附录4 常用的消毒灭菌操作方法
常用的消毒灭菌方法
常用的消毒灭菌方法本页仅作为文档封面，使用时可以删除This document is for reference only-rar21year.March2014年7月份手术室业务讲课稿常用的消毒灭菌方法讲课人：杨志婷一、液体化学消毒剂使用规范1 、戊二醛：光谱、高效。
对金属腐蚀性小，受有机物影响小。
2%。
范围：不耐热的医疗器械和精密仪器等。
方法：1)灭菌：浸泡法。
将清洗、晾干待灭菌处理的医疗器械及物品浸没于装有2%容器中，加盖。
10小时后，无菌操作取出，无菌水冲净，无菌擦干后使用。
2）消毒浸泡法，将清洗、晾干待灭菌处理的医疗器械及物品浸没于装有2%或1%增效戊二醛中，加盖，10-20分钟，取出后无菌水洗干并擦干。
注意事项：1）对手术刀片等碳钢制品有腐蚀性，使用前先加入%亚硝酸钠防锈。
2）加强浓度监测。
3)对皮肤黏膜有刺激性，应戴橡胶手套，防止进入眼内或吸入体内。
4）容器应加盖，放于通风良好处。
2、过氧乙酸：广谱、高效低毒对金属织物有腐蚀性，稳定性差。
16%-20%范围：耐腐蚀物品，环境及皮肤等的消毒与灭菌。
方法：浸泡、擦拭、喷洒。
1）浸泡：加盖。
对一般污染物品，用%（500）溶液浸泡。
对细菌芽孢用1%（1000毫克每升）浸泡5分钟。
灭菌时浸泡30分钟。
2）擦拭：对大物品或不能用浸泡法。
3）喷洒：对一般污染表面用%%（2000-4000）作用30-60分钟，对肝炎病毒和结核杆菌污染用%30-60分钟。
注意事项：1）贮存于通风阴凉处，用前测定有效浓度，原液低于12%禁用。
2）稀释液临用前配制。
3）配制时忌与碱或有机物相混合。
4）金属与织物侵泡后及时用清水冲洗干净。
3，过氧化氢高效消毒剂，广谱，高效，速效，无毒，对金属及织物有腐蚀性，受有机物影响大，稳定性好，稀释液不稳定。
范围：用于炳乙酸树脂制成的外科埋织物，隐形眼镜，不耐热的塑料制品，餐具，服装，饮水等消毒和口腔含漱，外科伤口清洗。
方法：1）配制：美军蒸馏水稀释。
消毒供应中心常用灭菌方法的操作流程
消毒供应中心常用灭菌方法的操作流程（一）小型预真空压力蒸汽灭菌器操作流程1.先检查供水、供电是否正常。
打开灭菌器电源开关，显示“PleasewaitDoorrelease"字样，提示等待5秒后，设备进入预备状态。
2.待灭菌的物品清洗、保养维护、打包后进行装载。
混合装载时由下到上的位置顺序是器械、纸塑袋和织物；物品之间尽量不要接触，也不要触及灭菌器内壁。
注意纸塑袋之间有良好的间隙，纸塑袋纸面向上侧放于专用的托盘。
3.向灭菌器容器方向轻推门，同时按下滑动门把手。
显示屏将显示"Doorclosed"字样，表示门已经关好。
4.根据需求选择灭菌程序Universal-program:温度134℃，压力 2.2bar （1bar=10'Pa），灭菌时间3.5分钟；适合各种类型的包装物品灭菌，尤其是器械或混合装载时（包装/未包装）。
Quick-program:温度134℃，压力2.2bar，灭菌时间3.5分钟；仅适合非包装器械的灭菌（织物不可），在急需使用器械的情况下使用。
Gentle-program:温度121℃，压力1.1bar，灭菌时间15分钟；适合各种类型的包装物品灭菌，尤其是大量的织物、不耐热的物品（塑料、橡胶）或混合装载时（包装/未包装）Disinfection:温度105℃，压力0.3bar，消毒时间8分钟；是利用物理性质，采用蒸汽压力消毒。
注意：此程序不是灭菌。
Bowie&DickTestProgram:温度134℃，压力2.2bar，灭菌时间3.5分钟；用于检查灭菌器运行状况（检查蒸汽穿透力测试）。
Vacuumtest:用于检查灭菌器冷启时，是否有泄漏。
5.运行程序：按下Start-Stop键一次，所选程序出现在显示屏上；再按一次Start键，则程序继续运行。
