病理大体标本制作技术
病理检验技术ppt课件
最新课件
37
病理尸体解剖的现状
国外：发达国家的一些教学医院尸解率 高达80%-90%；
国内：距世界水平有差距； 影响病理尸体解剖减少的因素：认识问 题、经济问题、责任问题、病理临床联 系问题、法律问题。
最新课件
38
最新课件
23
三、免疫组织化学常用设备
微波炉、高压锅：用于抗原的修复和固定； 微量加样器； 微量震荡器; 恒温水浴项
最新课件
24
四、常用器械和工具
1、标本巨检器械：解剖刀、手术 刀、手术剪、剖验刀、镊子、血管钳 、、钢尺、钢锯；
2、尸体剖检器械 3、五金工具：
最新课件
25
五、其他
1、常用染料：苏木素、伊红 2、化学试剂：乙醇、甲醛、二甲苯、石
第二节尸体剖检室的布局和基本设施
一、尸体剖验室布局：
环境：应设在光线充足、空气通畅、干 爽、尸体搬运方便的地方；
房间构成：1、尸体解剖室
2、配套空间：
二、尸体剖验室的基本设施：
1、尸体剖验台设计 2、常用器械
最新课件
39
三、尸体剖检室的清洁、消毒
1、解剖器械的清洗和消毒 2、个人防护：
9、免疫组化室
10、病理诊断室
5. 细胞学制片室
最新课件
11、资料室（档案室）： 资料柜、玻片柜、蜡块 柜，用于保存各种病理 档案 12、标本陈列室
7
二、病理科人员设置
病理医师
负责病理标本的取材、病理诊断和发报告等；
病理技术员
负责病理标本和把病理诊断报告的收发、病理 组织切片的制作、实验室管理等工作。
常规病理技术流程和步骤
常规病理技术流程和步骤常规病理技术流程主要包括以下步骤：1. 标本的固定：通过手术从人体取下的组织称为标本。
标本取下后会立即放入10%中性福尔马林中固定，小的组织固定4~6小时，大的需要18~24小时甚至更久。
这一步是为了防止组织出现自溶现象。
2. 编号、取材、记录：组织固定好后，首先进行编号登记，然后由病理医师结合病理申请单上的相关资料进行取材。
取材过程中，医生会对标本的大小、形状、颜色、质地、病灶范围、病灶数目等进行仔细观察和测量，同时由病理技术员与病理医生配合，将标本的大体情况登记录入系统，并将病变部位按照取材规范切成适当大小的组织块。
每一例标本都有唯一的病理号，且每一块组织都有其唯一的编号。
3. 脱水、透明、浸蜡：组织取好后装入写有病理编号的有孔小盒内，再放入病理组织脱水机中进行脱水、透明、浸蜡。
这个过程需要经历十二道程序，耗时十四小时，一般在取材当日的夜间进行。
4. 包埋：将已经完成脱水、透明、浸蜡的标本放入专用模具，按规范摆放好，再加入包埋剂（最常用的包埋剂是石蜡），然后放在冷冻台上冷却，此时的标本已变成蜡块。
5. 切片、摊片、贴片、烤片：技术人员将包埋好的蜡块粗切后放在冷冻台上按序冷冻，然后在轮转切片机上切成厚3~5微米的组织蜡片。
切下的蜡片经过冷水展平后放到温水中慢慢展开，然后“定点”、“定向”地捞在专用玻片上。
载有组织的玻片再经过20-30分钟70-80℃烤箱烤干，使组织牢牢贴在玻片上。
6. 染色：最常见的是HE染色，将玻片上的超薄组织经过20多个染色缸的处理，变成彩色的图像。
7. 封片：在染好的组织上盖上一层透明的盖玻片，称为封片。
它能使切片在显微镜下显示出清晰的组织结构和细胞形态。
8. 镜下阅片至报告发出：病理医师将封好的切片放在显微镜下，运用病理学知识，结合有关临床资料和其他检查结果，对送检标本进行最后的诊断。
此过程通常需要经过初诊医生和复诊医生的双人两级诊断。
如遇病变不典型，还需要重切、深切甚至补取材，又要1-2天；如遇到疑难病例，还需经过高级医师间讨论、会诊。
病理大体标本的制作技术
察大体标本加深对疾病发生发展过程及临床症 支架上 ， 分暴露 病变 ， 充 放进 清洗 干净 的大 小 入的 １％中性福 尔马林应在加注液体 前临 时配 ０
状 的认识， 故病理大体标本的种类直接影响到病 适当 的透明玻 璃标本缸 内， 入适 量的 １ ％ 加 ０ 中 制 ， 加 入量 应保 证 液 面至 少超 过 标本 上 缘 且
