生理实验讲义
生理学讲义
生理学讲义第一章绪论1.何谓内环境及其稳态？内环境为何必须维持相对稳定？机体如何维持内环境相对稳定？3.何谓正反馈和负反馈？试各举一例说明它们在生理功能调节中的作用及意义。
第二章细胞膜的基本功能1.细胞膜的物质转运主要有哪几种形式？各自的转运机制如何？5.神经纤维上的静息电位是怎样产生的？有何实验依据？7.何谓动作电位？神经纤维上的动作电位就是怎样产生的？如何在神经纤维上传导？8.如何通过实验去证明细胞动作电位的产生机制？12.骨骼肌神经-肌接头处的兴奋传递是如何进行的？如何加以证明？14.何谓激动-膨胀耦联？它包含哪些过程？其结构基础和耦联因子就是什么？第三章血液2、血浆晶体渗透压和胶体渗透压就是如何构成的？各存有什么生理意义？3、各类血细胞的正常值就是多少？9、血液凝固有哪几个基本步骤？凝血酶原激活物的形成有哪两条途径？12、何谓abo 血型系统？如何确定abo血型？第四章血液循环4、试述心脏泵血功能的各项评定指标。
5、试述影响心输血量的因素。
6、先行比较心肌工作细胞和骨骼肌细胞动作电位的优劣。
12、心肌细胞存有哪些生理特性？与骨骼肌较之有何相同？14、先行分析动脉血压构成机制及其影响因素。
21、试述心交感和心迷走神经对心肌电生理和收缩功能的作用机制。
24、在家兔实验中，阻断一侧颈总动脉血流后，血压有何变化？为什么？第五章体温3.试述肺、组织换气的过程及其影响因素。
5.试述氧离曲线的特征、成因、生理意义以及影响因素。
6.氧气和二氧化碳各自通过什么形式在血液中运输。
8.试述动脉血中的pco2升高、pco2降低和h+浓度升高对呼吸运动的影响和机制。
9.如何用实验证明动脉血中的pco2升高主要通过中枢化学感受器而影响呼吸运动？第六章消化与稀释3.试述胃液中的主要成分、生理作用和各自的分泌细胞。
4.消化期胃液的分泌是怎样调节的？7.为什么说道胰液就是消化食物最全面、消化力最强大的一种消化液？11.糖、蛋白质和脂肪在小肠内是如何被吸收的？第七章能量代谢与体温1.试述影响能量代谢的因素。
天津商业大学《生理药理学》实验讲义
《生理药理学》实验指导课程编号：0741535048实验一水杨酸钠血浆半衰期的测定一、实验目的了解分光光度法测定水杨酸钠的血药浓度和计算半衰期的方法。
二、实验内容家兔静脉采血、静脉注射、离心、光电比色等。
三、实验要求集中授课形式。
四、实验准备预习药物代谢动力学，药动学参数的概念、意义、计算方法等理论知识。
五、实验原理、方法和手段在酸性条件下，水杨酸钠解离为水杨酸，后者与三氯化铁生成一种紫色络合物，该络合物在520nm波长处，其光密度与水杨酸的浓度成正比。
采用光电比色法，计算血药浓度，进一步计算药物的半衰期。
六、实验条件1. 动物家兔，2～3kg，雌雄均可。
2. 药品10% 及0.02% 水杨酸钠（sodium salicylic），10% 三氯化铁，10% 三氯醋酸（trichloroacetic acid），0.5% 肝素（heparin），蒸馏水。
3. 器材试管架、试管、离心管、吸管（10mL、2mL、1mL 0.5mL）、注射器（2mL、5mL）、针头、吸耳球、分光光度计、离心机、计算器等。
七、实验步骤1、取4支离心试管，编号后各加入10% 三氯醋酸5mL。
2、取家兔一只，称体重，使其耳部充血后，用经0.5% 肝素湿润过的注射器由耳缘静脉缓慢抽血2.5mL，分别置于1号管和2号管内各1 mL，余血弃掉，将试管摇匀静置。
3、由耳缘静脉缓慢注射10% 水杨酸钠1.5 mL/kg，（150mg/kg），给药后5min 和35min，各采血1mL，分别置于3号管和4号管内，摇匀静置。
