酵母双杂交系统及应用
酵母双杂技术的原理和应用
酵母双杂技术的原理和应用一、酵母双杂技术的原理酵母双杂技术是一种重要的基因工程技术，其原理主要包括以下几个方面：1.酵母双杂技术的基本原理：酵母双杂技术基于酵母细胞中的两种杂交酵母菌株，一种包含目标酵母蛋白的报告基因，另一种包含潜在的酵母互补DNA库。
通过把这两个酵母菌株共同培养在含有特定酵母蛋白诱导剂的培养基中，使得目标酵母蛋白和潜在互补DNA库中的DNA相互作用，从而筛选出与目标蛋白相互作用的DNA序列。
2.双杂交酵母菌株的构建：首先需要构建含有目标酵母蛋白的报告基因表达酵母菌株，该菌株会在酵母细胞中表达目标蛋白。
同时，还需要构建潜在酵母互补DNA库，该库中含有大量酵母基因组DNA片段的克隆。
3.酵母菌株的培养和筛选：将目标蛋白报告基因酵母菌株和酵母互补DNA库菌株共同培养在含有诱导剂的培养基中，诱导目标蛋白和潜在互补DNA库中的DNA发生相互作用。
然后利用适当的筛选方法，如抗生素抗性筛选或含有荧光素底物的筛选，筛选出与目标蛋白相互作用的克隆。
二、酵母双杂技术的应用酵母双杂技术广泛应用于生物医药、生物学研究等领域，具有多个重要的应用方面：1.蛋白相互作用的研究：通过酵母双杂技术，可以快速筛选出与目标蛋白相互作用的DNA序列，从而深入研究蛋白相互作用的机制和功能。
这对于揭示生物体内复杂蛋白相互作用网络、研究疾病相关蛋白相互作用具有重要意义。
2.新药靶点的发现：通过酵母双杂技术，可以筛选出与药物分子相互作用的蛋白，从而为新药靶点的发现提供候选蛋白。
这对于药物研发和临床治疗具有重要意义。
3.基因功能研究：通过酵母双杂技术，可以筛选出与目标基因相互作用的蛋白，从而推断目标基因的功能。
这有助于揭示基因的调控机制和功能。
4.疾病相关基因的筛选：通过酵母双杂技术，可以筛选出与疾病相关的基因，从而对疾病的发生机制和治疗提供有价值的信息。
5.基因治疗的研究：通过酵母双杂技术，可以筛选出与治疗目标相关的蛋白或基因，从而为基因治疗的研究提供候选靶点或治疗策略。
酵母双杂交的原理和应用
酵母双杂交的原理和应用前言酵母双杂交技术是一种常用的分子生物学实验方法，用于研究蛋白质间相互作用。
本文将介绍酵母双杂交的原理和应用，并详细说明相关实验步骤和注意事项。
一、酵母双杂交原理酵母双杂交利用酵母细胞中的转录因子来检测两个蛋白质是否发生相互作用。
该技术包括两个主要步骤：酵母杂交库的构建和蛋白质相互作用的检测。
1.酵母杂交库的构建–首先，需要构建一个酵母细胞库，其中包含目标蛋白的编码序列，以及与之它相互作用的蛋白编码序列。
–这些蛋白编码序列被插入一个特殊的酵母表达载体中，该载体包含一个转录因子启动子和一个可变启动子。
当目标蛋白与与之相互作用的蛋白结合时，转录因子被激活，并启动报告基因的表达。
2.蛋白质相互作用的检测–将酵母杂交库与一个可能与目标蛋白相互作用的蛋白质编码序列进行杂交。
–利用筛选或选择的方法，检测是否存在转录因子的激活，从而判断蛋白质是否发生相互作用。
二、酵母双杂交的应用酵母双杂交技术在生物学研究中有广泛的应用，主要用于以下方面：1.蛋白质相互作用的筛选–酵母双杂交可以用于大规模筛选蛋白质间的相互作用。
通过构建酵母杂交库，并与目标蛋白进行杂交，可以鉴定潜在的相互作用蛋白，从而探索蛋白质间的相互作用网络。
2.功能区域的鉴定–通过酵母双杂交，可以鉴定特定的蛋白质功能区域。
例如，在研究某个转录因子的结构和功能时，可以利用酵母双杂交技术识别其与其他蛋白质相互作用的功能区域。
3.药物靶点的鉴定–酵母双杂交可以用于鉴定药物的靶点。
通过与已知药物相互作用的酵母杂交库进行筛选，可以发现与特定药物相互作用的蛋白质，进而确定药物的作用机制和潜在靶点。
