红细胞衰亡与红细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻机制研究进展论文
细胞受到氧化应激后损伤的检测方法
细胞受到氧化应激后损伤的检测方法杨丽娟;游育红【摘要】正常生理状态下,机体活性氧的产生与消除处于一个动态平衡中.而在某些病理生理状态下,细胞内的自由基产物超出其自身的抗氧化能力时,便会产生氧化应激.活性氧基团引起的氧化损伤在许多慢性疾病中起着重要作用,如糖尿病、动脉粥样硬化等.近年来,一些动物、细胞实验及临床试验对细胞氧化损伤的方法展开了研究.对目前国内外常用的检测细胞氧化损伤的方法予以综述,以期为检测细胞氧化受损提供更好的参考.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2010(016)006【总页数】4页(P924-927)【关键词】细胞损伤;活性氧;氧化应激;检测【作者】杨丽娟;游育红【作者单位】福建医科大学药学院药理系,福州,350004;福建医科大学药学院药理系,福州,350004【正文语种】中文【中图分类】R392氧化应激是机体或细胞内以氧自由基为代表的氧化性物质的产生与消除失衡,或外源性氧化物质的过量摄入,导致氧化性物质在细胞内蓄积而引发氧化反应的状态[1]。
血管内皮细胞正常生理活动过程都有氧化性物质参与,主要为氧自由基,统称为活性氧(reactive oxygen species,ROS)。
ROS是需氧生物在自身的新陈代谢过程中,由于受到内外环境的刺激而在其机体内持续产生的活性产物。
ROS因含有未成对电子,所以极不稳定,容易与其邻近分子反应,并可诱发产生新的自由基。
一般情况下可以参与机体的物质代谢和信号转导,对细胞的正常代谢起着重要作用。
它的产生会受到体内抗氧化防御系统的调节,从而保持在平衡的健康状态。
当其产生过量或机体清除能力下降时,则对组织细胞产生不可逆损伤,氧化应激即发生,造成蛋白质损伤、脂质过氧化、DNA改变、酶失活等,发生包括癌症、心血管疾病、风湿性关节炎、感染等多种疾患[2]。
1.1 电子自旋共振法电子顺磁共振又称电子自旋共振(electron spin resonance,ESR),是研究含有未成对电子的物质和材料(包括自由基)的得力工具。
成熟红细胞的衰老凋亡机制
成熟红细胞的衰老凋亡机制成熟红细胞的寿命只有大约120天，随着时间的推移，它们会逐渐衰老，最终凋亡。
这个过程是由多个生物化学机制组成的。
一、细胞膜的变化成熟的红细胞细胞膜主要由磷脂分子组成。
衰老过程中，细胞膜的含水量减少，膜脂质排布不规则。
细胞膜磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇含量减少，而磷脂酰肌酸和磷脂酰甘油等含量增加。
这些变化使细胞膜的弹性和稳定性下降，细胞膜的生理活性也会降低。
二、氧化损伤红细胞处于氧气环境下，在此过程中极易受到氧化损伤。
在衰老过程中，红细胞LCAT （酯化酶）活性下降，细胞膜上的抗氧化酶GPx（谷胱甘肽过氧化物酶）和CAT（过氧化氢酶）活性也减弱，这些酶正常情况下可以清除细胞内部的氧自由基，但是随着红细胞的衰老和死亡，氧自由基的数量逐渐增加，导致红细胞内部的氧化状态加剧，最终造成细胞膜的损伤。
三、细胞膜蛋白的磷酸化红细胞衰老过程中，细胞膜磷酸化状态的改变也是一个重要的标志。
磷酸化可以使蛋白质分子结构发生变化，影响它们的功能。
一些研究表明，在细胞膜磷酸化状态改变的同时，细胞膜上一些蛋白质的构象也发生了变化。
这可能导致细胞膜蛋白从原来的造血细胞系列转化为破坏或凋亡细胞系列的标志性蛋白质。
四、微管和微丝的改变红细胞的外部骨架主要由微丝和微管组成。
这些蛋白质质地柔软，可以使细胞形态保持在一个固定的形状。
随着红细胞的衰老，微管和微丝的蛋白骨架内的蛋白质质量也随之降低，并且逐渐发生断裂。
这导致细胞形态的变扁和畸变，进而引起细胞膜和内部结构的变化和损坏。
五、细胞色素的氧化血红蛋白是一种重要的细胞色素，可以使红细胞以高效能的方式运输氧气到全身组织。
然而，衰老红细胞中的血红蛋白会逐渐发生氧化改变，形成自由基，使血红蛋白失去了它的真正功能。
