细胞爬片HE染色方法
细胞爬片HE染色方法
细胞爬片HE染色方法一、原理苏木素（Hematoxylin）－伊红（Eosin）染色法，简称HE染色法。
HE染色法采用两种染料即碱性染料苏木素和酸性染料伊红分别于细胞核和细胞质发生作用，使细胞的微细结构通过颜色而改变它的折光率，从而在光镜下能清晰地呈现出细胞图像。
该染色过程既有化学反应，又有物理作用参与。
从化学反应看，组织细胞内含有酸性物质和碱性物质，细胞的酸性物质与碱性染料的阳离子结合，而细胞核的碱性物质与酸性染料的阴离子结合，使其中酸性细胞核被碱性的苏木素染成蓝色，而碱性的胞浆被酸性染料伊红染成红色。
其结果胞核呈蓝色，胞浆呈红色。
从物理现象看，主要有吸附、吸收之说。
HE 染色提供良好的核浆对比染色，是细胞化学染色最常用的一种方法。
二、实验用品1、固定液：常用95％乙醇和冰丙酮2、苏木精染液：称取苏木精粉0.5g，铵矾24g溶解于70ml蒸馏水中，然后取NaIO 31g，水5ml，再加入甘油30ml和冰醋酸2ml，混合均匀，滤纸过滤，备用。
3、伊红染液：称取0.5g水溶性伊红染液，溶于100ml蒸馏水中。
4、稀盐酸乙醇溶液：用75%乙醇配制1％盐酸。
5、系列浓度的乙醇、二甲苯、中性树胶。
6、培养瓶、培养皿、眼科镊、盖玻片、载玻片、显微镜。
三、实验步骤1、样品制备：对于贴壁生长细胞，胰酶消化，调整细胞浓度约1×105/ml，滴加于盖玻片上（置于6孔板中），培养相应时间后，取出细胞爬片，用PBS洗涤3次。
2、样品固定：95％乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min。
3、染核：苏木素染液染色2－3min，自来水洗涤。
4、分色：镜下观察，若细胞核染色过深，用1％盐酸酒精溶液分色数秒，自来水洗涤。
5、染胞质：浸入伊红染液染色1min，自来水洗涤。
6、吹干或自然晾干细胞爬片后，中性树胶封片。
若细胞用4％多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12-15min，伊红5min 即可。
he染色——精选推荐
一、HE染色石蜡切片制作的基本过程作者：未知来源：生物秀时间：2007-12-71、取材与固定：?从人或动物新鲜尸体上取下组织块(一般厚度不超过0．5厘米)投入预先配好的固定液中(10％福尔马林，Bouin氏固定液等)使组织、细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞死后的自溶或细菌的分解，从而保持细胞本来的形态结构。
2、脱水透明：一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份。
再将组织块置于既溶于酒精，又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明，以二甲苯替换出组织块的中酒精，才能浸蜡包埋。
3、浸蜡包埋：将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温。
待石蜡完全浸入组织块后进行包埋：先制备好容器(如折叠一小纸盒)，倒入已溶化的石蜡，迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中。
冷却凝固成块即成。
包埋好的组织块变硬，才能在切片机上切成很薄的切片。
4、切片与贴片：?将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片，一般为5—8微米厚。
切下的薄片往往皱折，要放到加热的水中烫平，再贴到载玻片上，放45℃恒温箱中烘干。
5、脱蜡染色：?常用HE染色，以增加组织细胞结构各部分的色彩差异，利于观察。
苏木精(Hematoxylin，H)是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。
伊红(Eosin，E)是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色，被酸性染料染色的结构具有嗜酸性。