4、1，3，4号管内各加入蒸馏水1mL ，2号管内加入0.02%水杨酸钠1mL。
摇匀。
5、将4支离心管置于离心机内，以1500～3000rpm，离心5min，使血浆蛋白沉淀。
6、另取相应编号的试管4支，将离心后的上清液倒入相应编号的试管中，从中准确吸取3mL 分别置入相应编号的另外4支试管中，每管再加入10% 三氯化铁溶液0.5mL，摇匀显色。
植物生理学实验讲义
植物生理学实验（第一版）目录实验一质壁分离法测定植物组织的渗透势 (2)实验二植物体内硝态氮含量的测定 (4)实验三叶绿素a，b含量的测定 (5)实验四赤霉素对水稻α--淀粉酶的诱导形成 (6)实验五植物呼吸强度的测定 (7)实验六种子活力的快速测定—氯化三苯基四氮唑(TTC)法及红墨水法 (8)实验七丙二醛含量的测定 (11)实验一质壁分离法测定植物组织的渗透势[实验目的]观看植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生进程及其用于测定植物组织渗透势的测定[实验原理]原生质层（细胞膜、原生质、液泡膜）具有选择透过性，近似于半透膜，一个成熟的植物细胞确实是一个完整的渗透装置：当外界溶液浓度大于细胞液浓度时(高渗溶液），细胞失水，发生质壁分离；当外界溶液浓度小于细胞液浓度时（低渗溶液），细胞吸水；当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平稳状态，当外界溶液浓度等于细胞液浓度时（等渗溶液），植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。
细胞水势等于细胞液的渗透势等于外界溶液渗透势。
将植物组织置于对其无迫害的一系列不同浓度的溶液里处置一按时刻，然后镜检发生质壁分离的情形，细胞的等渗浓度将界于方才引发初始质壁分离的浓度和不能引发质壁分离的浓度之间。
代入公式即可计算渗透势。
[材料、器材与试剂]1 实验材料洋葱表皮2 实验仪器显微镜，载玻片，盖玻片，镊子，刀片，培育皿，记号笔，滴管。
3 实验试剂别离配制、、、、、、、、L的蔗糖溶液，贮9个试剂瓶中。
称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml，其浓度为1mol/L(母液)。
再配制成以下各类浓度：L：吸母液25ml+水25mlL：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水L：吸母液+水[方式与步骤]1. 取6套干净清洁的小培育皿，用记号笔编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培育皿中使成一薄层，盖好皿盖。
现代生化技术实验讲义（生物08）
实验一 牛乳中酪蛋白的提取及其含量测定一、实验目的1、掌握等电点法提取蛋白的基本原理及基本操作；、掌握等电点法提取蛋白的基本原理及基本操作；2、掌握双缩脲法测定蛋白含量的基本原理及基本操作。
二、实验原理酪蛋白是乳蛋白质中最丰富的一类蛋白质，约占乳蛋白的80~82%，酪蛋白不是单一的蛋白质，是一类含磷的复合蛋白质混合物，以一磷酸酯键与苏氨酸及丝氨酸的羟基相结合。
它还含有胱氨酸和蛋氨酸这两种含硫氨基酸，但不含半胱氨酸。
它在牛乳中的含量约为35g/L ，比较稳定，利用这一性质，可以检测牛乳中是否掺假。
牛乳中是否掺假。
酪蛋白在其等电点时由于静电荷为零，同种电荷间的排斥作用消失，溶解度很低，利用这一性质，经牛乳调到pH4.6，酪蛋白就从牛乳中分离出来。
酪蛋白不溶于乙醇，这个性质被利用来从酪蛋白粗制剂中将脂类杂质除去。
