电泳分析技术
分子生物学中的电泳技术
分子生物学中的电泳技术电泳技术是分子生物学领域的一种非常有用的工具。
实验室普遍使用它来分离和分析基因和蛋白质。
本文将介绍电泳技术的原理、应用以及最新发展。
一、电泳技术的原理电泳技术利用电场力驱动化学物质在凝胶或缓冲液中移动的原理。
具体来说，将样品装入凝胶或缓冲液中，接上外加电场，然后根据其分子的大小和电荷等特征，在凝胶或缓冲液中发生电泳运动。
运动的速度取决于物种的电荷和面积，因此可以通过电泳技术将样品分离成多个基于大小、电荷和特定的分子特征的带。
二、电泳技术的类型有好几种不同种类的电泳技术。
其中，凝胶电泳是最常见的一种，可以用来分离 DNA、RNA、蛋白质等。
凝胶电泳中，常用的凝胶材料包括聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）和琼脂糖凝胶（agarose）等。
PAGE电泳通常用于分离蛋白质，由于其具有高分辨率和优异的分离能力，常用于研究蛋白质结构的鉴定。
琼脂糖凝胶电泳常用于 DNA 和 RNA 分离，这是因为琼脂糖可以形成空气孔，从而隔开 DNA 和 RNA 的碱基对。
三、电泳技术的应用电泳技术是许多分析基因、蛋白质和其他生物分子的各种实验室技术的核心。
以下是一些电泳技术应用的例子。
1. 分离 DNA 片段电泳技术用于分离 DNA 片段是分子生物学中最基本的应用之一。
通过将 DNA 片段放在琼脂糖凝胶中，可以通过检查带的大小来区分和识别不同的DNA 片段。
这种方法可以用来识别特定的基因，了解基因在不同个体中的表达情况，识别变异对健康的影响等。
2. 分离蛋白质蛋白质凝胶电泳是分离、检测和鉴定蛋白质最广泛的方法。
在凝胶中进行蛋白质电泳后，带上每个带中都含有相同大小和特定蛋白质的不同量。
这种技术可以用于分析蛋白质的组成和克隆纯化鉴定等。
3. 快速核酸定性检测快速核酸定性检测是电泳技术在分子诊断中的重要应用。
如今，已出现了一些新的电泳技术，如毛细管电泳和片段长度分析，这些技术能够更快地分析样品中的 DNA 和 RNA 等分子。
电泳技术(基础医学与医学实验技术)
电泳技术的应用领域
总结词
电泳技术广泛应用于生物、医学、化学等领域。
详细描述
电泳技术广泛应用于生物学、医学、化学和环境科学等 领域。在生物领域，电泳技术用于蛋白质、核酸和糖类 等生物大分子的分离和鉴定。在医学领域，电泳技术用 于血液、尿液和其他体液中蛋白质、酶和代谢产物的分 析。在化学领域，电泳技术用于合成高分子聚合物、金 属离子和有机化合物的分离和纯化。此外，毛细管电泳 和芯片电泳等新型电泳技术在生命科学和临床诊断等领 域也具有广泛的应用前景。
DNA电泳
DNA电泳是电泳技术中用于分离、鉴定和纯化DNA片段的一种方法。通过电泳技术可以将DNA片段按照大小进行分离，为基 因克隆、基因诊断和基因组学研究等领域提供基础。
DNA电泳的原理是利用DNA片段在电场中的迁移率不同而实现分离。DNA片段在电场中的迁移率取决于其大小、电荷和构象 等因素。通过选择合适的电泳介质和电泳条件，可以实现对DNA片段的精细分离。
电泳技术(基础医学与医学实验技 术)
contents
目录
• 电泳技术概述 • 电泳技术的基本类型 • 电泳技术在基础医学中的应用 • 电泳技术在医学实验技术中的应用 • 电泳技术的优缺点 • 电泳技术的发展趋势和未来展望
01 电泳技术概述
电泳技术的定义
总结词
电泳技术是一种利用电场对带电粒子进行分离的实验技术。
样品损失。
局限性
电泳技术对于某些特定类型的 生物大分子分离效果不佳，如 蛋白质的分离。
耗时长
电泳技术需要较长时间进行分 离，对于某些快速变化的生物 样品，可能无法及时检测。
高压电场影响
电泳过程中需要施加高压电场 ，可能会对生物大分子产生一 定的影响，如引起蛋白质的变
电泳分析常用方法
电泳分析常用方法（一）醋酸纤维素薄膜电泳醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。
由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。
