本科线虫实验1
寄生虫实验一：线虫
（3） 蛲虫的形态观察
成虫
细小，乳白色，线头状
♀大，8-13mm，尾直而尖细， 呈现纺锤形。
♂小，2-5mm，后端向腹部 卷曲，有交合刺一根.
蛲虫头部结构
• 头端角皮 膨大，形 成头翼 • 咽管末端 膨大呈球 形，称咽 管球
蛲虫卵
• 55-60×25-30µm； • 两侧不对称，一则较 平，一则稍凸，柿核 形； • 无色透明； • 卵壳厚，分三层 • 脂层（内）→ • 壳质层（中）→ • 蛋白质膜（外） • 内含一幼虫。
蛔虫头顶部
有三个品字形排列的唇瓣。
受精蛔虫卵
• 宽椭圆形，棕黄 色，表面常有一层凹 凸不平的蛋白质膜， 卵壳厚，无色透明， 壳内有一大而圆的卵 细胞，卵细胞与卵壳 之间有半月形间隙。
蛋白质膜
卵壳 卵细胞 间隙
未受精蛔虫卵
长椭圆形，棕黄色， 蛋白质膜与卵壳均较 薄，卵内充满卵黄颗 粒脱蛋白质膜受精蛔虫卵
虫卵无色透明，无 蛋白膜。其它结构 同受精蛔虫卵。
卵壳 卵细胞
（2）鞭虫形态学观察
成虫
长约3～5厘 米，形似马鞭， 前端3/5细长， 尾部较粗。雌虫 大于雄虫。雄虫 尾端卷曲，雌虫 尾端钝圆。
鞭虫卵
纺锤形，黄褐 色，卵壳厚，两端 各具一个透明的盖 塞（透明栓）。内 含有一个受精的卵 细胞。
2.病原学技术
生理盐水直接涂片法
透明胶纸法
• 二.自己观察 • 成虫、虫卵 • 三. 实验作业： • 绘制受精和未受精蛔虫卵、蛲虫卵、鞭 虫卵。并注明虫卵的各部分名称和放大倍 数。
实验一
线虫
基础医学医学技术学院
一.示教内容： 1.形态学观察：3个（蛔虫、鞭虫、蛲虫）
（1）蛔虫成虫、虫卵； （2）鞭虫成虫、虫卵； （3）蛲虫成虫、虫卵；
线虫开放实验-实验攻略
线虫开放实验的补充说明1.培养基倒培养基一定在超净台中完成，注意无菌操作，平板不能高压灭菌，会变形。
2.线虫的食物滴菌同样在超净台中完成，菌滴于平板中央（防止线虫爬到平板边缘干死丢了），并且要进行测试无杂菌才可大规模使用，污染杂菌会影响观察和统计记录。
3.线虫的生活史和表型观察（重要）“磨刀不误砍柴工”这两部分是整个线虫遗传实验最重要的基本知识。
需要记录并熟悉线虫的生活史。
熟知不同阶段的线虫（特别是L4和adult），区分雌雄同体线虫（hermaphrodite）和雄虫（male），识别典型的突变体：unc 和dpy。
4.线虫的基本实验操作（重要）熟练使用picker(自制铂金丝小铲)，达到如下要求：1）注意操作迅速，干净，不污染杂菌，及时烧picker，防止交叉污染虫子和卵；2）两种方法“挑”和“粘”。
“挑”：在解剖镜下找到目标线虫后，用picker 末端在线虫的附近压琼脂培养基，使线虫爬到picker上再转移到新的平板中；“粘”：用picker末端蘸取少量OP50，轻轻地而且快速的碰触线虫的上部，线虫被picker上的菌液粘住。
3）用“挑”法时，往新的平板放线虫时，注意要慢慢降低picker末端，轻轻接触琼脂平面或菌苔边缘等线虫爬出来，不要将琼脂戳破，否则线虫喜欢钻入琼脂中，4）转移虫子不挑破培养基，不使虫子被挑死；如果是用“粘”法，直接将picker底部粘上的菌液线虫放到新平板的菌苔边缘即可。
3）挑虫准确性强，不顺带别的虫子和卵；4）要做到“挑的起”，“放的下”，掌握挑虫技巧。
5.线虫的遗传实验技巧1）掌握mating时期：充分利用L4的特点，使用L4早期的雌雄同体的虫子进行交配。
2）铺op50食物菌斑时，建议铺菌斑较小的平板作为mating plate，提高交配效率，另外雄虫比例较高时也可提高交配效率。
一般雄虫：雌雄同体为3：1至4：1能有不错的交配效率，当雌雄同体为比较弱的突变体时，建议增加雌雄同体的量，以防止某些母本产卵少或不产卵，导致交配后代很少。
线虫实验报告
线虫实验报告
实验报告
《线虫实验报告》
