圆二色谱技术及其应用
简述圆二色谱的原理及应用
简述圆二色谱的原理及应用原理圆二色谱（Circular Dichroism，简称CD）是一种研究物质光学活性的技术。
其基本原理是通过测量样品对左旋光和右旋光的吸收差异，来研究物质结构和手性。
圆二色谱的原理主要涉及到电磁波的旋转和手性分子的相互作用。
电磁波可以被视为电场和磁场的横向振动，而这两个场的振动方向垂直于波传播方向。
在自由空间中，电磁波的电场和磁场是相互垂直、相互平行并且幅度相等的。
然而，在手性分子存在的情况下，电场和磁场的振动可能会被干扰，从而导致电磁波的旋转。
根据圆二色效应，左旋光和右旋光在经过手性分子样品后会发生旋光现象。
当左旋光与手性分子相互作用后，其振动面会发生旋转，而右旋光则会与之相反地发生旋转。
这种旋光现象称为旋光分散（Optical Rotation），而测量这种旋光差异的技术就是圆二色谱。
圆二色谱可以通过测量样品对左旋光和右旋光的吸收程度差异来分析和表征生物大分子、有机化合物和无机配合物的结构、构象和手性特征。
应用圆二色谱在化学、生物化学、生物医学和药物研发领域具有广泛的应用。
下面是一些常见的圆二色谱的应用：1.结构分析和构象研究：圆二色谱可以用来确定分子结构和构象。
根据样品测得的CD谱图，可以通过比对已知的标准谱图或者进行计算模拟，来推断分子的立体结构、构象和手性特征。
2.蛋白质折叠和结构变化：圆二色谱可用于研究蛋白质的二级结构、折叠状态和构象变化。
蛋白质的二级结构（如α-螺旋、β-折叠等）会对圆二色谱谱图产生特定的影响，因此可以通过分析谱图来了解蛋白质的结构信息。
3.酶的活性和结构：通过圆二色谱可以研究酶的结构和活性。
酶的结构与其功能密切相关，圆二色谱可以帮助研究人员揭示酶的结构与功能之间的关系，并优化酶的催化活性。
4.药物研发：圆二色谱在药物研发中发挥着重要作用。
通过对药物分子的圆二色谱谱图的分析，可以了解药物的结构、构象和活性与手性之间的关系，从而指导药物改良和设计。
圆二色谱报告
一、实验目的1. 圆二色性；2. 圆二色光谱的原理与应用；3. 圆二色光谱的相关拓展知识；4. 圆二色光谱的实验技术与操作。
二、实验原理圆二色性是手性分子在光学上表现的一种特性。
光可视为振动方向与传播方向垂直的电磁横波。
当光波的电矢量方向以一个固定的角速度以传播方向为轴心匀速旋转时，称之为圆偏振光。
根据圆偏振光电矢量旋转方向的不同，可以将其区分为左圆偏振光和右圆偏振光。
一束平面偏振光可以看成是由两个振幅和速度相同而螺旋前进方向相反的圆偏振光叠加而成〔图1〕。
两圆偏振光彼此对映，互为镜像。
当手性物质在偏振光的波长范围内存在吸收的时候，其对左右圆偏振光的吸收程度，也就是摩尔吸光系数，是不同的。
此时不但偏振光的偏振平面将被旋转，构成该偏振光的左右圆偏振光的振幅也将不再相等。
组成出射光的左右圆偏振光的电矢量和将沿一个椭圆轨迹移动，此时的出射光就是椭圆偏振光〔图2〕。
这种光学现象就称为手性物质所具有的圆二色性。
对于纯手性物质，其椭圆偏振光的椭圆度θ在特定溶剂、浓度、温度和光程下，在特定波长处为定值。
同时，在特定波长处的椭圆度θ与在该波长处对左右圆偏振光的摩尔吸光系数之差(Δε)成正比。
将θ或Δε对波长作图，即得到圆二色光谱。
图1 右圆偏振光(a)、左圆偏振光(b)及平面偏振光示意图，水平箭头表示光的传播方向。
