殖技术。
一、人工授精实验人工授精是一种常见的动物繁殖实验，通过人工手段将精子注入到雌性动物体内，以达到繁殖的目的。
在实验中，首先需要收集雄性动物的精液，然后经过离心等处理，分离出精子。
接着，将收集到的精子通过注射器等装置注入到雌性动物的生殖道内，进行授精。
通过该实验，科学家们可以研究和改进人工授精的技术，提高繁殖效率，并应用到动物育种中。
二、体外受精实验体外受精是一种将精子和卵子在体外进行结合和培养的实验方法，它可以在不同的动物物种中应用。
在实验中，首先需要收集雌性动物的卵子和雄性动物的精子，然后将它们在培养皿等容器中进行结合。
科学家们利用培养液和特定的条件来模拟体内环境，促使受精卵的形成和发育。
通过该实验，可以研究受精的过程和机制，并研发辅助生殖技术。
三、胚胎移植实验胚胎移植是一种将受精卵或胚胎移植到另一个动物体内进行发育的实验方法。
在实验中，首先需要收集受精卵或胚胎，然后通过注射器等装置将其移植到另一个动物的子宫内。
经过一段时间的发育，移植的受精卵或胚胎可以继续发育成为羊水膜、胎盘和胚胎等结构。
通过该实验，科学家们可以研究胚胎发育的机制，并应用于动物繁殖和生殖医学领域。
四、基因编辑技术在动物繁殖中的应用近年来，基因编辑技术的发展为动物繁殖学带来了新的突破。
通过利用CRISPR/Cas9等基因编辑技术，科学家们可以对动物的基因进行精确修改，实现精准育种和基因改良。
该技术可以在动物胚胎发育的早期阶段对其基因进行编辑，使其后代具有特定的遗传特征。
基因编辑技术的应用不仅可以提高动物繁殖效率，还可以培育更强健、更抗病的新品种。
结语动物繁殖学的实验操作和繁殖技术的不断探索和创新，为动物保护和育种工作提供了重要的科学支持。
实验动物生产繁殖操作规程
实验动物生产繁殖操作规程
《实验动物生产繁殖操作规程》
实验动物的繁殖是科学研究中不可或缺的一部分，能够为科学家们提供大量的实验数据。
而实验动物的繁殖操作规程对于保护动物福利、提高繁殖效率和确保实验结果的可靠性具有重要作用。
首先，实验动物的饲养环境和条件需要得到严格控制和管理，包括温度、湿度、采光时间和饮食等。
繁殖动物的健康状况和营养状况对繁殖效果有着至关重要的影响。
其次，实验动物的遗传背景需要被认真考虑。
选取适合实验需求并且具有稳定遗传性状的繁殖动物，能够为后续实验提供更可靠的结果。
在进行繁殖时，需要注意避免过度近亲交配，避免遗传缺陷。
此外，实验动物的观察和检测也是繁殖操作规程中不可或缺的一部分。
及时发现异常状况并采取相应的处理措施是确保繁殖效率和繁殖质量的关键。
最后，对实验动物进行合理的繁殖管理，包括配种、妊娠期、分娩以及幼仔的抚育等，需要得到严格执行。
不仅要保证实验动物的健康和福利，还需要确保实验结果的可靠性和重复性。
总之，繁殖操作规程对于实验动物的生产和繁殖至关重要，它直接关系到实验结果的可靠性和科研成果的准确性。
因此，科
研人员需要严格执行繁殖操作规程，以确保实验动物的健康和福利，提高实验效果的可靠性和准确性。
《实验动物培育技术》课件
实验动物培育的历史与发展
历史
实验动物培育的历史可以追溯到18世纪，随着遗传学、胚胎 学和微生物学等学科的发展，实验动物培育技术不断得到完 善和提高。
发展
现代实验动物培育技术已经从单一的近交系向突变系、杂交 系和悉生动物等多方向发展，同时，基因敲除、基因编辑等 技术的出现和应用，为实验动物培育带来了新的机遇和挑战 。
猴模型
用于脑科学和病毒性疾病的研究。
