血小板计数SOP(手工法)
血液分析仪与手工法计数儿童血小板误差原因分析
血液分析仪与手工法计数儿童血小板误差原因分析目的:分析血液分析仪与手工法对儿童血小板计数产生的误差。
方法:用两种血液分析仪及手工显微镜计数法对600例血液标本进行血小板计数,并进行对比分析。
结果:成人血小板值高于正常参考上限(300×109/L)的比率低于儿童,两种血细胞分析仪测的儿童血小板值无显著性差异(P>0.05),血液分析仪分析时出现异常报警(URI),直方图尾部有异常升高的血小板值与显微镜计数的结果有显著性差异(P＜0.05)。
结论:使用血液分析仪计数儿童血小板时如出现,计数有警示信号(URI);MCV0.05)。
MEK-6108测得的值[(204.0±80.5)×109/L]与手工显微镜计数值[(190.0±65.3)×109/L]比较,无显著性差异(P>0.05)。
将MEK-6108血液分析仪分析时出现异常报警(URI)的28例标本的血小板值[(486.0±98.7)×109/L]与显微镜计数的结果[(279.0±76.5)×109/L]进行比较,有显著性差异(P＜0.05)。
3 讨论不同的血液分析仪虽然有不同的生产厂家,且分析原理及试剂有所不同,但在分析时只要按其要求操作,所取标本合格、操作时间控制在一定范围内(15～60 min),所得的血小板结果无明显差异[1],笔者的结论也与之相符。
血液分析仪所测得的血小板值高于正常参考上限的儿童多于成人,考虑可能有以下几方面原因:①某些疾病如肺炎、支气管炎、溶血性贫血、川崎病、上呼吸道感染、哮喘喘息发作期、肾病综合征等疾病可引起血小板增高,这可能与血小板活化参与其发病机制有关[2],而这几种疾病儿童的发病几率要大于成人。
②在采集儿童静脉血液时由于儿童与工作人员难以很好地配合,采集到的标本很容易造成红、白细胞破坏形成碎片。
由于血液分析仪对血小板的测定是与红细胞在同一个计数池中进行,其原理是在一定体积(2～24 fl)范围内的颗粒被计数为血小板[3]。
束臂试验出血时间测定和血小板计数
方
法
BT是筛检实验中唯一的体内试验，TBT法是目前 推荐方法，由于使用标准的测定器，因此皮肤切口
的长度、宽度和深度恒定，达到切口标准化。
操作
加压 将血压计袖带缚于上臂，加压并维持 成人40mmHg，儿童在20mmHg.
消毒 在肘前凹窝下约2cm处用碘酊在直径 5cm范围内消毒，使皮肤碘酊干后，再用 乙醇棉球拭去碘酊待干。
• 原理 将血液用适当的稀释液作一定量稀 释后，混匀注入计数池内计数，再算出 每升血液中血小板数。
操作
1、在清洁试管中加入稀释液0.38ml。 2、准确吸取血液20μl，擦去管尖外附着血液， 置于血小板稀释液内，立即充分混匀。待完全
溶血后再次混匀1min。
3、取上述均匀血小板悬液1滴，注入计数池内， 静置10-15min，使血小板下沉。 4、用高倍镜计数每升血液内血小板数。
一、束臂试验
(毛细血管脆性试验) （capillary fragility test ） （毛细血管抵抗力试验 ） (capillary resistance Test, CRT)
目的
• 掌握束臂试验方法，参考范围及临床意义。
原理
• 束臂试验又称毛细血管脆性试验，也称毛
细血管抵抗力试验。通过给手臂局部加压 （标准压力），使静脉血流受阻，给毛细 血管以负荷，检查一定范围内皮肤新出现 的出血点的数目来估算血管壁的完整性及 脆性。
临床意义（2）
• 3.血管性血友病
• 4.其他如高血压、糖尿病、维生素C缺乏症、
肝胆疾病、败血症、亚急性感染性心内膜
炎、尿毒症等。 • 5.少数正常人可呈阳性，尤其是妇女。