图2 (a) 平面偏振光的圆组分；(b) 平面偏振光的旋转与圆组分；(c) 椭圆偏振光的旋转与圆组分被吸收的情况。
其中，OB与OC分别表示右、左圆偏振光被吸收后的振幅，OD表示OB与OC的矢量和，θ表示椭圆偏振光的椭圆率角，tanθ= OE/OA″≈θ。
圆二色光谱的英文名称为Circular Dichroism，简称CD光谱。
其光谱仪的基本测试原理是——通过入射圆偏振光的波长变化，测定手性样品的左圆偏振光和右圆偏振光摩尔消光系数之差Δε。
由于CD光谱反映了光和分子间的能量交换，因而只能在有最大能量交换的共振波长范围内测。
圆二色谱测试：红外光谱分析的得力助手
圆二色谱测试：红外光谱分析的得力助手在生物制药领域，药物的质量控制是至关重要的。
为了确保药物的纯度和有效性，科学家们需要使用各种分析技术来进行药物的表征和分析。
其中，圆二色谱测试作为一种重要的分析方法，被广泛应用于生物药物的研究和开发过程中。
本文将详细介绍圆二色谱测试的原理、应用和优势，帮助读者更好地了解这一分析技术。
一、圆二色谱测试的原理圆二色谱测试是一种基于红外光谱的分析方法，通过测量样品对不同偏振方向的圆偏振光的吸收情况，来获取样品的结构和构象信息。
圆二色谱测试主要依赖于分子中手性中心的存在，手性分子对圆偏振光的吸收会导致光的旋光现象，从而产生圆二色信号。
通过测量样品对左旋和右旋圆偏振光的吸收差异，可以得到样品的圆二色谱图。
图1。
二、圆二色谱测试的应用圆二色谱测试在生物制药领域有着广泛的应用。
首先，它可以用于药物的纯度检验。
不同的药物分子具有不同的手性结构，通过圆二色谱测试可以确定药物样品中手性分子的含量和纯度，确保药物的质量。
其次，圆二色谱测试还可以用于药物的结构分析。
药物的结构对其活性和稳定性有着重要影响，通过圆二色谱测试可以获取药物分子的构象信息，帮助科学家们了解药物的结构特征，从而指导药物的设计和改进。
此外，圆二色谱测试还可以用于蛋白质的研究和分析，帮助科学家们揭示蛋白质的结构和功能。
三、圆二色谱测试的优势相比于其他分析方法，圆二色谱测试具有一些独特的优势。
首先，圆二色谱测试是一种非破坏性的分析方法，可以在不破坏样品的情况下获取样品的结构信息。
这对于药物的研究和开发非常重要，可以避免样品的浪费和损坏。
其次，圆二色谱测试具有高灵敏度和高分辨率的特点，可以检测到极小浓度的手性分子，并且可以区分不同手性分子的结构差异。
这使得圆二色谱测试在药物分析中具有很大的优势。
此外，圆二色谱测试还可以进行在线监测，实时监测药物的质量和稳定性，提高生产过程的控制和效率。
圆二色谱测试作为一种重要的分析方法，在生物制药领域发挥着重要的作用。
圆二色谱的原理及其应用
圆二色谱的原理及其应用《圆二色谱的原理》嘿，朋友们！今天咱们来聊聊圆二色谱的原理。
简单来说，圆二色谱就是一种用来研究分子结构和性质的工具。
它的原理呢，就像是一束特殊的光照射到我们要研究的分子上，然后这束光和分子之间会发生一些有趣的“互动”。
咱们平时见到的光可以看作是由左右振动方向相同的光波组成的。
但圆二色谱用的光可不一样，它是由两种特殊的光组成，一种是左旋圆偏振光，另一种是右旋圆偏振光。
当这两种光碰到分子时，分子对它们的吸收程度会不一样。
这是因为分子本身的结构会影响对这两种光的吸收。
比如说，如果分子有一定的对称性或者特定的结构，它就会对左旋和右旋光的吸收有差别。