4.疾病相关基因的鉴定–酵母双杂交还可以用于鉴定疾病相关基因。
通过与疾病相关蛋白相互作用的酵母杂交库进行筛选，可以发现与疾病发生发展相关的基因，从而揭示疾病的发病机制。
三、酵母双杂交实验步骤酵母双杂交实验包括以下步骤：1.构建酵母杂交库：–从样品中提取RNA或DNA片段；–将片段克隆到酵母表达载体中；–将载体转化至酵母细胞中。
酵母双杂交系统原理的应用
酵母双杂交系统原理的应用1. 什么是酵母双杂交系统酵母双杂交系统是一种常用的方法，用于检测蛋白质之间的相互作用。
这个系统利用酵母细胞中的转录因子和报告基因来实现。
当两个蛋白质相互作用时，可以触发报告基因的表达，从而显示出它们之间的相互作用。
2. 酵母双杂交系统的原理酵母双杂交系统的原理主要基于透明质酸选择活化子（activation domain）和DNA 结合结构域（DNA-binding domain）相互作用。
这种相互作用会激活基因的表达，从而触发报告基因的产生。
酵母细胞中通常包含两个重要的部分：转录因子DNA 结合结构域（DBD）和活化因子 DNA 结合结构域（AD）。
•转录因子 DNA 结合结构域（DBD）：该结构域能够识别和结合目标DNA序列，从而调控基因的转录。
•活化因子 DNA 结合结构域（AD）：该结构域能够激活特定的报告基因的表达。
当两个蛋白质相互作用时，将目标蛋白质的DBD域与AD域融合到一个融合蛋白中。
当这个融合蛋白与另一个蛋白质结合时，就会形成一个激活结构，从而使报告基因得以表达。
3. 酵母双杂交系统的应用酵母双杂交系统在生物学研究中应用广泛。
以下列举了一些常见的应用领域：3.1. 蛋白质-蛋白质相互作用的研究利用酵母双杂交系统，研究人员可以快速筛选并确认蛋白质与蛋白质之间的相互作用关系。
通过构建大规模的蛋白质库，可以鉴定出蛋白质与蛋白质之间的相互作用网络。
这有助于理解蛋白质相互作用对于细胞的功能和调控的作用。
3.2. 蛋白质-小分子相互作用的筛选酵母双杂交系统也可以用于筛选蛋白质与小分子之间的相互作用。
研究人员可以将小分子与AD结构域融合，并与目标蛋白质库进行酵母双杂交筛选。
这有助于发现新的药物靶点，并加速新药的开发过程。
3.3. 酵母基因组互作网络的构建通过酵母双杂交系统研究蛋白质与蛋白质之间的相互作用，可以构建酵母基因组互作网络。
这个网络可以用来预测蛋白质功能、发现新的互作关系，并帮助研究人员理解细胞的调控机制。
酵母双杂交的原理及其应用
酵母双杂交的原理及其应用1. 引言酵母双杂交是一种常用的分子生物学技术，可以用于研究蛋白质相互作用、识别蛋白质结构域、筛选靶蛋白等。
本文将介绍酵母双杂交的原理及其在科研和药物研发领域的应用。
2. 酵母双杂交的原理酵母双杂交利用酵母细胞中的转录激活因子（TF）和DNA结合域（DBD）的相互作用来探测蛋白质的相互作用。
该技术主要包括两个重要组成部分：诱饵（bait）与猎物（prey）。
2.1 诱饵（bait）诱饵通常是感兴趣蛋白质的DNA结合域（DBD），可以通过基因工程方法将其与转录激活因子（TF）融合，并构建到酵母细胞中。
2.2 猎物（prey）猎物是待测蛋白质，可以将其与激活域融合，并构建到酵母细胞中。
2.3 相互作用检测当诱饵与猎物相互作用时，其融合蛋白质能够形成转录激活复合物。
该复合物能够通过激活报告基因（如LacZ或荧光蛋白）的表达来检测相互作用的发生。
3. 酵母双杂交的应用酵母双杂交技术在科研和药物研发领域有广泛的应用。
3.1 蛋白质相互作用的研究酵母双杂交技术可以用于筛选和验证蛋白质相互作用的目标。
通过构建不同的诱饵和猎物，可以识别和验证蛋白质相互作用的蛋白质。