一、实验目的
通过对线虫的研究，探究它们对不同药物的反应和对环境因素的适应能力，为深入了解动物生命和生物学研究提供参考。
二、实验材料和方法
材料：
1.线虫培养基：含有1%琼脂糖、0.25%乳酸、0.5%酵母粉、0.05%胆固醇和0.5%无菌培养水；
2.线虫：选择标准化的Caenorhabditis elegans种群；
3.药物：红霉素、链霉素、卡那霉素和4℃的冰水；
4.显微镜：采用80倍显微镜观察线虫活动。
方法：
1.培养线虫：在一定温度、湿度和光照条件下，将线虫培养在含有培养基的琼脂糖平板中；
2.选择线虫：选择健康、正常发育的线虫；
3.测试不同药物对线虫生长和活动的影响。
三、实验结果
本次实验测试了红霉素、链霉素和卡那霉素对线虫生长和活动的影响，测试结果如下：
1.红霉素：加入50μg/ml红霉素的培养基中，线虫死亡率逐渐上升，最终达到100%；
2.链霉素：加入50μg/ml链霉素的培养基中，线虫死亡率逐渐上升，最终达到80%；
3.卡那霉素：加入50μg/ml卡那霉素的培养基中，线虫死亡率逐渐上升，最终只有20%的线虫存活。
四、实验结论
1.不同药物对线虫生长和活动产生不同的影响，红霉素具有较大的毒性，链霉素次之，卡那霉素具有较小的毒性；
2.环境因素对线虫的生长和存活有重要影响，温度、湿度、光照等都会对线虫产生影响。
五、实验总结
通过本次线虫实验，不仅可以深入了解线虫的生长和生存环境，还可以探究药物对生物的影响，这些都是生命科学研究中至关重
要的内容，也对广大生物学爱好者进行探究和研究提供了理论依
据和实验示范。
线虫病害检测实验报告
线虫病害检测实验报告
线虫病害检测实验报告
一、实验目的
了解和学习线虫病害的检测方法，掌握线虫病害的诊断技能。
二、实验器材和试剂
1. 试验材料：线虫病害患病的植物样品。
2. 试验器材：显微镜，玻片，盖玻片，显微镜相机。
3. 试剂：10%酒精溶液。
三、实验步骤
1. 取线虫患病的植物样品，仔细观察其叶片上是否有线虫根部附着。
2. 将植物样品放入10%酒精溶液中，浸泡一段时间，使线虫脱落。
3. 取少量线虫悬液放在玻片上，加盖玻片，通过显微镜观察并拍照。
4. 根据观察结果判断是否存在线虫病害。
四、实验结果
经过观察和拍照发现，植物样品上存在线虫病害。
通过显微镜观察，可以清晰地看到线虫在植物根部附着，对植物造成了危害。
五、实验分析
线虫病害是一种常见的植物病害，给农作物的生长和产量造成
了很大的损失。
通过本实验的检测方法，可以快速准确地识别出是否存在线虫病害，为采取相应的防治措施提供依据。
六、实验总结
通过本次实验，我们学习并掌握了线虫病害的检测方法，提高了病害诊断的技能。
线虫病害是一种常见的植物病害，对农作物的生长和产量造成了很大的影响。
在实际生产中，我们应加强对线虫病害的防治措施，提高农作物的抗病能力，从而保证农作物的产量和质量。
线虫实验报告作业
一、实验目的1. 了解线虫的基本生物学特征和生长习性。
2. 掌握线虫实验操作的基本技能。
3. 探究不同环境因素对线虫生长和发育的影响。
二、实验材料1. 线虫：秀丽线虫（Caenorhabditis elegans）2. 培养基：Lysogeny broth（LB）培养基3. 实验器具：恒温培养箱、显微镜、培养皿、移液器、酒精灯、镊子、剪刀等三、实验方法1. 线虫培养（1）将线虫置于含有LB培养基的培养皿中，放入恒温培养箱中，温度控制在25℃左右。
（2）每隔一定时间，用移液器吸取适量的培养基，移入新的培养皿中，以保持培养基的新鲜。
（3）观察线虫的生长状况，记录其数量、活动能力等。
2. 线虫实验操作（1）线虫的分离：用镊子轻轻将线虫从培养皿中取出，置于显微镜下观察其形态。
（2）线虫的计数：将线虫置于计数板上，使用显微镜进行计数。
