Houseby固定液使用说明
常用固定液及其配制
一、常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。
1.甲醛（formaldehyde）是无色气体，易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发，且有强烈刺激气味，常用得是37％～40％得甲醛溶液，商品名为福尔马林（formalin）。
用作固定的浓度习惯为10％福尔马林（即1份甲醛溶液加9份水配制而成），实际含甲醛4％。
10％福尔马林渗透力强，固定均匀，对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好，是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织，易产生黑色的沉淀，称福尔马林色素。
2.乙醇无色液体，易溶于水，它除可作为固定剂外，还可作为脱水剂，对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度，乙醇渗透力校弱，它能溶解脂肪，核蛋白被沉淀后，仍能溶于水，因此核的着色不良。
3.中性甲醛液（混合固定液）甲醛（浓）120ml，加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O）4g，磷酸氢二纳（Na2HPO4）13g。
此液固定效果比单纯10％福尔马林要好。
4.AF液（混合固定液）95％乙醇90ml，甲醛(浓)10ml。
也有配方是95％乙醇85ml，甲醛（浓）10ml，冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外，兼有脱水作用，因此，固定后可直接入95％乙醇脱水。
以上4种固定液中，以中性甲醛为首选，其次为10％福尔马林，乙醇应尽量不用。
二、组织脱水脱水用的乙醇浓度一般从70％~75％开始，然后依次80％→95％→100％，即由低浓度逐步到高浓度。
脱水的时间与组织大小、厚薄有很大关系、组织厚大，脱水时间要长些；而小薄的组织脱水时间相对的可以短些。
组织脱水时间在低浓度乙醇中可以长些（如70％~80％），而在高浓度乙醇中要短些，这是因为高浓度的乙醇渗透力不强，延长脱水时间无益，相反高浓度乙易使组织收缩、变脆，致使以后切片和观察困难。
⑴70％乙醇1h。
⑵80％乙醇1h。
⑶95％乙醇Ⅰ1h。
⑷95％乙醇Ⅱ1h。
⑸95％乙醇Ⅲ1h。
戊二醛固定液(1%,电镜专用)
编号
名称
DF0161Storage 戊二醛固定液(1%,电镜
专用)
100ml 4℃ 避光使用说明书1份
戊二醛固定液(1%,电镜专用)
简介：
固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构，固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。
固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变，从而使酶失活。
戊二醛固定液会引起蛋白质α-螺旋结构变形，不利于过氧化物酶染色。
戊二醛固定液固定速度快，渗透力差。
Leagene戊二醛固定液(1%,电镜专用)由戊二醛、磷酸盐、去离子水等组成，pH7.2～7.4，该固定液对细胞核、细胞浆的细微结构固定效果好，经常用于电镜标本固定。
组成：
操作步骤(仅供参
考)：
1、 根据实验具体要求操作。
2、 取新鲜标本，立即入戊二醛固定液4℃固定1～4h，稍大标本应
适当延长固定时间。
3、 送检或4℃保存。
注意事项：
1、 Leagene戊二醛固定液有一定腐蚀性，请在通风较好的环境下小心操作， 避免吸入。
2、 组织取材的厚度不同，固定时间也不同。
常规活检组织比较适合的厚度为2～4mm，一般不超过6mm。
对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3、 温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但本固定
液最好不要提高温度。
4、 取出新鲜组织后，应及时固定。
无法及时固定时，应保存于生理盐水中及时送检。
