无特定病原体SPF实验猕猴培育关键技术研究与应用
实验动物简答题
实验动物简答题浙江省医学实验动物与动物实验培训考试简答题第一章医学实验动物学概论1、实验动物学的概念及其主要研究内容。
2、请简述科技部、卫生部实验动物的管理政策。
3、简述21世纪医学实验动物科学发展趋势。
第二章医学实验动物学标准4、医学实验动物标准包括哪几方面，请举例说明实验动物质量对实验的影响。
5、请叙述实验动物遗传学和微生物学的分类及其质量控制意义。
6、简述影响动物实验和屏障动物实验室的环境因素。
7、简述国际上实验动物规范化管理模式。
第三章常用实验动物特点及其在生物医学研究中的应用8、请举例说明常用的近交系大、小鼠和远交系动物。
9、举例说明常用实验动物在生命科学研究中的用途。
10、比较小型猪与人在结构和功能上的相似点，举例说明我国目前的小型猪品种及其应用价值。
11、简述一般情况下大型和小型尝试动物的环境豢养前提。
第四章人类疾病动物模型12、简述人类疾病动物模型的概念及优缺点。
13、简述遗传性和诱发型动物疾病模型的概念及优缺点。
14、举例说明医学研究中常用的自发性高血压、糖尿病、免疫缺陷型动物模型。
15、简述转基因动物的概念、基本原理和用途。
第五章实验动物的选择和应用16、简述实验动物选择的基本原则。
17、简述药物毒性试验时，选择实验动物的注意事项。
第六章医学课题动物尝试的设计及影响其效果的因素18、简述动物实验设计的基本原则。
19、简述干扰动物实验结果的动物、环境、技术因素。
第七章尝试动物福利和伦理学要求20、什么是动物福利？国际普遍认可的“满足动物需求的五项标准”是什么？21、尝试动物福利的内涵有哪些？简述3R准绳。
22、结合工作实践，说明在动物尝试过程中应如何善待尝试动物。
第八章医学动物尝试与生物安全23、举例说明实验动物中重要的人兽共患病及传染病。
24、什么是实验室生物安全？简述动物实验的安全防护内容。
25、简述如何进行动物实验废弃物的无害化处理。
第九章医学动物实验操作技术26、简述动物实验前的准备工作内容。
动物实验上岗培训单选题
生物安全柜为活病原微生物的动物实验设施; 动\植物确实存在或潜在危害的,该实验需在感 染性动物实验设施内进行 普通环境饲养普通级动物;屏障环境饲养清洁 级或SPF级动物;隔离环境饲养无菌动物 实验动物环境指标中,只有氨气浓度是动态检 测指标;屏障环境的空气洁净度指标为10000级 国标中，生产型和使用型屏障系统大小鼠温度 为20-26℃;相对湿度为40%-70%;换气次数为 10-20次/h;气流速度为0.1-0.2m/s;压强梯度 为20-50Pa 国标中，使用型屏障系统工作照度为150300lx;动物照度为15-20lx
我国已建立啮齿类动物的种子中心（上海和北京） 国家实验动物质量检测中心挂靠在中国医科院实 验动物所 GLP（良好实验室操作规范）是用于新药临床前安 全性评价的法规 《实验动物管理条例》规定，实验动物繁育和动 物实验不能在同一区域。
实验动物许可证的有效期为5年，生产许可证的申请 必须种子来源可靠，有健全的质量管理制度，环境 符合国家标准。许可证的发放向科技部门申请，由 科技部门组织专家评审，合格后发放许可证。包括 生产和使用许可证两种。 国家种子中心、实验动物质量检测机构的主要任务 （p82） 近交系：连续20代或20代以上近亲交配所培育而成 的品系。如BALB/C,C57BL/6J,DBA,C3H,A/He等（常 以F加数字表示近交代数）。 封闭群：以非近亲繁殖方式，不从外部引入新个体 的前提下至少连续繁殖4代以上。引种数目不少于25
