Tris-乙酸电泳缓冲液
tris-acetate buffer作用
tris-acetate buffer作用Trisacetate buffer是一种常用的缓冲液，主要用于调节溶液的酸碱性。
本文将以Trisacetate buffer作用为主题，从何为缓冲液、Trisacetate buffer的组成、Trisacetate buffer的酸碱性调节机制、Trisacetate buffer的优点和应用等方面，详细介绍Trisacetate buffer的作用。
第一部分：缓冲液的概述缓冲液是一种可以维持溶液酸碱性不易受外界影响的溶液。
在生化实验和许多生物学实验中，维持溶液的酸碱平衡是重要的，而缓冲液的作用就是起到这个平衡的作用。
缓冲液可以通过吸收或释放氢离子来维持溶液的酸碱平衡，并使溶液的pH值保持在一个稳定的范围内。
第二部分：Trisacetate buffer的组成Trisacetate buffer是一种由三羟甲基氨基甲烷（Tris）和乙酸钠（sodium acetate）组成的缓冲液。
Tris是一种弱碱，可以和酸反应，吸收氢离子，使溶液保持在碱性条件下。
乙酸钠是一种弱酸，可以和碱反应，释放氢离子，使溶液保持在酸性条件下。
这两种物质的组合可以在一定pH范围内维持溶液的中性。
第三部分：Trisacetate buffer的酸碱性调节机制Tris和乙酸钠之间的反应可以用以下方程式表示：Tris + H+ ↔ TrisH+乙酸钠↔乙酸 + Na+酸性条件下，乙酸钠离解，释放出乙酸和Na+离子，乙酸与Tris反应，生成TrisH+，以吸收氢离子，维持溶液的酸碱平衡。
碱性条件下，Tris与H+反应，生成TrisH+，以吸收氢离子，维持溶液的酸碱平衡。
通过Tris和乙酸钠之间的反应，Trisacetate buffer可以在一定pH范围内稳定溶液的酸碱性。
第四部分：Trisacetate buffer的优点和应用Trisacetate buffer具有以下几个优点：1. 在生理pH范围内（pH 7.27.6）表现出良好的缓冲能力，减小了溶液的pH值受外界变化的影响；2. 具有良好的溶解性，可以在生化实验中稳定有效地工作；3. 不对大多数生物分子具有毒性和抑制作用，适用于生物学实验。
te缓冲液
te缓冲液1. 简介TE缓冲液是一种常用于核酸研究中的缓冲液。
TE缓冲液的全称为Tris-EDTA 缓冲液，其中Tris是三羟甲基氨基甲烷（Tris(hydroxymethyl)aminomethane），EDTA是乙二胺四乙酸（Ethylenediaminetetraacetic Acid）的缩写。
TE缓冲液常被用于核酸的储存、稀释和DNA的电泳分析。
2. 组成TE缓冲液的组成为：•10mM Tris-Cl•1mM EDTA3. 功能TE缓冲液具备以下功能：•维持等电点：TE缓冲液的pH值约为8.0，可在理想pH范围内维持核酸的等电点，保持其稳定性。
•稀释和储存：由于TE缓冲液中的EDTA可以与金属离子结合，阻止金属离子的催化作用，因此经TE缓冲液稀释储存的核酸可以减少降解和酶催化反应的发生。
•DNA电泳：TE缓冲液可用于DNA电泳分析，使DNA保持在双链状态，减少DNA降解和断裂。
4. 制备方法制备TE缓冲液的步骤如下：1.加入800mL去离子水或蒸馏水到一个无菌的容器中。
2.加入6.06g Tris-Cl固体，搅拌至完全溶解。
3.加入0.372g EDTA固体，搅拌至完全溶解。
4.调节pH值至8.0，可以用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)进行调节。
5.加入去离子水或蒸馏水直至总体积为1L。
6.混匀，用0.2μm滤器过滤消除杂质，得到TE缓冲液。
5. 注意事项在制备和使用TE缓冲液时，需要注意以下事项：•使用无菌的实验室器具、试剂和培养基。
•严格遵循实验室的安全操作规程，避免对人身和环境造成伤害。
•储存TE缓冲液时，使用无菌密封容器，避免污染和杂质的进入。
•注意TE缓冲液的pH值，需要在8.0附近，可以使用pH计进行测量和调节。
•TE缓冲液供实验使用前，需要用0.2μm滤器过滤消除杂质。
6. 结论TE缓冲液是核酸研究中必备的一种缓冲液，具备维持核酸稳定性、稀释储存和DNA电泳的功能。
在制备和使用TE缓冲液时，需要注意无菌操作、安全操作和pH值的调节。
PCR 各种缓冲液的配方
PCR 各种缓冲液的配方1. 电泳缓冲液50×Tris-乙酸（TAE）缓冲液终浓度配制1L溶液成分2mol/L Tris碱 242g1mol/L 冰乙酸 57.1 mlEDTA （pH＝8.0） 18.622g （200ml的0.5 mol/L EDTA（pH 8.0））水补足1L2. 5×Tris-硼酸（TBE）缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量445 mmol/L Tris碱54g445 mmol/L 硼酸盐 27.5g 硼酸10 mmol/L EDTA 20 ml的0.5 mol/L EDTA（pH 8.0）水补足1L染料1％溴酚蓝（bromophenol blue）加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
1％二甲苯青FF（xylene cyanole FF）溶解1g二甲苯青FF于足量水中，定容到100ml。
10mg/ml的溴化乙锭（ethidium bromide）小心称取1g溴化乙锭，转移到广口瓶中，加100ml水，用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。
用铝箔包裹装液管，于4℃贮存。