3.2 靶蛋白筛选酵母双杂交技术可以用于筛选潜在的靶向蛋白质。
通过将蛋白质库（library）与诱饵进行组合，可以筛选出与诱饵相互作用的猎物，进而识别潜在的靶向蛋白质。
3.3 药物研发酵母双杂交技术可以用于药物研发的初步筛选。
通过将化合物库与诱饵进行组合，可以筛选出与诱饵相互作用的化合物，进而确定潜在的药物候选物。
3.4 蛋白质结构域识别酵母双杂交技术可以用于识别蛋白质的结构域。
通过将蛋白质的不同结构域与诱饵进行组合，可以确定某个结构域的相互作用蛋白质。
4. 结论酵母双杂交是一种有效的蛋白质相互作用研究方法，广泛应用于科研和药物研发领域。
通过酵母双杂交技术，可以识别蛋白质相互作用、筛选靶蛋白等，为蛋白质相关研究和药物研发提供了有力的工具。
酵母双杂交系统及其应用
酵母双杂交系统及其应用Yeast Two-hybrid System and Its Application1. 酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的生物学特性（1）单细胞真核生物尽管酵母细胞比较简单，但它们具有所有真核生物细胞的主要特征，如含有一个独立的细胞核、多条线性染色质包装成染色体、细胞质包含了全部的细胞器和细胞骨架结果（如肌动蛋白纤维）。
（2）与其它真核生物相比，它们的基因组较小，基因数目也较少；1996 年已完成酵母全基因组测序（1.5 x 10 7 bp ），是第一个被测序的真核生物。
大约有6000个基因。
目前已经建立了一个6000 个菌株的文库，每一个菌株中只删除了一个基因。
其中5000 多株在单倍体状态时能够存活，表明大多数酵母基因时非必需的。
（3）易于培养和操作,可以在实验室快速繁殖在指数生长期每90 分钟繁殖一代，从单个细胞可以繁殖称克隆群体。
（4）单倍体和双倍体的存在使酿酒酵母便于进行遗传分析酿酒酵母可以以单倍体状态和双倍体状态生长。
单倍体和双倍体之间的转换是通过交配和孢子形成来实现的。
有两种单倍体细胞类型，分别为a 型和α型。
在一起生长时，这些细胞因交配而形成a/ α双倍体细胞。
在营养匮乏时，a/ α双倍体发生减数分裂，产生一个子囊的结构，每个子囊含有4 个单倍体孢子（两个a－孢子和两个α－孢子）。
但当生长条件改善时，这些孢子可以出芽并以单倍体细胞的形式生长或交配而重新形成双倍体。
一个酵母细胞可同时兼容几种不同质粒bud，芽, 蓓蕾starvation ，饥饿, 饿死ascus，n.［微生物］子囊meiosis，n.减数分裂, 成熟分裂haploid，n.［生物］单倍体, 仅有一组染色体的细胞adj.单一的diploid ，adj.双重的, 倍数的, 双倍的n.倍数染色体ascospore，n.［植］囊孢子rupture，v.破裂, 裂开, 断绝（关系等）, 割裂。
酵母双杂交的原理及其在分子生物学研究中的应用。
酵母双杂交的原理及其在分子生物学研究中的应用。
酵母双杂交是一种重要的分子生物学技术，可用于研究蛋白质相互作用、酵母遗传学以及药物筛选等领域。
本文将分为两个部分，首先介绍酵母双杂交的原理和方法，然后探讨其在分子生物学研究中的应用。
一、酵母双杂交的原理和方法酵母双杂交技术是通过构建一个人工的酵母表型来研究蛋白质间相互作用的技术。
其基本原理是利用转录因子的激活域和DNA结合域分离为两半，并将这两半与待测蛋白结合，从而使转录因子重组并激活报告基因的表达。
具体而言，酵母双杂交实验需要构建三个关键的DNA重组元件：酵母表达载体、效应报告基因和测试蛋白质。
1.1 酵母表达载体：酵母表达载体是一个质粒，其中包含两个重要的部分，即酵母选择性培养基选择基因和转录因子的激活域和DNA结合域。