5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
组织固定液说明书
组织固定液说明书【产品名称】通用名称：组织固定液商品名称：10%中性缓冲福尔马林固定液-即用型【包装规格】3ml、5ml、10ml、15ml、30ml、50ml、10L、20L【型号】ANBF01【预期用途】用于新鲜组织样本的固定。
【作用原理】固定是将组织浸入化学溶剂，使细胞内的物质尽量保持其生活状态时的结构和位置，并尽量保存组织中的抗原，使其不被破坏或扩散。
醛类固定液是一种交联性组织固定剂，主要通过使蛋白质分子发生交联而产生固定作用，中性福尔马林固定液采用磷酸氢二钠、磷酸二氢钠调节其pH值至中性，能最大限度地保护组织抗原，固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的甲醛溶液，是生物组织最常用的固定液。
【主要组成成分】主要由甲醛、磷酸氢二钠，磷酸二氢钾组成。
【储存条件及有效期】室温、防潮、防晒、阴凉处密封保存，储存条件下有效期24个月。
【适用仪器】染色结果适用于光学显微镜观察【样本要求】本试剂盒适用于新鲜生物组织。
【检验方法】1、将组织标本固定液编号、写上姓名等；2、组织标本的体积与组织固定液体积的比例为1：4，将离体组织及时浸入组织固定液中，一般不超过5分钟，固定时间为2至12小时。
【检验方法的局限性】1、含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色。
2、不能固定尿酸和糖类物质。
3、容易挥发,污染环境,可导致标本干涸。
【产品性能指标】1、PH值：6.8～7.5，且瓶间差异不大于0.2，批间差异不大于0.2。
2、甲醛含量：4%～4.2%。
3、常温下，经固定液固定3h后的组织，经切片后在显微镜下观察，应细胞核清晰，无收缩现象。
【注意事项】1、注意使用时通风；2、忌新旧液混合使用；3、避免使用时接触皮肤、粘膜；4、本品仅用于体外诊断。
4%多聚甲醛溶液使用说明
4%多聚甲醛溶液使用说明
货号：P1110
规格：100ml/500ml
保存：2-8℃可保存3个月，长期储存可置于-20℃。
产品说明：
多聚甲醛（Paraformaldehyde）是免疫组织化学(IHC)和免疫细胞化学（ICC)研究中最常用的固定剂之一。
该固定剂较为温和，能很好地保存组织的抗原性和细微结构，适于组织标本和细胞片的较长期保存，非常适合组织和细胞的光镜免疫化学研究。
本产品为4%多聚甲醛的PBS溶液，可直接用于组织和细胞固定。
若需使用其他低浓度多聚甲醛，可使用0.01M PBS按比例稀释。
使用说明：
组织固定：室温或4℃浸泡固定2-24h，用缓冲液漂洗后即可树脂包埋用于组织切片。
切片固定：室温或4℃固定10min-2h，视切片厚度而定，用缓冲液漂洗后即可用于染色。
细胞固定：室温或4℃固定10-30min，用缓冲液漂洗后即可用于染色。
注意事项：
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品不含防腐剂，不宜室温或4℃长期保存，请勿反复冻融。
相关试剂：
C1010柠檬酸钠缓冲液0.01mol/L，pH6.0
C1050ELISA包被液
DA1010DAB显色试剂盒（20×）
G1120H-E染色试剂盒
P11128％多聚甲醛
P210010×多聚赖氨酸
P10100.01M PBS干粉，PH7.2-7.4
S2100抗荧光衰减封片剂
X10200.1%胰蛋白酶液消化液。
4%多聚甲醛(pH 7.2~7.4)使用说明书
杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://
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4%多聚甲醛（pH 7.2~7.4）
4%多聚甲醛（pH 7.2~7.4）
4%多聚甲醛（pH 7.2~7.4）可以用于免疫染色时细胞样品或组织切片的固定。
按照每个样品固定时需要1mL 固定液计算，一个包装的4%多聚甲醛固定液可以固定100个样品。
使用说明
对于细胞样品，去除培养液后，按照每六孔板一个孔加入1mL 固定液的比例，加入4%多聚甲醛固定液。
对于其它样品，加入4%多聚甲醛固定液的量都以充分盖住样品为准。
通常室温固定10min 即可完成固定。