将脂类杂质除去。
在乳制品加工或成品中，酪蛋白含量是一个常需测定的指标。
常用于测定酪蛋白的方法是先将酪蛋白在等电点沉淀，再用凯氏定氮法测定。
本实验采用双缩脲法测定酪蛋白。
其原理为：蛋白质含肽键，肽键在碱性溶液中可与铜离子形成紫红色化合物，在540nm 波长处有最大吸收，其颜色深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸组成无关。
比，而与蛋白质分子量及氨基酸组成无关。
三、材料与试剂市售牛奶市售牛奶10mg/ml 酪蛋白标准溶液（用0.1MNaOH 配制）配制） 0.1M NaOH 溶液、0.2M pH4.6的HAc －NaAc 缓冲液缓冲液双缩脲试剂：称取硫酸铜（CuSO 4·5H 2O ）1.5g ，加水100ml ，加热助溶；另称取酒石酸钾钠（NaKC 4H 4O 6·4H 2O ）6.0g 、碘化钾5g 溶于500ml 水中。
两液混匀后，在搅拌下加入10%NaOH 300ml ，后，后用水稀释至1000ml ，贮存于塑料瓶中。
此液可长期保存，若瓶底出现黑色沉淀则需重新配制。
植物生理学实验讲义最新
实验一植物组织渗透势的测定（质壁分离法）一、实验目的植物细胞的渗透势主要取决于溶液的溶质浓度，因此又称溶质势。
渗透势与植物水分代谢、生长及抗性密切相关。
在干旱、盐渍等条件下，一些植物常在细胞内主动积累溶质，以降低其渗透势，增加吸水能力，在一定程度上保持膨压，保持细胞的生长和气孔的开放，这种现象称为渗透调节作用。
渗透调节能力的大小可以用逆境条件下细胞的渗透势的降低值来表示，在水分生理与抗性生理研究中经常需要测定。
掌握质壁分离法测定植物细胞渗透势的原理和方法。
二、实验原理当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势，该溶液的浓度称为等渗浓度。
当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。
带入公式即可计算出其渗透势。
三、实验材料、仪器设备和试剂1. 实验材料洋葱鳞茎（最好是紫色洋葱）2. 仪器设备光学显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、干净的小培养皿、滴瓶、吸水纸。
3. 试剂（1）1 mol/L蔗糖溶液，（2）蔗糖系列标准液以1 mol/L蔗糖溶液作为母液，配置梯度溶液: 0.20、0.30、0.35、0.40、0.45、0.5、0.55、0.60、0.65、0.70 mol/L的蔗糖溶液。
四、实验步骤1. 取10套干燥洁净的小培养皿，编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培养皿中使成一薄层，盖好皿盖。
2. 用刀片在洋葱鳞片外表皮或其它带有色素的组织表皮上纵横划成0.5cm2左右的小块，用镊子将表皮小块轻轻撕下，依次迅速投入各浓度蔗糖溶液中，每个培养皿中放材料3个左右，使其完全浸没，并立即盖好皿盖。
浸泡10～15分钟。
3. 从0.70 mol/L 蔗糖溶液开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上载玻片，于显微镜下观察，如果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低浓度溶液中的表皮做制片，进行同样观察，并记录质壁分离的相对程度。
生理实验报告
生理实验报告
实验目的，通过生理实验，探究人体生理机能的变化规律，加深对人体生理学