这种薄膜对蛋白质样品吸附性小，几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象，又因为膜的亲水性比较小，它所容纳的缓冲液也少，电泳时电流的大部分由样品传导，所以分离速度快，电泳时间短，样品用量少，5靏的蛋白质可得到满意的分离效果。
因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。
醋酸纤维素膜经过冰醋酸乙醇溶液或其它透明液处理后可使膜透明化有利于对电泳图谱的光吸收扫描测定和膜的长期保存。
⒈材料与试剂醋酸纤维素膜一般使用市售商品，常用的电泳缓冲液为pH8.6的巴比妥缓冲液，浓度在0.05-0.09mol/L。
⒉操作要点⑴膜的预处理：必须于电泳前将膜片浸泡于缓冲液，浸透后，取出膜片并用滤纸吸去多余的缓冲液，不可吸得过干。
⑵加样：样品用量依样品浓度、本身性质、染色方法及检测方法等因素决定。
对血清蛋白质的常规电泳分析，每cm加样线不超过1靗，相当于60-80靏的蛋白质。
⑶电泳：可在室温下进行。
电压为25V/cm，电流为0.4-0.6mA/cm宽。
⑷染色：一般蛋白质染色常使用氨基黑和丽春红，糖蛋白用甲苯胺蓝或过碘酸-Schiff试剂，脂蛋白则用苏丹黑或品红亚硫酸染色。
⑸脱色与透明：对水溶性染料最普遍应用的脱色剂是5％醋酸水溶液。
为了长期保存或进行光吸收扫描测定，可浸入冰醋酸：无水乙醇＝30:70（V/V）的透明液中。
（二）凝胶电泳以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。
其中聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。
琼脂糖凝胶孔径较大，对一般蛋白质不起分子筛作用，但适用于分离同工酶及其亚型，大分子核酸等应用较广，介绍如下：⒈琼脂糖凝胶电泳的原理概述琼脂糖是由琼脂分离制备的链状多糖。
电泳的原理及应用
电泳的原理及应用1. 电泳的基本原理电泳是一种利用电场作用下溶液中带电粒子（离子）在导电介质中的移动性差异而进行分离的方法。
其基本原理包括电荷的产生和电场的形成，以及带电粒子受电场力而移动的过程。
1.1 电荷的产生电荷的产生通常是通过将样品溶解或悬浮在缓冲液中，其中缓冲液中存在电解物质。
电解物质在溶液中分解成正、负离子，并为样品带上电荷。
1.2 电场的形成电场通过在导电介质中施加电势差而形成。
电势差通过两个电极施加电压使之形成，产生一个电场加速带电粒子的运动。
1.3 带电粒子的移动带电粒子在电场中受到电场力的作用而移动。
根据带电粒子的电荷性质和电势差的方向，带电粒子会向相应的电极移动。
2. 电泳的应用2.1 蛋白质电泳蛋白质电泳是一种常用的生物化学分析技术，可用于分离和鉴定复杂样品中的蛋白质分子。
其应用范围包括生物学研究、医学临床诊断等领域。
在蛋白质电泳中，样品中的蛋白质首先被加入到电泳胶中，然后施加电势差使之进行分离。
不同的蛋白质根据其电荷、大小和形状的差异，在电场中移动的速度不同，从而在电泳胶中分离。
2.2 DNA电泳DNA电泳是一种常用的分子生物学技术，用于分离和分析DNA分子的大小、形状和电荷。
DNA电泳在基因测序、DNA指纹鉴定、基因突变检测等领域具有广泛的应用。
DNA电泳的原理是将DNA样品置于琼脂糖凝胶中，然后施加电势差使之进行分离。
由于不同大小的DNA分子在电场中移动的速度不同，所以可以根据DNA片段在凝胶上的位置来确定其大小。
2.3 药物分析电泳技术在药物分析中也有重要的应用。
通过药物分析电泳，可以分离、鉴定和定量药物中的成分。
这对于药物研究、药效评价和药物质量控制等方面具有重要意义。
药物分析电泳通常使用毛细管电泳技术，其中样品以溶液的形式填充在毛细管中，然后施加电势差使之进行分离。
根据药物在电场中的迁移速度，可以确定其成分。
3. 总结电泳作为一种分离和分析技术，广泛应用于生物学、医学、药学等领域。
电泳实验的操作步骤与分析方法
电泳实验的操作步骤与分析方法引言：在现代生物学和分子医学领域，电泳技术被广泛应用于分离、纯化和分析生物大分子。
本文将介绍电泳实验的操作步骤和分析方法，以帮助读者更好地理解和应用这一技术。
一、背景知识在开始电泳实验之前，我们需要了解一些背景知识。
电泳是基于分子在电场中的迁移行为来进行分离的技术。
其中，核酸电泳用于分离DNA和RNA，蛋白质电泳用于分离蛋白质。