染色前，须用二甲苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度酒精，最后入蒸馏水，就可染色。
HE染色过程是：?①将已入蒸馏水后的切片放入苏木精水溶液中染色数分钟。
?②酸水及氨水中分色，各数秒钟。
?③流水冲洗1小时后入蒸馏水片刻。
?④入70％和90％酒精中脱水各10分钟。
?⑤入酒精伊红染色液染色2—3分钟。
6、脱水透明：?染色后的切片经纯酒精脱水，再经二甲苯使切片透明。
7、封固：?将已透明的切片滴上加拿大树胶，盖上盖玻片封固。
待树胶略干后，贴上标笺，切片标本就可使用。
he染色的操作流程原理
he染色的操作流程原理下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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将组织样本迅速放入固定液中，以防止组织自溶和腐败。
HE染色步骤[推荐]
![HE染色步骤[推荐]](https://img.taocdn.com/s3/m/645e26c84793daef5ef7ba0d4a7302768f996f61.png)
HE染色步骤[推荐]
染色是加入染料将细胞或组织着色的过程。
HE染色是指使用
血红蛋白染成红色，细胞核染成蓝色的染色方法。
HE染色步骤如下：
1. 取制好的玻片（细胞或组织已固定在玻片上），用甲醇或乙醇进行脱水，使细胞或组织变得透明。
2. 将玻片放入染料盒中，加入苏丹三液（血红蛋白染料）浸泡。
时间通常为5-10分钟。
洗净玻片以去除多余的染料。
3. 将玻片放入氧化性酸液中（酸性洗涤液或稍微含有酒精的酸性水溶液），将苏丹三液中的铁离子还原成溶于水的亚铁离子。
时间通常为1-2分钟。
4. 接下来，将玻片放入碱性染色液中（含有甲苯重组溶液和酸性洗涤液的甲苯重组溶液），染色液中的亚铁离子被氧化成沉淀（血红蛋白）。
5. 最后，将玻片漂洗并脱水，然后用透明介质将玻片封闭，使其防止氧化。
通过HE染色，可以使细胞核染成蓝色，血红蛋白染成红色，
从而在显微镜下清晰地观察细胞或组织的结构和特征。
这是一种常用的组织学染色方法。
HE染色步骤
HE染色法是苏木精（hematoxylin）和伊红（eosin）的首个字母缩写。
苏木精是碱性染料，使细胞核染色质和胞质内的核糖体呈紫蓝色。
伊红是酸性染料，使细胞质和细胞外基质中带较强碱基的蛋白质成份着红色。
常规he染色步骤：(1)二甲苯（Ⅰ）15min(2) 二甲苯（Ⅱ）15 min（3）二甲苯：无水乙醇=1:1 2min(4)100%乙醇（Ⅰ）5min(5)100%乙醇（Ⅱ）5 min(6)80%乙醇5min(7)蒸馏水5 min(8)苏木精液染色5 min(9) 流水稍洗去苏木精液1-3 s(10) 1%盐酸乙醇1-3 s(11) 稍水洗10-30 s(12)蒸馏水过洗1-2 s(13) 0.5%伊红液染色1-3 min(14) 蒸馏水稍洗1-2 s(15) 80%乙醇稍洗1-2 s(16) 95%乙醇（Ⅰ）2-3 s(17) 95%乙醇（Ⅱ）3-5 s(18) 无水乙醇5-10 min(19) 石炭酸二甲苯5-10 min(20) 二甲苯（Ⅰ）2 min(21) 二甲苯（Ⅱ）2 min(22) 二甲苯（Ⅲ）2 min(23) 中性树胶封固注：①第（11）、（12）步可省去，（13）步冲水时间需延长至20-30min。
②第（21）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。
冷冻切片HE染色步骤：（1）冰冻切片固定10～30 s（2）稍水洗1～2 s（3）苏木精液染色（60℃）30～60 s（4）流水洗去苏木精液5～10 s （5）1%盐酸乙醇1～3 s （6）稍水洗1～2 s（7）促蓝液返蓝5～10 s （8）流水冲洗15～30 s （9）0.5%曙红液染色30～60 s （10）蒸馏水稍洗1～2 s （11）80%乙醇1～2 s （12）95%乙醇1～2 s （13）无水乙醇1～2 s （14）石炭酸二甲苯2～3 s （15）二甲苯（Ⅰ）2～3 s （16）二甲苯（Ⅱ）2～3 s （17）中性树胶封固。