6.程序结束后，屏幕显示信息"Pleasewait/doorunlocking"。
微生物实验常用的灭菌、消毒方法及效果监测
微生物实验常用的灭菌、消毒方法及效果监测因为微生物广泛存在于环境中，从预防交错污染的角度动身，微生物试验必需遵循无菌操作的原则，采纳多种物理、化学或是生物的办法，确保全部的物品和工作环境符合用法要求。
常用以下术语表示杀灭微生物的程度。
消毒：杀灭或(和)清除致病微生物，使其数量削减到不再能引起人发病。
用于消毒的化学药品称为消毒剂。
灭菌：将全部微生物所有杀灭或(和)清除掉，包括细菌芽孢和非致病微生物。
灭菌比消毒更彻底。
无菌：不含活菌，是灭菌的结果。
防止细菌进入人体或其他物品的操作技术称为无菌操作。
(一)常用的灭菌、消毒办法常用的灭菌或消毒办法分为4类：热力灭菌法、化学消毒法、辐射法和过滤除菌法。
普通按照物品的种类和污染后的危害程度来挑选消毒、灭菌办法。
消毒首选物理办法，不能用物理办法消毒的方可选化学办法。
1.热力灭菌法高温对微生物具有显然的杀伤作用，这是因为热能可变性蛋白质、核酸及破坏细胞膜等。
热力灭菌法按照有无水蒸气的参加分为干热灭菌法和湿热灭菌法两种。
热力灭菌法的种类及用法范围详见表4-4。
表4-4 热力灭菌法的种类及用法范围 2.化学消毒法无数化学药物能够影响微生物的物理结构和生理活动，从而达到消毒的作用。
化学消毒剂普通都对人体组织有害，因此，只能外用或用于环境的消毒，常用化学消毒剂的种类、作用机理及用法范围见表4-5。
表4-5 化学消毒剂及用法范围 3.辐射法辐射法中紫外线杀菌最为常用。
紫外线的穿透能力很弱，简单被固形物汲取，不能透过一般玻璃，因此，它只适用于空气、水及物体表面的杀菌。
无菌室、超净工作台、生物平安柜内都装有紫外灯，用来举行空气消毒，消毒时光普通为30min。
应用紫外线杀菌时，必需防止紫外线对人体的挺直照耀，以免损害眼睛和灼伤皮肤。
4.过滤除菌法指将含菌的液体或气体通过一个称作细菌滤器的装置，使细菌受到机械的阻力而留在滤器或滤板上，从而达到除菌的目的。
此法常用于不宜加热灭菌的液体物质，如培养基添加剂、抗生素、血清等。
消毒及灭菌技术操作指南
《消毒及灭菌技术操作指南》消毒和灭菌可是个重要的事儿，搞不好就会出大问题。
下面就给大家说说消毒及灭菌技术的操作指南。
首先，咱得搞清楚啥是消毒，啥是灭菌。
消毒呢，就是把那些致病的微生物给弄死或者弄少点，让它们不能害人。
灭菌就更厉害啦，直接把所有的微生物都给灭得干干净净，一点活路都不给。
这就好比打架，消毒是把坏人打跑，灭菌就是把坏人全给灭了，连个渣都不剩。
一、消毒技术操作1. 物理消毒法（1）高温消毒这可是个老办法了，就像咱煮饺子似的，把东西放在高温里煮一煮，那些细菌啥的就受不了啦。
像餐具啊、奶瓶啊这些，可以放在开水里煮个几分钟，保证干净。
不过可别把自己的手给煮了啊，哈哈。
（2）紫外线消毒这玩意儿就像个小太阳，能发出一种神奇的光，把细菌给杀死。
像医院啊、实验室啊这些地方经常用紫外线消毒。
不过用的时候可得注意，别盯着紫外线看，不然眼睛会受伤的。
到时候变成了“熊猫眼”可别怪我没提醒你。
2. 化学消毒法（1）酒精消毒酒精这东西大家都熟悉吧，消毒效果那是杠杠的。
可以用酒精棉球擦一擦手啊、手机啊这些经常接触的东西。
但是可别用太多了，不然会变成“酒鬼”哦。
而且酒精易燃，可别在旁边玩火，不然一把火下去，你就变成“烤乳猪”了。
（2）含氯消毒剂消毒像 84 消毒液就是含氯消毒剂，能杀死很多细菌和病毒。
用的时候要按照说明书上的比例来稀释，不然浓度太高会把东西给烧坏的。
而且这玩意儿味道有点大，用的时候最好戴个口罩，不然会被熏得晕头转向。
二、灭菌技术操作1. 高压蒸汽灭菌这可是个厉害的家伙，把东西放在高压锅里，用高温高压的蒸汽来灭菌。