如果分子对左旋光吸收得多，对右旋光吸收得少，那我们就会观察到一个正的信号；反过来，如果对右旋光吸收得多，对左旋光吸收得少，那就是负的信号。
通过测量这些信号的大小和变化，我们就能知道分子的结构特点啦。
比如说，是不是有手性中心，是不是有特定的构象等等。
怎么样，圆二色谱的原理是不是也没有那么复杂呀？《圆二色谱的原理》亲，今天咱们来搞清楚圆二色谱的原理哈！你知道吗？光其实有很多小秘密。
圆二色谱就是利用了光的一些特别之处来帮助我们了解分子。
想象一下，有一束很特别的光，它不是普通的光哦，而是由左旋圆偏振光和右旋圆偏振光组成的。
比如说，如果分子的结构很特别，像是有那种不对称的部分，那么它对左旋光和右旋光的喜欢程度就不一样。
这就好比我们去买东西，有的东西我们更喜欢，有的就一般般。
分子对光也是这样，吸收的多少会不同。
然后呢，我们通过仪器去测量这种吸收的差别，就能推断出分子的结构啦。
是不是挺神奇的？所以说，圆二色谱就是靠光和分子之间的这种奇妙“交流”，让我们能够探索分子的世界。
这下你懂圆二色谱的原理了吧？《圆二色谱的应用》朋友，今天咱们来讲讲圆二色谱在实际中的应用。
这圆二色谱的用处可多啦！比如说在生物化学领域，它能帮助我们研究蛋白质的结构。
你想啊，蛋白质对咱们身体那么重要，搞清楚它们的结构，就能更好地理解它们是怎么工作的。
圆二色谱总结
圆二色谱总结圆二色谱是一种常用于研究分子结构和性质的重要工具，特别是在物理、化学、生物学以及材料科学等领域。
它利用偏振光通过样品时产生的圆偏振光变化来测量样品的光谱特性。
以下是关于圆二色谱的一些总结：1.圆二色谱的定义和原理圆二色谱（Circular Dichroism，CD）是一种测量左旋和右旋偏振光通过样品后的透过率差别的技术。
当偏振光通过一个含有手性分子的样品时，它会发生旋光，即偏振面会旋转。
通过测量旋光度，可以确定分子的手性及其结构。
2.圆二色谱的应用圆二色谱被广泛应用于各种科学领域。
例如，在生物学中，CD被用于研究蛋白质和DNA的结构和动力学。
在化学中，它被用于研究有机化合物的手性和分子结构。
在材料科学中，CD被用于研究纳米材料和功能材料的光学特性。
3.圆二色谱的优势和局限性圆二色谱有以下几个优势：（1）灵敏度高：可以检测到样品中微小的旋光度变化，从而可以研究分子结构和动力学。
（2）分辨率高：可以区分不同的手性分子，这对于研究分子结构和手性之间的关系非常重要。
（3）无损检测：不会对样品造成破坏，因此可以用于研究生物样品和其他易损坏的样品。
然而，圆二色谱也存在一些局限性：（1）需要大量的样品：通常需要大量的样品才能获得可靠的CD谱图。
（2）需要专业的技术人员：需要进行CD测量的实验需要专业的技术人员进行操作和维护。
4.圆二色谱的发展趋势近年来，圆二色谱技术不断发展，出现了许多新的技术和发展趋势，如：（1）高精度CD测量技术：随着技术的进步，现在可以获得更高的测量精度和分辨率，从而能够更深入地研究分子的结构和动力学。
（2）CD与其他谱图的联用技术：可以将CD与其他谱图技术联用，如红外光谱、核磁共振谱等，从而可以从多个角度研究分子的结构和性质。
（3）CD在生物医学中的应用：CD可以用于研究生物分子的结构和动力学，从而可以应用于生物医学领域，如药物筛选、疾病诊断和治疗等。
（4）CD在材料科学中的应用：通过CD可以研究纳米材料、功能材料的光学特性，为材料科学的发展提供新的工具。
圆二色谱的原理及其应用pdf