也可固定较长时间，例如4℃固定过夜。
温馨提示
多聚甲醛有刺激性气味，为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，戴口罩，戴手套等。
储存温度
建议分装后保存于-20℃。
包装清单
货号 品名 包装
HCY068 4%多聚甲醛（pH 7.2~7.4） 100mL 说明书 1份。
甲醛-生理盐水固定液使用说明
甲醛-生理盐水固定液Formaldehyde Normal saline Fixative Solution编号名称规格单位北京华越洋WG07789甲醛-生理盐水固定液100ml，500ml瓶甲醛-生理盐水固定液用途：甲醛-生理盐水固定液pH为7，此液可用于保护脂类和细胞核。
甲醛-生理盐水固定液固定时的注意事项：(1)固定液量：20倍于材料的体积，以免固定液被稀释。
(2)选择合适的固定液：渗透力强的固定液既可以迅速进入组织中，又不使组织过度收缩或膨胀。
(3)固定的时间要合适：与材料的大小和温度有关：材料大则时间长，材料小则时间短；温度高则时间短，温度低则时间长。
经固定的材料如不及时使用，可以经过90%酒精换到70%酒精中各半小时，再换入一次70%酒精，在0-4℃冰箱内可保存半年。
经过较长时间保存的材料进行观察前可以换新的固定液再处理一次，效果较好。
甲醛-生理盐水固定液固定的条件：(1)迅速渗入组织，杀死原生质。
在杀死的短时期中，细胞形态不致有所变化。
(2)必须具有渗透力，对组织各部分的渗透力相等，可使组织内外完全固定。
(3)尽可能避免使组织膨胀或收缩。
(4)使细胞内的成分凝固或沉淀。
(5)增加细胞内含物的折光程度，易于鉴别。
(6)增加媒染作用和染色能力。
(7)使组织变硬，具有一定的硬度。
(8)固定以后能起到保存的作用。
(9)在凝固原生质以后，增加细胞对于各种穿透的抵抗力，不致于因以后的处理而使固定的原生质变形。
华越洋甲醛-生理盐水固定液其他相关固定液：通用组织细胞固定液Champy固定液Helly固定液AAF固定液Bouin固定液戊二醛固定液Zetterqvist固定液甲醛-生理盐水固定液Brasil固定液Dafano固定液Gendre固定液Methacarn固定液A-F固定液。
一些固定液及方法介绍
一些固定液及方法介绍前，免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂，其中以甲醛类和戊二醛最为常用。
在此，简要介绍几种目前较为常用和推荐的固定剂，以供读者选用。
1.4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.3）试剂：多聚甲醛40g0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml配制方法：称取40g多聚甲醛，置于三角烧瓶中，加入500～800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液（Phosphate Buffer以下简称PB），加热至60℃左右，持续搅拌（或磁力搅拌）使粉末完全溶解，通常需滴加少许1N NaOH才能使溶液清亮，最后补足0.1mol/L的PB于1000ml，充分混匀。
该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究，最好是动物经灌注固定取材后，继续浸泡固定2～24h。
另外，该固定剂较为温和，适于组织标本的较长期保存。
2.4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠试剂：A液：多聚甲醛40g蒸馏水400mlB液：Na2HPO4•2H2O16.88g蒸馏水300mlC液：NaOH 3.86g蒸馏水200m配制方法：A液最好在500ml的三角烧瓶中配制（方法同前），至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。
注意，在溶解多聚甲醛时，要尽量避免吸入气体或溅入眼内。
B液和C液配制好后，将B液倒入C液中，混合后再加入A液，以1N NaOH或1N HCl 将pH调至7.2～7.4，最后，补充蒸馏水至1000ml充分混合，4℃冰箱保存备用。
该固定剂适于光镜和电镜免疫细胞化学研究，用于免疫电镜时，最好加入少量新鲜配制的戊二醛，使其终浓度为0.5%～1%。