一期止血的筛查试验
二、出血时间（bleeding time,BT）
网织红细胞计数SOP(手工法)
XXXX医院
临床检验实验室
网织红细胞计数（
［检测原理］
网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质,
经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后呈浅蓝或深蓝色的网状结构。
溶于双蒸馏水100ml中，过滤后备用；
2,10g/L煌焦油蓝ACD溶液：取ACD保养液（血库用）20ml,用1mol/L NaO调至PH 7.5左右，加入研细的煌焦油蓝200mg溶解后过滤备用。
（二）方法：
1，于小试管中滴加1滴煌焦油蓝生理盐水溶液或煌焦油蓝ACD溶液。
2，加入末梢血2滴于上述试管中，混匀。
［标本的收集与处理］
1,用EDTA-K20.2ul抗凝静脉血1ml,轻轻摇动抗凝。凝集，溶血，血量小 于0.5 ML或抽血时间超过四小时为不合格标本，拒收。
2，直接采集未稍血液。
［操作步骤］一，百分计数；
（一）试剂：
1,10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液：煌焦油蓝1g,枸橼酸钠0.4g，氯化钠0.85g
4，试剂定期重配，以免变质沉淀。
5，用瑞氏--姬姆萨染液复染后可使网织红细胞计数结果减少。
6，因操作误差大，不宜用波片直接染色法。
7,网织红细胞也可用荧光染色或流式细胞仪计数。
8,抗凝血标本应尽可能快地制片。
（四）参考范围：
成人：0.005--0.015 （ 0.5%--1.5% ）;
新生儿：0.03--0.06 （ 3%--6% ）
XXXX医院
临床检验实验室
文件编号：
XXXX
网织红细胞计数(Ret)，网织红细胞绝对值计数
网织红细胞% X红细胞/ul
血小板检查
南华大学 University of South China
南华大学 University of South China
南华大学 University of South China
31，血小板直方图异常（血小板聚集引起的除外），应该涂片镜检。 32，有不成熟粒细胞（仪器图像判断），且为首次检查时，应该涂片镜检。 33，有不成熟粒细胞（仪器图像判断）， 34，有核左移的图像（仪器图像判断或者提示），应该执行实验室SOP。 35，有异型（变异）淋巴细胞图像（仪器提示有异淋），且为首淋），以前证实过结果，但是 WBC阳性差值失败，应该涂片镜检（希望专家能解释一下本条规则---译者）。 37，有原始细胞图像（仪器提示有原始细胞），且为首次检查时，应该涂片镜检 。 38，有原始细胞图像（仪器提示有原始细胞），以前证实过结果，差值通过或者 对WBC有阴性差值，且在3-7天内检查，应该执行实验室SOP。
南华大学 University of South China
经验教训：
1、初次到本院检查，血小板<50X109/L的，不管机器是否报“聚集”， 必须进行目测血小板检查。用的就是临检操作规程上的目测方法。看看 有没有聚集，没有聚集就可以发送了。 2、主要仪器报“聚集”，需要重点关注。 2.1此时需进行目测血小板，计数盘中血小板聚集成团，不能计数。 2.2马上通知病人用枸橼酸抗凝管采血，进行全血细胞分析，一般情况 下血小板计数恢复正常。 2.3告知病人以后做血常规不能用“紫管”，要用“蓝管”。
坏红细胞。 高铁氰化钾：不能完全破坏红细胞。 复方碘：不破坏红细胞，易长菌，已淘汰。
用生理盐水作稀释液解决1例血小板聚集现象的案例报道