圆二色谱的原理及其应用一、圆二色谱的原理圆二色谱是一种分析化学技术，用于测定物质的旋光性质。
它在药学、化学和生物学等领域有着广泛的应用。
圆二色谱原理基于物质分子对左旋光和右旋光的吸收性差异。
圆二色谱利用圆二色变化测定物质对圆偏振光的旋光角度和吸收度的关系。
当线偏振光通过样品时，正交两个互相垂直的圆偏振分量，产生旋光现象。
如果样品吸收左旋光的圆偏振分量多于右旋光的圆偏振分量，样品会产生负圆二色变化。
相反，如果样品吸收右旋光的圆偏振分量多于左旋光的圆偏振分量，样品会产生正圆二色变化。
圆二色谱测定的结果可用光谱表示，通常为色散图。
色散图由圆二色变化在不同波长处的数值表示。
通过分析色散图，可以确定物质的结构、构型以及与其他分子间的相互作用。
二、圆二色谱的应用圆二色谱有广泛的应用领域，下面列举了几个常见的应用方面：1. 蛋白质结构研究圆二色谱在蛋白质结构研究中扮演着重要角色。
蛋白质的结构与功能密切相关，圆二色谱可以提供关于蛋白质二级结构的信息，如α-螺旋、β-折叠等。
通过圆二色谱的测定，可以确定蛋白质的二级结构比例，从而推测蛋白质的折叠状态和功能。
2. 药物研究和分析圆二色谱在药物研究和分析中也得到了广泛应用。
通过圆二色谱的测定，可以研究药物与其他分子之间的相互作用，从而帮助优化药物设计和药物疗效评估。
3. 分子手性性质研究圆二色谱可用于分析分子的手性性质。
手性是化学物质的一种重要性质，与其生物活性、药物活性以及光学性质相关。
圆二色谱可以通过测定物质对旋光的吸收情况，从而确定其手性性质。
4. 化学反应动力学研究圆二色谱在化学反应动力学研究中起到了重要作用。
通过测定反应过程中圆二色变化的特征，可以研究反应的速度和路径，并推断反应机理。
三、使用圆二色谱的注意事项使用圆二色谱时，需要注意以下几点：1.样品准备：样品的纯度和浓度对测定结果有重要影响。
样品应尽可能纯净，并适当稀释，以避免吸光度过高引起的光散射效应。
生物大分子的构成奥秘：圆二色光谱测什么？
生物大分子的构成奥秘：圆二色光谱测什么？生物大分子是构成生命体的基本组成部分，对于研究生物学和药物研发具有重要意义。
然而，了解生物大分子的结构和构成并不容易。
在这方面，圆二色光谱技术为我们提供了一种强大的工具，可以帮助我们揭示生物大分子的奥秘。
本文将介绍圆二色光谱的原理、应用和意义。
1. 圆二色光谱的原理圆二色光谱是一种通过测量分子对圆偏振光的吸收来研究分子结构的技术。
它利用了生物大分子的手性性质，即分子的立体构型不对称性。
生物大分子如蛋白质、核酸和多糖都具有手性结构，因此它们对圆偏振光的吸收会产生旋光现象。
圆二色光谱仪通过向样品中传入圆偏振光，并测量透射光的旋光角度来获得样品的圆二色谱。
根据旋光角度的正负和大小，可以推断出样品中手性分子的含量和立体构型。
2. 圆二色光谱的应用2.1 蛋白质结构研究蛋白质是生物体内最重要的大分子之一，其结构与功能密切相关。
圆二色光谱可以用于研究蛋白质的二级结构，如α-螺旋、β-折叠和无规卷曲等。
通过分析圆二色谱图，我们可以了解蛋白质的结构特征，进而推断其功能和相互作用。
图1。
2.2 药物研发圆二色光谱在药物研发中也发挥着重要作用。
许多药物靶点是蛋白质，了解药物与蛋白质的相互作用对于药物设计和优化至关重要。
圆二色光谱可以帮助研究人员确定药物与蛋白质结合的方式和强度，从而指导药物研发过程。