二、DNA电泳实验操作步骤1. 提取DNA样品首先，我们需要从细胞的裂解物或其他样品中提取目标DNA。
这可以通过常见的DNA提取方法，如酚/氯仿法或盐酸法来实现。
提取的DNA样品应该具备一定的纯度和浓度。
2. 制备琼脂糖凝胶接下来，我们需要制备琼脂糖凝胶。
首先，将适量的琼脂糖（通常为0.7-1.2%）溶解在缓冲液中，再添加一定量的琼脂糖染料（如溴化乙啶）。
将溶液倒入电泳槽中，并插入电极。
3. 加载DNA样品将提取好的DNA样品与DNA提取缓冲液混合，并将混合物加入凝胶齿孔中。
为了确定各样品带位置，可以在其中一些样品中加入DNA分子量标准物。
4. 进行电泳将电泳槽连接到电源，设置合适的电压和电流条件。
DNA分子在电场中会迁移，较小的DNA分子迁移较快，较大的DNA分子迁移较慢。
5. 可视化和记录结果当电泳结束后，取出凝胶并进行染色，如乙溴橙染色。
使用紫外光箱或相应的图像分析系统观察和记录结果。
DNA带的长度和强度可以被定量分析，以获取更精确的数据。
三、蛋白质电泳实验操作步骤1. 提取蛋白质样品首先，从细胞裂解液或其他样品中提取目标蛋白质。
这可以通过研磨、超声处理或其它细胞破碎方法来实现。
提取的样品应具有一定的纯度和浓度。
2. 准备凝胶根据需要，选择合适类型的凝胶，如SDS-PAGE凝胶或IEF凝胶。
根据凝胶配方，准备凝胶缓冲液，并在电泳槽中制备凝胶。
3. 加载蛋白质样品将提取的蛋白样品与载体缓冲液或其他加载缓冲液混合，并将混合液加载到凝胶孔中。
根据需要，也可以添加蛋白质分子量标准物。
化学分析中的电泳分析技术
化学分析中的电泳分析技术电泳分析技术是一种常用的分离和定量分析方法，广泛应用于分子生物学、药物化学和环境化学等领域。
本文将介绍电泳分析技术的原理、分类、应用和发展趋势。
一、原理电泳分析技术基于带电粒子在电场中的迁移速率不同而进行分离分析。
具体地说，将样品分子或离子溶液放置于电泳缓冲液中，然后通过外加电场，使得样品分子或离子在电场中发生迁移。
根据样品的分子大小、电荷数和电泳缓冲液条件，即可实现分子间的分离。
再通过测量样品的迁移速率或电泳迁移距离，即可定量分析样品中所含的成分。
二、分类根据电泳介质的不同，电泳分析技术可以分为凝胶电泳、毛细管电泳、等电聚焦电泳、两种向电泳等多种类型。
（一）凝胶电泳凝胶电泳是将样品分子在凝胶毛细管或凝胶板上进行分离。
凝胶可以是聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯凝胶、琥珀酸凝胶等，具有分离效率高、分辨率好、方法可靠等优点。
凝胶电泳广泛应用于核酸分离和蛋白质分离等领域。
（二）毛细管电泳毛细管电泳是一种基于微柱形毛细管进行的电泳分析技术。
它具有分离效率高、操作简便、速度快等特点，可以实现超高效毛细管电泳、毛细管等电聚焦电泳、毛细管电泳-电喷雾等多种操作模式。
（三）等电聚焦电泳等电聚焦电泳是一种基于样品分子在pH梯度中进行的电泳分析技术。
它通过电解液中的pH值梯度，在电场中使得样品分子在等电点处停留，实现分离与富集。
等电聚焦电泳不仅可以用于生物大分子如蛋白质和核酸的分析，也可以进行小分子离子的分析。
（四）两种向电泳两种向电泳是一种在同一缓冲液中，通过两种电场方向进行的电泳分析技术。
它不仅可以实现离子、分子迁移的分离分析，还可以通过两种电场方向的变化，探究溶液中的离子迁移速率等物理量，从而更加深入地揭示样品分子性质。
三、应用电泳分析技术广泛应用于分子生物学、药物化学和环境化学等多个领域，包括：（一）核酸分析：电泳技术广泛应用于DNA测序、PCR产物分析、RNA测序等领域。
通过凝胶电泳或毛细管电泳对DNA或RNA进行分离，可以实现DNA测序、切割片段分析等操作。
生物化学实验技术(5)电泳技术
3. 琼脂糖电泳应用
（1） 核苷酸琼脂糖电泳 （2） 血清脂蛋白电泳 （3） EcoR1对λDNA酶解片段分析
（三）聚丙烯酰胺凝胶电泳
优点： 可调节孔径大小，机械强度好，无电渗，分辨率高， 用途广。 一、基本原理 浓度 T%=(a+b)/m*100% 交联度 C%=b/(a+b) 聚合过程 AP-TEMED 核黄素-TEMED
