组织固定液
固定液和组织的比例依据
固定液和组织的比例依据
固定液和组织的比例是根据所需固定的组织的大小和类型来确定的。
一般而言，常用的固定液和组织的比例是10:1，即10部分的固定液与1部分的组织混合。
然而，不同的组织类型可能需要不同的比例。
以下是一些常用的组织固定液比例：
1. 大体组织：对于较大的器官或动物组织，通常使用10%缓冲福尔马林溶液（10% buffered formalin）固定。
这意味着将10部分的缓冲福尔马林溶液和1部分的组织混合。
2. 细胞和细胞簇：对于大部分细胞和细胞簇的固定，一般使用4%缓冲福尔马林溶液。
这意味着将4部分的缓冲福尔马林溶液和1部分的细胞或细胞簇混合。
3. 骨骼组织：对于骨骼组织的固定，常用的固定液是10%缓冲福尔马林溶液或中性缓冲福尔马林溶液。
需要较长的固定时间。
除了以上常用的固定液比例外，还有其他特殊组织和细胞类型可能需要不同的固定液比例。
此外，固定时间和固定温度也会影响固定效果，需要根据具体实验要求进行调整。
因此，最好根据实验需要和参考相关文献确定合适的固定液和组织比例。
组织固定液说明书
组织固定液说明书【产品名称】通用名称：组织固定液商品名称：10%中性缓冲福尔马林固定液-即用型【包装规格】3ml、5ml、10ml、15ml、30ml、50ml、10L、20L【型号】ANBF01【预期用途】用于新鲜组织样本的固定。
【作用原理】固定是将组织浸入化学溶剂，使细胞内的物质尽量保持其生活状态时的结构和位置，并尽量保存组织中的抗原，使其不被破坏或扩散。
醛类固定液是一种交联性组织固定剂，主要通过使蛋白质分子发生交联而产生固定作用，中性福尔马林固定液采用磷酸氢二钠、磷酸二氢钠调节其pH值至中性，能最大限度地保护组织抗原，固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的甲醛溶液，是生物组织最常用的固定液。
【主要组成成分】主要由甲醛、磷酸氢二钠，磷酸二氢钾组成。
【储存条件及有效期】室温、防潮、防晒、阴凉处密封保存，储存条件下有效期24个月。
【适用仪器】染色结果适用于光学显微镜观察【样本要求】本试剂盒适用于新鲜生物组织。
【检验方法】1、将组织标本固定液编号、写上姓名等；2、组织标本的体积与组织固定液体积的比例为1：4，将离体组织及时浸入组织固定液中，一般不超过5分钟，固定时间为2至12小时。
【检验方法的局限性】1、含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色。
2、不能固定尿酸和糖类物质。
3、容易挥发,污染环境,可导致标本干涸。
【产品性能指标】1、PH值：6.8～7.5，且瓶间差异不大于0.2，批间差异不大于0.2。
2、甲醛含量：4%～4.2%。
3、常温下，经固定液固定3h后的组织，经切片后在显微镜下观察，应细胞核清晰，无收缩现象。
【注意事项】1、注意使用时通风；2、忌新旧液混合使用；3、避免使用时接触皮肤、粘膜；4、本品仅用于体外诊断。
组织固定液是什么
安徽雷根生物技术有限公司 组织固定液说明书【产品名称】组织固定液【包装规格】货号：DF0111包装规格分别为：500ml、5000ml。
【预期用途】用于新鲜组织标本的固定。
【检验原理】固定的目的在于保护细胞和组织的原有形态结构，固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长，通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变，从而使酶失活。
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等，较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
本组织固定液主要由甲醛、磷酸盐组成，该固定液适合于绝大多数组织的固定，属于中性福尔马林固定液，pH接近于中性。
【主要组成成分】试剂组成主要成分组织固定液甲醛、磷酸盐【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封固定液的有效期为24个月，在有效期内的已开封固定液建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】组织尽量新鲜。
【检验方法】l、一般标本固定时间控制在1～4小时/mm，大标本应适当延长固定时间；2、固定好的组织，可在10%福尔马林固定液或70%乙醇中长期保存。
【检验方法的局限性】仅限于病理组织内容物固定。
【注意事项】l、避免过度延长固定时间，否则引起生物大分子过度交联，取材厚度不同，固定时间也不同。