1.2 效应报告的基因：效应报告基因可用于检测蛋白质相互作用的程度。
一般选择具有报告基因（如lacZ、GFP）的启动子和结构基因的基因组片段。
1.3 测试蛋白质：待测蛋白质需要与转录因子的激活域和DNA结合域相互作用。
测试蛋白可以来自多种来源，如细菌、动物或植物。
在酵母双杂交实验中，测试蛋白质片段被融合到转录因子激活域的N端，而其他可能相互作用的蛋白质片段被融合到DNA结合域的C端。
当这两个蛋白质结合后，转录因子就会再组装成一个功能完整的转录因子，从而激活效应报告基因的表达。
可以通过测定报告基因的表达水平来推测蛋白质之间的相互作用程度。
二、酵母双杂交在分子生物学研究中的应用2.1 研究蛋白质相互作用：酵母双杂交是研究蛋白质-蛋白质相互作用的重要工具。
通过构建不同蛋白质的基因库，可以筛选出与待测蛋白质相互作用的蛋白质，进而揭示细胞内蛋白质网络的结构和功能。
2.2 酵母遗传学研究：酵母双杂交还可以用于酵母遗传学的研究。
通过构建与酵母突变株相互作用的蛋白质基因库，可以筛选出与突变株互补的基因，从而揭示酵母基因功能和调控网络。
2.3 药物筛选：酵母双杂交技术可以应用于药物筛选，特别是针对蛋白质相互作用靶点的药物开发。
酵母双杂交技术
酵母双杂交常规技术一．双杂交系统原理及应用范围蛋白质之间的互作是很多反应机制分子水平的核心动作，如DNA合成、转录激活、蛋白质翻译、蛋白质定位和信号转导等所有的的反应的完成都涉及到蛋白质复合体的作用。
而随着酵母双杂系统的成熟和完善，其在蛋白质互作研究中的应用越来越广泛。
酵母双杂交系统是基于转录因子的典型结构特征所建立的，它利用了酵母的转录因子GAL4基因产物，该蛋白拥有两个典型的转录因子结构域DNA结合结构域（BD）与转录激活结构域（AD）。
前者结合GAL1启动子区的DNA序列，后者则激活转录（Fields and Song，1989）。
Fields和Song分别构建了含有含有编码GAL4 DNA结合结构域（GAL4BD）和GAL4转录激活结构（GAL4AD）序列的载体。
将我们所要研究的目的基因分别装载到这两个质粒载体中，两个结构域序列则分别与基因的ORF进行融合。
当转入相应酵母菌株后，若在酵母内表达的不同蛋白发生互作，则将使GAL4-BD和GAL4-AD相互靠近结合，再进一步与上游激活序列结合，激活相应报告基因（report gene）的表达。
特点与优点酵母双杂交系统的最主要的应用是快速、直接分析已知蛋白之间的相互作用及分离新的与已知蛋白作用的配体及其编码基因。
酵母双杂交系统检测蛋白之间的相互作用具有以下优点：（1）作用信号是在融合基因表达后，在细胞内重建转录因子的作用而给出的，省去了纯化蛋白质的繁琐步骤。
（2）检测在活细胞内进行，可以在一定程度上代表细胞内的真实情况。
（3）检测的结果可以是基因表达产物的积累效应，因而可检测存在于蛋白质之间的微弱的或暂时的相互作用。
（4）酵母双杂交系统可采用不同组织、器官、细胞类型和分化时期材料构建cDNA文库，能分析细胞浆、细胞核及膜结合蛋白等多种不同亚细胞部位及功能的蛋白。
局限性和存在的问题酵母双杂交系统是分析蛋白-蛋白间相互作用的有效和快速的方法，有多方面的应用，但仍存在一些局限性。
酵母双杂交的原理及其应用
酵母双杂交的原理及其应用
酵母双杂交是一种常用的蛋白质相互作用研究技术，通过构建酵母中的两个蛋白质相互作用所需要的分子间的结合，结合情况可以检测相互作用的程度或强度。
酵母双杂交的原理是基于兰伯特-贝尔特微分方程（Lambert-Beer-Bouguer Law），该方程描述了光强与溶液中物质的浓度之间的关系。