知识的理解。
实验材料，实验所需材料包括心率计、血压计、体温计等。
实验过程，首先，记录实验者的基础生理指标，包括血压、心率、体温等。
然后，进行一定强度的运动，如跑步、仰卧起坐等，记录运动后的生理指标变化。
最后，进行放松休息，观察生理指标的恢复情况。
实验结果，经过运动后，实验者的心率明显上升，血压也有所增加，体温略微
升高。
而在放松休息后，心率逐渐恢复正常，血压和体温也逐渐回落至基础水平。
实验结论，通过本次实验，我们可以得出结论，运动后，人体的心率、血压和
体温都会发生相应的变化，这是因为运动时身体需要更多的能量供应，心脏需要加快跳动来输送氧气和养分，血管收缩增加血压以维持血液循环，身体代谢产生的热量也会导致体温升高。
而在休息放松后，这些生理指标会逐渐恢复正常。
实验启示，生理实验是加深对人体生理机能理解的重要手段，通过实验，我们
可以更直观地了解人体在不同状态下的生理变化，为保持健康、科学锻炼提供依据。
结语，通过本次生理实验，我们不仅加深了对人体生理机能的认识，也对运动
后的生理变化有了更清晰的了解。
希望通过今后的实验学习，能够更全面地掌握生理学知识，为保持健康、科学运动提供更多的科学依据。
临床医学生理生态学课程讲义
临床医学生理生态学课程讲义1、生态学：研究有机体及其周围环境相互关系的科学。
（环境包括非生物环境和生物环境。
强调的是相互作用。
）2、生态因子(ecological factor):环境要素中对生物起作用的因子，如光照、温度、水分、氧气，二氧化碳和其他生物。
3、生境(habitat)：所有生态因子构成生物的生态环境，特定生物体或群体的栖息地的生态环境称为生境。
4、耐受性定律：任何一个生态因子在数量上或质量上的不足或过多，即当其接近或达到某种生物的耐受限度时会使该种生物衰退或不能生存。
5、生态幅：每一种生物对任何一种生态因子都有一个耐受范围，即有一个生态上的最低点和最高点，在最低点和最高点（或称耐受下限和上限）之间范围，称为生态幅或生态价。
6、光补偿点：绿色植物光合作用吸收二氧化碳量与呼吸作用释放的二氧化碳量，处于动态平衡时的光照强度。
7、光饱和点：在一定的光强范围内，植物的光合强度随光照度的上升而增加，当光照度上升到某一数值之后，光合强度不再继续提高时的光照度值。
8、短日照植物：日照超过某一数值或黑夜小于某一数值时才能开花的植物。
这类植物在全年日照较长时间里开花。
起源和分布在温带和寒温带地区。
9、长日照植物：日照小于某一数值或黑夜长于某一数值时才能开花的植物。
这类植物通常在早春和深秋开花。
起源和分布在日带和亚热带地区，在中等纬度也有分布。
10、冷害：喜温动物在0℃以上的温度条件下受害或死亡，这可能是通过降低了生物的生理活动及破坏生理平衡造成的，它是喜温生物向北方引种和扩张分布区的主要障碍。
11、冻害：当温度低于-1℃时，很多物种被冻死，这是由于细胞内冰晶形成的损伤效应，使原生质膜发生破裂，蛋白质失活或变性。
12、驯化：如果一个种长期生活中最适范围的一侧，将逐渐导致该种耐性限度的改变，适宜生存的上下限会发生移动，并形成一个新的最适点，这一过程叫驯化。
应用：品种移植，实验室试验等1、什么是生态因子，其作用特点有哪些？生态因子(ecological factor):环境要素中对生物起作用的因子。
人体解剖生理学实验讲义
实验一神经干动作电位测定及兴奋传导速度和不应期测定一、实验目的：1、掌握坐骨神经标本的制备方法并按要求制备出完整的蟾蜍坐骨神经标本2、掌握神经干动作电位的引导、不应期及动作电位传导速度的测定方法二、实验内容：1、坐骨神经标本制备2、坐骨神经干动作电位测定3、坐骨神经干兴奋传导速度和不应期测定三、实验仪器设备和材料清单1、实验材料：蟾蜍或蛙、蛙类手术器械一套（包括探针、粗剪、手术剪、眼科剪、镊子、玻璃分针）、蛙板、滴管、培养皿、烧杯、棉线、棉球、滤纸片。
