百合组织培养
百合组织培养和快速繁殖技术
实验方案1.材料的选取及消毒1.1材料的选取在花鸟市场购得新鲜百合，取百合的鳞片为外植体。
1.2材料的消毒将百合鳞茎分成鳞片，取外层鳞片经洗衣粉水浸泡3Omin，用自来水冲干净，在超净台上用7O%酒精浸4 min，0.5%新洁尔灭8 min，0.5%升汞10min，每次都用无菌水淋洗3～4次，剥去外皮，再用70%酒精浸2 min，0.5%新洁尔灭5 min，0.5%升汞8min后用无菌水淋洗4～8次后即可．将外层鳞片切成上、中、下3段约0.5cm×0.5cm方块，选取下段接种。
2.培养方法2.1培养基的选择培养基是以MS为基本培养基，附加不同激素构成的。
根据各种激素浓度范围及比例的不同，以下设计三套方案：继代培养基：（6-BA/NAA=4/1）生根培养基：2.2培养基的配制2.2.1MS培养基母液的配制MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。
这样每次使用时，取其总量的1/20（50 mL）或1/200（5 mL），加水稀释，制成培养液。
根据MS培养基中元素分类，分为以下四种母液：大量元素(母液Ⅰ) NH4NO3、KNO3 、CaCl2·2H2O 、MgSO4·7H2O 、KH2PO4微量元素(母液Ⅱ) KI 、H3BO3、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、铁盐(母液Ⅲ) FeSO4·7H2O、Na2-EDTA·2H2O有机成分(母液Ⅳ)肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、甘氨酸以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。
上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。
百合的组织培养综述
百合的组织培养xxx摘要：百合的离体培养是目前为止百合迅速繁殖的最有效方法，下文对百合的外植体选择和处理、离体培养的器官发生途径、和组织培养中容易出现的问题进行综述。
并对百合组织培养的未来发展做出展望。
关键词：百合；外植体；组织培养；器官发生百合是百合科百合属，多年生草本球根植物。
是著名的观赏花卉，可食用，有很高的利用价值。
利用组织培养进行繁育是百合无毒化和商品化的必要途径。
百合的传统繁殖方式主要有珠芽繁殖、小子球繁殖、鳞片繁殖3种方式。
由于百合的常规繁殖率低，易感染病毒，所以对繁殖技术提出了更高的要求，人工繁殖技术对百合具有重要的意义。
1、百合组织培养的特点和优势培养条件可人为控制，进行周年生产。
植物组织培养中采用的植物材料是经过精挑细选的，他们生长的培养基及小气候环境都是人为控制的对其生长最有利的，摆脱了大自然中四季、昼夜气温频繁变化甚至是灾害性气候等外界不利因素的影响。
并且条件均一，便于稳定地进行周年生产。
生长周期短,繁殖率高,成本较低。
人为控制的条件可以满足其快速生长的需要，所以生长快，培养周期比其它繁殖方式短很多。
虽然组织培养先期投资较大，需要一定的设备及能源消耗，但是在百合开始批量生产之后，相对于有性繁殖来说成本低廉的多。
管理方便，便于工厂化生产和自动化控制植物。
组织培养可以在工厂高密度培育，并可以通过机械进行培育，与传统的盆栽相比，省去了中间一系列繁杂劳动。
培养材料来源广泛。
由于植物细胞具有全能性，在生产实践中, 单个细胞、小块组织等经离体培养均可再生形成完整植株。
由于取材少，培养效果好，对于新品种的推广和良种延续还有灭毒等都有重大的实践意义。
另外，百合组织培养具有很高的应用价值。
百合可以进行远缘杂交，但由于生理代谢等方面的原因，常使杂种胚早期败育，而不能得到相应的杂种植物。