HE染色方法与步骤吐血整理
HE染色方法与步骤吐血整理染色是一种常见的实验技术，用于观察和分析生物样品中的细胞或组织结构。
HE染色是一种常用的组织和细胞染色方法，它能够同时染色细胞核和细胞质，因此得名HE（hematoxylin and eosin）染色。
下面是HE染色的步骤：1.染色前的准备工作：-选择合适的组织样品，通常是已固定和包埋的组织切片。
-准备好需要使用的试剂和设备，包括显微镜玻片、切片刀、染色盘、醇和蜡解剂、染色液和显微镜。
-将切片从包埋蜡中去蜡，并通过浸泡在蜡解剂中来溶解蜡质。
2.组织切片的处理：-将组织切片通过水洗涤，去除蜡解剂和剩余的蜡质。
-将切片通过不同浓度的醇溶液进行脱水处理，使得切片逐渐转移到无水状态。
-将脱水处理后的切片通过透明质量更好的试剂（如亚硫酸氢钠或甘油）进行透明处理，以利于细胞的观察。
3.组织切片的染色：-首先进行碱性染色，即将切片浸泡在染色盘中的伊洛酮溶液中，伊洛酮是一种天然的染色物质，能够与细胞核结构中的DNA结合，使细胞核染色为暗蓝色。
-然后进行酸性染色，即将切片浸泡在染色盘中的苏木精溶液中，苏木精是一种带正电荷的染色物质，能够与细胞质结构中的负电荷部分结合，使细胞质染色为粉红色。
4.组织切片的脱水和封片：-将染色后的切片通过不同浓度的醇溶液进行脱水处理，使得切片从水状态逐渐转移到无水状态。
-将切片在醇溶液中固定一段时间，然后转移到透明的试剂（如苏木精和二甲苯混合溶液）中进行浸泡。
- 最后将切片取出，放在显微镜玻片上，滴入固定剂（如Canada Balsam）并加盖玻片，使切片固定在玻片上。
5.显微镜观察和分析：-使用显微镜观察染色后的组织切片，并通过不同增大倍数的镜头进行详细观察。
-根据观察到的细胞和组织结构，进行分析和研究，并将观察结果记录下来。
需要注意的是，HE染色是一种简单、快速且广泛应用的染色方法，但在不同类型的组织和细胞中可能会有不同的染色效果。
因此，在进行HE染色时，需要根据具体实验要求和样品的特点，进行相应的优化和调整。
he染色流程步骤
he染色流程步骤HE 染色啊，这可是病理实验中的一项重要技术呢！就好像是给组织细胞精心打扮一番，让它们能更好地展现在我们眼前。
首先得准备好切片，这就像是给模特准备好展示的舞台。
切片要切得薄而均匀，就像裁衣服一样，得有好手艺。
然后把切片放到烤片机上稍微烤一下，让它能稳稳地待在那儿，就像给它定个型。
接下来就是染色的关键步骤啦！先把切片放到苏木精溶液里泡一泡，这苏木精就像是神奇的魔法药水，能让细胞核变得蓝汪汪的，特别好看。
就好像给细胞核穿上了一件蓝色的漂亮衣服。
染完细胞核，就得让细胞质也美起来呀。
这时候就要用到伊红溶液啦，把切片放进去，细胞质就会染上那鲜艳的红色，哇，一下子就生动起来了，就像给细胞质化了个美美的妆。
染完色可还没完事儿呢！还得经过一系列的脱水、透明步骤。
就好像给化好妆的模特做最后的整理，让一切都更加完美。
脱水呢，就像是把多余的水分挤出去，让切片变得更清爽。
透明呢，则像是给切片罩上一层薄薄的面纱，让它更有朦胧美。
最后一步就是封片啦！把切片用盖玻片封起来，就像是给模特穿上了一件华丽的外套，保护好它。
你说这 HE 染色是不是很神奇呀？就这么一步步的，把那些原本我们肉眼很难看清的组织细胞变得清晰又漂亮。
它就像是一个小小的魔法，让我们能更好地了解身体内部的奥秘。
想想看，如果没有 HE 染色，我们怎么能那么清楚地看到细胞的结构和形态呢？怎么能对疾病做出准确的诊断呢？它可是病理诊断的重要手段之一呢！所以啊，一定要好好掌握 HE 染色的流程步骤，这可关系到我们对生命的探索和了解呢！可不能马虎哟！这就像是学一门手艺，得用心去学，才能学好。
你说是不是呢？你要是学会了这一手，那可就厉害了，感觉就像掌握了打开生命奥秘大门的钥匙呢！。
he染色吉姆萨染色试剂方法[精华]
![he染色吉姆萨染色试剂方法[精华]](https://img.taocdn.com/s3/m/414c5dc03086bceb19e8b8f67c1cfad6195fe9f1.png)
两种染色试剂和方法如下。