饲料中脂肪有真脂肪（由脂肪酸和甘油组成）和 类脂肪（由脂肪酸和甘油及其他含氮物质组成） 饲料抽样数量为0.5Kg/次/批 维生素A维持上皮的形态与功能；维生素D参与钙 磷调节；维生素E与生殖泌乳有关 大小鼠饲料水分≤10%；豚鼠维持料蛋白≥17%， 繁殖料蛋白≥20%；兔维持饲料粗蛋白≥ 14%，繁 殖料粗蛋白≥ 17%；犬维持饲料粗蛋白 ≥ 20%，繁 殖料粗蛋白≥ 24%
实验动物学复习题答案(更新)
实验动物学复习题答案（完整版改）实验动物：指经人工培育，对其携带的微生物实行控制，遗传背景明确，来源清楚，用于科学研究、教学、生产、检定及其他科学实验的动物。
实验用动物：广义指一切用于科学实验的动物，也包括试验动物。
动物实验：为科研、教学、药物检定等目的，对实验动物进行物理、化学、生物等因素处理，观察其反应，获得实验数据，解决科研中问题的过程。
实验动物学：研究动物实验和实验动物的科学。
以实验动物为研究对象，专门研究实验动物的饲养繁殖及育种、实验动物的标准化、实验动物的质量监测、野生动物的实验动物化及其开发应用以及动物实验技术的科学。
实验动物环境：是指人工控制的, 供实验动物繁殖、生长的特定场所及有关条件, 即围绕实验动物所有事物的总和。
实验动物设施：界定实验动物生存空间、维持其所需的建筑物和设备等。
AEIR:生物科学研究四个基本条件：animal、equipment、information、reagent（试剂）根据对微生物、寄生虫的控制程度将实验动物划分为4个等级：普通级动物、清洁动物、无特定病原体动物、无菌动物。
普通级动物是微生物和寄生虫控制级别最低的按动物；要求不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病病原，以及人兽共患寄生虫。
清洁动物是根据我国国情而设立的等级动物，除普通级动物应排除的病原和寄生虫外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原和寄生虫。
无特定病原体动物通常被称为SPF动物，除清洁动物应排除的病原和寄生虫外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科学按干扰大的病原和寄生虫。
无菌动物指无可检出一切生命体的动物。
导致人兽共患病的主要病原体1、病毒—淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒、狂犬病病毒、猕猴疱疹病毒1型（B病毒）、汉坦病毒（流行性出血热病毒）。
2、细菌—沙门菌、布鲁杆菌、志贺菌、结核分歧杆菌、钩端螺旋体。
3、真菌—皮肤病原真菌。
4、寄生虫—弓形虫。
1988年, 原国家科委颁布了《实验动物管理条例》, 标志着我国实验动物工作走上了行政法规管理的轨道。
实验动物试题及答案
实验动物学试题及答案一、填空题1、实验动物学研究的对象实验动物、动物实验。
2、根据我国实际，实验动物被分为四级，分别是一级为普通动物、二级为清洁动物、三级为SPF动物、四级为无菌动物（包括悉生动物）。
国际上公认的标准实验动物是SPF 动物，我国公认的标准实验动物是清洁动物。
3、通常称近交系动物为品系，称封闭群动物为品种。
4、实验动物的年龄通常根据体重来判断。
5、裸鼠除全身无毛外，还有裸体和无胸腺，并随年龄增加皮肤变薄，头颈部皮肤皱褶，发育迟缓等特征。
6、药物筛选实验首选动物为小鼠；过敏实验首选动物为豚鼠；发热研究首选动物为家兔；实验外科学首选动物为犬；人类脊髓灰质炎等病的研究最理想的实验动物是非人灵长类动物；做反射弧分析实验常用实验动物是青蛙。
7、实验动物常用给药途径有经口给药、注射给药等。
二、名词解释1.实验动物：是指经人工饲养、对其携带的微生物、寄生虫实行控制，遗传背景明确或来源清楚的，用于科学研究、教学、生产、鉴定、及其他科学研究的动物。
2.近交系动物：是指至少经过20以上连续全同胞或亲子交配，品系所有个体都可追溯到其源于第20代或以后代鼠的一对共同祖先的动物群。