2、实验试剂：任氏液3、实验仪器：生物信号采集处理系统、打印机、、神经标本屏蔽盒四、实验要求1、学会用细胞外电刺激诱发神经干动作电位的方法；掌握生物电记录的一般原则和方法；熟悉生物信号采集处理系统的操作；2、要求学生了解科研过程，培养学生发现问题、分析问题、解决问题的能力；3、要求学生能独立操作每一个实验步骤，了解和掌握相关的原理，培养学生熟练操作。
五、实验原理：可兴奋组织如神经纤维在受刺激而兴奋时，细胞膜电位将发生一系列短暂的变化。
由安静状态下的膜外正膜内负的静息电位变为兴奋状态下的膜外负膜内正的去极化状态。
因此，在膜外兴奋区相对于未兴奋区来说电位为负。
这种电位差所产生的局部电流又引起邻近未兴奋区的去极化，使兴奋沿细胞膜传向整个细胞，而原来的兴奋区的膜电位又恢复到膜外正膜内负的静息水平。
这种可传播的、短暂的膜电位变化称之为动作电位。
可兴奋组织在一次兴奋之后，其兴奋性要经历一个规律的时相变化，依次是绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，然后才恢复到正常的兴奋性水平。
六、实验方法：一）、实验步骤和观察指标1、仪器装置准备好生物信号采集处理系统及相关电极。
2、制备蟾蜍坐骨神经标本（1）破坏脊髓：左手握住蟾蜍，用食指下压蛙头使头前俯(图1-1)，右手持探针从枕骨大孔垂直刺入，再向前刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织；然后将针退至皮下，再将针尖向后刺入椎管捣毁脊髓。
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生理实验讲义
绪言
一、生理学实验课的目的
生理学是一门实验学科，其研究的基本方法即是实验。
生理学实验课的基本目的在于：⑴通过实验培养学生具有科学的思维方法和科学的工作态度；⑵在实验过程中使学生初步
掌握生理学实验的基本操作技术；⑶了解获得生理学知识的科学方法；⑷验证和巩固生理
学的基本理论。
二、生理学实验的特点及基本方法
生理学实验的特点在于主要以活的动物为实验材料，因此要求做到：⑴爱护动物，尽
量减少动物在实验中的痛苦，并充分利用每只动物以获得尽可能多的观察结果和实验数据；
⑵严格按实验步骤和要求进行操作，以免造成不必要的创伤和出血使动物的正常生理状态
遭到破坏，从而影响到实验结果的可靠性。
生理学的基本实验方法分为急性实验方法和慢性实验方法两大类。
㈠急性实验方法实验过程不能持久，实验后动物不能存活，实验观察能在短时间内
完成的实验方法。
一般又可分为两种：
⒈离体器官实验方法把要研究的器官或组织从活的或刚死去的动物身上取下来，放
在一个适宜于正常生理活动的人工环境中以观察和研究其生理功能。
⒉活体（在体）实验方法在动物麻醉或大脑毁损的状态下，解剖暴露动物的某一器
官组织以进行实验研究。
㈡慢性实验方法是在某一特定条件下，连续地反复观察和记录清醒动物的生理机能，需要较长时间才有结果的实验方法。
有时要先做无菌的外科手术，待动物恢复健康后再进
行实验研究。
此法在基础实验课教学中较少应用，主要广泛应用于研究工作中。
三、
生理学实验课要求
⒈认真预习本次实验的原理、目的、要求、实验步骤和操作程序。
⒉严格按照实验步骤认真操作、仔细观察，在需要互相合作的实验中应互相配合。
在
整个实验过程中不得进行与实验无关的活动。