作原因，检验者按SOP操作，白细胞红细胞等计数均正常， 尚未查出。经查阅文献显示：血小板假性减少现象主要分
故可排除因操作导致吸样不足；（2）分析中仪器原因， 为以下几类原因；第一种原因是据文献显示使用国际血液
因BC 6900血小板计数方法使用的是RBC通道即鞘流阻抗 学标准化委员会推荐EDTA盐抗凝剂导致的血小板聚集现
畸形，无其他特殊疾病或体征。入院后行常规检查，大小便 者最佳稀释倍数。多次重复此操作，平均计数值得到血小
均正常，无血尿，血常规使用迈瑞BC 6900检查，血小板计 板数为：102×109/L。此时，发出该患者报告。后连续两日抽
数为3×109/L，凝血象正常。遇到此种情况我们按照常规流 取该患者新鲜血液，按此方法检查得到血小板数分别为：
能，故手工推片，发现整片中存在明显血小板成堆聚集现 多数认为与免疫机制有关；第四种原因是我们采血原因导
象，镜下血小板数明显高于仪器检测值。
致的血小板被活化引起血液的部分凝集造成；近年来也有
为准确计数病人血小板。与患者沟通后，我们后续均 观点认为该现象可能与血浆中的抗PLT抗体和抗心磷脂抗
采用床旁釆血检测。首先分别使用肝素和枸橼酸钠抗凝管 体等自身抗体，以及与血小板表面存在某种隐匿性抗原有
床表现：轻者可有皮肤出血点、淤斑，牙龈渗血、鼻衄，重者 境，且能规避红细胞碎片对血小板影响），并加大了稀释倍
可表现为脏器出血：如呕血、黑便、血尿及脑出血等。因此 数，同时使用常规稀释液设置对照，分别稀释成1:20、1:50、
临床工作中，准确计数血小板对病人的病情诊断有着举足 1:100、1:200、1:400五个不同倍数，进行手工计数。多次反复
程从分析前、分析中和分析后进行规范处理。
105×109/L和106×109/L。计数结果同镜下显示数量相符且
影响血小板计数的相关因素分析
影响血小板计数的相关因素分析发表时间：2019-09-09T16:33:30.530Z 来源：《健康世界》2019年8期作者：张婉婧[导读] 若2次计数误差小于10％，取其均值报告；若计数误差大于10％，应做第3次计数，取2次相近结果的均值报告。
黑龙江省哈尔滨血液病肿瘤研究所 150010摘要：目的：临床检验应用血细胞分析仪对血小板计数，对影响血小板计数的相关因素进行分析。
方法：选取2018年3月~2018年12月期间进行健康体检者60例，采用全自动血细胞分析仪进行血小板计数，同时采用手工计数法进行检测对检测结果进行分析。
结果：全自动血细胞分析仪测定血小板，放置10分钟血小板数明显高于立刻检测血小板数，差异有统计学意义（P<0．05），之后1、2、4小时血小板数无显著性差异（P>0．05），放置8小时后血小板数明显低于放置10分钟血小板数（P<0．05）。
应用手工法测定血小板，血小板数在立刻检测和放置 10分钟、1、2、4小时时血小板数差异不明显（P>0．05），放置8小时后血小板数明显降低，低于其它时间的血小板数（P<0．05）。
MCV大于70fl时，两种检测方法对血小板计数结果差异无统计学意义（P>0．05）；MCV小于70fl时，血细胞分析仪检测血小板计数明显高于手工法检测结果，差异明显（P<0．05）。
结论：全自动血细胞分析仪对血小板计数的准确性，同标本放置时间、红细胞体积相关，必要需要重新采血，或者是采取手工计数。
关键词：血细胞分析仪；血小板计数；影响因素；血小板来自骨髓的巨核细胞，体积较小，直径2~4微米，寿命约~11天。
正常人血小板约有2／3在外周血循环，1／3滞留在脾脏；衰老的血小板主要在脾脏清除，也有少量在肝脏清除。
血小板在止血，血栓形成方面有重要的作用，如血小板磷脂参与多种凝血因子的活化等。