3.杂交优势：杂种一代具有较强的生命力，对疾病的抵抗力强，寿命较长，容易饲养，在很大程度上克服了近交衰退现象的优越性。
4.封闭群动物：不以近交形式进行交配，也不引入任何外来血缘，在封闭条件下交配繁殖，从而保持群体的一般遗传特性，又具有杂合性的一个实验动物种群。
我国制定的标准作如下定义：以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群，在不从其外部引入新个体的条件下，至少连续繁殖4代以上，称为一个封闭群，或叫远交群。
5.诱发性动物模型：是指使用物理、化学、生物等致病因素作用于动物，造成动物组织、器官或全身一定的损害，出现某些类似人类疾病的功能、代或形态性结构方面的病变，即人为地诱发动物产生类似人类疾病的动物模型。
三、问答题1.悉生动物和SPF动物有何区别？悉生动物又称已知菌动物，是指在隔离系统饲育的，经检测其体外仅有经人工有计划接种的已知微生物或寄生虫的动物。
实验动物质量控制1
（三）杂交一代动物旳特征及应用 1．遗传和表型上旳一致性 2．杂交优势 3．杂合旳遗传构成 4．作为某些疾病研究旳模型
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第二节 试验动物微生物与寄生虫学 质量控制
一、微生物和寄生虫感染旳危害性 1．影响试验成果 试验动物旳微生物和寄 生虫感染可不同程度干扰试验成果，从而 影响研究工作旳精确性和可靠性，甚至得 犯错误旳结论。隐性感染常造成动物生理 生化指标旳变化，使试验得不到应有旳成 果。或因试验处置，动物抵抗力下降，使 隐性感染显性化，造成疾病旳发生。
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2、无菌动物旳特点 形态学变化
1. 消化系统: 盲肠膨大，易发生盲肠扭转，造成破裂。 2. 循环系统：心脏变小。 3. 免疫系统：胸腺上皮细胞变大，胞浆泡状构造和溶酶体变小。
生理学变化 1. 免疫功能：免疫应答慢，过敏反应、对异体移植物旳排斥反应
以及本身免疫现象消失或减弱。对微生物感染非常敏感。 2. 生长率：豚鼠、兔生长率降低，大、小鼠变化不大。 3. 代谢：水分代谢周期延长，肠管对水旳吸收率低。 4. 营养：体内不能合成VitB、VitK。 5. 抗辐射能力：增强。 6. 寿命：长于一般动物。
悉生动物
Gnotobiotics animal GN
无特定病原体动物
Specific pathogen free animal SPF
清洁动物
Clean animal CL
一般动物
Conventional
喂养条件
隔离系统
Isolation system
隔离系统
Isolation system
屏障系统
解剖、脏器、肠内容物、粪便取样
体外寄生虫检测
检测 检测报告
体内寄生虫检测
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横竖科技股份公司 出口检疫(B病毒)标准
致病和对科学实验干扰大的病原的实验动物，简称无特定病原体动物或 SPF 动物。
版本：2016 版
（四）无菌级动物：无可检出的一切生命体的实验动物。简称无菌动物。 四、实验动物标准 按微生物学等级分类如下： a、普通级动物 b、清洁级动物 c、无特定病原体级动物 d、无菌级动物 五、检测标准和指标 （一）外观指标 实验动物应外观健康、无异常。 （二）病原菌指标 病原菌指标见表 1 （三）病毒指标 病毒指标见表 2 表 1 犬、猴病原菌检测项目
版本：2016 版