像医院的手术器械啊、培养基啊这些都要用高压蒸汽灭菌。
不过这玩意儿操作起来有点麻烦，得注意安全，别被蒸汽给烫伤了。
要是不小心被烫了，那可就成了“红烧猪蹄”啦。
2. 环氧乙烷灭菌这个方法一般用在一些不能用高温高压灭菌的东西上，比如塑料制品啊、电子设备啊这些。
但是环氧乙烷是有毒的，用的时候要特别小心，别让自己中毒了。
常用灭菌方法
常用灭菌方法 本通则介绍的常用灭菌方法，可用于制剂、原料、辅料、医疗器械、药品包装材料以及设备表面等物品的灭菌，从而使物品残存活微生物的概率下降至预期水平。
灭菌（sterilization）系指用适当的物理或化学手段将物品中活的微生物杀灭或除去的过程。
无菌物品是指物品中不含任何活的微生物，但对于任何一批无菌物品而言，绝对无菌既无法保证也无法用试验来证实。
一批物品的无菌特性只能通过物品中活微生物的概率来表述，即非无菌概率（Probability of a Nonsterile Unit，PNSU）或无菌保证水平（Sterility Assurance Level，SAL）。
已灭菌物品达到的非无菌概率可通过验证确定。
无菌物品的无菌保证不能依赖于最终产品的无菌检验，而是取决于生产过程中采用经过验证的灭菌工艺、严格的GMP管理和良好的无菌保证体系。
无菌药品的生产分为最终灭菌工艺和无菌生产工艺。
经最终灭菌工艺处理的无菌物品的非无菌概率不得高于10-6。
灭菌工艺控制涉及灭菌工艺的开发、灭菌工艺的验证和日常监控等阶段。
灭菌工艺的开发 灭菌工艺的开发应综合考虑被灭菌物品的性质、灭菌方法的有效性、灭菌后物品的完整性和稳定性，并兼顾经济性等因素。
只要物品允许，应尽可能选用最终灭菌工艺灭菌。
若物品不适合采用最终灭菌工艺，应选用无菌生产工艺达到无菌保证要求。
综合考虑灭菌工艺的灭菌能力和对灭菌物品的影响，灭菌工艺可以分为过度杀灭法、生物负载/生物指示剂法（也被称为残存概率法）和生物负载法。
对耐受的灭菌物品，通常选用过度杀灭法。
物品的无菌保证与灭菌工艺、灭菌前物品的生物负载相关。
灭菌工艺开发时，需要对物品污染的微生物种类、数目及其耐受性进行综合评估。
灭菌工艺的验证 灭菌工艺的验证是无菌保证的必要条件。
灭菌工艺经验证后，方可交付正式使用。
验证内容包括：①撰写验证方案及制定评估标准；②确认设备的设计与选型；③确认灭菌设备资料齐全、安装正确，并能正常运行；④确认灭菌设备、关键控制和记录系统能在规定的参数范围内正常运行；⑤采用被灭菌物品或模拟物品按预定灭菌程序进行重复试验，确认各关键工艺参数符合预定标准，确定经灭菌物品的无菌保证水平符合规定；⑥汇总并完善各种文件和记录，撰写验证报告。
科室中常用用物的消毒灭菌方法
一、概述在医疗机构的临床科室中，常用物品消毒灭菌是保障患者安全的重要环节。
科学、规范的消毒灭菌工作能有效预防医院感染，减少交叉感染的发生，保障医疗质量和患者安全。
本文将围绕科室中常用物品的消毒灭菌方法进行详细介绍，以期为临床工作者提供参考和借鉴。
二、常用消毒灭菌方法1. 高温高压灭菌高温高压灭菌是指利用高压蒸汽对物品进行灭菌处理的方法。
它是目前医疗机构最常用的物品灭菌方法之一。
此方法操作简便，灭菌效果好，可以有效杀灭细菌、真菌、病毒等病原体。
常见的高温高压灭菌设备有压力蒸汽灭菌器、高温高压灭菌器等。
2. 化学灭菌化学灭菌是利用化学药剂对物品进行消毒灭菌的方法。
常见的化学灭菌药剂有过氧化氢、乙醛等。
化学灭菌可以对一些不耐高温、高压的物品进行灭菌处理，灭菌效果可靠。
不过，需要严格控制浓度和时间，避免残留物对患者造成不良影响。
3. 紫外线消毒紫外线消毒是利用紫外线对物品进行杀菌消毒的方法。
它适用于对一些较为平整、不易受潮湿污染的物品进行消毒。
但紫外线只能杀灭空气和物体表面的病原体，对于物件内部的细菌和病毒杀灭效果较差。