闭。 好标签 。 贴 ［ ． Ｍ】北京 ： 民卫生出版社 ， ００：５ ６ 人 ２ ０ １ ～１ ． 【］兰 向昀． ２ 玻璃胶应用于标本缸 的封 固ｆ］山 Ｊ．
１％中性福 尔马林 ； 璃胶 ； 仿 ０ 玻 氯
１ ３方法 ．
１ ３ １筛选标 本 ．． 由有经验 的病 理教 师选 择临 床手 术切 除 ２结果 和尸检 的典型标 本 。 ２１ ． 玻璃大体标 本
西 医科 大学 学报 ，９ ５ ２ （）１ １ １９ ，６２：８ ．
［］吕益新 ， 锦花 ． ３ 陈 病理大体标本制 作技 术改 进与 保色 的研究【 临床 与 实验 病理学 杂
志 ， ９ １ ７ １ ～１ ３． １ ９ ， ： ４１ ４
１３２标 本的 固定 、 ．． 显色
１ ３． １固定 ． ２．
病理学是 －ｆ具 有高度理论性和 实践性 的 ｑ
１ ３ ３ １ 璃大 体标 本的 制作 ． ．． 玻
架和 玻璃缸 的大小应与标 本的大小基 本相符 ； 固定标 本的尼 龙缝 合线不应暴 露在标本 上 ； 加
课程 ， 实验教学是病理教学的重要 内容 ， 通过观
用 白色尼龙缝合 线 ， 将标本 固定在玻璃 棒
璃容器 ， 将标 本装入后 再加入现 配的中性福 尔
器制作封 Ｉ时胶合 面有气泡产生 ， 致液体渗 Ｚ ｌ 导
病理学大体标本实训报告
一、实训目的本次实训旨在通过观察和分析病理学大体标本，加深对病理学基本理论的理解，提高病理学诊断技能，培养病理学思维和临床应用能力。
二、实训内容1. 实训时间：2021年X月X日至X月X日2. 实训地点：XX医学院病理实验室3. 实训内容：（1）病理学大体标本的采集与保存在实训过程中，我们学习了病理学大体标本的采集、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片等基本步骤。
了解标本采集的重要性，以及如何保证标本质量。
（2）病理学大体标本的观察与描述在实训过程中，我们观察了多种病理学大体标本，包括肿瘤、炎症、感染、变性、坏死等。
通过观察，我们学习了病理学大体标本的形态学特征，如肿瘤的大小、形态、颜色、质地等。
（3）病理学大体标本的病理学诊断在实训过程中，我们学习了如何根据病理学大体标本的特征，进行病理学诊断。
通过分析标本的形态学特征，结合病理学知识，对标本进行诊断。
（4）病理学大体标本的记录与报告在实训过程中，我们学习了如何记录病理学大体标本的观察结果，以及如何撰写病理学报告。
了解病理学报告的基本格式和内容。
三、实训过程1. 标本采集与保存在实训过程中，我们首先学习了病理学大体标本的采集与保存方法。
标本采集过程中，应注意无菌操作，避免污染。
标本固定后，应立即进行脱水、透明、浸蜡、包埋等步骤，以保证标本质量。
2. 标本观察与描述在实训过程中，我们观察了多种病理学大体标本。
通过观察，我们学习了肿瘤、炎症、感染、变性、坏死等病理学特征。
同时，我们还学习了如何对标本进行描述，包括肿瘤的大小、形态、颜色、质地等。
3. 病理学诊断在实训过程中，我们根据标本的形态学特征，结合病理学知识，对标本进行诊断。
通过分析标本的病理学特征，我们提高了病理学诊断技能。
4. 记录与报告在实训过程中，我们学习了如何记录病理学大体标本的观察结果，以及如何撰写病理学报告。
了解病理学报告的基本格式和内容，为今后的临床工作打下基础。
四、实训心得1. 病理学大体标本观察与分析是病理学诊断的重要环节，通过观察标本，我们可以了解疾病的形态学特征，为病理学诊断提供依据。
病理标本制备注意事项
病理标本制备注意事项病理标本制备是医学领域中非常重要的环节，对于准确诊断和治疗具有重要意义。
正确的病理标本制备能够保证病理学检查的准确性和可靠性，因此制备过程中需要注意一系列重要事项。
以下是关于病理标本制备的注意事项，以便医务人员能够正确操作，保证标本的质量和结果的准确性。