而通过组织培养，可使其顺利生长，得到远缘杂交品种并讲品种延续下去，从而选育出园艺新品种。
此外还可采用愈伤组织诱变、花粉培养等多种方法来进行花卉育种。
百合的组织培养技术
百合的组织培养技术1植物名称百合(lilium brownii var. viridulum)2材料类别鳞茎、珠芽、叶片、花器官等3外植体消毒将洗净的外植体材料放于无菌瓶中，先用70%-75%的酒精消毒10-60s，用无菌水冲洗1次；再用饱和的漂白粉上清液消毒5min，用无菌水冲洗1次；再用0.125%的HgCI2消毒5-10min，用无菌水冲洗1次；再用饱和漂白粉的上清液消毒10-20min，用无菌水冲洗6-7次即可获得无菌的外植体材料。
4外植体培养条件（1）诱导培养基：MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L；（2）增殖培养基：MS+6-BA0.5mg/L+NAA 0.5mg/L；（3）生根培养基：1/2MS+NAA 0.1mg/L；以上所有培养基的pH均为5.8-6.0，培养温度为（24±2）℃，光照为800-1200lx，每天光照12h左右。
５外植体的生长与分化5.1诱导培养：鳞茎切块接种于诱导培养基上，大约20天后便可在切口处产生白色小鳞茎凸起，这时便可进行继代培养。
5.2增殖培养：将萌发的小鳞茎切成数块接种于增殖培养基上，约30天后即可抽出叶片形成幼苗。
5.3生根培养：将已经抽叶的幼苗转入生根培养基中大约10天便可看到有根开始长出。
5.4炼苗及移栽：当幼苗的根生长到0.5cm长度左右时即可进行炼苗，在室温下炼苗2天，然后除去封口膜继续炼苗3-5天，然后将组培苗取出，用自来水洗净苗根部的培养基，移栽入基质或者田园土中，放入人工气候室中进行培养，每天进行浇水，约10-15天后即可移栽入大田中。
注：百合组培苗移栽以春秋季节成活率较高，冬夏季较差。
6意义百合是百合科百合属的一种多年生草本植物，不仅是世界著名的观赏花卉，而且具有食用、药用价值。
传统的百合繁殖方法具有繁殖系数小、多代繁殖种性易退化等缺点，对百合生产的数量和质量造成了一定的影响。
组培技术的应用能够克服以上缺点，并且提高的繁殖速度，是今后生产中一种有效的繁殖途径。
百合的组织培养技术
Байду номын сангаас
外植体的准备
（一）外植体的选择
在百合科植物组织培养中外植体来源广泛 几乎包括了植物的各种组织和器官。如鳞片、 种子、珠芽、茎段、花瓣、花丝、叶片、花药、 子房和花梗等。 1、培养目的 2、外植体的培养能力 种子> 鳞片> 花丝> 花瓣> 叶片 3、消毒难易和遗传稳定性
外植体的准备
（二）外植体的消毒
百合的组织培养技术
第一组
组长：郭男男 副组长：康瑶
组员：白丹、陈恩名、党花利、谷微微、
胡梦圆、贾春秋、姜飞龙、雷丹
目录
• 百合的简介
• 外植体的准备
百合简介
百合是单子叶植物纲百合科百合属的 总称。其为多年生宿根草本植物, 本属在世 界上有 90 余种,原产我国的约有47 种, 占世 界总数的51%。百合花除具有观赏价值外, 大多数可以食用, 是上等的滋补佳品。百合 中的麝香百合、 透百合和香水百合等观赏 价值高, 植株刚直挺秀,花大美丽, 清雅脱俗, 芳香宜人, 常被人们视为纯洁、 光明、 自 由和幸福的象征,是目前国际市场上十分畅 行的花卉之一。
百合的组织培养技术综述
百合的组织培养综述（辛文龙，200674010152）摘要对百合的分布和组织培养的进展状况及组织培养在百合育种中的应用作了综述。
特别罗列了百合组织培养中所选用的外植体类型和一些组培材料的最佳分化、生根培养基配方；阐述了组织培养中常见的一些问题；并介绍了百合组织培养在其育种中的应用。
关键词百合；组织培养；百合(Lilium.spp.)是百合科(Iiliaccae)百合属(Lilium)多年生草本植物。