2.3 生物大分子工程生物大分子工程是一种利用基因工程技术改造生物大分子的方法。
圆二色光谱可以用于监测和评估生物大分子工程过程中的结构变化。
通过比较圆二色谱图，我们可以判断工程后的生物大分子是否具有所需的结构和功能。
3. 圆二色光谱的意义圆二色光谱作为一种非破坏性、快速、灵敏的分析技术，对于生物大分子的研究具有重要意义。
首先，圆二色光谱可以提供关于生物大分子结构的直接信息。
通过分析圆二色谱图，我们可以了解生物大分子的二级结构、手性性质和立体构型，为我们深入理解生物大分子的功能和相互作用提供了重要线索。
圆二色谱的原理和应用
圆二色谱的原理和应用原理圆二色谱是一种用来分析物质的光学技术，它能够测量物质对不同偏振光波的吸收和旋光性质。
它的原理基于光的波动理论和旋光性质。
旋光性质旋光性是指物质对偏振光通过时会导致光的偏振面发生旋转的性质。
物质对光的旋光性可以分为正旋光性和负旋光性。
正旋光性表示物质使偏振光的偏振面顺时针旋转，负旋光性表示物质使偏振光的偏振面逆时针旋转。
旋光性可以通过旋光仪进行测量。
光的偏振光波一般是沿着特定的方向振动的，这个方向就是光的偏振方向。
偏振光通过介质之后，其偏振方向可能会发生改变，这种现象称为偏振光的旋转。
圆二色谱法圆二色谱法是通过测量物质对不同偏振方向的肩振光波的吸光度差异来分析物质的技术。
它使用圆二色偏振器和检测器进行测量。
圆二色偏振器分为正旋光和负旋光的偏振器，检测器测量不同偏振方向的肩振光波的吸光度差。
应用圆二色谱在生物化学、药物化学和有机化学等领域有广泛的应用。
蛋白质结构分析圆二色谱可以用来分析蛋白质的二级结构，如α-螺旋、β-折叠等。
蛋白质的二级结构对其功能和稳定性有重要影响，因此了解蛋白质的二级结构对于研究蛋白质的结构和功能十分重要。
药物研发圆二色谱可以用来研究药物的立体化学特性。
有机化合物通常会存在手性，不同手性的化合物可能具有不同的药理活性。
通过圆二色谱分析药物的手性可以帮助研发人员合成更有效的手性药物。
有机化学研究圆二色谱可以用来研究有机化合物的结构和手性。
有机化合物的手性对其性质和反应具有重要影响。
通过圆二色谱分析有机化合物的手性可以帮助有机化学研究人员了解其结构和性质。
生物医学研究圆二色谱可以用来研究生物体内的分子结构。
许多生物分子具有手性，其手性对其功能和相互作用有重要影响。
通过圆二色谱可以研究生物分子的手性及其与其他分子的相互作用，有助于了解生物体内的生化过程。
总结圆二色谱是一种用于分析物质的光学技术，通过测量物质对不同偏振光波的吸收和旋光性质来分析物质。
圆二色谱广泛应用于蛋白质结构分析、药物研发、有机化学研究和生物医学研究等领域。
圆二色谱仪的原理及应用
圆二色谱仪的原理及应用1. 圆二色谱仪的介绍圆二色谱仪是一种用于测量光学活性物质的仪器，它能够通过测量物质对左旋光和右旋光的旋光性质，实现对物质的结构、构型和纯度等方面的分析。
圆二色谱仪可以广泛应用于医药、化学、生物学等领域，对于研究和分析手性化合物、蛋白质结构等具有重要的作用。
2. 圆二色谱仪的原理圆二色谱仪的工作原理基于光束的旋转和二色性。
当物质通过圆二色谱仪时，它会与光产生相互作用，使得入射光分成两个方向旋转的光束，即左旋光和右旋光。
这两个旋光光束的角度、强度差异可以通过圆二色谱仪测量出来，从而得到物质的旋光性质。
3. 圆二色谱仪的组成圆二色谱仪主要由光源、单色器、样品室、检测器和计算机等组成。