⒊注意保护实验动物和标本，尽量节省实验器材和药品。
⒋实验后将仪器整理整齐，所用器械清洗干净并擦干，做好本组卫生。
⒌遵守实
验器械管理规定，爱护实验器械。
⒍及时整理实验记录，认真撰写实验报告，按时将报告交负责老师评阅。
四、实
验报告写作要求
⒈写明姓名、日期、学号、组别及同组人员⒉实验号和实验题目⒊实验目的
⒋实验原理：可作扼要描述
⒌实验对象⒍实验器材和药品
⒎实验方法和步骤：可作扼要描述
⒏实验结果：详细记录所观察的实验结果，以及获得这些结果所需的各种实验条件，
并进行适当的分析和处理。
⒐实验讨论和结论：运用所学的理论知识对实验结果进行解释和分析，并指出其生理
意义。
也可对实验方法进行讨论和分析。
实验一蛙或蟾蜍坐骨神经―腓肠肌标本的制备
实验原理两栖类动物的一些基本生理活动规律与哺乳类动物类似，其离体器官可以
在室温下的任氏液中于一定时间内保持其生理机能，所以常用作生理学研究中的实验材料。
坐骨神经─腓肠肌标本就是从两栖类动物后肢分离坐骨神经及其支配的腓肠肌所制成，常
用于研究神经冲动的传导和神经肌肉接头的传递特性，以及肌肉的收缩机能，是研究神经、肌肉生理的最基本的实
1
验材料之一。
实验目的熟练掌握坐骨神经─腓肠肌标本的制备方法，为今后的神经肌肉实验打下
有利的基础。
实验对象蛙或蟾蜍
实验器材和药品蛙类手术器械（蛙板、玻璃板、大头针、探针、普通剪刀、单面刀片、玻璃针、镊子、手术剪、滴管、线、烧杯、培养皿、锌铜弓、棉花）；任氏液。
实验步骤和观察项目
一、破坏蟾蜍的脑和脊髓取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。
左手握住蟾蜍，用食指
和中指夹住其前肢，无名指和小指夹住其后肢，拇指按压其头部前端。
右手持探针从相当
于枕骨大孔处垂直刺入，然后向前通过枕骨大孔刺入颅腔，左右充分搅动捣毁脑组织。
再
将探针抽回至进针处，向后刺入脊椎管，反复抽插捣毁脊髓。
此时如果蟾蜍四肢松软、呼
吸停止、角膜反射消失，表明脑和脊髓已完全被破坏，否则应重复上述步骤直至蟾蜍出现
如此现象为止。
二、左手捏住蟾蜍的腰部，右手持普通剪刀在其肩关节稍下方处剪断脊柱，然后提起
脊柱，沿两侧剪开皮肤，蟾蜍头部与内脏自然下垂，剪去头部及所有内脏（注意切勿损伤
沿脊柱两侧下行的坐骨神经）。
三、左手捏紧脊柱残端（注意不要碰到坐骨神经），右手捏紧其上的皮肤边缘，用力
向下剥掉全部后肢的皮肤，然后把标本放入盛有任氏液的培养皿中。
将手及全部用过的手
术器械冲洗干净，因为皮肤的分泌物对神经和肌肉是有害的。
四、用镊子夹住脊柱将标本提起，然后用普通剪刀沿正中将脊柱分为两半，并从耻骨
联合中央剪开两侧大腿，使之完全分离；或用单面刀片沿正中将脊柱和耻骨联合处切开
（注意勿伤坐骨神经）。
把标本放入盛有任氏液的培养皿中。
五、取一条腿放置于蛙板上的玻璃板上，脊柱端取腹面向上，大腿端取背面向上，用
大头针固定。
用玻璃针沿脊柱分离坐骨神经，再沿神经走向剪去梨状肌及其附近的结缔组织，顺坐骨神经沟（股二头肌与半膜肌之间的肌间沟）找出坐骨神经的大腿段，用玻璃针
仔细分离。
在近脊柱处结扎坐骨神经，从结扎处近脊柱端将坐骨神经剪断，然后将结扎神
经的线轻轻提起，剪断坐骨神经的所有分支，将神经游离。
六、将游离的坐骨神经搭于腓肠肌上，在膝关节周围剪去全部的大腿肌肉，用刀片将
股骨
图1－1：坐骨神经－腓肠肌标本
刮干净，然后在距膝关节约１cm处剪断股骨。
七、将游离的坐骨神经置于股骨端，在腓肠肌的跟腱下穿线结扎，并于结扎处远端剪断跟腱。
提起腓肠肌将其游离至膝关节下，然后从膝关节囊将小腿其余部分剪去，这样就制成了一个
附着于股骨上并带有坐骨神经的腓肠肌标本（如图1－1）。