氧化血红蛋白可以在细胞膜上形成氧化产物，进一步导致膜破坏和氧自由基形成，最终加速红细胞的衰老和凋亡。
综上所述，成熟红细胞的衰老凋亡是由多个生物化学机制共同作用引起的。
钙网蛋白免疫调节的分子机制研究
钙网蛋白免疫调节的分子机制研究吴薇;刘朝奇【摘要】钙网蛋白(Calreticulin,CRT)是46 kD大小的Ca2+结合内质网常驻蛋白,具有调节细胞内钙浓度、增强抗原递呈及抑制血管生成等多种生物学功能.从机体凋亡细胞的清除、抗原提呈、信号转导及与体液免疫多方面阐述近来钙网蛋白在机体免疫调节分子机制的最新进展,以期为钙网蛋白的致病机制及免疫干预奠定理论和试验基础.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2013(000)003【总页数】4页(P44-47)【关键词】钙网蛋白;免疫调节;分子机制;抗原提呈【作者】吴薇;刘朝奇【作者单位】三峡大学分子研究所,宜昌443002【正文语种】中文钙网蛋白（Calreticulin，CRT）是一种在结构和功能上高度保守的钙结合蛋白，主要存在于内质网（endoplasmic reticulum，ER）［1] 。
大量研究发现，钙网蛋白具有多种功能，参与抗原提呈、分子伴侣、抑制血管生成及细胞黏附等生物学作用。
因此，与多种疾病的发生发展有一定的相关性。
但钙网蛋白免疫调节作用分子机制的研究甚少，因此本研究从钙网蛋白在免疫调节增强及免疫逃避方面对其分子机制进行综述，并期望能为这一领域的科研工作者提供一些参考。
1 CRT的免疫增强活性1.1 CRT与吞噬作用机体对凋亡细胞的清除是正常的基本的生理功能，这个过程对于维持机体的内环境稳定具有重要意义。
目前，比较明确的凋亡细胞膜上的受体识别配体是磷脂酰丝氨酸（phosPhatidylserine，PS），PS的外翻表明细胞凋亡的发生。
近几年的研究发现，CRT也参与巨噬细胞对凋亡细胞的清除过程［2] ，CRT与人精子蛋白（ERP57）共转位至膜表面会引起免疫原性的细胞死亡［3] ，主要是通过囊泡相关膜蛋白（SNARE）依赖的胞吐作用转位至膜表面，这个过程可能与囊泡相关的SNARE蛋白（如囊泡相关膜蛋白1）和膜相关SNARE蛋白（如突触小体相关蛋白23/25）的相关［4] 。
流式细胞仪检测细胞凋亡方法（AnnexinV法）
流式细胞仪检测细胞凋亡方法（AnnexinV法）实验概要Annexin V是一种检测细胞凋亡的试剂，本实验介绍了一个用流式细胞仪检测细胞凋亡的方法(Annexin V 法)。
实验原理Annexin V是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。
它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。
在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸(PS)由质膜内侧翻向外侧。
Annexin V与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合。
由于在发生凋亡时，磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核的改变，因此，与DNA碎片检测比较，使用Annexin V可以更早地检测到凋亡细胞。
因为细胞坏死时也会发生磷脂酰丝氨酸外翻，所以Annexin V常与鉴定细胞死活的核酸染料(如PI或7-AAD)合并使用，来区分凋亡细胞(Annexin V /核酸染料-)与死亡细胞(Annexin V /核酸染料 )。
主要试剂1. PBS缓冲液：含0.1%NaN3，过滤后2-8°C保存。
2. Annexin V Binding Buffer缓冲液(Cat. No. 66121E)：浓度为10×，使用时，用稀释为1×浓度的应用液。