- 光源：圆二色谱仪使用的光源通常为氙灯或卤素灯，具有广谱且连续的特性。
- 单色器：单色器用于将光源发出的白光分解成不同波长的单色光，以满足实验需求。
- 样品室：样品室是放置待测样品的位置，通常包括旋转样品架等装置，用于调节样品的入射角度和位置。
- 检测器：检测器用于测量样品通过的旋光光束的强度，常用的检测器包括光电二极管和光电倍增管等。
- 计算机：圆二色谱仪还配备了计算机控制系统，用于控制实验参数、采集和处理数据等。
4. 圆二色谱仪的应用领域圆二色谱仪在许多领域中都有广泛的应用，以下列举了一些主要领域： - 药学研究：圆二色谱仪可以用于研究药物的手性性质，如药物对不同手性异构体的吸收、分布和代谢等。
- 生物化学：圆二色谱仪可以用于蛋白质和核酸的二级结构研究，进而揭示它们的功能和性质。
- 光学活性材料研究：圆二色谱仪可以用于研究光学活性材料（如液晶材料、染料等）的手性性质以及其与其他化合物的相互作用。
-环境分析：圆二色谱仪可以用于环境样品中手性化合物（如农药、药物残留等）的分析与检测。
5. 圆二色谱仪的优势与局限性圆二色谱仪有许多优势，如高灵敏度、高分辨率、快速测量等，使得它在实验室和工业研发中得到广泛应用。
圆二色技术及应用
（四）CD与ORD和吸收光谱的关系
1 旋光性和圆二色性
联系：都是由光学活性分子的不对称性引起的 二者之间相互联系，由其一可推知其二。 由Kroning-Kramers将二者联系起来。
差别： 一个孤立的生色团在所有波长均有旋光性。 圆二色性只在发生吸收的那些波长才能观测到。
find that the signal is weak because the concentration of the protein is lower than you were initially told. How could you overcome this problem – and what do you have to be careful of. 4. Does the CD spectrum of a protein give most information about the (i) primary structure, (ii) secondary structure or (iii) tertiary structure? 5. Draw the CD spectrum of an α-helix. Remember to label the axes and mark important points with their values. 6. Why is nitrogen gas used in CD instruments? 7. Does CD give information about where the helices are in a protein? 8. You wish to study the thermal stability of a protein with a single buried tryptophan residue. What methods would you consider using and why? 9. Membrane proteins are difficult to study by CD. True or false? Why?