3. 凝胶上样液（gel loading solutions）6×碱性凝胶上样液（室温贮存）成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.3 N 氢氧化钠 300ul 10N 氢氧化钠6 mmol/L EDTA 120ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）18％聚蔗糖（400型） 1.8g0.15％溴甲酚绿 15mg0.25％二甲苯青FF 25mg水 10ml4. 6×聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存）成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15％溴酚蓝 1.5ml 1％溴酚蓝0.15％二甲苯青FF 1.5ml 1％二甲苯青FF5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）15％聚蔗糖（400型） 1.5g水补足到10ml5.6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存）成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.25％溴酚蓝 2.5ml 1％溴酚蓝0.25％二甲苯青FF 2.5ml 1％二甲苯青FF15％聚蔗糖（400型） 1.5g水补足到10ml6.6×甘油凝胶上样液（4℃贮存）成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15％溴酚蓝 1.5ml 1％溴酚蓝0.15％二甲苯青FF 1.5ml 1％二甲苯青FF5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）50％甘油3ml水 3.9ml7. 6×蔗糖凝胶上样液（室温贮存）成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15％溴酚蓝 1.5ml 1％溴酚蓝0.15％二甲苯青FF 1.5ml 1％二甲苯青FF5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）40％聚蔗糖 4g水补足到10ml8.10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存）成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.2％溴酚蓝20mg0.2％二甲苯青FF 20mg200 mmol/L EDTA 4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 0.1％SDS 100ul 10％ SDS50％甘油 5ml水补足到10ml。
凝胶电泳缓冲液的配制
2．测序凝胶加样缓冲液98%去离子甲酰胺10mol/L EDTA(pH8.0)0.025%二甲苯青FF0.025%溴酚蓝甲酰胺：许多批号的试剂级甲酰胺，其纯度符合使用要求，无须再进行处理。
不过，一旦略呈黄色，则应用在磁力搅拌器上将甲酰胺与D owexXG8混合床树脂共同搅拌1小时进行去离子处理，并用What man 1号滤纸过滤2次，去离子甲酰胺分装成小份，充氮存于-70℃。
3．常用的电泳缓冲液说明：①TBE溶液长时间存放后会形成沉淀物，为避免这一问题，可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液，出现沉淀后则予以废弃。
以片都以1×TBE作为使用液（即1：5稀释浓贮液）进行琼脂糖凝胶电泳。
但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。
目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1：10稀释的贮存液作为使用液。
进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小，故通过缓冲液的电流量通常较大，需要使用1×TBE以提供足够的缓冲容量。
②碱性电泳缓冲液应现用现配。
③Tris-甘氨酸缓冲液用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。
4．2×SDS凝胶加样缓冲液100mmo l/L Tris·HCl(6.8)200mmo l/L二硫苏糖醇（DTT）4%SDS（电泳级）0.2%溴酚蓝20%甘油不含DTT的2×SDS凝胶加样缓冲液可保存于室温，应在临用前取1mol/L贮存液现加于上述缓冲液中。
5．凝胶加样缓冲液使用以上凝胶加样缓冲液的目的有三：增大样品密度；以确保DNA均匀进入样品孔内；使样品呈现颜色，从而使加样操作更为便利，含有在电块中能以可预知速率向阳极泳动的染料。
溴酚蓝在琼脂糖中移动的速率约为二甲苯青FF的2. 2倍，而与琼脂糖浓度无关。
常用缓冲液配方及缓冲范围
常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种水溶液，其中含有在酸性或碱性条件下能够保持pH稳定的化学物质。
缓冲液广泛应用于生物化学、分子生物学、生物技术和医学等领域的实验和研究中。
下面是一些常用的缓冲液配方及其应用范围。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是一种中性缓冲液，常用于生物化学和分子生物学实验。
它的配方通常为：- 10 mM Tris base-1mMEDTA-向溶剂中调整pH至7.4Tris缓冲液可用于DNA和RNA的电泳、酶反应、细胞培养等实验中。
2.PBS缓冲液PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物学缓冲液，具有缓冲能力强和与生物体液成分相似的特点。
