第三章 药物的杂质检查

第三章药物的杂质检查§3-1 药物的杂质与限量一、药物的杂质与纯度1、杂质：指药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。

2、药物的纯度：指药物的纯净程度。

它反映了药物质量的优劣。

3、化学试剂与药物纯度（1）化学试剂：不考虑杂质的生理作用，其杂质限量只是从可能引起的化学变化对使用的影响来限定的，对试剂的使用范围和使用目的加以规定，它不考虑杂质对生物体的生理作用及毒副作用。

（2）药物纯度：主要从用药安全、有效和对药物稳定性等方面考虑。

化学试剂是不能来代替药品使用的。

共同点：杂质<规定限量二、药物杂质的来源（一）生产过程中引入的杂质1、原料或辅料及试剂不纯或未反应完全、反应的中间体与反应副产物在精制时未能完全除去而引入杂质。

2、药物在制成制剂的过程中，也能产生新的杂质。

3、在药物生产过程中，所用的试剂、溶剂、还原剂等可能会残留在产品中而成为存在杂质。

4、生产过程中，由于使用的金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具，都可能使产品中引入砷盐，以及铅、铁、铜等金属杂质。

5、无效或低效异构体或晶型。

6、天然植物提取，常含结构、性质相近的物质，难以完全分离除去。

（二）贮藏过程中引入的杂质1、保管不善或贮存时间过长2、包装不当三、药物杂质的分类1、按来源分（1）一般杂质：也称为信号杂质。

是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质。

（2）特殊杂质：是指在特定药物的生产和贮藏过程中引入的杂质，也常称为有关物质。

2、按毒性分（1）毒性杂质：重金属、砷盐（2）信号杂质：一般无毒，但其含量的多少可反映出药物的纯度情况。

3、按化学类别和特性分（1）无机杂质（2）有机杂质（3）残留杂质四、杂质的限量1、杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量。

用百分之几或百万分之几表示。

2、杂质限量的控制方法（1）限量检查法：通常不要求测定其准确含量，只需检查杂质是否超过限量。

①对照法：指取一定量的被检杂质标准溶液和一定量供试品溶液，在相同条件下处理，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过限量。

%100%100⨯⨯=⨯=供试品量标准溶液的体积标准溶液的浓度杂质限量供试品量杂质最大允许量杂质限量 或%100⨯⨯=SV C L 注意：采用该法应注意平行原则，即供试溶液和对照溶液应在完全相同的条件下反应，如加入的试剂、反应的温度、放置的时间等均应相同，这样检查结果才有可比性。

②灵敏度法：在供试品溶液中加入一定量的试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现，从而判断供试品中所含杂质是否符合限量规定。

③比较法：指取供试品一定量依法检查，测定特定待检杂质的参数（如吸光度）与规定的限量比较，不得更大。

（2）对杂质进行定量测定[例1]茶苯海明中氯化物的检查：取本品0.30g 置200ml 量瓶中，加水50ml 、氨试液3ml 与10%硝酸铵溶液6ml ，置水浴上加热5分钟，加硝酸银试液25ml ，摇匀，再置水浴上加热15分钟，并时时振摇，放冷，用水稀释至刻度，摇匀，放置15分钟，滤过，取续滤液25ml ，置50ml 纳氏比色管中，加稀硝酸10ml ，用水稀释成50ml ，摇匀，在暗处放置5分钟，依法检查，与标准氯化钠溶液（10μg Cl/ml ）1.5ml 制成的对照液比较，不得更浓。

求氯化物的限量。

解：%04.0%1002002530.05.11010%1006=⨯⨯⨯⨯=⨯=-S CV L [例2]谷氨酸钠中重金属的检查：取本品1.0g ，加水23ml 溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml ，依法检查，与标准铅溶液（10μg Pb/ml ）所呈颜色相比较，不得更深。

已知重金属限量为百万分之十，求算应取标准铅溶液（V ）多少毫升。

解：ml C LS V 0.110100.11010%10066=⨯⨯⨯=⨯=--§3-2 杂质的检查方法（自学）一、杂质的研究规范（一）有机杂质在药品质量标准中的项目名称1、以杂质的化学名称作为名称2、以某类杂质的总称作为名称3、以检测方法作为项目名称（二）杂质检查项目的确定杂质检查项目的确定要有针对性。

（三）杂质限度的确定杂质限量的确定要合理，在确保用药安全有效的前提下，应考虑到生产的可行性及批与批之间的正常波动，还要考虑药品本身的稳定性。

杂质限度的制订应考虑的因素：（1）杂质及含一定限量杂质的药品的毒理学研究结果。

（2）给药途径。

（3）每日剂量。

（4）治疗周期。

（5）给药人群。

（6）杂质药理学可能的研究结果。

（7）原料药的来源。

（8）在保证安全有效的前提下，药品生产企业对生产高质量药品所需成本和消费者对药品价格的承受力。

（四）杂质检查方法的选择与验证药物中杂质的检测方法包括化学法、光谱法、色谱法等，因药物结构及杂质的不同采用不同的检测方法。

有机杂质的检测方法多采用色谱法，特别是高效液相色谱法。

用于杂质检查的分析方法要求专属灵敏。

二、杂质的常用检查方法（一）化学方法1、显色反应检查法2、沉淀反应检查法3、生成气体的检查法4、滴定法（二）色谱方法1、薄层色谱法⎪⎪⎩⎪⎪⎨⎧）对照药物法（法溶液自身稀释对照并用）杂质对照品与供试品（对照法）供试品溶液自身稀释（）杂质对照品法（4321 2、高效液相色谱法⎪⎪⎩⎪⎪⎨⎧）面积归一化法（分自身对照法）不加校正因子的主成（自身对照法）加校正因子的主成分（法））外标法（杂质对照品（4321 3、气相色谱法4、毛细管电泳法（三）光谱方法光谱检查法是依据药物和药物中的杂质对光选择吸收性质差异进行的。