(三)取样、送检 1、应在每一生产繁殖单元的不同方位（例如：四角和中央）选取动物。 2、动物送检容器级别要求编号和标志，包装好，安全送达实验室，并附送检单，写明动 物品种品系、级别、数量和检测项目。 3、无特殊要求时，犬和猴的活体取样，可在生产繁殖单元进行。 （四）检测项目的分类 1、必须检测的项目,是指在进行实验动物质量评价时必须检测的项目。 2、必要时检测项目，是指从国外引进实验动物时、怀疑有本病流行时、申请实验动物生 产许可证和实验动物质量合格证时必须检测的项目。 九、结果判定 在检测的各个等级动物中，如有一只动物的一项指标不符合该等级标准要求，则判为不 符合该等级标准。 十、报告 根据检查结果，出具报告。
实验猕猴出口检疫操作标准流程 为了确保采购商的猕猴订单顺利完成，根据横竖科技公司猕猴检疫出口工作预案，生产 区需要 10 天的时间来完成超出订单数量 30%的猕猴准备，上笼后检疫观察过程需要 45 天的 程序，在 45 天的检疫期间完成相应猕猴报关报检出口和采购商需要的资料和证件。
实验猕猴出口检疫操作标准十大流程步骤分别是： 步骤一 完成采购商和供应商关于订单签订的前期工作：供应商调查、订单洽谈等相关文件签署。 步骤二 办理《允许进出口证明书》文件，提前至出运订单 60 天，分别向国家林业局、国家濒危办递 交办理 CITES 证件的相关材料：林业局和濒危办核发的相关文件、办证申请表、公司资质证 件、外贸合同等。 步骤三 根据采购商订单标准和超出订单 30%
实验动物学知识点总结
实验动物学一、选择：1、DBA小鼠：世界上第一个近交系小鼠，听到铃声大面积死亡。
2、小鼠房/单位实验间的湿度：40-70%。
3、皮肤烧伤等实验模型选用：小型猪。
4、KM小鼠（昆明小鼠）：封闭群小鼠。
5、豚鼠：青霉素敏感，给药后死亡；自身不能合成VitC，需补充；最早获得无菌动物实验模型的动物。
6、家兔：对多种细菌、病毒敏感，血清量多，常用来培育抗体；颈部减压神经独立行走；胸腔有纵膈胸膜，常用来作心、熊外科实验。
7、刺激性排卵的动物：家兔、猫。
8、消化道瘘的模型动物：犬。
9、常用的涂染化学药品：红色：0.5%中型红或品红溶液；黄色：3-5%苦味酸溶液或80-90%苦味酸酒精饱和溶液；咖啡色：2%硝酸银溶液；黑色：煤焦油酒精溶液。
10、继人类之后完成染色体基因组物理图谱的动物是：小鼠。
11、我国使用的实验猴，主要是猕猴属中的恒河猴。
12、毛色：遗传学分析的遗传标记和品系鉴定的依据之一。
13、裸小鼠：接受人类各种肿瘤细胞的植入。
14、豚鼠：结核病诊断病例研究的首选实验动物。
15、金黄地鼠：妊娠期最短的哺乳动物。
16、猫：脑神经电生理研究的极好动物。
17、洁净度：隔离环境100级，屏障环境1000级。
18、实验研究的基本条件(AEIR四要素)：实验动物（A）,设备(E)，信息(I)，和试剂（R）。
二、名词解释：1、实验动物科学：是关于实验动物标准化和动物实验规范化的学科。
2、实验动物：指以实验动物本身为对象，如何培养出标准化的实验动物。
指经人工培育或人工改造，对其携带的微生物和寄生虫进行控制。
遗传学背景明确或来源清楚，用于科学研究、教学、生物制品或药品生产与鉴定以及其他科学实验的动物，也称狭义的实验动物。
3、动物福利：是在动物的整个生命过程中动物保护的具体体现，其基本原则是保证动物的康乐，包括使动物身体健康、体质健壮，行为正常，无心理紧张、压抑或痛苦等。
4、3R运动：即动物实验的减少、替代和优化。
5、无特定病原体动物（SPF)：不携带所规定的人畜共患病和动物烈性传染病病原，且不携带主要潜在感染病原或条件致病菌及科学实验干扰大的病原的动物，饲养于屏障系统中。
实验动物学资料
填空或选择1.实验动物，目前公认，进行生命科学研究需要4个基本条件，即“AERI”，“A”即animal（实验动物），“E”即equipment（设备），“I”是information（信息），“R”是reagent（试剂）2.实验动物按遗传学分类，可将实验动物分为近交系，封闭群系（远交系）和杂交群3类。