1. 标本采集前的准备在进行病理标本制备之前，首先需要对标本采集前的准备工作进行梳理。
这包括标本采集所需的器械、药品、消毒液、标本容器等的准备；对标本采集部位的清洁和消毒；对标本采集区域的标识和定位等工作。
只有做好了这些前期准备工作，才能保证标本采集的顺利进行。
2. 标本采集过程中的注意事项标本采集过程中需要注意采集方式、深度、角度等，确保采集到的组织和细胞标本完整且具备代表性。
对于需要活检的组织，需要根据病变部位的位置、形态特点选择合适的采集方法，确保标本质量。
3. 标本保存和运输标本采集完成后，需要妥善保存和运输。
标本保存时需要注意温度、湿度和酸碱度等因素，确保标本的完整性和稳定性。
标本运输需要在规定的时间内送达实验室，并且保持适宜的温度条件，避免标本变性或破坏。
4. 标本固定和包埋对于需要进行病理学检查的标本，固定和包埋是必不可少的环节。
固定和包埋的质量直接影响最终镜检结果的准确性和可靠性。
在固定和包埋过程中需要注意浓度、时间、温度等因素，确保标本得到充分固定和包埋。
5. 标本切片和染色准备好的固定和包埋标本需要进行切片和染色处理。
在这一过程中，需要特别注意切片的厚度和角度，染色的选择和时间，以及操作规范，确保制备出的病理切片清晰、细胞结构完整，染色均匀且真实。
6. 制备过程的质量控制在整个病理标本制备过程中，需要建立严格的质量控制体系，包括记录标本采集的详细信息、制备过程的操作记录、质量控制的监测记录等。
同时需要进行内部和外部质控，确保标本制备的结果准确可靠。
病理标本制备是一项复杂的过程，需要医务人员严格按照标准操作流程进行。
组织病理切片的制作过程
组织病理切片的制作过程1.取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体(外科手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物，并确定取材的部位和方法。
取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的U的，具体要求如下：(1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2. 0cmX2. OcmXO. 3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和LI的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1〜0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3〜0. 5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块：切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锂动。
夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位：要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。
为此可将组织展平，以尽可能维持原形。
2.固定(1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4〜20,但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。
故取组织块的大小一般为2. 0cmX2. OcmXO. 3cm o(2)注射、灌注固定法：某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部，或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。