2.分类及优点 电泳法可分为自由电泳（无支持体）及区带电泳 （有支持体）两大类。 自由电泳包括Tise-leas式微量电泳、显微电泳、等电 聚焦电泳、等速电泳及密度梯度电泳。 区带电泳则包括滤纸电泳（常压及高压）、薄层电泳 （薄膜及薄板）、凝胶电泳（琼脂、琼脂糖、淀粉胶、 聚丙烯酰胺凝胶）等。 自由电泳法的发展并不迅速，因为其电泳仪构造复 杂、体积庞大，操作要求严格，价格昂贵等。而区带 电泳可用各种类型的物质作支持体，其应用比较广泛。 本节仅对常用的几种区带电泳分别加以叙述。
⒈琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖是由琼脂分离制备的链状多糖。其结构单元 是D-半乳糖和3.6-脱水-L-半乳糖。许多琼脂糖链依氢 键及其它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束， 构成大网孔型凝胶。因此该凝胶适合于免疫复合物、 核酸与核蛋白的分离、鉴定及纯化。在临床生化检验 中常用于LDH（乳酸脱氢酶）、CK（肌酸激酶）等同 工酶的检测。
第二节 电泳分析常用方法
（一）醋酸纤维素薄膜电泳 醋酸纤维素是纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素 醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。 这种薄膜对蛋白质样品吸附性小，几乎能完全消除纸 电泳中出现的“拖尾”现象，又因为膜的亲水性比较 小，它所容纳的缓冲液也少，电泳时电流的大部分由 样品传导，所以分离速度快，电泳时间短，样品用量 少，5μg的蛋白质可得到满意的分离效果。因此特别适 合于病理情况下微量异常蛋白的检测。 醋酸纤维素膜经过冰醋酸乙醇溶液或其它透明液 处理后可使膜透明化有利于对电泳图谱的光吸收扫描 测定和膜的长期保存。
电泳技术
▪ （三）按照分离目的的不同，分为分 析电泳和制备电泳。
▪ （四）按照支持物的装置形式（电泳 装置）不同，分为水平电泳（支持物 水平放置，最常用）和垂直电泳等。
▪ （五）按照缓冲液pH值是否均一分为 连续pH电泳和不连续pH电泳。
▪ 1．连续pH电泳 支持介质各处的pH 相同，如滤纸电泳、醋酸纤维素薄膜 电泳等。
▪ I=ΣCiZi2/2
▪ I：离子强度，Ci：离子的浓度，Zi： 离子的价数，Σ代表累加。
▪ 例：求0.015M Na2SO4溶液的离子强度： ▪ I=（0.015×2×12+0.015×22）/2=0.045
（mol/L）
▪ 缓冲液的离子强度影响缓冲容量、产热效 应和电泳速度。离子强度大，缓冲容量大， pH值稳定；但离子强度大，电泳速度慢； 同时离子强度大，电流强度大，产热多， 蒸发快。速度慢，会导致时间过长，标本 扩散。速度快，导致区带不整齐，分辨率 低。综合考虑，离子强度最好选在0.02～ 0.2mol/L之间。
▪ （二）按照电泳媒介不同（有无支持 物），分为自由电泳和区带电泳
▪ 1．自由电泳 自由电泳的媒介为溶液 （不用支持物），带电粒子在溶液中 自由移动，适用于生物细胞和生物大 分子的电泳分离，如显微电泳、等电 聚焦电泳、密度梯度电泳等。
▪ 2．区带电泳 媒介为支持介质，被分 离的物质经电泳后在支持介质上形成 区带称为区带电泳。区带电泳是目前 应用最广泛的一种电泳技术，适用于 蛋白质、核酸等标本的分离。区带电 泳根据支持介质的不同又分为滤纸电 泳、醋酸纤维素薄膜电泳、琼脂糖凝 胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。
▪ 1．缓冲液的化学组成（缓冲溶质） 缓冲 体系的组成常选用弱酸/弱酸盐、酸式盐/次 级盐。对缓冲液的要求是化学性质稳定、
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（五）等速电泳 采用两种不同浓度的电解质组成 ，一种为前导电解质，充满整个毛细管柱；另一 种为尾随电解质，置于一端的电泳槽中。前导电 解质的迁移率高于任何样品组分，后者则低于任 何样品组分，被分离的组分按其不同的迁移率夹 在中间，在强电场的作用下，各被分离组分在前 导电解质与尾随电解 质之间的空隙中移动， 实现分离。
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（三）根据支持载体的位置或形状可分成：水平电泳 、垂直电泳、板状电泳、柱状电泳、U型管电泳 、倒V字形电泳、毛细管电泳等。