3.我国国标对动物的分类：小鼠、大鼠：清洁级、SPF级、无菌级；家兔、豚鼠、地鼠：普通级、清洁级、SPF级、无菌级；犬、猴：普通级、SPF级（可能是问答）4.实验动物环境的分类：普通环境、屏障环境、隔离环境5.实验动物的分类：普通级动物、清洁级动物、无特定病原体级动物、无菌级动物、悉生级动物6.屏障环境指标：温度控制在20~26摄氏度，日温差小于等于4，相对湿度控制40%~70%，换气数控制在10~20次/小时，空气洁净度7级7.小鼠：①解剖学特点：尾长与体长相近；脊椎55-61个，肋骨12-14对，胸骨6块，下颌骨形态稳定，遗传监测的重要指标上颌骨；骨髓：红骨髓，无黄骨髓，终生造血；肝脏4叶；胰腺分散；左肺单叶，右肺分四叶；雌鼠为Y型双子宫；卵巢有系膜包绕，不与腹腔相通；乳腺发达，乳头5对、胸部3对、腹部1对、腹股沟1对；肠道短、盲肠不发达；淋巴系统发达，但无腭或咽部扁桃体，脾脏有明显的造血功能；皮肤无汗腺，靠尾巴散热。
②生理学特点：生长快、成熟早、繁殖力强；全年多发情，性周期明显【产后24小时发情，产后妊娠，边哺乳、边怀孕，可以提高产量；性周期分四个时间（动情前期、动情期、动情后期、动情间期，课本80页）机械刺激宫颈可产生假性妊娠，转基因或克隆动物常利用此特性】体温和水调节能力差。
③在生物医学研究中的应用：药物研究；肿瘤学研究（自发肿瘤、诱发性肿瘤、人癌细胞移植）；传染病学的研究；遗传学及遗传学疾病研究；生殖学研究；内分泌疾病的研究；老年病学研究（快速老化模型小鼠SAM）；免疫学研究；其它疾病研究（呼吸系统：小鼠是研究镇咳药的首选动物）。
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“无特定病原体（SPF）实验猕猴培育关键技术研究与应用”
公示内容
一、项目基本情况
项目名称：无特定病原体（SPF）实验猕猴培育关键技术研究与应用
完成单位：云南中科灵长类生物医学重点实验室；昆明亚灵生物科技有限公司主要完成人：王宏，陈智岗，李鹤龄，牛昱宇，司维，张龙，韦秋奖，宗发梁，覃刚民，蒋德兵
成果类型：拟申报云南省科技进步一等奖
二、项目简介
猕猴是重要的实验动物之一，在科学研究领域具有不可替代的重要作用。
随着生物科学技术特别是医药产业的发展，人们对实验研究、鉴定和测试结果的要求愈来愈高，实验结果应具有可靠性、准确性、重复性及可比性，而选择和应用标准的灵长类实验动物，是达到这一目的的前提和保障。
培育高标准的灵长类实验动物对认识疾病的本质，新药的安全性、有效性评价具有积极的重大作用。
通常的动物群中有许多病原体呈隐性感染，在一般条件下，微生物与宿主间能保持相对平衡，动物不显现症状。
一旦条件变化或动物在承受实验处理的影响下，这种平衡遭到破坏，隐性感染被激发，动物出现疾病的症状，这将严重地干扰实验的结果。
尤其在非短期的实验中，这种现象（包括动物的死亡）在时间上、经济上以及实验的准确性方面，将带来巨大的损失。
无特定病原体（SPF）动物将会极大地改善这种现象，因此，近十几年来，SPF动物已成为标准的实验动物，其使用量不断增加，并有逐步取代普通动物的趋势。
目前国内外使用的啮齿类动物绝大多数为SPF级，但由于灵长类动物的管理以及养殖方面存在一定的复杂性和高成本等原因，截止目前，国内能使用SPF实验猴还非常有限，因此，建立先进的、符合国际标准的SPF实验猕猴群，对生物医药的研究及生命科学的发展具有重要的意义。
本项目针对此现状，进行了长达10年的持续研发攻关，取得了如下成果：
1、揭示了SPF 猕猴种群建立过程中常见病原微生物（包括病毒、寄生虫和细菌）的流行病学特征。