04
实验动物模型在科学研究中的应用案例
肿瘤研究
利用小鼠肿瘤模型研究肿瘤的发生、发展机制及抗肿瘤药物的筛选 。
心血管疾病研究
利用大鼠或小鼠模型研究高血压、心肌梗死等心血管疾病的发病机 制及治疗策略。
神经科学研究
利用转基因小鼠或猴模型研究人类神经退行性疾病如帕金森病、阿 尔茨海默病的发病机制及治疗手段。
疾病预防与控制
采取有效的预防措施，如定期消毒、 免疫接种等，降低疾病的发生率。
实验动物的饲料与饮水管理
饲料选择与配制
饮水质量保障
根据实验动物的不同生长阶段和营养需求 ，选择合适的饲料种类和配制比例。
确保提供清洁、无污染的饮用水，定期检 测水质，防止水源污染。
饲料与饮水量的控制
饲料与饮水设施的维护
根据实验动物的体重、活动量和季节等因 素，合理控制饲料和饮水量，避免过量或 不足。
在特定组织或发育阶段敲除动物体内特定基因， 以研究疾病发生和发展的动态过程。
实验动物培育技术在生物医学领域的应用前景
疾病机制研究
通过实验动物培育技术 ，模拟人类疾病的发生 和发展过程，深入探讨 疾病的发病机制。
新药研发
利用实验动物培育技术 建立人类疾病动物模型 ，对新药进行筛选和验 证，缩短药物研发周期 。
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是指以实验方法导入的外源基因在 其染色体基因组内稳定整合并能稳定表 达遗传给后代的一类动物。
Gordon等人首次成功地将含有HSV(单纯疱疹病 毒)和SV40(猴空泡病毒40) DNA片段的重组质粒 DNA以显微注射法导入小鼠受精卵的雄原核内，得 到了带有这种外源DNA顺序TGM。 1982年Palmiter等运用此法得到的所谓“超级巨 鼠”,曾引起整个生物学界的轰动。 到目前为止，人类已获得转基因鱼、鼠、羊、猪、 兔、牛等等大小动物。
四、繁殖方法
近亲繁殖： 即近亲交配，指血缘关系极为相近 的个体之间或遗传组成极相似的个体之间进行的交 配繁殖。常有全同胞兄妹交配、父女或母子交配、 堂兄妹交配等。用于近交系育种繁殖。 异系杂交： 两个不同的近交系品系之间进行的 交配。用于杂种一代育种繁殖。 随机繁殖： 群体中每个个体都有同样的机会同 另一性别中的任何一个个体进行交配（即随机进 行的交配）。用于封闭群育种繁殖。
一、杂种一代的育种繁殖
二、重组近交系的育种繁殖
一、杂种一代的育种繁殖
C57BL/6 ♀× DBA/2 ♂ ↓ B6D2F1
DBA /2 ♀ × C57BL/6♂ ↓ D2B6F1
二、重组近交系的育种繁殖
第五节 携带特定基因品系的育种繁殖
一、突变基因的培育和保持
二、同源导入近交系的育种繁殖
三、分离近交系的育种繁殖
一、突变基因的培育和保持
裸鼠的繁殖生产
二、同源导入近交系的育种繁殖
用回交系统培育同源导入近交系
（目的基因为常染色体显性或共显性）
用杂交—互交系统培育同源导入近交系
（目的基因为常染色体隐性基因）
三、分离近交系的育种繁殖
用于分离近交系培育的回交（A）和互交系统（B）
转基因动物培育技术
转基因动物（transgenic animal）
阴道涂片法：阴道冲洗液涂片镜检看动情期是否 消失。用于大鼠、小鼠等。 直肠检查法：手插入直肠触摸子宫胎儿。用于猪等。
第二节 近交系动物的育种繁殖
一、育种方法 二、保种方法 三、繁殖生产方法
一、 育种方法
初始动物：按定向选择方法从封闭群或近交系中 选择1对或多对全同胞兄妹，均具有育种性状。 交配方式：常采用全同胞兄妹交配（近交）。 配种：雌雄1：1长期同居。