它的配方通常为：-137mMNaCl-2.7mMKCl-10mMNa2HPO4-2mMKH2PO4-向溶剂中调整pH至7.4PBS缓冲液可用于细胞培养、免疫荧光染色、蛋白质凝胶电泳等实验中。
3.TAE缓冲液TAE（三乙酸缓冲液）是一种常用的核酸电泳缓冲液，其配方为：- 40 mM Tris base-20mM醋酸-1mMEDTA-向溶剂中调整pH至8.0TAE缓冲液可用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳，如聚丙烯酰胺凝胶电泳（）和琼脂糖凝胶电泳（agarose gel electrophoresis）。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液是一种常用的酸性或碱性缓冲液。
它的配方基于Tris缓冲液，在Tris缓冲液基础上调整pH的方法是在配方中加入稀盐酸或稀氢氧化钠。
例如，对于Tris-HCl缓冲液的配方为：- 50 mM Tris base-向溶剂中加入HCl调整pH至所需的值（通常为7.2至9.0）Tris-HCl缓冲液可用于酶反应、蛋白质组学研究、PCR等实验中。
这只是一些常用的缓冲液配方，根据不同实验需求和物质稀释要求，还有其他许多缓冲液的配方。
对于缓冲液的选择，关键在于根据实验要求选取适当的缓冲体系，并对缓冲液中所需的化学物质浓度、pH值等进行精确调整。
Tris-HCH缓冲液
Tris-HCl缓冲液的优点是：①因为Tris碱的碱性较强，所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液；②对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。
其缺点是：①缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍，pH值的变化大于0.1；②温度效应大，温度变化对缓冲液pH值的影响很大，即：△pKa／℃＝－0.031 ，例如：4℃时缓冲液的pH＝8.4，则37℃时的pH＝7.4，所以一定要在使用温度下进行配制，室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃～4℃。
③易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封。
④此缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用，所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。
Question about Tris-Hcl and PBS buffer - (Jan/22/2007 )Hello..Maybe it is a very stupid question..but i would like to ask what is usage of buffer...and what is the difference between the Tris-Hcl and PBS...How can i choose buffer for the experiment? What is the basis of sele cting a buffer solution?-hana_angel-Remember that biological reactions work well only in a very narrow ra nge of pH (around 7.4). Many of that ractions generate or consume pro tons, so a buffer must have the capability of compensate that variati ons of pH. Tris has pros and cons about it. Its pKa is 8.0, so its bu ffering capacity is around 7.5-9.0, enough to most of biological reac tions. Despite its high buffering capacity, being highly soluble in w ater and being inert for enzimatic reactions, Tris is a toxic polyami ne, and that's why we use PBS for living cells experiments. PBS is ma de of phosphates so it's cheap and easy to prepare (an important poin t for a good buffer). It's no toxic for cells, compatible in osmolari ty and it's insensitive to temperature changes (Tris don't). Phosphat es have a high buffering capacity too but may inhibit enzymatic react ions because they can sequester divalent cations like calcium and mag nesium, then we use Tris for enzymatic reactions.Choosing a buffer depends upon the objective of your experiment and t he nature of your method (enzymatic reactions, histological procedure, live/dead cell detection methods, etc). Take a look on the literatur e about the experiment you want to do and check is buffers used there are compatible with your experiment or protocol. Some basic books ab out cell culture or molecular biology technics are useful too. Even b rochures or catalogs from manufacturers could be a good source of information.Good Luck!