病理标本制备之包埋与切片 (1)
为宜
包埋机的清洁、维护与保养
包埋机24小时开机。
每天使用完毕要清理台面、沟槽及接 蜡盒，清除蜡屑及冰霜，保持机器干 净整洁
每月定期清理熔蜡槽，清洗过滤网
切
片
定义：把蜡块制成
一定厚度的蜡片的过
程叫做切片。
切片厚度：3-5um，
淋巴组织可小于 3um，
脑组织6-8um
工具：镊子、毛笔、毛 刷、铅笔等 耗材：载玻片、刀片等
⑵定期用二甲苯清洗蜡块夹头及刀座，上机
油，以确保机器的正常状态
常规石蜡切片质量的基本标准
优 质 标 准 ⒈组织切面完整，小标本切数面 ⒉切片薄(3～5μ m)，厚薄均匀 ⒊切片无刀痕、裂隙、颤痕 ⒋切片平坦，无皱褶、折叠 ⒌切片无污染 ⒍无气泡，盖片周围无胶液外溢 ⒎透明度好 ⒏细胞核与细胞浆染色对比清晰 ⒐切片无松散，裱贴位置适当 ⒑切片整洁，标签端正粘牢，编号清晰 合 计 满 分 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 100
增加蜡块冷冻时间 /降低冻台温度、换新刀；适当增加切 片厚度 3）较脆组织：肝、脾、淋巴结等 (容易出现渔网纹或裂隙) 粗修时注意组织表面要光滑，稍退刀后再切片，速度要慢
4）有钙化的组织 (容易碎片)
5%的盐酸浸泡蜡块片刻后切片
切片机的维护与保养
⑴每日切完片后将机器表面及周围的石蜡残
渣和切片废物清理倒掉
其他ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ助工具：
镊子、酒精灯等
包埋机使用方法
包埋机结构组成及性能参数：
包埋机熔蜡槽、出蜡孔、储块槽、镊子插槽及加热 板（50-80℃）
冷冻台（-10-0℃）
病理组织切片制作技术
病理组织切片制作技术病理组织切片常用的制作方法有三种。
即石蜡切片法，冰冻切片法和火棉胶切片法。
以石蜡切片法为代表，切片的基本制作过程是：组织取材T固定T冲洗T脱水T透明T浸蜡T组织包埋T组织切片T展片附贴T切片脱蜡T染色T脱水T染片透明T封固。
以上基本过程是互相联系的，任何一环节出现问题，都将使整个切片制作归于失败。
因此应细致、耐心、认真负责，并事先做好计划安排。
一、取材采取病料，要刀剪锐利，剪切时不可挤压，扯拉病料，以防人为损伤。
切取的工具要清洁。
采取病料越新鲜越好，一般不超过死后24 小时。
应选择病变部与可疑病变部切取，切取时要由表及里，有浅入深并包括周围正常组织一部分。
特殊病料应根据器官的结构特点切取。
管状，囊状和皮肤组织应注意垂直切取（横切）。
带有薄膜的组织，要防止切时薄膜分离和脱落。
切取组织块大小，以 1.5X 1.5X 0.3厘米为宜，最厚不宜超过0.5厘米。
组织块病变一面应平整光滑，另一面可不平整，以便包埋时辨认。
切取后，放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中，并做好标记。
二、固定固定的目的是迅速将组织细胞杀死，使细胞中的蛋白质，糖，脂肪等凝固，从而保持与活组织相似的结构状态。
材料取下后，应迅速固定。
固定液数量应为病理组织块的5到20倍。
由于一般把组织块浸入固定液后数小时，固定液渗入组织液的深度只达2到3厘米。
因此，可以放置冰箱内固定，使组织内酶失去作用，细菌也能停止滋生。
最常用的固定液是10%的福尔马林溶液：使用时，用40%的甲醛饱和水溶液10毫升，加水90 毫升配成。
三、冲洗固定后的组织块，应将固定液洗去。
一般均用流水（自来水）冲洗12到24小时左右。
及时冲洗尚有停止固定的作用，防止固定过度，有利于制片染色。
冲洗时如不方便用流水冲洗，也可用较大容器盛装水浸洗，每隔相当时间换水一次。
整个浸洗时间比流水冲洗应稍长一些。
酒精固定的组织材料不需冲洗。
四、脱水经过固定的组织，冲洗后要进行脱水。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