000000一、HE染色000000试剂：000000苏木素染液：苏木精1g；无水乙醇25mL；硫酸铝钾10g；蒸馏水350mL；碘酸钾0.1g；冰醋酸10mL。
A 液：用25mL 无水乙醇溶解1g苏木精，摇动即可溶解。
B 液：用350mL 蒸馏水溶解10g硫酸铝钾，摇动或振荡即可溶解。
把A 液和 B 液混合，加入碘酸钾摇动至颜色加深。
最后加入10mL冰醋酸，摇动颜色变为深葡萄酒红色。
染液配制当日即可应用于染色。
酸化液：醋酸20-35mL加蒸馏水至700mL。
000000伊红染液：储液：取1g伊红，溶于100mL 95%的乙醇，待溶解完全后加几滴冰醋酸至染液呈半透明状，避光保存备用。
工作液：取一定量的伊红储液，加入等量70%乙醇，此液即为伊红染液的工作液。
000000染色步骤：000000（1）细胞爬片放用PBS漂洗3次，每次5min，无水乙醇固定5min，风干。
000000（2）95%乙醇1min，75%乙醇1min，三蒸水1min。
000000( 3 ) 浸洗5 % 的醋酸液 ( 酸化液 ) 数秒。
000000( 4 ) 苏木精染液 3 - 5 m i n，胞核呈橙红色。
000000( 5 ) 自来水冲洗至颜色变蓝。
000000( 6) 盐酸乙醇液分化数秒，颜色再次返红。
000000(7) 自来水再次冲洗，返蓝。
000000( 8) 伊红染液5min，流水漂洗15min左右。
000000二、吉姆萨染色000000试剂：000000吉姆萨染液配制：取吉姆萨粉末1g溶于66ml甘油中研磨混匀，然后放置55-60℃水浴2h，冷却后加入66ml甲醇中混匀，过滤后棕瓶分装保存。
0000 00PBS甲醇液：PBS与甲醇一比一混合。
000000染色步骤：000000（1）细胞爬片使用PBS漂洗3次，每次5min。
000000（2）加PBS甲醇液静置2min，去掉PBS甲醇液。
000000（3）加甲醇固定10min，去掉甲醇，加入新无水甲醇漂洗去掉。
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细胞爬片HE染色SOP
一、原理
苏木素（Hematoxylin）－伊红（Eosin）染色法，简称HE染色法。
HE染色法采用两种染料即碱性染料苏木素和酸性染料伊红分别于细胞核和细胞质发生作用，使细胞的微细结构通过颜色而改变它的折光率，从而在光镜下能清晰地呈现出细胞图像。
该染色过程既有化学反应，又有物理作用参与。
从化学反应看，组织细胞内含有酸性物质和碱性物质，细胞的酸性物质与碱性染料的阳离子结合，而细胞核的碱性物质与酸性染料的阴离子结合，使其中酸性细胞核被碱性的苏木素染成蓝色，而碱性的胞浆被酸性染料伊红染成红色。
其结果胞核呈蓝色，胞浆呈红色。
从物理现象看，主要有吸附、吸收之说。
HE染色提供良好的核浆对比染色，是细胞化学染色最常用的一种方法。
二、实验用品
1、固定液：常用95％乙醇和冰丙酮
2、苏木精染液：称取苏木精粉0.5g，铵矾24g溶解于70ml蒸馏水中，然后
取NaIO 31g，水5ml，再加入甘油30ml和冰醋酸2ml，混合均匀，滤纸过滤，备用。
3、伊红染液：称取0.5g水溶性伊红染液，溶于100ml蒸馏水中。
4、稀盐酸乙醇溶液：用75%乙醇配制1％盐酸。
5、系列浓度的乙醇、二甲苯、中性树胶。
6、培养瓶、培养皿、眼科镊、盖玻片、载玻片、显微镜。
三、实验步骤
1、样品制备：对于贴壁生长细胞，胰酶消化，调整细胞浓度约1×105/ml，
滴加于盖玻片上（置于6孔板中），培养相应时间后，取出细胞爬片，用PBS洗涤3次。
2、样品固定：95％乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min。
3、染核：苏木素染液染色2－3min，自来水洗涤。
4、分色：镜下观察，若细胞核染色过深，用1％盐酸酒精溶液分色数秒，自
来水洗涤。
5、染胞质：浸入伊红染液染色1min，自来水洗涤。
6、吹干或自然晾干细胞爬片后，中性树胶封片。
若细胞用4％多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12-15min，伊红5min即可。