八、检验标本活性: 用经任氏液润湿的锌铜弓两极轻轻接触一下坐骨神经，如腓肠肌
发生迅
2
速而明显的收缩，则表明标本的活性良好，可将标本放入盛有任氏液的培养皿中备用。
注意事项:
⒈在暴露坐骨神经和腿部肌肉后不能用自来水冲洗。
⒉分离坐骨神经时应沿神经走向进行，尽量少用金属器械接触神经干，不要过分牵拉
和压迫标本组织以免产生损伤。
⒊在制备过程中经常给神经和肌肉滴上任氏液，防止表面干燥，以保持标本的正常活性。
思考题
⒈你在制备坐骨神经─腓肠肌标本的过程中有哪些操作体会？⒉锌铜弓检验标本活性的原理是什么？
实验二神经干动作电位的引导
实验原理神经是可兴奋组织，其兴奋的客观标志就是神经动作电位，神经动作电位也叫神经冲动。
神经在安静状态下其静息膜电位为胞内负胞外正（内负外正，极化），当产生动作电位时膜电位变成内正外负（去极化），因而在神经兴奋区与非兴奋区之间存在着电位差，这种电位差所产生的局部电流又引起邻近的非兴奋区发生去极化并产生动作电位，使兴奋沿细胞膜传向整个细胞，同时原来的兴奋区又恢复为内负外正的静息膜电位（复极化）。
在完整的神经纤维膜外记录动作电位时，由于兴奋依次通过两个引导电极，会在这两个引导电极间产生方向不同的电位差变化，因而记录到的是双向动作电位，其波形与引导电极之间的距离有关。
如果在两个引导电极之间用损伤法或药物阻断动作电位的传导，则只能记录到一次电位差变化，即单向动作电位。
坐骨神经内包含许多阈值、传导速度和去极幅度都不同的神经纤维，每根神经纤维都按“全或无”的特点产生动作电位，刺激坐骨神经所记录到的复合动作电位即是这些单个动作电位的总和。
这种复合动作电位的波形与刺激强度有关。
当刺激强度较小时，只有一部分的神经纤维发生兴奋，复合动作电位比较小；当刺激强度增加到一定程度时，所有的神经纤维都发生兴奋，复合动作电位达到最大值，此时再增大刺激强度也不能记录到更大的复合动作电位。
实验目的
⒈掌握记录神经的双相和单相动作电位的方法。
⒉观察刺激强度、引导电极之间距离的变化对坐骨神经动作电位波形的影响。
3
实验对象蛙或蟾蜍
实验器材和药品计算机、生理学与神经生物学实验系统、神经标本屏蔽盒、蛙类手术器械、滤纸；任氏液。
实验步骤和观察项目
一、破坏蟾蜍的脑和脊髓（方法同实验一）。
二、游离坐骨神经至大腿段（方法同实验一）。
三、分离腓神经或胫神经坐骨神经在小腿段分为胫神经和腓神经两支。
在分支下方剪断内侧的胫神经，沿腓神经的走向（腓神经在腓肠肌沟内下行，直到足部）仔细分离腓神经，将坐骨神经轻轻提起，剪断腓神经的所有细小分支，游离腓神经，在踝关节水平穿线结扎，于结扎处远端将腓神经剪断。
这样就制成了坐骨神经─腓神经标本。
也可以剪断腓神经分支，分离胫神经，制成坐骨神经─胫神经标本。
将制备好的标本放入盛有任氏液的培养皿中。
图2－1
神经动作电位引导装置示意图 s1、s2：刺激电极，r1、r2、r3：引导电极
四、按图2－1连接仪器，注意接好地线，检查各部分是否接通，先打开计算机电源，打开生理学与神经生物学实验系统电源（以下简称实验系统），再运行生理学与神经生物
学实验系统软件，输入学号。
选择所做实验，进入实验界面。
五、参数的设置打开参数详细设置，参数设置分三个部分： 1.刺激器
单脉冲，波宽＜0.2ms，频率：15～30Ｈz，强度：微调从０Ｖ开始 2.放大器
首先根据实验选择通道，如图2-1信号输入接入1，通道选1，通道只能选择一个；
放大倍数几百倍（根据实验要求选择）,时间常数DC，滤波：10KHz。
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