我国是百合植物的原产地，早在1400多年以前就有人工栽培，食用、观赏和药用百合的栽培利用历史十分悠久。
百合除具有观赏价值外，大多数可以食用、药用，是上等的滋补佳品。
传统的白合繁殖方法主要采用常规分球、分珠芽鳞片扦插、鳞片包埋等。
但采用这些方法繁殖，繁殖系数较小，特别是经多代分殖以后，常造成种性退化，甚至病毒积累，影响百合的产量和质量。
利用组织培养技术，能够迅速去除病毒和更新品种，加快了百合的快速繁殖速度，缩短了百合的生育周期。
在百合杂交育种中也存在着基因库贫乏、种间杂交不亲和等局限性，而组织培养中的胚培养、花药培养等技术则可克服这些弊端。
现将目前百合组织培养及育种方法做简单总结。
1百合的分布全世界百合约有90多个种，主要分布在北半球的温带和寒带地区，少数种类分布在热带高海拔地区，南半球没有野生种分布。
中国是百合种类分布最多的国家，也是世界百合起源的中心。
据调查，中国约有47个种18个变种，占世界百合总数的一半以上，其中有36个种15个变种为中国特有种；日本有15个种，其中9个种为日本特有种；韩国有11个种，其中3个为特有种；亚洲其他国家和欧洲共有约22个种；北美洲约有14个种。
2百合的组织培养外植体类型2.1外植体的选择2.1.1鳞片百合鳞片作为外植体具有容易获得、分化能力强、对培养基要求不严等优点是目前百合组织培养中普遍采用的外植体。
主要是通过调节生长素和细分裂素的比例来诱导其组织产生不定芽和再生植株。
百合初代培养实训报告
一、实训目的本次实训旨在通过学习百合初代培养的方法和技巧，掌握百合组织培养的基本原理和操作流程，提高对植物组织培养技术的理解和应用能力。
同时，通过对百合初代培养过程中的各个环节进行实践操作，培养自己的动手能力和团队协作精神。
二、实训内容1. 百合组织培养概述百合（Lilium）是百合科百合属多年生草本植物，具有较高的观赏价值。
百合组织培养技术是一种无性繁殖方法，通过将百合的外植体接种到培养基上，使其在无菌条件下生长、分化，最终形成完整的植株。
2. 百合初代培养方法（1）外植体选取选取百合鳞茎或叶片作为外植体。
鳞茎选取饱满、无病虫害的健康鳞茎；叶片选取叶尖或叶缘部位。
（2）外植体消毒将外植体放入70%酒精中浸泡30秒，然后用无菌水冲洗3-5次。
将消毒后的外植体放入0.1%的氯化汞溶液中浸泡5-10分钟，再用无菌水冲洗3-5次。
（3）接种将消毒后的外植体接种到含有不同植物激素的培养基上。
培养基成分：MS培养基+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L。
（4）培养条件将接种后的培养基放入培养箱中，温度设置为25℃±2℃，光照强度为1000勒克斯，每天光照12-14小时，空气相对湿度保持在70%-80%。
3. 百合初代培养过程（1）愈伤组织诱导接种后3-5天内，外植体开始生长，形成愈伤组织。
愈伤组织呈白色、质地松软。
（2）芽分化愈伤组织培养7-10天后，开始分化出芽。
芽分化过程中，可适当调整培养基中植物激素的比例，以促进芽的分化。
（3）生根芽分化后，将芽转移到含有NAA 0.1mg/L的培养基上，促进生根。
生根过程中，芽可逐渐转移到生根培养基中。
（4）移栽当百合植株长到2-3片叶时，可将其移栽到营养土中。
三、实训结果与分析1. 百合初代培养结果通过本次实训，成功诱导出百合愈伤组织，并分化出芽和根，最终形成完整的植株。
2. 实训结果分析（1）外植体选取对百合初代培养效果有较大影响。
鳞茎外植体诱导愈伤组织的效果优于叶片外植体。
百合组织培养快速繁殖
百合组织培养快速繁殖组织培养是进行植物快速繁殖的常规手段,通过组织培养可以快速获得无病毒植株,对繁殖珍贵花卉品种是简易而有效的方法。