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模型动物心肌线粒体膜的CD谱
（a：病区粮喂养组；b：病区粮补加蔬菜喂养 组；c：正常对照组）
模型动物心肌线粒体细胞色素C的CD谱
（a：病区粮喂养组，15周前死亡；b：病区粮喂养组， 存活的；c：正常对照组）
（3）烟草花叶病毒侵染膜蛋白
（4 ）疏水表面对球状蛋白质二级结构变化的诱导作用
a:无规卷曲 b: 有β-折叠 c: 有α-螺旋 d: α-螺旋更多
蜂毒素的CD谱
（1：蜂毒素插入单层膜的CD谱；2：蜂毒素吸附在单层膜上时的CD谱； 3：在Tris-HCL缓冲液中的蜂毒素CD谱）
t u co S
Conformational transition: from alpha-helix rich to beta-sheet rich PrPc PrPsc
Typical Initial Concentrations:
1. 2. 3. 4. Protein Concentration: 0.5 mg/ml Cell Path Length: 0.5 mm Stabilizers (Metal ions, etc.): minimum Buffer Concentration : 5 mM or as low as possible while maintaining protein stability
4 光电倍增管 （PM） ５ 样品杯
由高度均匀的熔融石英制做，不会带来附加的原二色性， 也不会对光产生散射。 样品浓度要与样品杯光径配合，使待测样品的O.D.值 不大于２。
6 氮气保护装置
四 氨基酸和肽的圆二色性
（一）氨基酸的圆二色性
氨基酸分子中具有紫外生色团的有吲哚基，酚羟基，苯基，二硫键， 咪唑基，羧基。 酪氨酸，色氨酸，苯丙氨酸，胱氨酸，脯氨酸在近紫外区（240-300nm) 对CD谱有贡献 羧基在200-210nm显示正峰。
五 圆二色技术的应用
1 利用圆二色谱，可以计算多肽二级结构的含量。
θ λ = f α [θ ]λ ,α + f β [θ ]λ , β + f γ [θ ]λ , γ
[θ]λ,α、[θ]λ,β、[θ]λ,γ 分别为α螺旋、β折叠和非周期结构在波长λ处的椭圆率值，
fα、 fβ、 f γ
分别为α螺旋、β折叠和非周期结构在蛋白质中所占重量百分比。
单 色 器 棱 镜 样 品 室
LIGHT
调 制 解调器
光 电 探测器
前 置 放大器
（二）圆二色仪组成部分
1 光源 氙灯 2 起偏器 尼科耳棱镜: 天然方解石 Rochon棱镜：结晶状石英 3 调制解调器 （ＣＤＭ） 在其上施加几万赫兹的高频交变电压，作 用是将单色的平面偏振光以这种频率交替 地变化为左、右旋圆偏振光。
One may find that the protein concentration needs to be adjusted to produce the best data. Changing this has a profound effect on the data, so small increments or decrements are called for. If that does not produce reasonably good data, a change in buffer composition may be necessary. It would also be a good idea to check the sample for unforeseen aggregation via Dynamic Light Scattering (DNA repair enzymes are an especially good example of this behavior). If buffer poses a problem, cells with shorter path (0.1 mm) and a correspondingly increased protein concentration and longer scan time can help.
2 CD与ORD和吸收光谱的关系
CD谱中在λ= λ0处，[θ]λ取极值，（峰值或最小值）
ORD在λ= λ0处，[φ] λ=0
科顿效应： CD谱与吸收谱峰位基本接近，但吸收谱都是正值， 而CD谱则能显示正负。
ε 吸收谱 λ0 +
λ λ
Positive cotton effect
λ0 -
Negative cotton effect
2 光学活性物质(optical active substance)
(1) 定义 具有光学活性的物质，与手性物质等价。
（三） 旋光色散和圆二色谱