（3）线虫的染色：将线虫置于载玻片上，用酒精灯加热，使其固定，然后用染料染色，观察其结构。
3. 环境因素对线虫生长和发育的影响（1）温度：将线虫置于不同温度的培养箱中，观察其生长和发育情况。
（2）光照：将线虫置于不同光照强度的环境中，观察其生长和发育情况。
（3）湿度：将线虫置于不同湿度的环境中，观察其生长和发育情况。
四、实验结果与分析1. 线虫培养结果经过一段时间的培养，线虫数量逐渐增多，活动能力逐渐增强。
在适宜的温度、湿度和光照条件下，线虫的生长和发育状况良好。
2. 线虫实验操作结果（1）线虫的分离：成功分离出线虫，并观察到其形态特征。
（2）线虫的计数：通过计数板，成功计数线虫的数量。
（3）线虫的染色：成功染色线虫，观察到其结构。
3. 环境因素对线虫生长和发育的影响（1）温度：在25℃左右的温度下，线虫的生长和发育状况良好；温度过高或过低，线虫的生长和发育受到抑制。
（2）光照：在适宜的光照条件下，线虫的生长和发育状况良好；光照过强或过弱，线虫的生长和发育受到抑制。
（3）湿度：在适宜的湿度条件下，线虫的生长和发育状况良好；湿度过高或过低，线虫的生长和发育受到抑制。
实验1总论线虫
雌虫 雄虫
蛔虫
蛔虫的唇瓣（呈“品”字形）
蛔虫阻塞小肠病理标本
2.虫卵
（1）受精蛔虫卵 呈宽椭圆形，大小约为 (45~75)m×(35~50)m。卵壳 较厚，外被蛋白质膜，棕黄色。 卵壳内有一卵细胞，与卵壳间 常见有新月形空隙。
受精蛔虫卵
蛋白膜 卵壳 卵细胞
受精蛔虫卵（卵壳厚，新月形空隙）
8.两种钩虫大体观的区别要点是什么？ 9.为什么钩虫病可采用钩蚴培养法，其优点是什么？ 10.蛔虫与钩虫生活史异同点。 11.蛲虫病与蛔虫病的病原诊断方法有何不同？为什么？ 12.蛲虫病感染率在什么人群中较高？为什么？ 13.体长1厘米左右的线虫有哪些？ 14.粪便沉渣中能检到哪些线虫卵？其主要粪检方法有 哪些？
口囊
钩齿2对
十二指肠钩虫
板齿1对
美洲钩虫
交合伞 交合刺
2刺呈长毛状，末端分开 合并呈1刺，末端呈倒钩状
十二指肠钩虫
美洲钩虫
十二指肠钩虫
辐肋 背辐肋
美洲钩虫
交合伞 展开呈圆形，宽度＝长度 展开呈扇形，宽度﹥长度； 背辅肋 远端分2支，每支再分3小支 基部分2支，每支再分2小支
2. 虫卵 长椭圆形，壳薄，无色透明。大小约为(56~76) m×(36~40)m，卵壳内含4~8个卵细胞，卵壳与细 胞间有明显的空隙。
几种线虫成虫比较
几种线虫卵大小的比较
五、旋毛虫
1.成虫 人体最小线虫，线状，体长 3.0~1.5mm ，雌虫子宫较长，其 中段含虫卵，后段和近阴道处充 满幼虫，新生幼虫自阴门产出 （卵胎生）。
2.幼虫囊包 梭形，位于宿主横纹肌细胞内，内含1~2条幼虫。
肌肉中的旋毛虫幼虫囊包
（2）未受精蛔虫卵 长椭圆形，大小约为 (88~94)m×(39~44)m。卵壳 与蛋白质膜均较薄，卵壳内含许 多大小不等的折光性颗粒。
人体寄生虫-实验1-线虫(1)
体部 尾部
腹吸 盘
1、肺吸虫卵
颜色：金黄色； 大小： 80-118µm×48-60µm； 形状：椭圆形； 卵壳： 厚薄不均，后端增厚； 特殊结构：卵盖大，略倾斜，位于宽的一端，偶有缺盖者； 内含物：1个半透明卵细胞，10色：活体红褐色，半透明；固定后灰白色；遍布皮棘； 形状：肥厚，椭圆，背部隆起，腹面扁平，似半粒花生米； 大小：1厘米，长宽比约为2:1； 吸盘：口腹吸盘大小相近，腹吸盘位于体中横线之前； 消化道：咽和食管短，肠支3-4个弯曲； 生殖器官：2个分支睾丸，左右并列与后1/3处，卵巢5-6叶，
1、姜片虫卵
颜色：淡黄色； 形状：椭圆形； 大小：大，130-140 × 80-85µm； 卵壳：薄而光滑；特殊结构：卵盖较小； 内含物：1个卵细胞，20-40个卵黄细胞。
大小2：、姜片虫成虫
1、血吸虫虫卵