本研究通过组培快繁再生体系的建立、试管鳞茎的增、大再分化及移栽后的生理检测对东方百合“西伯利亚”、“索邦”和铁炮百合“白天堂”的快速繁殖进行了系统的研究。
以鳞片和试管苗叶片为外植体,通过直接诱导不定芽再生的方式,对启动培养、增殖培养、生根移栽等组织培养快速繁殖各个环节的影响因素进行了分析。
研究结果表明:1、MS基本培养基中附加适宜浓度配比的NAA与6-BA可诱导不定芽再生,再生频率在80%以上。
2、试管苗叶片下部分化能力较强,是建立高频快速增殖体系的首选材料:“西伯利亚”和“白天堂”再生芽的能力要强于“索邦”;用NAA或IBA与KT组合诱导不定芽增殖效果较好,再生频率在86%以上,适宜“白天堂”“西伯利亚”“索邦”试管苗增殖的激素配比分别为NAA 0.2mg/L+KT 0.4mg/L、NAA 0.1mg/L+KT0.2mg/L、IBA 0.1mg/L+KT 0.2mg/L。
3、百合试管苗具有较强的生根能力,在继代增殖的同时就可达到生根的目的。
4、以珍珠岩:土(3:1)为移栽基质,选取鳞茎直径≥1cm的试管苗移栽,成活率在95%以上。
培养基添加物对百合快繁体系影响的研究结果表明:培养基中添加30g/L蔗糖和3mg/L多效唑分别为促进“索邦”和“西伯利亚”生长的最佳培养基。
在添加60g/L蔗糖和3mg/L多效唑的培养基中“白天堂”试管鳞茎的增大及再分化效果最佳。
在上述最佳培养基中,各供试品种出瓶直径均在1cm以上,东方百合增殖系数可达8以上。
活性炭可以提高试管苗的质量,浓度在4～10g/L时,“白天堂”、“索邦”及“西伯利亚”试管鳞茎生长情况较好。
将移栽成活的健壮试管苗移栽入土后进行多效唑叶面喷施,研究结果表明:以500mg/L多效唑处理5周,百合叶片的气体交换特性得到明显改善、叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白含量均有所提高,组织含水量减少,对试管苗移栽入土后的生长发育起到了显著的促进作用。
百合的组织培养
百合的组织培养一、百合叶片的组织培养(一)外植体百合鳞茎。
(二)灭菌方法取百合花茎于洗涤灵液中浸泡20min, 自来水冲洗20 min, 离花茎叶片基部上下各0.2cm 左右, 剪取0.5cm 带叶片茎段。
自叶片基部留叶片长1.5~ 2.0cm, 剪去以上大部叶片, 于0.1% 农用链霉素水溶液中浸泡1h, 自来水冲洗20 min; 无菌条件下, 75% 酒精处理2~ 3s; 0.1% 升汞溶液处理3~ 4 min, 无菌水洗5~ 6 遍, 备用接种。
(三)发育途径将叶片茎段接种于诱导分化培养基, 待诱导出芽后将芽接种于增殖培养基, 最后增殖芽进行生根诱导。
(四) 培养基以MS 和LS 为基础培养基, 细胞分裂素采用BA, 生长素采用NAA, 以二者不同浓度和比例制成诱导分化培养基和芽增殖培养基, 探求基础培养基MS 和LS 及不同浓度激素及其配比对新普百合诱导分化和不定芽增殖的效果。
生根培养基采用LS, 培养基中添加不同浓度生长素、活性炭, 研究生长素浓度及活性炭对生根苗的影响。
培养基均添加琼脂7g / L。
在103kPa、121℃条件下灭菌15min。
(五)培养条件培养室温度( 25±1℃) , 相对湿度60%~ 70% , 光强1800~ 2500lx , 光照每天12h。
(六)讨论愈伤组织的诱导及不定芽的分化设计8 种起始诱导培养基, 每种培养基接种50 片叶。
接种后, 在适宜培养基上, 15 天左右可见叶片基部膨大隆起, 继而生出黄绿色愈伤组织,20 天左右可长至0.5cm3 , 并生出绿色芽点后分化出芽, 50 天左右可长至2~ 3cm。
统计愈伤组织及不定芽诱导状况。
结果表明, 经50 天的培养后, 单一使用细胞10分裂素的处理效果不佳, 愈伤组织诱导率、不定芽分化率均较低。