2、固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
3、温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
4、本产品仅用于体外诊断，应由专业人士使用及进行结果的判读。
5、使用前应详细阅读说明书，并做好个人卫生防护，在有效期内使用，生产日期、生产批号和失效日期见包装。
6、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】备案人/生产企业名称：安徽雷根生物技术有限公司住所：淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。
福尔马林固定液
磷酸缓冲中性福尔马林固定液济南百博生物技术股份有限公司【预期用途】磷酸缓冲中性福尔马林固定液主要用于适用于常规标本的组织固定。
福尔马林固定液作为一种样本处理液，主要是通过对组织标本的固定，以方便医院检验人员进行后续的染色、免疫组化等操作。
该固定液主要是用于对病人进行治疗的初步阶段，用于固定组织切片标本。
由于该种固定液是用于固定病理组织标本使用的，所以该种固定液的目标用户是各医院的手术室、病理科以及肿瘤医院等。
【检验原理】甲醛能与蛋白质的氨基结合，使蛋白质凝固，因此可做为检验时的组织固定剂。
【主要组成成份】甲醛、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠。
【适用范围】用于大多数组织标本的固定，能较好地保存组织的抗原性和细微结构，具有较强的渗透力和较好的固定效果，能满足常规HE及免疫组化、原位杂交等检测工作。
【使用方法】根据组织类型及试验目的选择合适的固定液浓度，按标本的5—10的用量将组织标本在室温条件下浸泡固定2-72h，（固定时间依组织块大小和实验目的而定）,自来水或缓冲液充分漂洗后即可用于组织切片。
【固定的作用】固定的作用，从组织学的角度讲是，使之尽量保持细胞、组织的固有形态和结构，而从免疫组化技术的角度，固定的作用不仅是使细胞内蛋白质凝固，尽量减少或终止外源性酶和内源性酶的反应；防止细胞的自溶，以免使抗原扩散至组织间质；以保持组织的固有形态和结构；更重要的是保持组织或细胞的抗原性，不但要使抗原不导致失活，而且不使抗原发生弥散的现象，才能在免疫组化染色时，不产生过深的背景，影响对阳性物的判断。
【成分特点】1 .采用优质进口原料配制，确保产品质量优良2 .添加独特增固剂，增强组织固定效果3 .添加复合磷酸盐，形成一个中性缓冲环境（pH：7.0±0.2）4 .添加挥发抑制剂，减少甲醛挥发，气味小且安全5 .添加独特抗聚合反应成分，防止有效成分聚合【固定特点效果】1. 固定效果均匀，穿透力强，完整保存细胞组织形态结构2. 增进组织弹性，利于切片3. 完整保存组织细胞形态结构，特别适用于免疫组化染色的组织，能最大程度保存组织细胞的蛋白抗原和核酸分子，使抗原定位更加清晰，利于特殊染色、免疫组化染色及分子生物学检验4. 有效保存脂肪及脂类物质，使免疫组化的染色与鉴定效果更佳5. 适用于血红素与含铁血红素的固定，抑制福尔马林色素的生成6. 特別适用于黏多糖染色与鉴定。
病理制片中固定液的选择-2019年精选文档
病理制片中固定液的选择由于病理学诊断是诊断的金标准，是辅助临床诊断的主要把关口，也是最后的宣判性诊断。
做好病理诊断，层层步骤就显得尤为重要，包括组织的取材，固定，脱水，浸蜡，包埋及染色。
组织的固定是一个关键的过程，因为没有好的固定就没有好的制片，没有好的制片就不会有好的成品，一张好的切片与固定有着密切的关系。
1固定的目的固定的概念是将采取的活体组织置于化学性溶媒（固定液）中，使其不发生自溶与腐败，保持被采取时的形态。
固定的目的是在于尽量使组织和细胞保持与生活时相仿的成分和形态，迅速防止组织、细胞的死后变化，防止自溶与腐败，使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等各种成分转变成不溶性物质，使组织中的各种物质沉淀和凝固起来，而产生不同的折射率，成光学上的差异，以便染色后易于鉴别和观察。
因此，固定的组织愈新鲜愈好，固定组织时，应使用足量的固定液。
其固定液的量一般小于组织块总体积的4 倍以上。
2固定液的选择固定液必需要有较强的渗透能力，能迅速地渗入组织内部，不会使组织过度收缩或膨胀，并且能使组织内易观察的成分可以凝固为不溶性物质，能使组织达到一定的硬度，获得较佳的折光率和对染料具有较强的亲和力。