Pulvertaft法 法 A液（固定液）： 液 固定液）： 40%甲醛液 100ml 甲醛液 醋酸钾 50g 1000ml 加蒸馏水至
B液（混合液）： 液 混合液）： 300ml 甘油 100g 醋酸钾 40%甲醛液 5ml 甲醛液 1000ml 加蒸馏水至
操作步骤 大体标本→取材修整→10%甲醛生理 大体标本→取材修整→10%甲醛生理 盐水冲洗固定12-24h→固定液中固定3 盐水冲洗固定12-24h→固定液中固定3-7 12 固定液中固定 天→流水冲洗12-24h→再整理→95%乙醇 流水冲洗12-24h→再整理→95%乙醇 12 再整理 回色液中1 3h→颜色恢复→ 回色液中1-3h→颜色恢复→纱布吸干标本 颜色恢复 表面液体→ 表面液体→混合液浸泡保存
四、标本的装缸和封存 （一）标本的修整 （二）标本支架的制作 （三）标本的装缸 （四）封口
第二节
有机玻璃标本缸的制作 及标本装存与陈列
一、有机玻璃标本缸的制作 （一）材料的选择 （二）裁锯和磨边 （三）加热成型 （四）盖和底板的粘合 （五）抛光 二、标本装存 三、标本储存与陈列
病理大体标本制作技术
第一节 病理大体标本的制作 一、大体标本的收集 1.尸体解剖 1.尸体解剖 2.外科手术 2.外科手术 3.动物实验 3.动物实验
二、大体标本的取材、固定与修整 大体标本的取材、 取材原则： 取材原则：保持器官的完整性和病变的特征 （一）实质性器官 用脏器刀将器官沿长轴切成两半， 用脏器刀将器官沿长轴切成两半，切开要 均匀用力，切勿前后“拉锯” 均匀用力，切勿前后“拉锯”。标本厚度不 超过2cm 超过
（二）空腔脏器 取材时不要损伤粘膜及其病变部位， 取材时不要损伤粘膜及其病变部位， 固定时，粘膜面朝上，按其自然形态用 固定时，粘膜面朝上， 大头针沿周围固定。 大头针沿周围固定。 （三）脑
（四）心脏 对剖剪开的标本， 对剖剪开的标本，最好用支架将病灶 按显示方法处理后，再置入固定液体。 按显示方法处理后，再置入固定液体。 特别注意不要人为损伤心瓣膜及其健索 或碰掉原本松脆的赘生物。 或碰掉原本松脆的赘生物。
（五）肺 肺因含气易浮，可用棉花覆盖， 肺因含气易浮，可用棉花覆盖，使整 个标本浸入液体中，切忌有纱布覆盖， 个标本浸入液体中，切忌有纱布覆盖， 以免留下纱布痕迹。 以免留下纱布痕迹。
（六）肾脏 （七）骨组织来自三、大体标本的固定与保存 固定原则 1.固定标本的容器宜宽大，口不宜过小。 固定标本的容器宜宽大，口不宜过小。 固定标本的容器宜宽大 2.固定液的量要充分，应是标本总体的 固定液的量要充分， 固定液的量要充分 10倍以上。 倍以上。 倍以上 3.先配置固定液，在将标本放入固定液中。 先配置固定液，在将标本放入固定液中。 先配置固定液
100ml 30g 30g 1000ml
B液（回色液）： 95%乙醇 液 回色液）： 乙醇 C液（保存液）： 液 保存液）： 甘油 醋酸钾 麝香草酚 加蒸馏水至
200ml 100g 2.5g 1000ml
操作步骤 大体标本→取材修整→ 大体标本→取材修整→生理盐水冲洗 →固定液中3-7天→流水冲洗12-24h→再 固定液中3 流水冲洗12-24h→再 12 整理→回色液中1 3h→颜色恢复→ 整理→回色液中1-3h→颜色恢复→纱布洗 颜色恢复 干标本表面液体→ 干标本表面液体→保存液浸泡保存
4.固定的时间因标本的种类、大小、固 固定的时间因标本的种类、大小、 固定的时间因标本的种类 定液的性质及温度而决定。 定液的性质及温度而决定。固定时间 一般为2-7天。 一般为 天 固定液：多用 中性甲醛液固定。 固定液：多用4%中性甲醛液固定。 中性甲醛液固定
固定与保存方法有：凯氏法、 固定与保存方法有：凯氏法、柯氏法等 凯氏法溶液配置 A液（固定液）： 液 固定液）： 40%甲醛液 甲醛液 硝酸钾 醋酸钾 加蒸馏水至