在双杂交中，一对目标蛋白质分别与两个不同的报告蛋白质（通常是启动子与其相应的转录激活因子）结合，形成一个蛋白质复合物。
当这两个蛋白质相互作用时，可以观察到报告蛋白质转录水平的上升。
酵母双杂交的应用广泛，可以用于以下方面：
1. 识别蛋白质-蛋白质相互作用：通过构建大规模的蛋白质相互作用图谱，可以帮助研究人员理解细胞内蛋白质相互作用网络的组织和功能。
2. 确定蛋白质结构和功能：通过和其他蛋白质的相互作用，可以获得相关蛋白质的结构和功能信息。
3. 寻找药物靶点：酵母双杂交可以用于筛选潜在的药物靶点，从而帮助药物研发。
4. 研究疾病机制：通过了解蛋白质之间的相互作用，可以揭示疾病的发生机制，
为疾病的治疗提供新的思路和方法。
总的来说，酵母双杂交技术是一种有效的方法，可以用于研究蛋白质相互作用和功能，对于生命科学研究具有重要的意义。
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因表达与否，就可以很容易地判断出 X 和 Y 之间是否存在相互作 许多蛋白间的相互作用依赖于翻译后加工如糖基化、二硫找 这些反应在核内无法进行，另外在酵母中大量表达融合蛋白有可能
到与 X 相互作用的蛋白的 DNA 序列。
会影响目的蛋白的修饰和折叠，尤其是在研究异源蛋白相互作用时，
1 酵母双杂交系统的原理
母表达时发挥了转录激活作用；两个相互作用的蛋白质在原宿主内
酵母双杂交系统由 Fields 和 Song[12]等于 1989 年首先在研究真核 不在同一种组织或细胞内表达，或者是在发育的不同时期、同一种
基因转录调控中建立，此系统是在酿酒酵母体内分析蛋白质间的相互 细胞的不同区域表达，利用此系统分析把这些在生理状态下是不可
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作 者 简 介 ：岳世召（1987-），男，河北宁晋人，天津大学管理与经济学部，硕士 研究生，研究方向为工程管理，农村经济。
国内的许多学者对农村劳动力的迁移进行了研究，成果颇丰。 苗瑞卿、戎建、郑淑华对托达罗模型作了修正意见，重新建立了劳动 力转移模型，分析影响劳动力转移速度和数量的因素，论证了户籍 制度的改革和农村劳动力人力资本的提高是促进农村劳动力转移 的最主要途径[2]。陈欣欣、黄祖辉研究了劳动者年龄、文化程度和所 在地域对就地迁移意愿的影响，分析了影响就地转移劳动力迁移的 有利因素和不利因素[3]。李勋来、李国平从农村劳动力“转移能力”的 视角分析了影响劳动力转移的因素，应用经济计量方法对各因素进 行了定量测度，指出提高农民收入、增加农村人力资本存量、消除制 度因素的阻滞作用、扩大对第三产业的投资是加快农村劳动力转移 的主要着力点[4]。杨琦、曾祥旭通过 Logit 回归模型分析影响农村劳 动力非农就业的因素，表明男性、家庭总人数、外面有务工关系对非
称为 DB）和转录激活结构域（transcription-activation domain，简称为 有时会把两个原本无直接相互作用的蛋白拉到一起，从而激活报告
AD），前者负责识别 DNA 上的特异序列，并使转录激活结构域定位 基因的表达。针对这些缺陷，可以通过做严格的对照试验排除假阳
于所调节的基因的上游，后者与转录复合体的其他成分作用，启动所 性，应对诱饵和靶蛋白分别作单独激活报告基因的鉴定，也可以采
DOI:10.14018/13-1085/n.2011.23.006
Value Engineering
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酵母双杂交系统及应用
Yeast Two-hybrid System and Application