颜色：淡黄色； 卵壳：厚薄均匀； 形状：椭圆形； 大小：89 µm ×67 µm； 特殊结构：无卵盖，一侧有小棘； 内含物：成熟毛蚴，与卵壳间有大小不等的圆形或椭圆形
猪带绦虫头节牛带绦虫头节
近似球形，0.6-1mm，4个 吸盘，顶突，其上有25-50 小钩，内大外小。
略呈方形，1.5-2mm，4个 吸盘，顶突凹入。
猪带绦虫孕节牛带绦虫孕节
7-13支，通常12支以下。
15-30支，排列较整齐。
猪囊尾蚴
圆形或椭圆形，乳白色，半透明，黄豆大小囊状物：8-10X5mm，囊内充满 透明液体，有一小米粒大小白点，为幼虫头节，无法区分猪或牛囊尾蚴。
如手指，与子宫并列与腹吸盘之后。
猪带绦虫成虫牛带绦虫成虫
扁平、带状，乳白色，半透明，2– 4m，头节微小，近球形，0.6-1mm， 颈部纤细，为头节的1/2，5-10mm。
线虫的实验报告
一、实验背景线虫是一类广泛分布于土壤、水体及动物体内的微小生物，对农业、生态和人类健康具有重要意义。
近年来，线虫的研究逐渐成为生物科学领域的热点。
氧化磷酸化（Oxidative Phosphorylation，OXPHOS）是线粒体中产生ATP的主要途径，对于线虫的生长、繁殖和代谢具有重要作用。
本研究旨在探讨线虫的繁殖能力与氧化磷酸化反应之间的关系。
二、实验材料与方法1. 实验材料（1）松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus）；（2）100mmol/L Ca2+溶液；（3）RNA干扰技术相关试剂；（4）荧光定量PCR仪；（5）显微镜等。
2. 实验方法（1）线虫繁殖能力检测：将线虫分为对照组和钙胁迫组，分别用100mmol/L Ca2+溶液处理。
在适宜条件下培养，记录每组的产卵量和校正死亡率。
（2）差异表达基因筛选：利用RNA干扰技术，针对氧化磷酸化途径中的关键基因进行干扰，观察干扰后线虫的繁殖能力变化。
（3）荧光定量PCR：检测干扰后线虫中关键基因的表达水平，分析其与繁殖能力之间的关系。
（4）统计学分析：采用SPSS软件对实验数据进行分析，比较各组间的差异。
三、实验结果1. 线虫繁殖能力检测对照组线虫的产卵量为31.00个卵，校正死亡率为0；钙胁迫组线虫的产卵量为6.75个卵，校正死亡率为10%。
结果表明，钙胁迫显著降低了线虫的繁殖能力。
2. 差异表达基因筛选通过RNA干扰技术，对氧化磷酸化途径中的关键基因进行干扰，发现BXNDUFA2、BXQCR8基因干扰后，线虫的产卵量和校正死亡率显著降低。
3. 荧光定量PCR干扰后，BXNDUFA2、BXQCR8基因在钙胁迫组线虫中的表达水平显著下调，与产卵量和校正死亡率呈负相关。
四、实验结论1. 钙胁迫通过抑制氧化磷酸化反应降低松材线虫的繁殖能力和致病性。
2. BXNDUFA2、BXQCR8基因在氧化磷酸化途径中起关键作用，其表达水平与线虫的繁殖能力密切相关。
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头翼 咽 管 球
肛门
雌虫
雄虫
成虫前端
15
雌虫
雄虫
蛲虫虫卵
线 虫 实 验1
一、目的要求
1、掌握蛔虫、鞭虫、蛲虫虫卵的形态 特征。
2、熟悉成虫形态特征,能区分雌雄。
3、了解病理标本。
二、实验内容
（一）示教内容 1、蛔虫、鞭虫、蛲虫的成虫、虫卵的形态。 2、病理标本：蛔虫肠梗阻
（二）自看内容
三种线虫虫卵
三、作业
绘蛔虫受精、未受精虫卵；鞭虫 咽 管
咽 管 肠 管 阀
中 肠
直 肛 肠 门
-
蛔虫成虫
蛔虫雌雄成虫
雌虫
雄虫
蛔虫成虫 蛔虫唇瓣
蛔虫卵 受精蛔虫卵
蛋白质膜 卵壳 受精卵细胞
新月形空隙
受精蛔虫卵及未受精蛔虫卵区别
其他类型蛔虫卵
脱蛋白质膜 蛔虫卵
蛔虫肠梗阻
鞭虫成虫
鞭虫卵
吸附在肠壁上的鞭虫
蛲虫
阴门