卵泡开始迅速生长， 黄体退化 阴门变小，阴 道壁变薄
动情间期 (48hr72hr)
大量白细胞及少 量粘液
产（孕）后发情：产后不久出现发 情且能接受交配的现象。
产后妊娠：边哺乳边怀孕。
八、配种方法与交配识别
实验动物配种方法
两种配种方式：
长期同居与定期同居
三种配比方式：
一雌一雄、多雌一雄和多雌多雄
注意：隔离，选择。
二、保种方法
最大限度避免近交：♂10-25只。
循环交配：♂26-100只。 随机交配：按随机表编号，随机配对， ♂100只以上。
最大限度避免近交
循环交配
三、大量繁殖生产方法
保种群
基础群
(按保种方法繁殖) 1:1-3长期同居 法(或定期同居法)
繁殖群
(随机交配繁殖)
实验鼠
第四节 杂种一代和 重组近交系的育种繁殖
第三节 封闭群动物育种繁殖
一、育种方法 二、保种方法 三、繁殖生产方法
一、育种方法
育种原理：根据Hardy-Weinberg定律，保持群 体基因频率稳定。 初始群体来源：较高程度的基因杂合性和具有目 标性状的个体组成。 有效群体大小：雌雄个体不少于25对。 交配方法：随机交配繁殖。 培育代数：4代以上。
注射HCG 同步 与正常公鼠交配 ↓ 移植 采集受精卵 ↑显微注射
目的基因(DNA)
Founder转基因小鼠 ● 受精卵移植 ↓杂交、筛选 ● 目的基因表达整合的鉴 纯合转基因小鼠 定和检测 ● 建系
大、小鼠（离乳仔鼠）： ①雄鼠的生殖器距肛门较远，雌鼠较近。 ②雄鼠的生殖器与肛门之间长毛。 ③雄鼠的生殖器突起较雌鼠大。 ④雌鼠乳头较雄鼠明显。
豚鼠：雌性阴蒂小，可见阴道口；雄性有阴 茎小隆起，无阴道口，但可见龟头。
仔兔： 雄性肛门距尿道口较远； 雌性尿道口与肛门等大，雄性大于肛门； 雄性生殖孔呈园形，雌性呈Y形且裂缝及于肛门。
育种代数：连续近交20代以上。
注意：①系谱记录、繁殖记录。 ② 个体选择。 ③防止断种。
全同胞兄妹交配培育近交系图解
缺一性别
F0
○—○
○—○
○—○ ○—○ ○—○○○○ ○ ○—○ ○
○—○
○ ○—○ ○ ○—○ ○
断种
缺一性别
F1 ○ ○—○ ○ F2 ○ ○—○ ○ F3 ○ ○—○ ○ F20 ○ ○ ○ ○
转基因动物是动物基因工程在医学生物 学研究中的突出成果。 近十年来，为分子遗传学、发育生物学、 医学遗传学、肿瘤研究及优良经济动物的 开发研究等多方面做出了很大的贡献。
培育转基因动物的主要方法
1、受精卵雄原核显微注射法 2、胚胎干细胞（ES细胞）法
3、逆转录病毒感染法
4、体细胞核移植法 5、精子载体法
近交系保种应注意：
①、已育成的近交系保种时，群体内必须严格按照全同胞 交配方法交配，不得已的情况下可采用亲子交配，但不能 计入近交代数。 ②、已育成的近交系务必注意不能与其他品系进行杂交。 ③、为了保持品系内遗传一致性，在近交系保种过程中不 许产生更多的亚系，为此，多半采用单线方式或优选法。 ④、实验动物的近交系是通过极度的近亲交配而培育的， 多半繁殖力低。所以必须选择繁殖力高的家系，淘汰繁殖 力低的家系。 ⑤、对动物个体应进行记录和建立系谱。
第四章 实验动物的育种繁殖
第一节
第二节 第三节 第四节 第五节
实验动物育种繁殖基本技术
近交系动物的育种繁殖 封闭群动物的育种繁殖 杂种一代和重组近交系的育种 繁殖 携带特定基因品系的育种繁殖 转基因动物培育技术
克隆动物培育技术