血小板具有粘附、聚集、释放等功能[1]。
当血管内皮细胞损伤时反应迅速，首先粘附于损伤之处，继而聚集，形成凝块并释放多种促凝或血管活性物质使血栓形成从而达到止血的目的。
检验科临床输血SOP文件
临床血库操作规程SOP第一章临床输血技术规范第一条为了规范、指导医疗机构科学、合理用血，根据《中华人民其和国献血法》和《医疗机构临床用血管理办法》（试行）制定本规范。
第二条知液资源必须加发保护、合理应用，避免浪费，杜绝不必要的输血。
第三条临床医师和输血医技人员应严格掌握输血适应证，正确应用成熟的临床输血技术和血液保护技术，包括成分输血和自体输血等。
第二章输血申请第五条申请输血应由经治医师逐填写《临床输血申请单》，由主治医师核准签字，连同受血者血样于预定输血日期前送交输血科（血库）备血。
第六条决定输血治疗前，经治医师应向患者或其家属说明输同种异体血的不良反应和经血传播疾病的可能性，征得患者或家属的同意，并在《输血治疗同意书》上签字。
《输血治疗同意书》入病历。
无家属签字的无自主意识患者的紧急输血，应报医院职能部门或主管领导同意、备案，并记入病历。
第七条术前自身贮血由输血科（血库）负责采敌国和贮血，经治医师负责输血过程的医疗监护。
手术室内的自身输血包括急性等容性血液稀释、术野自身血回输及术中控制性低血血压等医疗技术由麻醉科医师负责实施。
第八条亲友互助献血由经治医师等对患者家属进行动员，在输血科（血库）填写登记表，到血站或卫生行政部门批准的采血点（室）无偿献血，由血站进行血液的初、复检，并负责调节器配合格血液。
第九条患者治疗性血液成分去除、血浆置换等，由经治医师申请，输血科（血库）或有关科室参加制定治疗方案并负责实施，由输血科（血库）和经治医师负责患者治疗过程的监护。
第十条对于Rh(D)阴性和其他稀有血型患者，应采用自身输血、同型输血或配合型输血。
第十一条新生儿溶血端正如需要换血疗法的，由经治医师申请，经主治医师核准，并经患儿家属或监护人签字同意，由血站和医院输血科（血库）提供适合的血液，换血由经治医师和输敌国科（敌国库）人员其同实施。
第三章受血者血样采集与送检第十二条确定输血后，医护人员持输血申请单和巾好标签的试管，当面核对患者姓名、性别、年龄、病案号、病室/门急诊、床号、血型和诊断，采集血样。
输血技术规范
输血技术规范术中输血需严格掌握适应证，合理遵循“循证原则”，积极实施成分输血，缺什么、输什么，适当欠量输血。
1.浓缩红细胞用于需要提高血液携气能力，血容量基本正常或低血容量已被纠正的患者。
低血容量患者可配晶体液或胶体液应用。
血红蛋白浓度＞100ｇ/L，一般不考虑输血；血红蛋白浓度＜70ｇ/L ，应考虑输；血红蛋白浓度在70~100ｇ/L 之间，应根据继续失血的情况、手术进行的程度、患儿基本身体状况、心肺代偿功能以及循环动力学状态，综合考虑是否给予血液或血液制品。
2.血小板2.1适应证：①各种不同原因引起的血小板计数低于2.0 ×109/L ，伴有严重出血者；②血小板计数不低，但功能异常所至严重出血者；③大量输血所致的血小板稀释性减少（血小板计数低于5.0 ×109/L 伴有严重出血者）。
要求ABO 血型相合，一次足量输注。
2.2输注血小板的种类2.2.1浓缩血小板采集：我国目前规定手工法由200ml 全血制备的浓缩血小板为1 个单位，不含保存液的容量为25~30ml ，需要加入保存液者容量为50~70ml，所含血小板数应≥2.4 ×1100，红细胞混入量≤1.0 ×91。
0机采的血小板1 个单位（袋）为1 个治疗量，所含血小板数≥2.5 ×1110个，相当于10 个单位手工采血小板。