（四）根据支持物的特点又可分为： ①无阻滞支持物电泳。②高密度的凝胶电泳。
（五）根据电源控制的不同，一般可分为以下3类： 1. 恒压电泳; 2. 恒流电泳; 3. 恒功率电泳 。
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若将带净电荷Q的粒子放入电场，则该 粒子所受到的电荷引力为：
（6-1）
F引=E Q
在溶液中,运动粒子与溶液之间存在阻力F阻
（6-2）
F阻=6πrηV
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当F引=F阻时
EQ= 6πrηV
V = EQ/6πrη
（6-3）
由上式可以看出,粒子的移动速度
(泳动速度V)与电场强度(E)和粒子所带电荷量
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第一节 电泳原理
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一、电泳的基本原理 物质分子在正常情况下一般不带电，即所带正负电荷
量相 等，故不显示带电性。但是在一定的物理作用或化 学反应条件下，某些物质分子会成为带电的离子，不同的 物质，由于其带电性质、颗粒形状和大小不同，因而在一 定的电场中它们的移动方向和移 动速度也不同，因此可使它们分离。
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（六）根据自动化程度的不同，可分为半自动和 全自动型。
（七）根据其功能的不同，可分为制备型、分析 型、转移型、浓缩型等。
（八）根据用法的类型可分为：双向电泳、交叉 电泳、连续纸电泳、电泳－层析相结合技术等。
（九）根据不同的使用目的可分为：核酸电泳、 血清蛋白电泳、制备电泳、DNA测序电泳等。
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2．等电聚焦电泳的特点 ①使用两性载体电解质，在电极之间形成稳
定、连续、线性的pH梯度；②由于“聚焦效应” ，即使很小的样品也能获得清晰、鲜明的区带界 面；③电泳速度快;④分辨率高;⑤加入样品的位 置可任意选择；⑥可用于测定蛋白质类物质的等 电点;⑦适用于中、大分子量（如蛋白质、肽类、 同工酶等）生物组分的分离分析。
它具有机械强度好、弹性大、
透明、化学稳定性高、无电渗
作用、设备简单、样品量小
(1～100μg）、分辨率高等优点。
06-04 凝胶电泳 图
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（四）等电聚焦电泳
1． 等电聚焦电泳过程 一种利用有pH 值梯度的介质，分离等电点不同的蛋白质 的电泳技术。
06-05 净电荷与PH的关系曲线
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将等电点不同的蛋白质混合物加入有pH值梯度 的凝胶介质中，在电场内经过一段时间后，各 组分将分别聚焦在各自等电点相应的pH值位置 上，最后，样品的各组分在各自的等电点聚焦 成一条清晰而稳定的窄带。
06-06 等速电泳示意图
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（六）双向凝胶电泳（二维电泳） 第一向采用等电聚焦 根据复杂的蛋白质成
分中各个蛋白质的PI的不同，将蛋白质进行分离 。
第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺 凝胶电泳 （SDS-PAGE）就是按蛋白质分子量的大 小使其在垂直方向进行分离。其结果不再是条带
状，而是呈现为斑点状 。
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二、电泳方法简介
（一）纸电泳 指用滤纸作为支持 载体的电泳方法。是最早使用的区带电泳 。
图
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06-02 平卧式电泳槽装置示意