实验动物育种：
根据遗传学原理有目的地改变 实验动物遗传组成的过程。
实验动物繁殖：
近交系数：某群体动物由于近交而造 成等位基因纯合的比率。 Fn=1-(1-△F)n
n为近交代数△F=19%
血缘系数：群体中个体之间基因组成 的相似程度。
Fab=
近交衰退：由于近交而造成保持正 常生物适合度的基因组合受到不同程 度的破坏，出现了某些不利的性状效 应。如生活力、生殖力降低等。
五、性别鉴定
子
宫
卵巢和输卵管
卵泡增大并膨胀，有 相当多的液体，在生 发上皮和卵泡细胞内 有少数的有丝分裂 排卵，随后输卵管上 端膨胀，在生长上皮 和卵泡细胞内有丝分 裂旺盛
外阴部变化
阴门开口，初 期阴门肿胀， 不久变白、枯 燥 阴门呈白色、 枯燥，交配旺 期
充血和膨胀增大， 上皮细胞有丝分 裂旺盛，少量白 细胞 在发情期膨胀与 活动性达到最大 限度，然后下降， 无白细胞
DNA
DNA 精子 卵细胞 受精卵
逆转录病毒感染 或DNA转染 或电穿孔
胚胎干细胞
显微注射
四细胞 胚胎
囊胚
原肠胚
转基因 动物
显微注射
逆转录病毒感染
DNA
DNA
一、基因显微注射法培育转基因小鼠的程序
母鼠注射PMSG
48h
基本步骤
结扎公鼠 ↓ 15d 与正常母鼠交配 ↓ 假孕母鼠 ↓21d ● 目的基因的制备与纯化 ● 卵供体母鼠和假孕母鼠 的准备 ● 超排卵与取卵 ● 基因显微注射
定期同居法
交配时间：
小鼠、大鼠、地鼠在动情前期交配。 豚鼠、兔、犬在动情期交配。 兔在动情期交配后10-12h再复配1次。
交配判断：
常用的方法是阴道涂片。 大鼠、小鼠可检查阴道栓。
阴道栓
九、妊娠诊断与妊娠期
妊娠诊断
摸胎法：触摸腹部，感受子宫有无胎儿。用于兔等。
外形观察法：观察腹部是否膨大，体重是否增加。 用于大鼠、小鼠等。
Female
Male
六、性成熟与配种年龄
七、动情周期与发情鉴定
动情周期： 哺乳动物性成熟后，卵巢、子宫、 阴道等出现周期性的变化，动物表现周 期性的动情现象。
动情前期
动情期 动情周期
动情后期
动情间期（休情期）
小鼠动情周期生殖器官变化
动情阶段
动情前期 (10hr)
阴道分泌物涂片
大量有核上皮细 胞、少量角化上 皮细胞 视野布满角化上 皮细胞，少量有 核上皮细胞
1：1的分离比
父母基因型可能为Aa和aa 显性1：基因型可能为A隐性1：基因型可能为aa
2、数量性状的判断 通过遗传力分析来判断数量 性状的遗传性。 遗传力：指遗传因素的影响 在整个表型中所占的比例，即遗 传方差对表型方差的比值，用百 分数表示。
V G 2 h = VP VP =VG + VE
二、群体的遗传组成定
杂交试验判断小鼠白内障基因
1只白内障小鼠 显性(AA) （? ） 113只白内障小鼠
（Aa）
1只正常小鼠 （?） 隐性(aa) 1只正常小鼠
（aa）
332只白内障小鼠 115只正常小鼠 34只白内障小鼠 36只正常小鼠
(AA) (Aa) （aa） （Aa） （aa）
3：1的分离比
父母基因型可能为Aa 显性3：基因型可能为A隐性1：基因型可能为aa
三、繁殖 生产方法
A 保种方法
A B
近交1-4代
C
近交1-2代
“A”基础群(白色标记)， “B”血缘扩大群（绿色标记 “C”扩大群（黄色标记）， “D“生产群（红色标记）
D
随机交配1-4代
近交系动物繁殖生产的交通信号灯方
(Traffic light system Lane-Petter 1961)
动情期 (42hr)