1 旋光性通常用旋光度α表示 ， α的大小 随入射波长 而变化的关系 称为旋光色散（optical rotatory dispersion, ORD) 。
BSA 在疏水石英板表面的CD谱
（a.1ug/ml,60S; b. 5ug/ml,60S ;c .60ug/ml,60S ; d.60ug/ml,30min;e.60ug/ml,溶液中的BSA）
（5） 磷脂膜诱导的蜂毒素二级结构的变化
1α-螺旋84%，β-折叠1% 无规卷曲15% 2 α-螺旋27%，β-折叠20% 无规卷曲53%
α-helix β-sheet
0
unordm β-turn: 180-190nm (-) 远紫外区（190-240nm) 200-205nm (+) 225nm (+) band, weak red shift
（三）含有金属离子的生色团
在波长大于300nm的区域，包括可见区域，对CD谱的贡献主要 来自像血红素一类含有金属离子的生色团，这一波段CD谱常用于研 究金属离子的氧化态、配位体以及链-链相互作用。
（circular dichroism, CD)
（四）CD与ORD和吸收光谱的关系
1 旋光性和圆二色性
联系：都是由光学活性分子的不对称性引起的 二者之间相互联系，由其一可推知其二。 由Kroning-Kramers将二者联系起来。 差别： 一个孤立的生色团在所有波长均有旋光性。 圆二色性只在发生吸收的那些波长才能观测到。
二 基本原理
（一） 几种偏振光的概念
1 平面偏振光 （plane polarized light)
又称线偏振光(linearly polarized light) 对着光前进的方向观察时， 一束光 波的电场矢量（或磁场矢量）都是在同 一方向振动。
2 圆偏振光
对着光前进的方向观察时，一束光波的电场矢量（或磁场矢量） 端点在空间的轨迹是以光传播方向为轴的圆形螺旋（在平面上的 投影为圆形）。 电矢量方向沿逆时针方向旋转，称为左圆偏振光 电矢量方向沿顺时针方向旋转，称为右圆偏振光
平面偏振光
左圆偏振光
右圆偏振光
3 椭圆偏振光
对着光前进的方向观察时，一束光波的电场矢量（或磁场矢量） 端点在空间的轨迹是以光传播方向为轴的椭圆形螺旋（在平面上的
投影为椭圆形）。
4 自然光
对着光前进的方向观察时，一束光波的电场矢量（或磁场矢量） 取所用可能方向，没有一个方向较其它方向占有优势。
（二） 几种偏振光的关系
图：三种LRR（lysine-rich repeat)家族肽的CD谱
2 CD谱非常适合研究蛋白质的构象变化
（1 ） 蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸结合的研究
图 A, Bob1（1-65）和Oct/DNA复合物的CD谱
图B，Oct/DNA/ Bob1（1-65）三元复合物的CD谱
（2 ） 克山病区粮饲养的豚鼠心肌线粒体膜的研究
振幅相等、 角频率相等、 相位相同 左右圆偏振光 合成线性偏振 光
参 照 面
α
φ1
φ2
振幅相等、 角频率相等、 相位不同 左右圆偏振光 合成线性偏振 光
参 照 面
a φ2
φ1
a
振幅不相等、 角频率相等 左右圆偏振光 合成椭圆偏振光
振幅相等、 位相差1/4波长 两束线偏振光 合成圆偏振光
（二） 光学活性和光学活性物质 1 光学活性
（二）肽的的圆二色性
Secondary structure of macromolecule α-helix: 190 nm (+) 208nm, 222nm (-) β-sheet: 195nm (+) antiparallel: red shift parallel: blue shift 215-217nm (-) Unordered structure: (-) below 200nm (+) 218nm weak band [θ] x E-3
（1）手性物质
含有不对称原子（结构) 的物质。具有光学活性。 一束平面偏振光进入手性分子时，手性物质会将其分解为 左右圆偏振光，并进行不同的处理。
（2）旋光现象
左右圆偏振光在手性分子中的行进（旋转）速度不同，通过 样品后，再次合成的偏振光相对于入射光旋转了一定角度。
（3）圆二色性
手性物质对左右圆偏振光的吸收程度不同，出射时电场矢量 的振幅不同通过样品后，再次合成的偏振光就不是圆偏振光， 而是椭圆偏振光。
圆二色技术及应用
一 序言 二 基本原理 三 圆二色仪 四 氨基酸和肽的圆二色性 五 圆二色技术的应用
一 序言
17世纪,Huggens,偏振光 1881年,Biot,石英能使偏振光的偏振面旋转, 1934年，Lowry, 《Optical Rotatory Power》 1953年，建立了第一台偏振光检测仪 19世纪60年代以后，圆二色仪出现
+ -
λ0
λ
3 CD与ORD和吸收光谱相比在结构分析中的优点