将滤纸条水平地架设在两个装有缓冲 溶液的容器之间，样品点于滤纸中央。当 滤纸条被缓冲液润湿后，再盖上绝缘密封 罩，即可由电泳电源输入直流电压 （100V～1000V）进行电泳。
(Q)成正比,而与粒子的半径(r)及溶液的粘度
(η)成反比。
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二、影响电泳的外界因素 （一）电场强度 （二）溶液的pH值 （三）溶液的离子强度 （四）电渗作用 （五）粒子的迁移率 （六）吸附作用
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第二节 常用电泳技术和电泳方法
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一、电泳技术的分类 （一）根据工作原理的不同：可分为移界电泳、 区带电泳、等速电泳、等电聚焦电泳、免疫电 泳等。 （二）根据有无固体支持物可分为：自由电泳和 支持物电泳
第五章 电泳分析技术
医学检验教研室 宜春职业技术学院
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一、概述
1.电泳是指带电荷的溶质或粒子 在电场中向着与其本身所带电荷相反的 电极移动的现象。
2.利用电泳现象将多组分物质分 离、分析的技术叫做电泳技术
3.可以实现电泳分离技术的仪器 称之为电泳仪
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目前，电泳技术已广泛用于蛋白质、多肽 、氨基酸、核苷酸、无机离子等成份的分离和鉴 定，甚至还用于细胞与病毒的研究。
临床常用的电泳分析方法主要有醋酸纤维素 薄膜电泳、凝胶电泳、等电聚焦电泳、双向电泳 和毛细管电泳等。
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本章目录
第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节
电泳原理 常用电泳技术和电泳方法 常用电泳设备的基本结构及技术指标 毛细管电泳的基本结构和分离模式 电泳仪的临床应用 电泳技术的质量控制
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（二）醋酸纤维素薄膜电泳 电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、
染色、脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电 泳的特点是分离速度快、
电泳时间短、样品 用量少。因此特别 适合于病理情况下 微量异常蛋白的检测。
06-03 血清蛋白的电泳图谱
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（三）凝胶电泳
由区带电泳中派生出一种用凝胶物质作支持物进 行电泳的方式，被称为凝胶电泳。普通的凝胶电泳在板 上进行，以凝胶作为介质。电泳中常用的凝胶为葡聚糖 、交联聚丙烯酰胺和琼脂糖。
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PI 逐渐降低
(七）免疫电泳 免疫电泳是琼脂平板电泳和双相免疫扩
散两种方法的结合。将抗原样品在琼脂平板上先进行 电泳，使其中的各种成分因电泳迁移率的不同而彼此 分开，然后加入抗体做双相免疫扩散，把已分离的各 抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇，在二者比例适 当的地方，形成肉眼可见的沉淀弧。
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胶性 PH9 中电 加解 入质 了溶
双液
第一向 等电聚焦
PI 逐 渐 降 低
等电聚焦胶放在SDS －聚丙烯酰胺凝胶上
PH3
加上电场
蛋白质
染色后，蛋
后建立稳
溶液加
白质因PI值
定PH梯度
入，建
不同，沿PH
立电场
梯度分离开第二向来自SDS－聚丙 烯酰胺凝胶 电泳
分子 量逐 渐降 低
06-07 双向凝胶电泳示意图