张开慧 Zhang Kaihui
（宝鸡职业技术学院，宝鸡 721013） （Baoji College of Engineering Technology，Baoji 721013，China）
转录因子功能是在融合基因表达后，在细胞内重新组建转录因子之 应给予高度重视的一个问题，在双杂交系统筛库过程中转化 BD-X
后发挥作用的，不需要分离纯化蛋白质，这就避免了在提纯蛋白过 载体和 AD-Y 载体时可以依次转化，也可以共转化，这两种方法相
程中可能引起蛋白变性，因此保持了蛋白的生物活性，能更真实地 比之下共转化更具有优势，首先它比较节省时间，工作量也没有依
2000 年到 2009 年间的统计数据进行了实证分析。结果表明，务农和进城打工的收入差距、进城打工收入与城镇居民收入之间的差距和城镇失业
率这三个宏观层面的因素是影响农村劳动力向城市迁移的主要因素。
Abstract: This paper makes an analysis of the influential factors on the migration of rural labor force to urban area from both micro and macro
中 图 分 类 号 ：C913
文 献 标 识 码 ：A
文 章 编 号 ：1006-4311（2011）23-0322-02
0 引言 据统计，2009 年我国的城镇人口为 6.22 亿，只占到人口总数的 46.59%，而乡村人口则为 7.13 亿，占到了人口总数的 53.41%[1]。虽 然我国的城镇化率在不断提高，但是如果比照发达工业化国家 5% 农村人口的标准，我国仍然有将近 6.5 亿的乡村人口需要转移到城 镇中去。同年，我国城镇居民人均可支配收入达到了农村居民人均 纯收入的 3.33 倍，这种巨大的城乡收入差距也促使着农村剩余劳 动力向城镇的转移。可见，加快农村劳动力向城市的转移，既是我国 劳动力就业演化的一般趋势，也是缩小城乡收入差距的关键所在。
摘 要 ：通过对蛋白质间相互作用的研究可以更好地理解生命的本质，而酵母双杂交系统是体内分析蛋白质间相互作用的一种遗传学方法，
本文对此系统的原理、优点、局限性ct: Through research on protein interactions we can better understand the essence of life, and yeast two -hybrid system in vivo analysis of
调节基因的转录，这两个结构域结构上相互独立但功能上又相互依 用双筛选系统以减少假阳性的发生[1]。
赖，一个完整的转录因子必须同时含有这两个结构域，否则将无法
3.2 假阴性现象 假阴性是指两个蛋白本应发生相互作用，但报
完成转录激活功能。酵母双杂交是将 BD 的核酸序列与诱饵蛋白 X 告基因不表达或表达程度非常低以至于检测不出来。原因是有些融
双杂交系统可采用不同组织器官细胞类型和分化时期材料构建 白质，利用酵母的有性生殖即酵母接合型的引用可以更有效地提高
— —— —— —— —— —— —— —— —— —— —— ——
双杂交的转化效率。
作 者 简 介 ：张开慧（1982-），女，河北张家口人，助教，硕士，主要从事高职生 物教学与研究。
和 Y 之间存在相互作用，那么与他们分别融合的 BD 和 AD 在空间 质的相互作用是定位于细胞核内，这就造成此系统对所有蛋白质并
上就能充分接近，呈现出完整的转录因子活性并激活相应报告基因 非都适用，对于核外蛋白就不能用此系统分析相互作用，因为它们的