4. 过滤灭菌过滤灭菌是将含有微生物的液体通过灭菌滤器进行过滤，以达到杀灭微生物的目的。
该方法适用于一些对高温、高压敏感的溶液或液体药剂等的消毒处理。
5. 辐射灭菌辐射灭菌是利用辐射对物品进行灭菌处理的方法，其常见的辐射源有γ射线、X射线等。
这种方法适用于对一些耐受辐射的医疗器械和物品进行灭菌处理。
三、消毒灭菌注意事项1. 选择合适的消毒灭菌方法在选择消毒灭菌方法时，应根据物品的特性、形态和材质进行选择，合理灭菌处理，确保消毒效果。
2. 严格控制消毒时间和浓度无论是高温高压灭菌、化学灭菌还是其他方法，都需要严格控制消毒时间和浓度，避免消毒不彻底或药剂残留。
3. 确保设备设施的运行状态对于高温高压灭菌设备、紫外线消毒设备等，需要定期进行维护和检测，确保设备设施的运行状态良好。
4. 对不同材质物品采用不同消毒方法不同材质的医疗器械和物品，应根据其耐受性差异，选择不同的消毒灭菌方法。
常用消毒灭菌法
消毒灭菌常规计划生育技术服务机构的清洁、消毒、灭菌是预防与控制医源性感染的重要措施之一。
常用的消毒灭菌方法有两大类：即物理消毒灭菌法和化学消毒灭菌法。
物理消毒灭菌法是利用物理因素，如热力、辐射、电离辐射、过滤等将微生物消除或杀灭的方法。
化学消毒灭菌法是采用各种化学物品来消除或杀灭微生物的方法，用于杀灭传播媒介上的微生物使其达到消毒或灭菌要求的化学制剂称为消毒剂。
下面将介绍几种常用的消毒灭菌方法。
一、压力蒸汽灭菌压力蒸汽灭菌是热力消毒灭菌中效果最好的一种方法，在临床上广泛应用，常用于耐高温、耐高压、耐潮湿物品的灭菌，如金属、玻璃、橡胶、搪瓷、敷料等的灭菌，不能用于凡士林等油类和滑石粉等粉剂的灭菌。
我们现阶段主要使用的是手提式压力蒸气灭菌器。
(一)灭菌原理微生物受到热力作用时，其蛋白质分子运动加速，互相撞击，致连接肽链的键断裂，使其分子由有规律的紧密结构，变为无秩序的散漫结构，大量的疏水基暴露于分子表面，并互相结合成为较大的聚合体而凝固沉淀即通过不可逆地破坏酶和结构蛋白，从而达到杀灭微生物的目的。
（二）高压锅的操作（现场操作）冷空气排除→灭菌→排汽→干燥→温度达到121℃，维持20-30分钟，即可达到灭菌目的。
（三）注意事项1、清洗干燥：器械或物品灭菌前必须清洗干净并擦干或晾干；2、物品包装合适，装载重量适当；3、灭菌包放置合理：各包之间留有空隙，布类物品放于金属、搪瓷类物品之上，盛装物品的容器如有孔应将容器打开，利于蒸气进入，消毒完毕，关闭容器孔；4、尽量排除灭菌器内的冷空气；5、控制加热速度，随时观察压力及温度；6、灭菌后处理：灭菌物品待干燥后才能取出，分类放置并做醒目标志；检查灭菌包装，若灭菌不彻底或有可疑污染如破损、湿包、有明显水渍等则不能作无菌包使用；7、注意安全操作：操作人员要经过专门训练，合格后才能上岗，严格遵守操作规程，定期对灭菌设备进行检查、维修。
二、紫外线消毒紫外线可杀灭多种微生物，包括杆菌、病毒、真菌、细菌繁殖体、芽胞等。
实验室常用消毒灭菌方法
实验室常用的器材一般包括玻璃器材、金属器械、橡胶制品及塑料制品等，每类器材的处理及消毒措施都有不同。
严格的消毒灭菌工作极为重要，直接影响着整个实验能否顺利进行。
目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。
1、湿热灭菌法湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
分为三种:（1）流通蒸气灭菌法：是指在常压条件下，采用100摄氏度流通蒸气加热杀灭微生物的方法，灭菌时间通常为30-60分钟。
该法适用于消毒以及不耐高热制剂的灭菌，但不能保证杀灭所有芽孢，是非可靠的灭菌方法。
（2）间歇蒸汽灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽加热，杀灭所有微生物，包括芽胞。