机采的血小板纯度高，外观半透明，橙黄色，混入的白细胞和红细胞极少。
保存：在22±2℃振荡条件下可保存24 小时，4℃保存有害。
特制的血小板保存袋在22±2℃振荡条件下可保存5 天。
剂量及用法：剂量视病情而定，用输血器输注。
一般每平方米体表面积输入血小板数1.0 ×1011个可使输注后1 小时的外周血小板数增高约1.0 ×109/L 。
儿童每10kg 体重要输手工法制备的血小板2 个单位；【注意事项】①输注前要轻摇血袋，混匀；②因故未及时输用要在室温下放置，不能放冰箱；③以患者可以耐受的最快速度输入，以便迅速达到止血；④要求ABO 同型输注；⑤Rh 阴性患者要输注Rh 阴性血小板；⑥如患者有脾肿大、感染、弥散性血管内凝血检验地带网等非免疫因素存在，输注剂量要适当加大。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
临床检验实验室
文件编号：：xxxx
页码：第2页，共2页
（3）血液加入稀释液内要充分混匀，滴入计数池后一定要静置10--15min。室温高时注意保持计数池周围的温度，以免水份蒸干影响计数结果。
（4）数光线要适中，不可太强，应注意有折光性的血小板和杂质，灰尘相区别。附在血细胞旁边的血小板也要注意，不要漏数。
（5）如在位相显微镜或暗视野显微镜下计数，效果更佳，计数更准确。
[参考范围]
（100--400）X10E9/L
[临床意义]
（1）血小板减少（〈100X10E9/L〉见于：
*血小板生成障碍：再生障碍性贫血，急性白血病，急性放射病等；
*血小板破坏增多：原发性血小板减少性紫癫（ITP），脾功能亢进；
*血小板消耗过多：DIC；
凝集，溶血，血量小于0.4 ML或抽血时间超过四小时为不合格标本，拒收。
2，直接采集未稍血液。
[操作步骤]
（1）于清洁试管中加入稀释液0.38ml。
（2）准确吸取毛细血管血20ul，擦去管尖外附着血液，置于血小板稀释液内，立即充分混匀，待完全溶血后再次混匀1 min。
（3）取上述均匀的血小板悬液1滴，注入计数池内，静置10--15min，使血小板下沉。
（4）用高倍镜计数中央1个大方格（即400个小格）内血小板，乘以0.2X10E9即为每升血液内血小板数。
[质量控制]
（1）血小板稀释液要清洁，配成后应过滤。防止微粒和细菌污染。试管及吸管也应清洁，干净。
（2）针刺应稍深，使血流通畅。拭去第一滴血后，首先采血做血小板测定，操作应迅速，防止血小板聚集和破坏。采取标本后尽快计数，以免影响结果。
xxxx医院
临床检验实验室
文件编号：
XXXX
血小板计数（PLT）
版序：xxxx
页码：第1页，共2页
[检测原理]
将血液用适当的稀释液作一定量稀释后，混匀注入计数池内计数，再算出每升血液中血小板数。
[试剂与仪器]
1，试剂：
（1）草酸铵法稀释液：分别溶解草酸铵1.0g及EDTA Na 0.012g，合并加蒸馏水至100ML混匀。
*家族性血小板减少：巨大血小板综合症（Bernard Souleir综合征）等。
（2）血小板增多（》400X10E9/L）见于：
*骨髓增生综合征：慢性粒细胞白血病，真性红细胞增多症等；
*急性反应：急性感染，急性失血，急性溶血等；
*其它：脾切除术后。
（2）许汝和稀释液：分别溶解尿素（AR级）10 g，枸櫞酸钠0.5g于蒸馏水中，合并后加蒸馏水至100 ml，再加40%甲醇溶液0.1ml，混匀，过滤，保存于冰箱中备用。
2，仪器：
（1）微量计数板
（2）显微镜
（3）微量吸管（MC）
[标本的收集与处理]
1，用EDTA-K2 0 .2ul抗凝静脉血1ml，轻轻摇动抗凝。