3. Annexin V试剂与核酸染料：Annexin V 核酸染料Annexin V-Biotin(Cat. No. 65872X) PI(Cat. No. 66211E)或Streptavidin-FITC(Cat. No. 13024D) 7-AAD(Cat. No. 34321X)Annexin V-FITC(Cat. No. 65874X) PI(Cat. No. 66211E) Annexin V-PE(Cat. No. 65875X) 7-AAD(Cat. No. 34321X)1. 一次性12×75mm Falcon试管。
细胞凋亡测定_实验报告
一、实验目的本实验旨在通过观察细胞凋亡的形态学特征和检测凋亡相关蛋白表达，了解细胞凋亡的发生机制，为细胞凋亡相关疾病的研究提供理论依据。
二、实验材料1. 细胞：人肝癌细胞株HepG2，人正常肝细胞株LO2。
2. 试剂：Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒，Caspase-3活性检测试剂盒，DNA ladder检测试剂盒，荧光显微镜，流式细胞仪等。
3. 仪器：CO2培养箱，细胞培养瓶，移液器，离心机，荧光显微镜，流式细胞仪等。
三、实验方法1. 细胞培养：将HepG2和LO2细胞分别接种于培养瓶中，置于CO2培养箱中培养，待细胞生长至对数生长期时进行实验。
2. 细胞凋亡检测：（1）Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测：将细胞悬液离心后弃去上清，加入Annexin V-FITC/PI染液，室温避光孵育15分钟，流式细胞仪检测细胞凋亡率。
（2）Caspase-3活性检测：按照试剂盒说明书操作，检测细胞中Caspase-3活性。
（3）DNA ladder检测：按照试剂盒说明书操作，进行琼脂糖凝胶电泳，观察DNA ladder现象。
3. 数据分析：采用SPSS软件进行统计学分析，比较两组细胞凋亡率、Caspase-3活性和DNA ladder的差异。
四、实验结果1. Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测：HepG2细胞凋亡率为（30.2±2.5）%，LO2细胞凋亡率为（2.1±1.2）%，两组间差异具有统计学意义（P<0.05）。
2. Caspase-3活性检测：HepG2细胞Caspase-3活性为（2.58±0.21）U/mg，LO2细胞Caspase-3活性为（0.83±0.14）U/mg，两组间差异具有统计学意义（P<0.05）。
3. DNA ladder检测：HepG2细胞出现明显的DNA ladder现象，LO2细胞无DNA ladder现象。
细胞凋亡检测方法及其研究进展
用 Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ Ｖ法对 此进 行检测 ［ ８ ］ 。Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ － Ｖ 是 一 种 分 子 量 为３ ５ ￣３ ６ ＫＤ 的 Ｃ ａ 抖 依 赖 性磷 脂结 合 蛋 白 ， 能与 Ｐ Ｓ高 亲 和 力 特 异 性 结 合 。将 Ａｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ － Ｖ用荧 光素如 Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ或生物素标记 ， 用标 记 后 的 Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ － Ｖ 作 为荧 光 探 针 ， 用 流式 细胞 仪 或 荧 光 显 微 镜 即可 检 测 ３ 磷 脂 酰 丝 氨 酸 的 外 翻 。碘 化 丙 啶 （ Ｐ Ｉ ） 是 一 种 核 酸 染料 ， 不能透过正 常活细胞 的细胞膜 ， 但 能 够 透 过 凋 亡 晚 期 的 细胞 以 及 死 细 胞 的 细 胞 膜 而 使 细 胞 核 染 色 ， 所 以将 Ａ ｎ — ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ － Ｖ与 Ｐ Ｉ 联合 使 用 ， 就 可 以将 凋 亡 早 期 细 胞 与 凋 亡 晚期 细 胞 以 及 死 细胞 区分 开 来 。细 胞 膜 磷 脂 酰 丝 氨 酸 外 翻 在 细 胞 凋 亡 的 早 期 出 现并 且 持 续 的时 间较 短 ， 所 以 可作 为 早 期 细 胞 凋 亡 的一 个 判 断 指 标 ＿ ９ 。 该 方 法 是 目前 检 测 细 胞 凋 亡 较 为 常 用 的 方法 ， 使 用 时 必 须 注 意 检 测 时 机 的选 择 。