因此在新普百合的诱导培养中需细胞分裂素( BA) 和生长素( NAA) 配合使用。
当BA 浓度较高时, 有利于愈伤组织的形成, 不利于不定芽的分化。
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果等梗缘茎多 期，上 球年荷 花，无 毛形生兰 月期颜散或草百 扁本 。 色生 月有；球株合 ，白花形高 蒴、单叶 果粉生披 ，、于针厘 黄黄短形米 褐、花全 色橘 鳞 ， , 8-9 , 5-6 , 40-60 , , ,
Lilium hybrids
卷丹百合（学名Lilium lancifolium) 又名卷 丹、天盖百合、倒垂莲、虎皮百合、珍珠花、黄百合。因花色 火红，花瓣反卷，故名“卷丹”，又因花瓣上有紫黑色斑纹， 很象虎背之花纹，故有虎皮百合之雅称。原产中国、日本、朝 鲜等地，现各地多有种植。株高70～100cm，间有高达1.5m的， 可称百合之冠。球茎肥大，色白，可供食用和药用，稍带苦味。 茎秆上着生黑紫色斑点，使株秆呈暗褐色。叶互生，狭披针形， 无柄，密集于茎秆的中上部。叶腋间生有可繁植的珠芽。花夏 季开放，数量较多，常3～10朵不等，花色橙红色或砖黄色， 花序总状，花瓣较长，约9～12cm，向外翻卷，花瓣上有紫黑 色斑点。花头下垂，雄蕊向四面张开，花药紫色。
山 丹 百 合
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应用价值： 百合的主要应用价值在于观赏，其球根含丰富淀粉质，部分 品种可作为蔬菜食用；以食用价值著称于世的中国兰州百合，最早记 载在甘肃省平凉县志中，迄今已有450多年。目前兰州七里河等地区广 泛栽种食用百合，在国内外享有很高声誉。兰州百合个大、味甜，既 可作点心，又可作菜肴；宜兴的卷丹制成百合汤是夏日消暑佳品。百 合还可制作成百合干、百合粉，在国际市场上价格很高。 到目前为止，百合仍然是中药中的常用药材。
主要品种： 朝鲜百合(Lilium amabile) 山百合(Lilium auratum) 珠芽百合(Lilium bulbiferum) 布朗百合(Lilium brownii) 加拿大百合(Lilium canadense) 白百合(Lilium candidum) 渥丹(Lilium concolor) 台湾百合(Lilium formosanum) 日内瓦百合(Lilium cv. "Geneve") 星象家百合(Lilium cv. "Star Gazer") 湖北百合(Lilium henryi) 洪堡百合(Lilium humboldtii) 荷兰百合(Lilium hybrids)
观呈灌长花 赏紫丛在卉 价色中海分为 值色。拔布百 高彩花 于合 属 艳大 云卷 丽喇～南瓣 叭 株型 、组 西多 形 美淡 藏年 观黄的南生 色杂 园 木部球 艺中林生根 心
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紫 斑 百 合
Lilium nepalense D. Don
美丽百合（学名Lilium speciosum) 又名鹿子百合、艳红百 合。鹿子百合原产中国江西省、浙江省、 台湾，及日本九州、四国西南滨海地区， 株高60～100cm。叶对生，宽而疏，故名大 叶百合。茎上部开花数朵，花瓣向外反卷， 雄蕊露出花瓣之外，花白色和淡红色，花 瓣上布有玫瑰色花纹和斑点，状如鹿身上 的斑纹，故有鹿子百合之美名。花色白者， 称白鹿子百合，花色红赤或紫者，叫赤鹿 子百合。中国台湾的珍稀品种艳红鹿子百 合（Lilium.speciousmThunb.var.glorios oides Baker.），被称为“东亚最美丽的 百合花”。
Lilium pumilum DC.Fisch.