组织细胞中不至于因固定引起人为的改变，因为在凝固原生质以后，增加了细胞对于各种穿透的抵抗力，不至于因以后的处理而使固定后的原生质变形，并尽可能地避免使组织膨胀或收缩，使细胞内的成分（蛋白质）凝固沉淀下来，由正常的半液体状（胶体）变为半固体状（凝胶），增加媒染作用和染色能力，使组织能够得到充分的固定，便于以后的蜡块保存。
固定液的种类很多，分为单纯固定液和混合固定液，其中混合固定液比较常用。
2.1 常用单纯固定液2.1.1 甲醛（formaldehyde）为非沉淀性固定剂，是一种约有40％重量溶于水的气体，易挥发，市售的为40％的甲醛水溶液，也称为福尔马林液（formalin）。
此液久存自行分解，形成白色沉淀为副醛（三聚甲醛或多聚甲醛）。
几种常用病理组织固定液的比较
用 甲醛 固定 的组 织 ． 细胞 结 构清 晰 ， 且 能保 持 与
生活 时形 态相 似 。 甲醛 为病 理科 组 织 固定 的常规 固
定液 ， 这是 因为其有以下优 ￣［ １ ｏ ， １ １ １ ： ① 甲醛有较强 的
分子 生 物学 的发展 ． Ｎ Ｂ Ｆ已经 不 能满 足 现代 病 理 学 组织渗透力 ； ②可 以有效且均匀地 固定标本 ； ③固 的要求 。最新 的生 物 医学 和病理 学研 究及 诊 断依赖 定 所引 起 的回缩 力较小 ， 对 标本 的 形态 保存 较完 整 ；
１ 单 纯 固定 液分 类及 其优缺 点
的发 展 ， 但 是 病理 检 测依 然 是诊 断 很 多疾 病 的金 标 定 液及 复 合 固定 液 都 已经 被研 发 处 理 应用 于 临床 ， 术要求 的不 断提 高 ， 组 织 固定 效果越 来 越重 要 。 这既
与疾 病 的病 理 学诊 断 息息 相 关 ． 又直 接 关 系 到疾 病 后续 的分 子检 测指 标及治 疗方 式 的选择圈 。 病理 切 片
癌物 ” 嘲 。 此外 ， 利用 甲醛 进行 长时 间的组 织 固定 将 引 起核 酸 的广泛 降解 ． 这 既损 害 了核酸 的完 整性 ， 又 降 嗜碱 性强 ， 细 胞 核 染色 深 ， 组 织 收缩 大 ， 细 胞 形 态 与 生活 时相 比明显 缩小 ； 混合 固定 液 的 固定速 度较 快 ，
制作 技 术 的质 量涉 及 多 个环 节 ． 组织 固定 是 最基 本 １ ． １交联 固定 液 理 切片及 免疫 组织 化学技 术 的制作 质量等 级 。
交 联 固定剂包 含 甲醛 和戊二 醛 。 它
最 重要 的一个 步骤 。组 织 固定 的质量 可直 接评 定病 们 通过 与蛋 白质 的氨 基酸 ， 相邻 蛋 白质 之 间 。 氨基 酸 和核 酸之 间形成 的亚 甲基 桥 与组 织相 互作 用 。这种 却 阻 碍 了核 固定 指利 用一 些化 学试 剂处 理组 织 以保存 组 织 交联 机 制 虽然 保 持 了组 织 的 良好 形 态 ，
缓冲液及组织固定液的配制
缓冲液及组织固定液的配制1、磷酸盐缓冲液的配制关于缓冲溶液PB的配制，好多参考书如生物技术实验的后面均附有缓冲溶液的配制配方，可以根据需要配制pH5.7～8.0的磷酸盐缓冲。
磷酸盐缓冲液称简PB，加NaCl（氯化钠）的称PBS，加KCl（氯化钾）、NaCl（氯化钠）的称KPBS。
S就是指氯化钠的含量，一般为0.85％，即是100ml里面加0.85克，这个时候的PBS的浓度是0.1M的。
一般在免疫组化洗涤中采用0.01M的PBS，pH7.0～7.4。
我们在实验中直接将0.1M的稀释十倍，即可。
最好能现配现用。
母液4℃可以保持1～2周，影响不大。
成份分子量（MW）浓度（g/1000mL）0.01M PBS①0.1M PBS0.1M PBNa2HPO4·12H2O 358.14 2.684 29.009 29.009NaH2PO4·2H2O 156.01 0.39 2.964 2.964NaCl 58.44 8.5 8.5~9 /pH值/ 7.4 7.4 7.4注：①配方来自网上。
2、组织固定液的配制2.1、4%多聚甲醛-0.1M磷酸缓冲液[1]（pH=7.3）：多聚甲醛40g，置于三角烧瓶中，加入500~800mL 0.1M的磷酸缓冲液（PB），加热至60℃左右，持续搅拌（或磁力搅拌）至粉末完全溶解，通常需要滴加少许1N NaOH才能使溶液澄清，最后补足0.1M PB至1000mL，充分混匀。
该固定试剂适用于光镜免疫细胞化学研究，因较温和，适用于组织标本的较长期保存。
2.2、10%中性缓冲福尔马林固定液[2]：甲醛溶液（37~40%）100mL，蒸馏水900mL，NaH2PO4（磷酸二氢钠）4g，Na2HPO4（磷酸氢二钠）6.5g，混合摇匀后调pH至7.2~7.4。
2.3、10%福尔马林固定液配制[2]：甲醛溶液（37~40%）100mL，自来水900mL，混合后在溶液中加入碳酸钙使溶液呈中性或偏碱性。