细胞凋亡 （ Ａ ｐ ｏ ｐ ｔ ｏ ｓ ｉ ｓ ） 是生 理 性 的细 胞 死 亡 ， 是 由基 因控 制 的有 序 的细 胞 自主 性 死 亡 ， 其意义 在于去 除不需 要、 衰 老 和 异 正 常 细 胞 的 磷 脂 酰 丝 氨 酸位 于细 胞 膜 内 侧 ， 在 细胞 凋 亡 的
早期 ， 磷 脂 酰 丝 氨 酸 从 细 胞 膜 的 内侧 转 移 到 细 胞 膜 的 表 面 ， 可
安徽省皖中名校2022-2023学年高一下学期期中联考生物试卷(含答案)
安徽省皖中名校2022-2023学年高一下学期期中联考生物试卷学校：___________姓名：___________班级：___________考号：___________一、单选题1、酶指的是一类由活细胞产生的、对其底物具有高度特异性和高度催化效能的有机物。
下列相关叙述正确的是( )A.各种酶都能与双缩脲试剂发生紫色反应B.低温会破坏酶的空间结构，使其变性失活C.人的成熟红细胞内有多种酶，但不能更新D.一种酶只能催化一种底物发生化学反应2、如图表示环化一磷酸腺苷（cAMP)的结构式，该物质是由ATP脱去两个磷酸基团后环化而成的一种细胞内信号分子。
ATP的结构简式为A-P～P～P，其中“~”代表一种特殊的化学键。
下列叙述错误的是( )A.cAMP解环化后，可得到腺嘌呤核糖核苷酸B.cAMP和ATP中分别有1个和2个特殊的化学键C.ATP在形成cAMP的过程中，初期会释放能量D.cAMP与磷脂所含的元素都是C、H、O、N和P3、如图表示酵母菌细胞内发生的部分生化反应。
下列叙述错误的是( )A.图中①过程涉及的酶在细胞质基质中B.图中③过程需要氧气的参与C.图中②过程没有腺苷三磷酸的形成D.图中③过程均发生于线粒体内膜上4、某生物兴趣小组利用葡萄糖溶液培养酵母菌并探究其无氧呼吸的类型(如图)。
下列叙述错误的是( )A.葡萄糖溶液的浓度是该实验的无关变量B.甲瓶与乙瓶连接前，需静置一段适宜时间C.若乙瓶内呈现出黄色，则说明甲瓶中有CO2产生D.甲瓶与乙瓶连接前，酵母菌的呼吸产物中无水5、在室温25℃，不同光照强度下，某植物吸收CO2速率的变化曲线如图所示。
据图分析，甲~丁4个点对应的光照强度中，该植物叶肉细胞的光合速率大于呼吸速率的有( )A.一点B.两点C.三点D.四点6、如图表示某植物细胞的有丝分裂过程中染色体和核DNA的数量变化曲线图。
据图分析，下列有关该植物细胞的有丝分裂过程的叙述，错误的是( )A.图中a点和b点，细胞内核DNA数是相同的B.图中d点，细胞内正在进行DNA分子的复制C.图中b点和e点，细胞内染色体数目均为4nD.图中f点，细胞赤道板处的细胞板正逐渐扩大7、如图表示人的骨髓造血干细胞通过增殖和分化，形成多种细胞的示意图。
肥胖儿童少年血脂、红细胞膜脂及PS外翻的研究
运动人体科学 ・
肥胖 儿 童少 年血 脂 、 细 胞 膜脂 及 Ｐ 红 Ｓ外 翻 的研 究
赖 爱 萍
（ 浙江体 育职业技术学院 体 育系 ， 浙江 杭 州 ３ ０ １ ） １０ ２ 摘要 ： 目的 ： 通过对肥胖 儿童 少年血脂及红 细胞膜脂及磷 脂酰 丝氨 酸（ Ｓ 外翻 的研 究 ， 讨肥胖 对儿 童少年脂代谢 Ｐ） 探
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ｎｅｓｔｈｅｓｉａ ａｎｄ Ｏｒｇａｎ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，Ｚｕｎｙｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｚｕｎｙｉ ５６３０００，Ｃｈｉｎａ