的表达，而单独的 BD 和 AD 均不能激活报告基因。通过检测报告基 相互作用不是发生在核内，如果用此系统就会出现假阴性结果；同时
作用。真核生物转录调控过程的认识为酵母双杂交系统的建立奠定了 能碰到一起的蛋白拉到一起进行相互作用而导致假阳性结果的出
基础，其理论依据为典型的真核生长转录因子，如 GAL4、GCN4 等都 现；某些蛋白表面含有的多种蛋白质低亲和力区域，也会导致报告
含有两个可分离的结构域：DNA 结合结构域（DNA-binding domain，简 基因的表达，产生假阳性结果；酵母细胞内还存在其他因素的影响，
细胞内研究蛋白质间的相互作用，并且还能检测到蛋白质间微弱的 相互作用的情况下，报告基因被激活，假阳性发生频率较高，归纳起
相互作用，无需对蛋白质进行纯化，因此自从该技术建立以后，得到 来有以下几个原因：某些蛋白质本身具有转录激活功能如转录因
了迅速广泛的应用。
子，就无需 BD 和 AD 相互作用就能激活报告基因表达或者是在酵
随着分子生物学的发展，人们对生命的研究逐渐从基因组时代 细胞作为报道株，具有直接进行选择的标记基因，易于转化、便于回
转到后基因组时代。蛋白质间相互作用的研究是后基因组时代的重 收扩增质粒，同时酵母的内源性蛋白不易同来源于哺乳动物的蛋白
要组成部分，对蛋白质相互作用的认识可以更好地理解生命的本 结合等特点和优点。
岳世召 Yue Shizhao
（天津大学管理与经济学部，天津 300072） （School of Management，Tianjin University，Tianjin 300072，China）
摘要： 文中从宏观和微观两个层面对农村劳动力向城市迁移的影响因素进行了分析，在此基础上建了多元线性回归的计量模型，并利用
4 酵母双杂交系统的应用 酵母双杂交系统产生以来，主要应用在以下几方面：可用来寻
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价值工程
农村劳动力向城市迁移的影响因素分析
Analysis of the Influential Factors on the Migration of Rural Labor Force to Urban Area
2 酵母双杂交系统的特点和优点
它们的正确折叠和功能有赖于其他非酵母蛋白的辅助，因此不能正
酵母双杂交系统与其它研究蛋白质间相互作用的方法相比其 确修饰和折叠的蛋白质也会导致假阴性结果的出现。
主要表现在[5,14]：①发现和研究在活细胞体内的蛋白质间的相互作用，
3.3 -X 融合表达载体，X 往往是已知蛋白，将 合蛋白的表达对细胞会产生毒性，这时应该选择敏感性低的菌株或
AD 的核酸序列与猎物蛋白 Y 的核酸序列结合到一起构建成 AD-Y 低拷贝数的载体去避免；也有可能是蛋白间的相互作用较弱，这时应
表达载体，之后将这两个质粒共同转入同一酵母细胞内表达，如果 X 选择高敏感的菌株及多拷贝载体去避免；还有就是此系统分析蛋白
是体外研究方法如交联、免疫共沉淀、亲和层析等，这些方法容易受 出现假阳性和假阴性，而且对蛋白质在细胞中的定位有非常严格地
外界条件的影响，还需要纯化蛋白，同时要求蛋白质间存在比较强 要求，同时转化效率偏低[1,2,5,8]。
的作用力，而酵母双杂交系统操作是在核酸水平上进行，是在酵母
3.1 假阳性现象 假阳性就是指待研究的两个蛋白间没有发生
共转化还可以减弱或消除融合表达蛋白
蛋白的核酸序列。③能敏锐地通过报告基因检测到蛋白间微弱的、 大量表达对酵母产生的毒性，尤其对一些低表达量的基因进行筛库
瞬间的作用，是一种研究蛋白间相互作用非常灵敏的技术。④酵母 时，就更应该提高转化效率，才有可能筛到与目的蛋白有作用的蛋