该固定剂较温和，适于组织的长期保存。
组织标本于该固定液中，4℃冰箱保存数月仍可获得满意的染色效果。
3．Bouin's液及改良Bouin's液试剂：饱和苦味酸40%甲醛250ml冰醋酸50ml配制方法：先将饱苦味酸过滤，加入甲醛（有沉淀者禁用），最后加入冰醋酸，混合后存于4℃冰箱中备用。
组织固定液的使用
谈谈固定液的使用作者: liza3(站内联系TA)发布：2013—01-11当前，应用于固定试剂的种类较多,它们对于固定不同的组织成分起着不同的作用，因此我们在使用时应该了解不同固定剂的效能,才能合理的固定组织。
根据Bencroft的分类法，将不同的固定剂分为四种类型:Ⅰ类:醛类，甲醛，戊二醛,多聚甲醛，丙烯醛，已二醛，丙二醛等.Ⅱ类:氧化剂类，四氧化锇（奥酸），高锰酸钾,重铬酸钾等。
Ⅲ类：蛋白变性类,甲醇，乙醇，醋酸等.Ⅳ类：其他,氯化汞，苦味酸等.上述四种类型的固定剂，最常使用的是甲醛，其余的也在其它病理技术方面中用到。
下面根据使用的需要，将着重介绍几种常用的固定剂。
(1）甲醛甲醛商品名为福尔马林，一般市售的含甲醛37-40%，由甲醛气体饱和于水而成,比重为1。
12。
它也可以稳定的固体形式存在,它的成分为高分子量的聚合体，称为多聚甲醛。
甲醛溶液较难纯化，在每批市售商品中，都含有不少的杂质如甲醇,这种在组织化学方法当中，能使酶钝化,影响其反应。
甲酸,它可使固定液变酸，在陈列标本或长时间固定的组织，由于酸的作用，往往细胞核染色欠佳。
甲醛有效固定作用的要点是，在蛋白质末端基团之间形成交联链。
参与甲醛固定蛋白质的基团，主要为氨基，亚氨基及酰氨基，肽，胍基，羟基，SH和芳香环.甲醛与组织蛋白类的反应是多样和复杂的，因为它能和多种不同的功能基团结合，在多数情况下在其间形成桥键。
甲醛有这种交联的功能,也是它的缺点，在用甲醛固定过的组织中,需要做免疫组化的，往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联的醛键断裂开，以利于后来的染色.甲醛可配成简单的或混合的固定液，最简单和最容易掌握的方法,就是取10ml甲醛液，加水90ml，这就是10％的福尔马林。
当然,现在使用的固定液要求较为严格些,最好是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来的免疫组化染色的需要.从组织学的观点来说,甲醛是一种良好的固定剂,它有很多的优点:1. 组织收缩较少,损伤少，保存固有物质好。
组织固定液的使用
谈谈固定液得使用作者: ｌiza3(站内联系TA)发布:２013-01-11当前,应用于固定试剂得种类较多,它们对于固定不同得组织成分起着不同得作用,因此我们在使用时应该了解不同固定剂得效能,才能合理得固定组织。
根据Bｅncroft得分类法,将不同得固定剂分为四种类型:ﻫⅠ类:醛类,甲醛,戊二醛,多聚甲醛,丙烯醛,已二醛,丙二醛等。
ﻫⅡ类:氧化剂类,四氧化锇(奥酸),高锰酸钾,重铬酸钾等、Ⅲ类:蛋白变性类,甲醇,乙醇,醋酸等。
Ⅳ类:其她,氯化汞,苦味酸等。
上述四种类型得固定剂,最常使用得就是甲醛,其余得也在其它病理技术方面中用到。
下面根据使用得需要,将着重介绍几种常用得固定剂。
ﻫ(1)甲醛ﻫ甲醛商品名为福尔马林,一般市售得含甲醛３7—4 0%,由甲醛气体饱与于水而成,比重为1。
12。
它也可以稳定得固体形式存在,它得成分为高分子量得聚合体,称为多聚甲醛。
ﻫ甲醛溶液较难纯化,在每批市售商品中,都含有不少得杂质如甲醇,这种在组织化学方法当中,能使酶钝化,影响其反应。
甲酸,它可使固定液变酸,在陈列标本或长时间固定得组织,由于酸得作用,往往细胞核染色欠佳。
ﻫ甲醛有效固定作用得要点就是,在蛋白质末端基团之间形成交联链。
参与甲醛固定蛋白质得基团,主要为氨基,亚氨基及酰氨基,肽,胍基,羟基,SH与芳香环。
甲醛与组织蛋白类得反应就是多样与复杂得,因为它能与多种不同得功能基团结合,在多数情况下在其间形成桥键、甲醛有这种交联得功能,也就是它得缺点,在用甲醛固定过得组织中,需要做免疫组化得,往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联得醛键断裂开,以利于后来得染色。