-aleruiz-三羟甲基氨基甲烷（tris(hydroxymethyl)aminomethane，一般简称为Tris）是一种有机化合物，其分子式为(HOCH2)3CNH2。
电泳缓冲液的配制
电泳缓冲液母液的配制
50×TAE
称取242g Tris溶于800ml双蒸水中，加57.1ml冰乙酸和100ml 0.5mol/L EDTA（pH 8.0），再加水定容至1L，室温保存备用。
50×TAE简易配制方案
称量242gTris，EDTANa2·2H2O37.2g于1L烧杯中，向烧杯中加入约800ml双蒸水，充分搅拌均匀；加入57.1ml的冰乙酸，充分溶解；用NaOH调pH至8.3，加去离子水定容至1L后，室温保存。
注：开始溶解药品的双蒸水量一定要小于800ml，否则加药后会发现总体积超过1L，加入水后，常会发现药品很难完全溶解，此时可先将烧杯放在磁力搅拌器上充分搅拌且适当加热液体（≤80℃），并继续后续配制；用NaOH调节pH时，推荐使用固体（粉末或颗粒）试剂，由于缓冲液的缓冲作用，需要加入较大量的NaOH，并且随着NaOH的加入，前面未溶解的药品会慢慢溶解，当pH＞8.0后，溶液即会变为无色澄清的液体。
此种配方方便快捷，且可保证稀释后1×TAE的pH值在8.0左右，是理想的TAE配制方案。
5×TBE
称取54g Tris，27.5g硼酸溶于800ml双蒸水中，加入20ml 0.5mol/L EDTA（pH 8.0），再加水定容至1L，室温保存备用。
[VIP专享]TAE缓冲液
![[VIP专享]TAE缓冲液](https://img.taocdn.com/s3/m/bbb09e0c3b3567ec112d8a4f.png)
loading buffer 的中文名字叫上样缓冲液,6*的缓冲液中可以显示两条带，前面的蓝色的 条带是溴酚蓝，代表的片段大小是 300bp，后面的有点绿色的条带是二甲苯青，代表的片 段大小在 4000bp 左右。 loading buffer 的功能主要有两个。第一，里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯酚起到指示的 作用，显示电泳的进程，以便我们适时终止电泳；第二，里边的成分甘油可以加大样品密 度，使样品密度大于 TAE，从而沉降到点样孔中，防止样品飘出点样孔。另外，有的 Buffer 是加有 SDS 的，一般都会写明。SDS 主要是促使聚合酶变性，因为没有除尽的聚
5.加入 2-ME 的 Loading Buffer 可在室温下保存一个月左右
1.生物学的聚合酶链式反应
定义
聚合酶链式反应简称 PCR（英文全称：Polymerase Chain Reaction），
聚合酶链式反应
具体内容点击： 聚合酶链式反应，简称 PCR。聚合酶链式反应，其英文 Polymease Chain Reaction(PCR)是体外酶促合成特异 DNA 片段的一种方法,由高温变性、低温退火及 适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的 DNA 得以迅速扩增,具有特异性强、灵 敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研 究,还可用于疾病病的诊断或任何有 DNA,RNA 的地方．聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，简称 PCR）又称无细胞分子克隆或特异性 DNA 序列体外引物定向酶促 扩增技术。 由美国科学家 PE（Perkin Elmer 珀金-埃尔默）公司遗传部的 Dr. Mullis 发明， 由于 PCRPCR 技术在理论和应用上的跨时代意义，因此 Mullis 获得了 1993 年诺贝尔化学 奖。
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Tris-acetate、1mM EDTA(pH8.0)。TAE 是常用的 DNA 电泳缓冲液, 本试剂是 50 倍浓缩的 TAE，主要由 2M Tris-acetate，50mM EDTA 组成，使用时需用蒸馏水或去离子水稀释 50 倍 后使用。
Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE)
试剂盒储存条件： 室温保存。
试剂盒组成：
产品组成 规格
Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE) 使用说明书
100ml 100ml1来自500ml 500ml
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有效期： 12 个月。
使用限制： 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品简介： Tris-乙酸电泳缓冲液采用高纯度、高品质原料进行配制，可用于生命科学研究核酸提取
使用方法： 用蒸馏水或去离子水稀释到 1×后使用。