月 厘 厘 蜜 有花 罗分 份 米 米 腺 少被 斯布 ， ， ， 两 数鲜 花 ，于 果 花 黄 边 斑红 蒙黄 熟 柱 色 有 点色 余 古土 期 约 ， 乳 ，， 朵 ，高 长 花 头 长通 朝原 ～ 于 粉 状 约常 排 鲜， 列 子 近 突 无 成 半内 月 房 红 起 厘斑 总 岛蒙 份 色 ； 米点 状 也古 。 倍 ； 花 ，， 花 有西 ； 子 丝 强有 分北 花 房 长 烈时 序 布等 期 长 约 反近 ， 。地 有 卷 ～ 约 ． ；基 香 ； 部味 俄 ； 20 5 1 2 5 1 7 8
野百合
百合花冠
常绘来从母白 常制象此玛百 使的征白利合 用绘圣百亚花 白画母合采本 百与的又了来 合圣纯被它是 作母洁叫它黄 为有和做才色 装关神 变的 饰的圣圣成但 点绘画母了因 缀画家百白为 时在合色圣 , " , , . ", , ,
圣 母 百 合
.
麝香百合（学名Lilium longiflorum） 又名铁炮百合、喇叭百 合、复 活节百合。原产中国台湾，琉球 群岛（明清属国），滇东北地区沿金沙江 流域也有分布。株高40～120cm，甚至更 高。球根卵形淡黄色，个大，直径6～9cm。 茎秆绿色无斑点，基部呈现红色，叶披针 形。花夏初开放，2～4朵不等，向四边伸 展，成水平或稍倾斜，花色蜡白，基部带 绿色，形如喇叭，花筒较长，外形似炮筒， 故又有铁炮百合之称。味清甜芳香，故叫 麝香百合。
百合花素有“云裳仙子”之称。由 于其外表高雅纯洁，天主教以百合 花为玛利亚的象征，而梵蒂冈以百 合花象征民族独立，经济繁荣并把 它做为国花。百合的鳞茎由鳞片抱 合而成，有“百年好合”“百事合 意”之意，中国人自古视为婚礼必 不可少的吉祥花卉。百合在插花造 型中可做焦点花，骨架花。它属于 特殊型花材。百合花花姿雅致，叶 片青翠娟秀，茎干亭亭玉立，是名 贵的，入心、肺经，有润肺止 咳、清心安神之功，可用于热 病后余热未消、虚烦惊悸、神 志恍惚和肺痨久咳、咯血、肺 脓疡等症；或因过食煎、炒、 油炸食品后觉得燥热时食用。 治疗肺伤咽痛、咳喘痰血等症 的名方“百合固金汤(丸)”， 即以百合为主药，配伍生熟地、 麦冬、贝母等。
植物简介 主要品种 应用价值 文化含义 繁殖方法 组织培养
百合品系
• 百合是百合科百合属多年 生草本球根植物，株高可达 1.2米。叶散生，倒披针形。 伞形总状花序，一个健壮的花 葶可具花 10朵以上，花期5至 8月，花色因品种而异。
百合品系
主要分布在亚洲东部、 欧洲、北美洲等北半球温带地 区，中国的西南、西北及东南 地区是其最主要的起源地。百 合既耐寒也耐热，但不耐长期 干旱。喜酸性或中性疏松、排 水良好的沙质壤土。全世界约 有100多个品种，我国有41种 ，常用于露地观赏栽培。