方法同流通蒸汽灭菌法，但要重复3次以上，每次间歇是将要灭菌的物体放到37℃孵箱过夜，目的是使芽胞发育成繁殖体。
若被灭菌物不耐100℃高温，可将温度降至75℃～80℃，加热延长为30～60分钟，并增加次数。
适用于不耐高热的含糖或牛奶的培养基。
（3）高压蒸汽灭菌法：103.4千帕蒸汽压温度达121.3℃，维持15-20分钟。
2、干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120ºC～150ºC的高热，并保持90～120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌，且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一，在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
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常用的消毒灭菌操作方法附录4
一、干热灭菌的操作方法
1.装入待灭菌的物品
将待灭菌的物品，如塞上棉塞的试管、锥形瓶、培养皿、吸管等玻璃仪器，用牛皮纸或干净的报纸包裹严密后，放人干热灭菌箱。
注意，物品不要摆得太挤，以免妨碍热空气流通。
同时，灭菌物品也不要与干热灭菌箱内壁的铁板接触，以防包装纸烤焦起火。
2.灭菌
关好干热灭菌箱的箱门，旋动恒温调节器，设定温度为160~170℃。
当温度升到150℃左右时，保持此温度3~4h。
由于干热灭菌温度较高，操作时要注意防止烫伤。
3.降温
关掉电源，自然降温。
4.开箱取物
等温度降到70℃以下后，打开箱门，取出灭菌物品。
注意温度未降到70℃以前，切勿打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。
二、高压灭菌的操作方法
1.首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架平齐。
2.放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。
注意不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。
锥形瓶与试管口不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包裹瓶口的纸而透入棉塞。
3.加盖，并将盖上的排气软管插人内层灭菌桶的排气槽内。
拧紧固定盖子的螺栓，注意要同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，不漏气。
4.加热灭菌锅，打开排气阀，使水沸腾，排除锅内的冷空气。
等冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐步上升。
当锅内压力升到所需压力时，控制热源，按照灭菌所要求的时间，维持压力。
5.到灭菌时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降到零时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。
如果提前打开排气阀，锅内压力突然下降，灭菌容器内的液体会冲出容器，造成污染。
三、紫外线灭菌的操作方法
紫外线只适用于表面灭菌和空气灭菌。
以面积为10 m2的普通小型接种室为例，在工作台上方距地面2m处悬挂1~2只30 W紫外灯，每次开灯照射30 min，就能达到室内空气灭菌的目的。
照射前，适量喷洒石炭酸等化学抑菌剂，可以加强灭菌效果。