ｆｍｉ
ｘｙ鼻Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ
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ｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ，Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ
Ｈｏｓｐｉｔａｌ
ｏｆＺｕｎｙｉ
Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｚｕｎｙｉ
５６３００３，Ｃｈｉｎｏ［Ｇｏｕ ＤＭ）
通信作者：苟大明，Ｅｍａｉｌ：ｇｄｍｚｙ＠ｙｅａｈ．ｎｅｔ
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｅｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３４３７８．２０１６．０５．０１８
【摘要】背景因成熟红细胞的死亡方式不同于有核细胞，故提出红细胞衰亡概念，描述红细胞的自发性程序性死亡。
目的了解红细胞最终衰亡是否主要通过红细胞膜磷脂酰丝氨酸（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｄｎｅ，Ｐｓ）外翻暴露，进而被吞噬细胞表面ＰＳ 受体识别、吞噬和降解清除实现。 内容综述红细胞衰亡的多种途径，以及这些途径是如何导致红细胞膜Ｐｓ外翻暴露，进 趋向 明确两者之间关系可对预防红细胞破坏提供新的思路和方法。
３红细胞衰亡与ＰＳ外翻
环氧化酶（ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ，ｃｏｘ）活化引起前列腺素 Ｅ２（ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｅ２，ＰＧＥ２）ｇｚ成和释放∞１，血小板活
化因子（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ，ＰＡＦ）形成及神经
观察大量红细胞衰亡增强的病理状态或疾病， 可发现其红细胞表面ＰＳ外翻增加。ＰＳ外翻导致红 细胞衰亡敏感性增加、寿命缩短、在血循环中被吞 噬降解，出现溶血或贫血。研究证实，存在棘形红细
而介导红细胞凋亡及被吞噬降解过程。
【关键词】红细胞衰亡；磷脂酰丝氨酸；凋亡
Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ
ｏｆ ｅｒｙｐｔｏｓｉｓ ａｎｄ ｐｈｏｓｐｈａｆｉｄｙｉｓｅｒｉｎｅ ｅｘｐｏｓｉｎｇ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅ
Ｌｉ Ｘｉａｏｙｉｎｇ，Ｇｏｕ Ｄａｒｎｉｎｇ
Ｇｕｉｚｈｏｕ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒｔａｒｙ Ａ
ｏｆ Ａ
ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｓｕｒ＿ｆ：ａｅｅ ａｎｄ ｔｈｅｎ ｗａｓ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ，ｅｎｇｕｌｆｅｄ ａｎｄ ｄｅｇｒａｄｅｄ ｂｙ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ．Ｃｏｎｔｅｎｔ ｔｈｅ ｗａｙｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ＰＳ
ｅｘｐｏｓｕｒｅ
Ｒｅｖｉｅｗ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ
ｅｒｙｐｔｏｓｉｓ ａｎｄ
理反应。
２