甲醛可配成简单得或混合得固定液,最简单与最容易掌握得方法,就就是取10ml甲醛液,加水9０ml,这就就是10％得福尔马林、当然,现在使用得固定液要求较为严格些,最好就是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来得免疫组化染色得需要。
1。
组织收缩较少,损伤少,保存从组织学得观点来说,甲醛就是一种良好得固定剂,它有很多得优点:ﻫ固有物质好、2。
固定液
一、固定液使用固定相: AT SE-30,AT OV-1组成100%甲基聚硅氧烷极性非极性应用碳氢化合物同类型号DB(HP) -1、AC1、SPB-1、CPSIL5、DM-1、RT-1使用温度50—300℃固定相: AT OV-101组成100%甲基聚硅氧烷（胶体）极性非极性应用氨基酸、基油同类型号HP-101、AC1 、SP-2100使用温度0—350℃固定相: AT SE-52AT SE-54组成5%苯基甲基聚硅氧烷，1%乙烯基5%苯基甲基聚硅氧烷极性非极性应用多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物、醇同类型号DB(HP)-5、AC5、SPB-5、DM-5、CPSiL8、Rtx-5使用温度50—350℃固定相: AT OV-1701组成7%氰丙基7%苯基甲基聚硅氧烷极性非极性应用药物、醇、酯、硝基化合物同类型号DB(HP)-1701、AC10、DB-1701、SPB-1701、RT-1701、CP-Sil 19CB 使用温度0—280℃固定相: AT XE-60组成25%氰乙基甲基聚硅氧烷极性中极性应用酯、硝基化合物同类型号DB (HP) -225、AC225使用温度0—280℃固定相: AT OV-17组成50%苯基甲基聚硅氧烷极性中极性应用药物、农药同类型号DB(HP)-17、AC10使用温度0—250℃固定相: AT FFAP组成聚乙二醇—TPA改性极性极性应用酸、醇、醛、酯、腈、酮、基油同类型号DB (HP) –FFAP、SP-1000、Supecl-NUKOL、AC20使用温度50—250℃固定相: AT PEG-20M组成聚乙二醇—20M极性极性应用同类型号HP- Wax、DB-Wax、AC20使用温度50—200℃固定相: AT 农残Ⅰ号AT 农残Ⅱ号组成极性应用六六六、DDT等八种含氯农药拟除虫菊酯类、含磷类农药同类型号SPB-608、HP-608使用温度25—300℃二、毛细管柱内径0.53mm 具有近似填充柱的负荷量，总柱效则远远超过填充柱。
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Houseby固定液
Houseby Fixative Solution
编号名称规格单位
北京华越洋WG04758Houseby固定液100ml，500ml瓶
Houseby固定液用途：
Houseby固定液对细胞质的微细结构保存好。
Houseby固定液固定时的注意事项：
(1)固定液量：20倍于材料的体积，以免固定液被稀释。
(2)选择合适的固定液：渗透力强的固定液既可以迅速进入组织中，又不使组织过度收缩或膨胀。
(3)固定的时间要合适：
与材料的大小和温度有关：材料大则时间长，材料小则时间短；温度高则时间短，温度低则时间长。
经固定的材料如不及时使用，可以经过90%酒精换到70%酒精中各半小时，再换入一次70%酒精，在0-4℃冰箱内可保存半年。
经过较长时间保存的材料进行观察前可以换新的固定液再处理一次，效果较好。
Houseby固定液固定的条件：
(1)迅速渗入组织，杀死原生质。
在杀死的短时期中，细胞形态不致有所变化。
(2)必须具有渗透力，对组织各部分的渗透力相等，可使组织内外完全固定。
(3)尽可能避免使组织膨胀或收缩。
(4)使细胞内的成分凝固或沉淀。
(5)增加细胞内含物的折光程度，易于鉴别。
(6)增加媒染作用和染色能力。
(7)使组织变硬，具有一定的硬度。
(8)固定以后能起到保存的作用。
(9)在凝固原生质以后，增加细胞对于各种穿透的抵抗力，不致于因以后的处理而使固定的原生质变形。
华越洋Houseby固定液其他相关固定液：
通用组织细胞固定液
Champy固定液
Helly固定液
AAF固定液
Bouin固定液
戊二醛固定液
Zetterqvist固定液
Houseby固定液
Brasil固定液
Dafano固定液
Gendre固定液
Methacarn固定液
A-F固定液。