1、可见-紫外分光光度法2、红外分光光度法3、原子吸收风光光度法（四）其他方法1、热分解法⎪⎪⎪⎩⎪⎪⎪⎨⎧⎩⎨⎧药物的纯度测定多晶型及其转变的表征）热分析法应用（）差示扫描热分析法（）差热分析法（）热重分析法（4321 2、酸碱度检查法⎪⎩⎪⎨⎧测定法）（）指示液法（）酸碱滴定法（pH 3213、物理性状检查法§3-3 药物中一般杂质的检查（重要）一、氯化物检查法（一）原理药物中的微量氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应，生成氯化银胶体微粒而显白色浑浊，与一定量的标准氯化钠溶液在相同条件下产生的氯化银浑浊程度进行比较，判定供试品中氯化物是否符合限量规定。

↓→++-AgCl Ag Cl（二）方法除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml （溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10ml ；溶液如不澄清，应滤过（滤纸事先用含有硝酸的水洗净其上的氯化物）；置50ml 纳氏比色管中，加水使成约40ml ，摇匀，即得供试液。

另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液（10μg Cl/ml ），置50ml 纳氏比色管中，加稀硝酸10ml ，加水使成40ml ，摇匀，即得对照溶液。

于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0ml ，用水稀释至50ml ，摇匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较，即得。

（三）测定条件1、标准氯化钠溶液：10μg Cl/ml ，50ml 供试溶液中含50—80μg 的氯离子，所显浑浊梯度明显，相当于标准氯化钠溶液5—8ml 。

2、反应需在硝酸酸性条件下进行，且以50ml 供试溶液中含稀硝酸10ml 为宜。

（1）加硝酸可加速氯化银浑浊的形成。

（2）产生较好的乳浊。

（3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。

3、稀释到40ml 以后再加硝酸银试液的目的（1）使产生的氯化银浑浊均匀。

（2）加入硝酸银过早，由于氯化物浓度过大而产生氯化银沉淀而影响比浊。

4、试剂：硝酸银5、避光、暗处放置5分钟后比浊（氯化银见光易分解）6、比浊方法：同置于黑色背景上，自上而下观察。

7、务必遵循平行操作原则。

（四）注意事项1、不澄清：用含硝酸的水洗净滤纸中的氯化物后过滤。

2、若供试品有色，需经处理后方可检查（1）内消色法（倍量法）（2）外消色法：向供试品溶液中加入某种试剂，使溶液颜色褪去后再依法检查。

[例]高锰酸钾中氯离子检查：加入适量乙醇，使眼色消失后再检查。

二、硫酸盐检查法（一）原理药物中微量的硫酸盐在稀盐酸酸性条件下与氯化钡反应，生成硫酸钡微粒显白色浑浊，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下产生硫酸钡浑浊程度进行比较，判定供试品硫酸盐是否符合限量规定。

↓→+-+4242BaSO SO Ba（二）方法取供试品，加水溶解成约40ml ，置50ml 纳氏比色管加稀盐酸2ml ，摇匀即得供试溶液；另取各药品项下规定量的标准硫酸钾溶液（100μg SO 42-/ml ），置于50ml 纳氏比色管中，加水使成约40ml ，加稀盐酸2ml ，摇匀即得对照溶液；于供试溶液与对照溶液中分别加入25%氯化钡溶液5ml ，用水稀释成50ml ，摇匀，放置10分钟，比浊。

（三）讨论1、标准硫酸钾溶液0.1mg/ml ，50ml 溶液中含0.1—0.5mg 的所显浑浊梯度明显，相当于标准硫酸钾溶液1—5滴。

2、加盐酸，可防止碳酸钡或磷酸钡等沉淀生成。

溶液的酸度以50ml 中含有稀盐酸2ml 为宜（溶液的pH 约为1）。

酸度增加，灵敏度下降。

3、氯化钡溶液的最佳浓度为25%，加入氯化钡试液后，应立即充分摇匀，防止局部过浓而影响产生浑浊的程度。

（四）供试品处理1、不澄清：先加盐酸使成酸性的水洗净滤纸中的硫酸盐，再过滤。

2、有色供试品：处理方法同氯化物。

（内消色法，即倍量法）三、铁盐检查法（一）原理铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸盐作用生成红色可溶性的硫氰酸铁配离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。

--+→+363])([6SCN Fe SCN Fe（二）方法除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml ，置于50ml 纳氏比色管中，加稀盐酸4ml ，与过硫酸铵50mg ，加水稀释至约35ml 后，加30%硫氰酸铵溶液3ml ，再加水适量使成50ml ，如显色，立即与各药品项下规定量的标准铁溶液（10μg Fe/ml ）按相同方法制成的对照溶液比较。

（三）讨论1、标准铁溶液的配制用硫酸铁铵]12)([2244O H SO FeNH ∙配制标准铁溶液，并加入硫酸防止铁盐水解，使易于保存。

标准铁溶液每1ml 相当于10μg 的铁离子。

2、铁离子适宜浓度目视：50ml 溶液中含10—50μg 的铁离子。

仪器：50ml 溶液中含5—90μg 的铁离子。

3、加入盐酸的作用与加入量（1）防止三价铁离子水解。

（2）加入量以50ml ，加稀盐酸4ml 为宜。

4、加入过量NH 4SCN 的作用（1）增加生成的配离子的稳定性，提高反应灵敏度。

（2）消除氯化物等其他在酸性溶液中能与铁盐生成配位化合物的物质所引起的干扰。