组织固定液的使用
谈谈固定液得使用作者: ｌiza3(站内联系TA)发布:２013-01-11当前,应用于固定试剂得种类较多,它们对于固定不同得组织成分起着不同得作用,因此我们在使用时应该了解不同固定剂得效能,才能合理得固定组织。
根据Bｅncroft得分类法,将不同得固定剂分为四种类型:ﻫⅠ类:醛类,甲醛,戊二醛,多聚甲醛,丙烯醛,已二醛,丙二醛等。
ﻫⅡ类:氧化剂类,四氧化锇(奥酸),高锰酸钾,重铬酸钾等、Ⅲ类:蛋白变性类,甲醇,乙醇,醋酸等。
Ⅳ类:其她,氯化汞,苦味酸等。
上述四种类型得固定剂,最常使用得就是甲醛,其余得也在其它病理技术方面中用到。
下面根据使用得需要,将着重介绍几种常用得固定剂。
ﻫ(1)甲醛ﻫ甲醛商品名为福尔马林,一般市售得含甲醛３7—4 0%,由甲醛气体饱与于水而成,比重为1。
12。
它也可以稳定得固体形式存在,它得成分为高分子量得聚合体,称为多聚甲醛。
ﻫ甲醛溶液较难纯化,在每批市售商品中,都含有不少得杂质如甲醇,这种在组织化学方法当中,能使酶钝化,影响其反应。
甲酸,它可使固定液变酸,在陈列标本或长时间固定得组织,由于酸得作用,往往细胞核染色欠佳。
ﻫ甲醛有效固定作用得要点就是,在蛋白质末端基团之间形成交联链。
参与甲醛固定蛋白质得基团,主要为氨基,亚氨基及酰氨基,肽,胍基,羟基,SH与芳香环。
甲醛与组织蛋白类得反应就是多样与复杂得,因为它能与多种不同得功能基团结合,在多数情况下在其间形成桥键、甲醛有这种交联得功能,也就是它得缺点,在用甲醛固定过得组织中,需要做免疫组化得,往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联得醛键断裂开,以利于后来得染色。
甲醛可配成简单得或混合得固定液,最简单与最容易掌握得方法,就就是取10ml甲醛液,加水9０ml,这就就是10％得福尔马林、当然,现在使用得固定液要求较为严格些,最好就是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来得免疫组化染色得需要。
1。
组织收缩较少,损伤少,保存从组织学得观点来说,甲醛就是一种良好得固定剂,它有很多得优点:ﻫ固有物质好、2。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
组织固定液
【产品名称】
组织固定液
【包装规格】
货号：DF0111
装规格分别为：500ml、5000ml。
【预期用途】
用于新鲜组织标本的固定。
【检验原理】
固定的目的在于保护细胞和组织的原有形态结构，固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长，通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变，从而使酶失活。
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等，较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
本组织固定液主要由甲醛、磷酸盐组成，该固定液适合于绝大多数组织的固定，属于中性福尔马林固定液，pH接近于中性。
【主要组成成分】
试剂组成主要成分
组织固定液甲醛、磷酸盐
【储存条件及有效期】
5℃～35℃保存，原包装未开封固定液的有效期为24个月，在有效期内的已开封固定液建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】
组织尽量新鲜。
【检验方法】
l、一般标本固定时间控制在1～4小时/mm，大标本应适当延长固定时间；
2、固定好的组织，可在10%福尔马林固定液或70%乙醇中长期保存。
【检验方法的局限性】
仅限于病理组织内容物固定。
【注意事项】
l、避免过度延长固定时间，否则引起生物大分子过度交联，取材厚度不同，固定时间也不同。
2、固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
3、温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
4、本产品仅用于体外诊断，应由专业人士使用及进行结果的判读。
5、使用前应详细阅读说明书，并做好个人卫生防护，在有效期内使用，生产日期、生产批号和失效日期见包装。
6、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称：安徽雷根生物技术有限公司
住所：淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。