海贫血和蚕豆病等；镰细胞贫血和缺铁性贫血患者 红细胞膜ＰＳ外翻暴露增加，且其程度与寿命缩短 程度一致ｍ。８｜。Ｂｏｎｏｍｉｎｉ等¨列也在他们的研究中发 现，无论是透析前、正在进行血液或腹膜透析的尿 毒症患者，其红细胞膜Ｐｓ外翻增加。Ｂｉ等幢圳也证实 了红细胞膜Ｐｓ外翻增加是腹膜透析患者贫血发生的 危险因素；红细胞膜Ｐｓ外翻水平越高，越容易出现贫 血。此外，肥胖和糖尿病患者可因红细胞膜氧化应激
３．１
状态下，磷脂双分子层呈不对称分布，鞘磷脂
（ｓｐｈｉｎｇｏｍｙｅｌｉｎ， ＳＭ）
和磷脂酰胆碱
（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ，ＰＣ）主要分布在胞膜外层，ＰＳ 和磷脂酰乙醇胺（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ，ＰＥ）主要 在内层¨２｜。人类红细胞的膜不对称性由３种酶（混 杂酶、翻转酶和转出酶）共同控制，共同维持红细胞 膜的完整性，并保证其功能正常进行。其中，ＰＳ又 称丝氨酸磷脂、二酰甘油酰磷酸丝氨酸，通常仅位 于膜的内层，具有净负电荷，有助于膜的不对称性， 对细胞生长和存活有重要作用¨“。 众所周知，细胞膜Ｐｓ外翻暴露是一种凋亡信 号，可被吞噬细胞表面的Ｐｓ受体识别后吞噬降解凋 亡细胞。红细胞受到各种病理性刺激和损伤因素作 用后，可激活胞膜混杂酶，抑制翻转酶，在翻转酶作 用下使位于红细胞膜内层的ＰＳ外翻暴露到膜外层， 破坏膜不对称分布。膜磷脂分布不对称性的破坏不 仅为巨噬细胞提供了识别信号，在机体循环中被吞 噬消灭；而且改变了膜电位，使胞膜阴性增强¨…，增 加细胞之间相互作用。研究已经证实，ＰＳ外翻暴露 对红细胞相互之间黏附¨弘１６１，红细胞与血管内皮之 间黏附及血栓形成¨纠均有很重要的作用。由此可见 红细胞ＰＳ外翻暴露在其生命周期、病理生理调控
ｐｏｔｅｎｔｉａｌ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ
ｃｈａｎｎｅｌｓ，ＴＲＰＣ）６有关‘川。
此外，研究表明红细胞外Ｃ１一缺乏时，也可激活 ＴＲＰＣ６通道，引起胞内Ｃａ２＋浓度增加致ＰＳ外翻暴 露，只是此途径中ＴＲＰＣ６的激活与ＰＧＥ：有关。当红 细胞外Ｃｌ一缺乏和细胞萎缩时，活化ＣＯＸ和磷脂酶
万方数据
４６６
国匾盎醛堂皇复菱盘查！Ｑ！鱼生！旦箜≥！鲞筮』塑！！！』△！！！尘珏！！！生些业垫竖■堕』Ｌ丛尘
Ａ２引起ＰＧＥ：生成和释放，进而激活胞膜上ＴＲＰＣ６
激活膜混杂酶致Ｐｓ外翻，还是通过介导胞内Ｃａ２＋浓度
通道致Ｃａ２＋内流，随后活化混杂酶使ＰＳ外翻暴露。 而应用ＣＯＸ抑制剂和磷脂酶Ａ２抑制剂可抑制和 减弱此途径引起的ＰＳ外翻∞。。
３．２
增加激活膜混杂酶致ＰＳ外翻的机制还有待研究Ｈ１。虽 不同个体之间对ＰＫＣ介导致Ｐｓ外翻暴露的敏感性 不同，但已明确，ＰＫＣ在红细胞ＰＳ外翻暴露致衰亡 中起着重要作用。
外，在鼠ＰＡＦ受体基因敲除和应用ＰＡＦ受体拮抗
半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶，也是细胞凋亡过
程中的主要调控蛋白。在人类成熟红细胞中已发现 含有ｃａｓｐａｓｅ－３与ｃａｓｐａｓｅ－８，且研究表明ｃａｓｐａｓｅ－３ 在体外可酶解带３蛋白，引起红细胞衰亡；ｃａｓｐａｓｅ－３ 亦可直接调控促进受氧化应激损伤红细胞的ＰＳ暴
凋亡基因通过细胞内信号通路精确调控，其过程涉 及细胞形态学变化和生化改变；成熟红细胞无细胞 核和细胞器，故不存在有核细胞相对特有的凋亡特 征，如核固缩、凋亡小体形成和ＤＮＡ片段化等；但 其存有两者共同的凋亡特征，如细胞萎缩、胞膜空 泡化等，被称之为红细胞衰亡…。虽然有关红细胞衰 亡的研究较早，但其机制错综复杂导致衰亡具体通
膜空泡化、ＰＳ外翻暴露等具有凋亡特征的变化，随
难。本文就红细胞衰亡与红细胞膜磷脂酰丝氨酸 （ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅ，Ｐｓ）外翻机制的研究进行综述， 试揭示红细胞衰亡与其膜Ｐｓ外翻暴露之间关系， 为红细胞保护提供新的思路。
１红细胞衰亡及途径
后在血循环中，被单核．巨噬细胞识别、吞噬和降解
清除。
ａｎｄ ｅｒｙｔｈｒｏｅｙｔｅ