通过连续多年对猕猴种群进行监测，明确了BV、SRV 和STLV-1、SIV四种病毒的抗体阳性率的变化规律，明确了SPF种群建立与新生幼猴四种病毒阳性率的相关性，提示了SPF 猕猴种群对生产SPF 幼猴的重要意义；对开放饲养环境下猕猴肠道寄生虫的大样本调查和肠道致病菌群的分离培养及鉴定，明确了结肠小袋纤毛虫和鞭毛虫等寄生虫流行分布并对肠道志贺菌的流行规律进行了详细报道。
2、明确了恒河猴和食蟹猴种群繁殖规律，详细报道了恒河猴和食蟹猴繁殖性能及血清生化、血常规等基础生物学数据，调查分析了猕猴常见疾病种类及发病特点，不仅为SPF猕猴的繁殖提供了数据参考，而且为开展猕猴相关的科研活动提供了基础数据。
3、创新集成了猕猴饲养管理、饲料配制、疾病检测和治疗、数据管理以及制定了SPF 级猕猴进出口检疫程序，为SPF猕猴的培育与应用提供了技术措施。
通过系统研究，本项目优化了猕猴的饲养管理程序，提高了猕猴生产效率；研制了一种膨化饲料作为猕猴的有效日粮，为猕猴健康繁育提供了保障；在国内外首次报道了猕猴膀胱结石、鳞状细胞癌及巨型胆囊等罕见疾病，丰富了灵长类疾病学内容；建立了幼猴人工护理程序；建立了猕猴剖宫产及术后护理程序；建立了猕猴结肠小袋纤毛虫和鞭毛虫的PCR检测方法；建立了志贺氏痢疾的检测程序并优化了治疗措施；有效建立了猕猴大叶性肺炎的诊断与防治体系；开发了数据档案管理系统，实现了猕猴养殖与应用管理的信息化和科学性，对猕猴的标准化养殖、基地规范化建设具有重要意义；已建立了一种SPF级猕猴进、出口检疫期的养殖方法，为SPF级实验猴的进、出口奠定了基础。
4、发明了非人灵长类的通用饲养装置及猕猴多功能转移笼，有效避免了研发期间动物病原微生物相互传播的风险，不仅满足了生产和科研实验的需求，还解决了动物转移易逃逸和笼内动物难控制的困难，提高了工作效率。
5、发明了猕猴肝损伤模型的制作方法，在国际上首次报道了酒精性肝损伤疾病模型，有效模拟了肝损伤疾病发生和发展的病程，解决了药物研发过程中缺乏猕猴肝损伤有效模型的问题，揭示了酒精性肝损伤的分子病理机制，为人类早期治疗肝损伤疾病提供了有效的动物模型。
三、获得知识产权及经济效益情况
通过本项目的研究，在国内外期刊上已发表研究论文20篇，其中SCI 论文4 篇；出版专著《猕猴繁殖生物学》一本；申请专利6 项，其中3 项获得授权；通过对本项目研究成果的应用，新增销售额5750万元，新增利润1308万元；已培养猕猴兽医技术人员31 人，2 人获得正高级职称晋升，1 人获得高级职称晋升，3 人获得云南省中青年学术和技术创新人才，1 人获得昆明市中青年学术和技术带头人。
四、项目曾获科技奖励情况
本项目部分内容获得2017年度昆明市科技进步三等奖。
五、候选人对项目的贡献
王宏，具体负责了本项目的实施，完成上述创新点1、2、3、4和5，是18篇文章的通讯作者，3项授权专利的第一发明人。
陈智岗，主要参与人，完成上述创新点1、2、3，参与发表了6篇文章。
李鹤龄，主要参与人，完成上述创新点1、2、3，参与发表了5篇文章。
牛昱宇，主要参与人，完成上述创新点4、5，参与发表了3篇文章及1项专利授权。
司维，主要参与人，完成上述创新点4、5，参与发表了3篇文章及1项专利授权。
张龙，主要参与人，完成上述创新点2、3，参与发表了2篇文章。
韦秋奖，主要参与人，完成上述创新点1、2、3，参与发表了3篇文章。
宗发梁，主要参与人，完成上述创新点1、2、3，参与发表了4篇文章。
覃刚民，主要参与人，完成上述创新点1、2、3。
蒋德兵，主要参与人，完成上述创新点1、2、3。
六、候选单位
云南中科灵长类生物医学重点实验室：是项目的承担和实施单位，全面负责了5个创新点的研究工作。
昆明亚灵生物科技有限公司：作为项目的推广应用单位，是3项专利的获得者，参与了1、2、3个创新点的研发。