ｄｅｇｒａｔｉｏｎ．Ｔｒｅｎｄ
Ｔｏｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ＰＳ ｅｘｐｏｓｕｒｅ ａｎｄ ｅｒｙｐｔｏｓｉｓ ｍａｙ ｐｒｏｖｉｄｅ ｎｅｗ ｔｈｅｏｒｙ ａｎｄ ｍｅｔｈｏｄ ｔｏ ｅｒｙｐｔｏｓｉｓ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ．
红细胞是人体血液的主要有形成分和机体氧 万方数据
国匪盛醛堂皇复菱盘查垫！ｉ生！旦筮！！鲞筮』塑！坐』△！鲤！垦塑！！：丛业！Ｑ！！：ｙ！！：！！：盟！：§
红细胞直接暴露在血循环内，其衰亡的诱发因 素复杂多样Ｈ１。目前关于红细胞衰亡的机制研究相 当复杂，主要包括：细胞内Ｃａｚ＋浓度及活性改变ｂ
Ｊ，
及参与体内反应中有着重要作用。
胞性贫血的患者，其红细胞膜Ｐｓ外翻增加，如地中
酰胺产生…，蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎ
ｋｉｎａｓｅ
Ｃ，ＰＫＣ）激
活［８－９］、半胱天冬酶（ｃａｓｐａｓｅ）活化¨叫和能量耗竭随川 等，且各种通路并非单独作用，而是相互联系促进， 共同作用于红细胞衰亡”。。由此可见，红细胞衰亡受 到多种途径的控制；且这些途径的最终通路似乎主 要集中在红细胞膜Ｐｓ外翻暴露，进而被吞噬细胞 表面存在的ＰＳ受体识别、吞噬和降解清除。通过这 种方式，机体清除受损红细胞而不释放细胞内血红 蛋白，避免引起炎症反应和次级损伤，符合正常生
露。２ ６｜，并抑制翻转酶活性，增强巨噬细胞吞噬，引起 红细胞衰亡。 ３．５其他因素
溶血磷脂酸不仅是生物膜的组成成分，还是一 种细胞间的磷脂信使，可以激活Ｇ蛋白耦联受体，产 生广泛的生物学效应；研究观察到溶血磷脂酸可诱 导红细胞ＰＳ外翻暴露旧１，并同时诱导红细胞聚集粘 附，其机制可能是通过激活ＰＫＣ和增强Ｃａ“内摄介
Ｃａ２＋介导途径 红细胞受到渗透休克和氧化应激时，可使对细
胞容积和氧化敏感的一种非选择性阳离子通道激
活，引起Ｃａ２＋内流，致胞内Ｃａ２＋浓度增加及活性增
强。这不仅可活化胞膜混杂酶，使ＰＳ外翻暴露；同
时可激活Ｃａｚ＋依赖的半胱氨酸内肽酶钙蛋白酶，降
解细胞骨架蛋白，促进细胞空泡化。此外，Ｃａ２＋敏感 性Ｋ＋通道也可因胞内Ｃａ２＋浓度增加被活化，致氯化 钾外流和胞膜超极化，进而胞质内水外渗，引起细 胞萎缩。目前，研究证明这种非选择性阳离子通道 可能与瞬时受体电位通道（ｔｒａｎｓｉｅｎｔ
路难以确定，这对预防和减轻红细胞破坏有一定困
先于正常衰老程序而启动自杀陛死亡程序，即红细
胞衰亡旧。。２００５年，Ｌａｎｇ等旧。首次提出红细胞衰亡 这一概念，用来描述红细胞的程序化自杀性死亡：当 红细胞受到一系列内／＃ｂ环境因素损害（诸如渗透性 休克、氧化应激、能量耗竭、高温和大量小分子物质 作用）时，便可诱发启动此程序，出现细胞萎缩、细胞
【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ｅｒｙｐｔｏｓｉｓ；Ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅ；Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ
细胞凋亡是有核细胞死亡的主要方式之一，由
供的主要执行者，其生成和衰亡的调控与机体所需 程度及血液运氧能力相适应。当红细胞出现体积缩 小、变形性下降、胞膜自身抗原产生和分子丢失等衰 老特征，可在血液循环中被单核一巨噬细胞清除，结 束生命周期。此过程为正常衰老的程序性死亡。然 而，当正常成熟红细胞受到病理性刺激和损害时，可
垦区鏖醛堂皇复菱盘查！Ｑ！§生§旦筮≥！鲞筮§翅！皿』△！！§尘Ｂ！！坚：丛型垫！鱼：Ｙ！！：！！ｚ型！：』
・综述・
红细胞衰亡与红细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻机制研究进展
李晓英萄大明
５６３０００，遵义医学院，贵州省麻醉与器官保护基础研究重点实验室（李晓英）；５６３００３，遵义医学院附属医院 麻醉科（萄大明）